禽用生物制品外源病毒监测研究—鸡传染性法氏囊炎疫苗外源病毒检测

原倍鸡传染性法氏囊炎（ＩＢＤ）高免血清可以中和１０个羽份ＩＢＤ病毒；中和后的病毒接种鸡胚卵黄囊后继续孵化至出雏，雏鸡健活；用ＮＤＶＬａＳｏｔａ毒和鸡鹌鹑痘病毒模拟污染ＩＢＤＶＢ８７毒再经ＩＢＤ高免血清中和，可以检出模拟污染的病毒；高免血清可以中和１０个羽份的ＩＢＤ疫苗毒。     

禽用生物制品外源病原监测研究：传染性支气管炎疫苗外源病毒检测

６４倍稀释的抗ＩＢＶ（传染性支气管炎病毒）高免血清可中和１００个ＥＩＤ＿（５０）ＩＢＶ病毒；２倍稀释抗ＩＢＶ高免血清可中和１０个羽份ＩＢＶＨ５２病毒。用ＮＤＶ（鸡新城疫病毒）ＬａＳｏｔａ或Ⅰ系病毒模拟污染ＩＢＶＨ５２毒株后，再用抗ＩＢＶ高免血清中和，可以检出污染的病毒。抽检ＩＢＶＨ１２０疫苗的１０个羽份可被ＩＢＶ高免血清中和。     

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)干扰新城疫病毒(NDV)增殖现象的研究

ＩＢＶ毒株Ｈ１２０、Ｈ５２、ＭＡ５对ＮＤＶ－ＬａＳｏｔａ的干扰实验证明ＩＢＶ特异性干扰ＮＤＶ增殖。１）采取不同顺序的同胚接种法：ＩＢＶ接种之后再接种ＮＤＶ;或ＮＤＶ接种之后再接种ＩＢＶ,及ＩＢＶ,ＮＤＶ同时接种,ＩＢＶ均干扰ＮＤＶ的增殖。２）ＮＤＶ接种３６小时之内,干扰现象最为明显,Ｈ１２０,Ｈ５２的干扰能力稍强于ＭＡ５。３）ＮＤＶ血清中和实验结果显示,不同顺序同胚接种ＮＤＶ、ＩＢＶ时,ＮＤＶ－ＬａＳｏｔａ不影响ＩＢＶ的增殖能力。同胚增殖ＩＢＶ,ＮＤＶ的关键是控制ＮＤＶ、ＩＢＶ的接毒量及选择合适的收毒时间。     

鸡传染性法氏囊病系列油乳剂组织灭活疫苗的研究

从多个地区收集的１０个鸡传染性法氏囊病病毒野毒株中，筛选出超强毒ＴＡ株，采用ＴＡ株对ＳＰＦ公雏攻毒，收获其法氏囊、脾脏、胸腺、肝脏、肾脏等病变组织，经处理后，与新城疫Ｌａｓｏｔａ毒株、传染性支气管炎多价毒株、ＥＤＳ７６毒株等联合，研制出了ＩＢＤ（高免免疫型）、ＮＤ－ＩＢ－ＩＢＤ、ＮＤ－ＥＤＳ－ＩＢＤ等系列油乳剂灭活疫苗，经实验室测定，并应用于蛋种鸡、肉仔鸡常规免疫以及鸡群高免等，均取得了较好的结果     

用抗新城疫病毒膜蛋白特异多肽抗体鉴别强毒株和弱毒株

利用ＪｅｆｆＧｏｒｍａｎ建立的用抗新城疫病毒（ＮＤＶ）膜蛋白特异多肽抗体鉴别强弱毒株的方法，对国内的Ｉ系、Ⅱ系、Ｌａ Ｓｏｔａ和两株分离毒进行了毒力分析。结果证明，上述毒株的毒力顺序为：Ｉ系〉Ⅱ系和Ｌａ Ｓｏｔａ〉Ｖ４（澳大利亚弱毒疫苗株）〉临床分离株（青岛）。其结论为：Ｉ系毒株与澳大利亚维多利亚分离株（ＡＶ）的Ｆ２蛋白片段有类似的氨基酸序列，属中发型毒株。虽然Ⅱ系和Ｌａ Ｓｏｔａ比Ｖ４和临床分离     

用RT—PCR检测新城疫病毒的研究

用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测新城疫病毒（ＮＤＶ）。研究结果表明ＲＴ－ＰＣＲ可检测出Ｆ４８Ｅ９株、Ｌａｓｏｔａ株、Ⅰ系疫苗株、Ｌ株、ＳＹ１株等５株ＮＤＶ尿囊液为阳性,其敏感性可测至１０－３倍稀释尿囊液病毒。ＲＴ－ＰＣＲ还能直接检测出发病鸡气管中的ＮＤＶ。     

鸡传染性法氏囊病系列油乳剂组织灭活疫苗的研究

从多个地区收集的１０个鸡传染性法氏囊病病毒野毒株中,筛选出超强毒ＴＡ株,采用ＴＡ株对ＳＰＦ公雏攻毒,收获其法氏囊、脾脏、胸腺、肝脏、肾脏等病变组织,经处理后,与新城疫Ｌａｓｏｔａ毒株、传染性支气管炎多价毒株、ＥＤＳ７６毒株等联合,研制出了ＩＢＤ（高免免疫型）、ＮＤ－ＩＢ－ＩＢＤ、ＮＤ－ＥＤＳ－ＩＢＤ等系列油乳剂灭活疫苗,经实验室测定,并应用于蛋种鸡、肉仔鸡常规免疫以及鸡群高免等,均取得了较好的结果。     

鸡群感染IBD强毒对ND免疫抑制的实验观察

６周龄商品ＡＡ肉鸡单独感染鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）强毒（ＩＢＤＶ）后，紧急注射ＩＢＤ高免卵黄，可在２天内得到控制；单独感染新城疫（ＮＤ）强毒后，紧急注射ＮＤⅠ系疫苗，可在５天内得到控制；而混合感染ＩＢＤＶ和ＮＤＶ或感染ＩＢＤＶ后继发感染ＮＤＶ，紧急注射ＮＤⅠ系疫苗，未能在７天内控制疫情。由此证明鸡群感染强毒ＩＢＤＶ可对ＮＤ产生严重免疫抑制。     

NDV单苗,NDV／IBV联苗对鸡头部相关淋巴组织的影响

本文选用１０株ＮＤＶ疫苗、１０株ＮＤＶ／ＩＢＶ联苗，察接种２周龄雏鸡后对头部相关淋巴组织（ＨＡＬＴ）的影响。通过对接种鸡进行一系列体内试验，检测了哈德氏腺（ＧＨ）对布氏杆菌灭活抗原滴眼的反应情况。根据这一结果，对ＨＡＬＴ的几个部位和支气管进行组织学检查，并见到有微观变化。本研究表明：３种ＮＤＶ／ＩＢＶ联苗（１株Ｂ１／Ｍａｓｓ＆Ｃｏｎｎ、２株ＬａＳｏｔａ／Ｍａｓｓ＆Ｃｏｎｎ）可干扰ＧＨ对布氏抗原的反     

鸽新城疫病毒的分离及鸽群自然感染状况的调查

将在北京某信鸽群采集的两只具神经症状的病鸽脑组织悬液接种ＳＰＦ鸡胚后，分离出二株病毒分离物ＰＢ９６０１和ＰＢ９６０２，通过对鸡红血球的血球凝集试验，用已知鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）高免血清任务在球凝集抑制试验（ＨＩ）及２～３月龄鸽的攻毒试验，证明这两个毒株为对鸽呈高致病性的ＮＤＶ。交叉ＨＩ试验表明，鸽ＮＤＶ分离株与鸡ＬａＳｏｔａ株间有很高的血清交叉反应，但也存在着一定抗原性差异。对扬州地区若鸽群中２－     

鸡新城疫Lasota—传染性支气管炎W93二联活疫苗研制

鸡新城疫（ＮＤ）Ｌａｓｏｔａ和肾变病型传染性支气管炎（ＮＩＢ）Ｗ９３弱毒经１０日龄ＳＰＦ鸡胚同胚培养,收获含毒鸡胚液,制成Ｌａｓｏｔａ－Ｗ９３二联活疫苗。经实验室检测和临床应用证明,用于预防ＮＤ和ＮＩＢ效果好。     

鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病三联油乳剂灭活疫苗研制及应用

用新城疫病毒（ Ｎ Ｄ Ｖ） Ｌａ Ｓｏｔａ 株、鸡传染性支气管炎病毒 （ Ｉ Ｂ Ｖ） Ｍ４ １ 株接种鸡胚, 收获含毒鸡胚尿液。用传染性法氏囊病病毒 （ Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ） 地方强毒 Ｈ Ｂ９ ０ ９ 株接种３０ ～４０ 日龄肉用鸡, 发病后取囊组织 （ 或收集 Ｉ Ｂ Ｄ 典型发病鸡囊组织） 制备成含毒组织悬液。将三种病毒液按一定比例混合, 制备成三联油乳剂灭活苗。三联苗免疫１８ 日～２８ 日龄雏鸡, 免疫后２１ 天攻毒测保护力, 三种传染病保护率均在９０ ％ ～１００ ％ , Ｎ Ｄ Ｈ Ｉ抗体≥１∶３２ , Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ Ａ Ｇ Ｐ阳性率１００ ％ , Ｉ Ｂ Ｖ Ｎ 抗体≥１∶８ , 疫苗免疫期可达４ 个月以上。疫苗在４ ℃～８ ℃保存期为１８ 个月, １０ ℃～２０ ℃保存为６ 个月, 该疫苗在全省不同地区、不同品种鸡应用１５ 万羽份, 取得理想免疫效果。     

荧光抗体技术检测病毒活疫苗中衣原体的污染

本试验将新城疫（ＮＤ）疫苗与Ｂ１１００１株鹦鹉热衣原体混合，用ＮＤ阳性血清中和，每个接种剂量最终含ＮＤ疫苗１０羽份，衣原体浓度分别为１０~（－９）、１０~（－２）、１０~（－３）、１０~（－４），分组接种ＳＰＦ鸡胚进行测定，检测了９株１０~（－４）稀释的衣原体。并以Ｂ１１００１株衣原体试验性污染５批ＮＤ疫苗作检测。试验中取卵黄囊膜涂片，用中科院动物所提供的衣原体萤光抗体试剂盒进行检测，并辅以姬姆萨染色法检查，结果表明用荧光抗体染色可以检查到疫苗中衣原体或包涵体的存在，与姬姆萨染色法基本一致。     

适应于牛胚肾细胞系增殖的新城疫病毒La Sota株的特性

新城疫病毒（ＮＤＶ）弱毒Ｌａ Ｓｏｔａ株适应于牛胚肾ＢＳ／ＢＥＫ细胞系中增殖，并产生与鸡胚中相似的感染滴度。连续在细胞系中传代后，在ＣＰＥ和蚀斑的大小、形态等生物学特性方面没有变化。相比之下，Ｌａ Ｓｏｔａ株对１日龄鸡脑内致病力指数细胞毒则低于鸡胚毒。但细胞培养适应毒的免疫原性在血清学反应和抵抗强度ＮＤＶ攻击方面并未显示出有何变化。换言之，在细胞系中增殖的Ｌａ Ｓｏｔａ株保持了它的生物学和免疫学特     

鸡群感染IBD强毒对ND免疫抑制的实验观察

６周龄商品ＡＡ肉鸡单独感染鸡传染性法氏囊病强毒后，紧急注射ＩＢＤ高免卵黄，可在２天内得到控制；单独感染新城疫强毒后，紧急注射ＮＤＩ系疫苗，可在５天内得到控制，而混合感ＩＢＤＶ和ＮＤＶ或感染ＩＢＤＶ后继发感染ＮＤＶ，紧急性注射ＮＤＩ系疫苗，未能在７天内控制疫情，由此证明鸡群感染强毒ＩＢＤＶ可对ＮＤ产生严重免疫抑制。     

新城疫与传染性法氏囊病疫苗对雏鸡联合免疫的研究

将１１４只１１日龄海赛克斯褐公鸡随机分成５组：Ⅰ组为空白对照，Ⅱ组用新城疫（ＮＤ）弱毒苗和ＮＤ油佐剂灭活苗同时免疫，Ⅲ组用传染性法氏囊病（ＩＢＤ）地方毒株油佐剂灭活苗免疫，Ⅳ组用ＮＤ弱毒苗、ＮＤ油佐剂灭活苗、ＩＢＤ地方毒株油佐剂灭活苗同时免疫，Ⅴ组在Ⅳ组的基础上增加ＩＢＤ弱毒苗免疫。５组鸡分别隔离饲养，定期测定血清ＮＤＨＩ效价与ＩＢＤ琼扩效价。选择时机用强毒攻击，观察各组鸡的保护情况。结果：（１）Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ组鸡均能很好地抵抗ＮＤＶ强毒的攻击，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组鸡无论对ＩＢＤＶ人工感染，还是自然感染，均有坚强的保护力；（２）ＩＢＤ地方毒株油佐剂灭活疫苗不干扰ＮＤ疫苗的免疫应答；（３）ＩＢＤ弱毒苗对ＮＤ疫苗的免疫应答有一定影响，在免疫初期能促进机体尽快对ＮＤ疫苗产生应答，但后期ＮＤ疫苗的ＨＩ抗体降低较快；（４）ＮＤ疫苗对ＩＢＤ疫苗的免疫效果无显著影响。作者提出，对雏鸡首免（无论有、无母源抗体）可采用ＮＤ弱毒苗＋ＮＤ油佐剂灭活苗＋ＩＢＤ（地方毒株）油佐剂灭活苗同时进行免疫，至少可以保护到上笼后或开产前免受ＮＤＶ和ＩＢＤＶ的感染，既简化了免疫程序，又可减少对鸡群的应激，值得推广应用。     

新城疫病毒F48E9株病毒结构蛋白的分析

采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、激光扫描技术、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ和糖蛋白染色方法对新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４８Ｅ９株的结构蛋白进行了分析，结果表明，它具有ＮＤＶ的典型结构特征，与ＬａＳｏｔａ毒株相比无显著差异     

同胚增殖鸡新城疫病毒和传染性支气管炎病毒的效果观察及免疫应答反应

鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）和鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）混合在同一鸡胚中增殖,当ＮＤＶ和ＩＢＶ接种浓度控制在一定范围时,最佳收毒时间选择使ＮＤＶ有足够时间增殖到最佳滴度,且在这一时间内不至于因孵育时间过长而致ＩＢＶ毒力减弱。结果表明ＮＤＶＬａｓｏｔａ株经１０倍稀释分别与４株ＩＢＶ１０００倍稀释液等体积混合后接种,能在同一鸡胚中正常增殖,即９６ｈ收毒,血凝（ＨＡ）方法测定两种病毒的血凝价均能达到最佳滴度,其血凝价不低于各自单独增殖的滴度。４种ＩＢＶ株与ＮＤＶ同胚增殖的ＨＡ滴度进一步证实,在合适的条件下,ＩＢＶ均不对ＮＤＶ的复制产生干扰作用,４种ＩＢＶ的血凝价无明显差异。免疫试验中用同胚增殖两种病毒二联苗接种,鸡体血清中可产生抗两种病毒的ＨＩ抗体,与各自单独接种时的ＨＩ抗体水平几乎一致。本试验中制备的ＩＢ血凝抗原在４℃保存一个月,其血凝活性保持不变。ＩＢＶ微量血凝抑制（ＨＩ）试验特异性测定结果证实,用自制ＩＢＶ血凝抗原进行ＨＩ试验检测鸡ＩＢ阳性血清均能产生稳定的特异性反应,并且无交叉反应。说明ＨＩ试验是检测ＩＢＶ抗体水平的有效可行的方法。     

鸡新城疫／传染性支气管炎二联油乳剂灭活疫苗试验研究报告（Ⅱ）：疫苗…

根据ＮＤＶ、ＩＢＶ二各病毒混合毒种的最适稀释比例，将混合毒种接种９－１０龄鸡胚尿囊腔内（简称同胚培养），使接种鸡胚９６ｈ二种病毒毒价同时达到高峰，０．０１ｍｌ尿囊液含：ＮＤＶ≥１０＾８ＥＩＤ５０、ＩＢＶ≥１０＾７ＥＩＤ５０。收获同胚培养的胚毒，制备同胚培养的胚毒，制备油乳剂灭活疫苗。用三批疫苗分别免疫１８日龄雏鸡，免疫后４周二联疫苗的有效抗体分别为：ＮＤ血凝抑制抗体（ＨＩ）≥１：１６、ＩＢ中和抗体     

4株鸡IBD活疫苗对鸡ND免疫抗体的影响

４株不同毒力鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）活疫苗,分别接种３０ｄＳＰＦ公维,４ｄ后再接种鸡新城（ＮＤ）Ｌａｓｏｔａ系活疫苗,同时每组捕杀５只,观察法氏囊损伤情况,另４组用同１天的ＳＰＦ公无接种ＮＤ－Ｌａｓｏｔｑ系疫苗４天后再接种不同毒力的ＩＢＤ疫苗。试验结果表明,４株ＩＢＤ活疫苗对雏鸡法氏囊不同程度损伤,并且对ＮＤ免疫抗体产生有明显抑制作用。