彰武松离体培养初步分析

以彰武松休眠芽和次年新梢为外植体,初步建立彰武松离体培养研究体系。结果表明:以当年发的新梢作为外植体,经1.5%H₂O₂预处理消毒10 min,75%乙醇30 s,0.1%Hg Cl₂消毒6 min消毒效果最好;接种在DCR+6-BA 2 mg/L+NAA 0.2 mg/L培养基中,能够诱导外植体顶部长出幼嫩的2针1束针叶,且生长旺盛,颜色鲜绿,活力强,诱导率达48.7%。以彰武松针叶为外植体进行体胚诱导,将消毒后的针叶接种在DCR+2,4-D 5 mg/L+NAA 5 mg/L的培养基中培养,能够产生愈伤组织,愈伤组织诱导率为100%,获得的愈伤组织为非胚性愈伤组织。     

燕麦愈伤组织的诱导

以白燕2号为材料,研究了不同的外植体、培养基比例和外植体的放置方式对燕麦愈伤组织诱导的影响,以及最有效的消毒方法。试验结果表明,外植体最有效的消毒方法是采用75%酒精消毒1min后无菌水冲洗,再用30%的次氯酸钠溶液消毒40min(间隔20min换1次);诱导培养基中2,4-D最适浓度为3mg/L;燕麦种子是较理想的外植体,接种时将种子盾片朝下放置直接接触培养基,会得到更高更理想的出愈率。     

番石榴(Psidium guajava)组织快繁技术的研究

为了进一步研究番石榴组织快繁技术,以番石榴腋芽为外植体研究不同成熟度的腋芽对番石榴芽分化的影响,并进行外植体消毒方法优化以期获得一组最佳的消毒方法组合。结果表明:75%乙醇15 s、1‰氯化汞10 min、75%乙醇10 s消毒效果最好;以较成熟的腋芽作为外植体进行培养的出芽率最高。本研究解决了快繁技术中外植体的选择及木本植物消毒不彻底的问题。     

澳蜡花‘Snow Flake’外植体消毒方法的研究

研究了澳蜡花‘Snow Flake’组织培养快速繁殖中,外植体消毒的影响因素,旨在得出最佳的消毒方法。试验分别从灭菌剂及灭菌时间,外植体取材时间、取材部位以及抗菌素几个方面进行研究。结果表明:在10月到翌年3月取材,以顶芽为外植体,在75%的酒精中浸泡30s后用0.1%HgCl2处理8min,消毒效果较好。而在培养基中添加抗菌素,对‘Snow Flake’内生菌污染控制效果不理想。由此可见,澳蜡花‘SnowFlake’外植体消毒与灭菌剂及灭菌时间及其取材时间、取材部位相关。     

风蜡花‘Snow Flake’外植体消毒方法的研究

本文研究了风蜡花‘Snow Flake’组织培养快速繁殖中,外植体消毒的影响因素,分别从灭菌剂及灭菌时间,外植体取材时间、取材部位,以及抗菌素几个方面进行研究。结果表明：在10月到翌年3月取材,以顶芽为外植体,在75%的酒精中浸泡30s后用0.1% HgCl2处理8min,消毒效果较好。而在培养基中添加抗菌素,对‘Snow Flake’ 内生菌污染控制效果不理想。     

甘薯组织培养外植体消毒方法的研究

本试验对甘薯外植体消毒条件进行了初步研究，以筛选出甘薯外植体进行组织培养的最佳消毒剂类型和最佳消毒时间。试验结果表明，选取甘薯块茎顶芽作为外植体进行消毒的最佳方案是：先用75%的酒精消毒30 s后再用0.1%氯化汞消毒10 min，有效材料获得率可达到78.6%，为进一步的组织培养等研究提供基础材料。     

银叶真藓外植体组织培养消毒方法的筛选

为给银叶真藓全基因组序列测定提供无污染材料,本研究对银叶真藓外植体组织培养的消毒方法进行筛选。分别使用酒精、次氯酸钠溶液和青霉素溶液作为消毒剂,在不同浓度和不同时间下处理银叶真藓外植体,然后分别将处理后的材料接种在改良的Knop培养基上进行培养。一定时间后,通过形态观察银叶真藓的生长状况。实验结果表明,酒精和次氯酸钠溶液对银叶真藓的消毒效果欠佳,而青霉素溶液对银叶真藓的消毒效果较好,由此筛选出银叶真藓外植体组织培养的最佳消毒方法为:用浓度为300 mg/L青霉素溶液浸泡1.5 h。利用本研究筛选出的消毒方法可以获得形态观察上无杂菌污染的银叶真藓材料,为后续全基因组序列测定前银叶真藓DNA的获取提供物质基础。     

鸡爪黄连组培繁殖技术研究初探

利用组织培养技术对黄连进行快繁育苗研究,首先必须解决外植体容易污染、褐化、诱导分化难易等关键问题。系列的比较筛选试验结果表明:用0.1%的高锰酸钾先浸泡花梗、嫩叶、叶柄和种子后再用0.1%的升汞进行常规消毒,能明显抑制外植体产生污染的机率;种子、花梗较嫩叶、叶柄接种成活率高,达90%以上,但种子接种后休眠期较长,花梗、嫩叶接种15d后开始产生分化,嫩叶较花梗取材容易。培养基中添加活性炭、PVP等抗褐化物质后,能显著抑制外植体接种后继续褐化的机率;培养基pH值对外植体接种成活影响较大,培养基pH值5.0时,接种效果最好;花梗、嫩叶初诱导最佳培养基:1/2MS+琼脂10 g/L+蔗糖25 g/L+活性炭1 g/L+PVP 1 g/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1～0.2 mg/L。     

影响小白菜子叶再生的因素

本研究以小白菜“杭州油冬儿”品种为试材,研究了不同激素组合、子叶不同部位、不同接种方式对不定芽再生的影响,并且还筛选了种子表面消毒的最佳方法和不定芽生根的最佳培养基。研究结果表明,白菜种子表面消毒的最佳方法为用70%的乙醇浸泡30s,再用20%的次氯酸钠消毒20min或用0.1%升汞消毒10min;以完整的带柄子叶为最佳外植体,接种时将子叶背面朝上放置比正面朝上放置更有利于不定芽的分化;子叶再生的最佳培养基为MN＋BA2mg/L＋NAA0.5mg/L,不定芽生根的最佳培养基为1/2MS＋IAA0.2mg/L。此研究为小白菜再生体系的建立奠定了基础。     

牛奶凤梨的组织培养及栽培技术

本研究通过对牛奶凤梨进行组培快繁及栽培技术进行探索,解决了牛奶凤梨繁殖速度慢且易受环境影响的问题。以牛奶凤梨幼嫩的茎尖,基部作为外植体,结合各项试验设计,着重研究了牛奶凤梨组织培养各个阶段的最佳培养基配方及培养方法,将牛奶凤梨外植体消毒完接种在改良MS培养基上20 d后出现愈伤组织,对愈伤组织进行诱导可获得完整植株。适合牛奶凤梨外植体的消毒方法是在超净工作台上用75%的酒精消毒1 min,无菌水冲洗后,再用0.1%的升汞溶液处理10 min;在6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L培养基不定芽诱导效果最好,愈伤诱导率达到77.1%。不定芽增殖的适宜生长调节剂浓度是6-BA 0.5~1.5 mg/L,NAA 0.5~1.5 mg/L。生根阶段以IBA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L的培养基效果最佳,生根率达94.4%。幼苗移栽以草炭:素沙比例为1∶2搭配的基质最为经济且效果较好,成活率达到98%。该方法解决了牛奶凤梨繁殖速度慢的难题,为牛奶凤梨的工厂化生产提供有价值的技术资料和依据。     

不同消毒处理对高寨贡茶快速繁殖的影响

目的:本实验通过不同的消毒处理,探讨消毒处理对高寨贡荼组培过程中的污染率和外植体成活率的影响.方法:通过多茵灵和青霉素处理后,再经75%酒精和0.1%升汞处理外植体,统计培养基的污染率和外植体的成活率.结果:顶芽作为外植体进行茶树的快繁研究,经多菌灵和青霉素处理后,用75%酒精处理25 s,0.1%升汞处理8 min,组培效果为最佳,存活率可达70%,颜色为嫩绿色.幼茎作为外植体经多菌灵和青霉素处理后,用75%酒精处理40 s,0.1%升汞处理10min,效果最佳,存活率可达65%,颜色为嫩绿色.     

卷丹百合鳞片及珠芽组织培养研究

以卷丹百合(Lilium lancifolium Thunb.)的鳞片及珠芽作为外植体,比较各种消毒时间和接种方法的效果和不同激素浓度对鳞片及珠芽的诱导增殖效果.结果表明,鳞片消毒以70%酒精20s再用0.1%HgCl212min效果最佳,珠芽消毒以70%酒精20s再用0.1%HgCl210min效果最佳;百合鳞片的分化能力外层好于中层,中层好于内层;近轴面向上的鳞片诱导效果好于远轴面向上.卷丹百合鳞片及珠芽的最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.2mg/L,诱导出生长势较强、数量较多的不定芽.最适合的增殖培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L,增殖系数达8.0,组培苗长势良好.     

影响番茄子叶再生的因素

本试验以番茄"中蔬四号"品种为试材,对不同激素组合、不同种类外植体、子叶不同部位及接种方式对番茄不定芽再生的影响进行了研究,同时还筛选了种子消毒的最佳方法和不定芽生根的最佳培养基。研究结果表明,番茄种子表面消毒宜采用70%乙醇浸泡30s,然后再用20%的次氯酸钠加土温消毒20min;子叶中间段为最佳外植体,茎段次之,真叶的诱芽率最低;子叶诱芽的最佳培养基为MS+ZT2mg/L+IAA0.1mg/L,且背面朝上放置更有利于不定芽的分化;不定芽生根的最佳培养基为1/2MS+IAA0.3mg/L。这项研究为番茄转化体系的建立奠定了基础。     

银杏茎尖无菌接种条件的优化

本研究以银杏的茎尖为材料,对银杏的消毒条件、培养基蔗糖浓度、激素种类及浓度进行了分析比较,以探索银杏茎尖作为外植体的无菌接种最佳条件,为银杏的快速繁殖及资源保护提供基础。结果显示选择广安地区树龄约30年母树当年发出的侧芽带叶茎尖为外植体,70%酒精处理1.5 min,0.5%新洁尔灭处理15min是最佳的灭菌组合。以MS为基本培养基,添加激素0.3 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA,加入0.3%活性炭,调减蔗糖用量为0,琼脂9 g/L,在此条件下培养更能有效地抑制褐化现象,利于银杏茎尖的生长,且长势旺盛。以幼茎尖为外植体建立的无菌体系,为银杏的快速繁殖技术及新品种的培育等研究提供了理论依据。     

富贵菜离体快繁及再生体系的建立

本研究以富贵菜种苗为实验材料,以富贵菜叶片为外植体,利用植物组织培养技术建立了富贵菜离体快繁体系,对富贵菜再生作了初步研究。结果表明:用4%Na Cl O处理外植体3 min可取得最佳消毒效果,降低外植体的污染率,提高植株成活率和生根率;富贵菜无菌苗在MS培养基上有利于茎叶的生长,在1/2MS培养基上有利于根部的生长;NAA诱导富贵菜生根的最适浓度应在0.05 mg/L左右;富贵菜无菌苗经移栽后,成活率可达到90%左右。富贵菜的叶片接种在MS基本培养基+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA中获得愈伤组织后,再接种在MS基本培养基+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.4 mg/L KT中获得再生芽。     

黄连木种子组织培养不同消毒方法的研究

黄连木是中国一种重要的木本能源植物,由于其种子存在内生菌,造成以种子为外植体的组织培养困难。为了高效获得可以用于组织培养研究的无菌种苗,笔者研究了各种消毒方法对其内生菌的抑制效果,以黄连木成熟种子为外植体,分别测试了种子浸泡与否、20% NaClO、0.1% HgCl2、10% H2O2及20% NaClO溶液与超声波相结合等消毒处理对其抑菌和发芽效果的影响。结果表明,在种子消毒之前,不经过预浸泡处理的消毒效果要远好于浸泡处理24 h的消毒效果;20% NaClO和0.1% HgCl2溶液对黄连木种子内生菌均有一定的抑制作用,但对发芽率有明显影响,最高发芽率仅为46%。10% H2O2的除菌效果好于前2种方法,且处理后的种子发芽率得到提高。而采用20% NaClO溶液与超声复合处理种子10 min,可以获得更好控制污染的效果,且有利于种子的萌发,种子发芽率可达79%。因此,NaClO溶液与超声复合处理为黄连木种子消毒的理想方法。     

毛叶木姜子组织培养中无菌苗建立的初探

为进一步开展毛叶木姜子组培再生研究,获得毛叶木姜子的无菌苗从外植体取材时间、不同消毒剂浓度与时间以及外植体抗褐变等多方面对无菌苗获得的前期条件进行分析。结果表明:于5月上旬采集当年生半木质化枝条剪取茎段,0.2%HgCl 2处理12 min为毛叶木姜子无菌体系建立时的最佳消毒方式,污染率为15.56%,但外植体的褐变率较高;进一步采用正交试验设计L 9(34)进行抗褐变试验,采用多指标综合平衡法进行分析,结果表明:外植体类型、冷藏时间、PVP为外植体抗褐变及腋芽萌动的主导因素,而AC对毛叶木姜子外植体抗褐变效果不明显,予以剔除,得出毛叶木姜子外植体抗褐变的最优水平组合为选用半木质化枝条作为外植体,接种前5℃低温冷藏5 h,培养基为MS+PVP 1.00 g·L^-1。     

天宫石斛快繁技术研究

以天宫石斛荚果为外植体,探究天宫石斛种胚快繁技术。选择荚果外植体适合消毒时间,添加不同有机添加物诱导原球茎,调节生长调节剂种类及浓度配比,诱导增殖分化,添加适当浓度生根壮苗活性炭。结果表明,消毒10 min效果最佳,污染率为30%;添加土豆30 g/L培养基原球茎诱导效果最佳,诱导率为95%;6-BA 1.5 mg/L+NAA0.1 mg/L培养基增殖效果最佳,增殖系数为9.4;活性炭1.2 g/L生根壮苗效果最好,平均生根数达8.54。     

梅片树组织培养中污染的抑制和愈伤组织的诱导

以富含右旋龙脑的梅片树当年生枝条作为外植体,进行梅片树组织培养技术的研究,来抑制培养中的污染,获得愈伤组织。结果表明,4月、5月、9月和10月时外植体的污染率可控制在20%以下,是进行组织培养的最佳时间;将常规消毒后的外植体接种到添加0.35‰益培隆的培养基上,培养30 d后外植体的污染率下降至23%,同时芽诱导率较高,生长状态较好;最佳的芽诱导培养基组合为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.05 mg/L,芽诱导率达89.13%,生长状态较好;小叶愈伤组织诱导的最佳培养基为:MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L,愈伤组织的诱导率达98.44%,生长状态良好。本研究为梅片树的组织快繁和细胞悬浮培养等的研究提供参考。     

外植体对甘薯茎尖培养与植株再生的影响

对甘薯茎尖外植体的取材大小，不同取材季节，不同消毒处理及不同生育时期的试验结果表明，外植体的大小对其茎尖离体培养的成苗率及脱毒率有显著差异，尤其是取材的季节和不同生育时期，对甘薯茎尖培养的效果具有明显的差异，本试验以1～4月份取薯块催芽的外植体材料是甘薯茎尖培养较为适宜的培养时间，其污染、死亡率为15%；茎尖成活率85%以上；品种成苗率可达86%。