重庆市甘兰病毒病毒原研究

1984～1985年在重庆市郊区采集的甘兰样品176份中,经汁液摩擦接种实由病毒引起的有143份。芜青花叶病毒(TuMV)占病样总数的67.14%,黄瓜花叶病毒(CMV)占9.79%,烟草花叶病毒(TMV)占5.59%,还有由TuMV 与 CMV 或 TuMV 与 TMV 复合侵染的占9.09%,尚需继续研究的其他病毒占8.39%。     

湖北省蔬菜病毒病主要毒原种类检测

采用斑点酶联免疫吸附法(Dot-ELISA)和RT-PCR法对采自湖北省7个地区的966份疑似感染病毒的蔬菜样本进行黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)、番茄花叶病毒(Tomato mosaic virus,ToMV)、芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)、蚕豆萎蔫病毒(Broad bean wilt virus,BBWV)、黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)共7种病毒的检测。结果显示检出阳性样本695份,占总样本数的71.9%。其中,十字花科蔬菜上主要毒原为TuMV,检出率高达86.4%,其次为CMV,检出率为26.7%;茄科、葫芦科和豆科蔬菜上主要毒原均为CMV,检出率分别为34.3%、59.2%和56.2%。CMV几乎能侵染所有蔬菜,为湖北省蔬菜病毒病的主要毒原。在检出的6种病毒中,存在TuMV+CMV、TuMV+BBWV、TuMV+CMV+BBWV、CMV+BBWV、CMV+ToMV和CMV+BBWV+TSWV+TMV等6种复合侵染类型,其中TuMV+CMV为十字花科蔬菜上的主要复合侵染类型,复合侵染率为23.8%,其他蔬菜上主要侵染类型为CMV+BBWV,复合侵染率为28.0%。     

陕西烟田主要病害种类调查与病毒分子检测

为明确陕西烟田病害种类,于2013-2015年对陕西烟田病害开展系统调查,鉴定出9种病害,分别是赤星病、白粉病、黑胫病、灰霉病、青枯病、角斑病、野火病、根结线虫病和病毒病,其中,赤星病、白粉病、灰霉病、黑胫病和病毒病发病普遍,危害严重;野火病、青枯病、角斑病和线虫病仅在个别烟田发生。烟草感染病毒的种类包括烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯Y病毒(PVY)、烟草蚀纹病毒(TEV)和烟草脉带花叶病毒(TVBMV),其中,CMV、TMV、TEV和PVY检出率分别为23.6%、34.7%、21.3%和18.4%,TMV+CMV、CMV+TEV和CMV+PVY检出率分别为27.4%、24.9%和20.9%,烟田病毒复合感染普遍,造成损失较大。     

蔬菜病毒病害的防治对策

各种蔬菜几乎都发生病毒病害,尤其以茄科、葫芦科、豆科、十字花科等蔬菜受害较重.蔬菜感染病毒种类也较多,如十字花科蔬菜的芜菁花叶病毒(TuMV)、黄瓜花叶病毒(CMV);茄科蔬菜的烟草花叶病毒(TMV)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY);葫芦科蔬菜的黄瓜花叶病毒(CMV)、甜瓜花叶病毒(MMV)、西瓜花叶病毒(WMV)、黄瓜绿斑驳花叶病毒(CG-MMV);豆科蔬菜的黄瓜花叶病毒(CMV)、菜豆花叶病毒(BMV)、菜豆黄花叶病毒(BYMV)等,这些病毒的严重危害引起了世界各国植物病理学家、蔬菜栽培及育种学家的广泛重视.各国专家从毒原、寄主、环境条件、传播媒介及防治对策等方面进行了大量研究并取得了明显的效果,蔬菜病毒病害的防治对策如下.     

3种大白菜病毒多重RT-PCR检测技术的建立

【目的】建立3种大白菜病毒病多重RT-PCR检测技术,为病毒病快速检测、白菜病毒病防治与抗病育种提供参考。【方法】针对我国大白菜芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)3种病毒的外壳蛋白(CP)基因保守区序列,设计特异性检测引物,从多重RT-PCR(mRT-PCR)扩增引物、Mg~(2+)浓度、Taq DNA聚合酶及dNTPs浓度、退火温度、延伸时间和循环次数等方面对RT-PCR检测技术进行优化。【结果】在dNTPs浓度为0.24 mmol/L,Mg2+浓度为2.8mmol/L,Taq DNA聚合酶浓度为0.12U/μL,退火温度为52℃,延伸时间为30s,循环30次,即可成功地在一个体系中对TuMV、TMV和CMV 3种病毒复合侵染的大白菜病样进行多重RT-PCR扩增,扩增得到228,305和460bp3条特异性条带,其大小与试验设计相符合。灵敏度接近单重RT-PCR(sRT-PCR),体现了多重RT-PCR的优越性。【结论】建立了能同时检测大白菜样品中TuMV、TMV和CMV的多重RT-PCR检测体系,该多重RT-PCR方法能对田间大白菜样品进行3种病毒的准确、快速、高效检测。     

贵州蔬菜病毒病主要病毒种类检测

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)法对采自贵州省3个蔬菜种植区的952份疑似蔬菜病毒病样品进行黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,Tu MV)、番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)、蚕豆萎蔫病毒(Broad bean wilt virus,BBWV)和黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)等6种病毒毒原检测。结果检出阳性样品273份,占总样品数的28.68%,其中CMV阳性检出率最高,占总样品数的16.49%,其余5种病毒的阳性检出率依次为2.63%、2.10%、1.05%、1.58%和0.53%,CMV为贵州省蔬菜上的主要病毒种类。就单一病毒侵染蔬菜的情况分析,供试12种蔬菜均检出CMV,Tu MV在茄子、白菜、萝卜和甘蓝中检出较多,而TSWV主要在番茄和辣椒样本中检出。存在CMV+TMV、CMV+Tu MV、CMV+TSWV、CMV+BBWV、Tu MV+BBWV和CMV+Tu MV+BBWV等6种复合侵染类型,其中CMV+TMV阳性检出率相对最高,达2.52%。城市近郊正季蔬菜区茄科和豆科蔬菜病毒侵染类型较多,十字花科病毒侵染类型最少,葫芦科在冬春喜温蔬菜区病毒侵染类型最多,表明贵州中、高海拔温凉山区比低海拔温热河谷区适于多种病毒发生。     

转病毒移动蛋白及复制酶基因烟草的协生和重组风险分析

 对转化番茄花叶病毒 (ToMV)、烟草花叶病毒 (TMV)移动蛋白 (MP)基因和黄瓜花叶病毒P1株系(CMV P1)部分复制酶基因的 3种转基因烟草 ,分别接种马铃薯X病毒 (PVX)、马铃薯Y病毒 (PVY)、CMVRB株系 (CMV RB)和TMV。症状观察和ELISA测定发现 ,各病毒在转基因烟草和非转基因烟草上的症状及病毒浓度没有显著差异 ,表明这些病毒在转基因烟草上没有协生作用发生。对转化ToMVMP基因和转化CMV P1部分复制酶基因的转基因烟草 ,分别接种TMV和CMV RB ,定期进行生物学、ELISA和免疫捕获反转录PCR(IC RT PCR)检测 ,在 16个月的连续测定中未发现病毒重组现象。     

双抗体夹心ELISA法检测上海崇明水仙的5种病毒

以崇明水仙露地栽培中出现的褪绿、斑驳、花叶和黄条等多种症状的植株为样本,以水仙试管脱毒苗为参照,采用DAS-ELISA法定量检测了烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、水仙潜隐病毒(NLV)、水仙花叶病毒(NMV)和水仙黄条病毒(NYSV)5种病毒病。结果发现全部样本带毒率共计50.8%,复合感染带毒率11.1%;54份露地栽培的样本中TMV、CMV和NYSV带毒率分别为38.9%、14.8%和1.85%;组培苗中TMV和CMV带毒率分别为88.9%和11.1%。     

不同处理方法对3种大丽花病毒的脱毒效果比较

为了进一步完善大丽花脱毒技术,获得优质大丽花脱毒苗,以感染大丽花花叶病毒(DMV)、黄瓜花叶病毒 (CMV D2)和烟草花叶病毒(TMV)的大丽花为试材,采用茎尖结合热处理、化学处理方法对大丽花脱毒效果进行了探讨。各培养单株经酶联免疫法(ELISA)检测,结果表明,茎尖结合热处理能有效脱除DMV和CMV D2,脱毒率分别达到747%和669%,但不能有效脱除TMV,对3种病毒均脱除的比率为106%;茎尖结合化学处理能有效脱除DMV,CMV D2和TMV,脱除率分别为831%,805%和771%,对3种病毒的脱除率为243%。     

不结球白菜抗病育种的研究：Ⅰ.南京地区病毒病原种类鉴定

1984～1988年对南京地区17个乡89块生产田中采集的558份不结球白菜典型病样进行病毒病原鉴定,依其在鉴别寄主上的症状反应,归纳为3种类型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)。根据典型分离物的传毒试验、寄主范围和体外抗性测定以及病毒的粒体形态综合鉴定,Ⅰ类型为芜菁花叶病毒(TuMV),Ⅱ类型为黄瓜花叶病毒(CMV),Ⅲ类型为烟草花叶病毒(TMV),它们分别占病样总数的65%～73%、8%～12%和19%～23%。TuMV 是南京地区不结球白菜病毒病的主要病原。     

武隆烟区烟草病毒病的病原初步鉴定

对重庆市武隆烟区田间烟草进行了病毒病病原种类的调查和鉴定.26个烟草样品经ELISA共检测到TMV,CMV,PVY及TuMV等4种病毒.所有样品均感染TMV,且病毒复合侵染严重,其中,以TMV ,TuMV,CMV及PVY等4种病毒的复合侵染为主,侵染率达30.77%.ELISA结果表明,复合侵染的样品中TMV含量最高,TuMV含量最低.     

武隆烟区烟草病毒病的病原初步鉴定

对重庆市武隆烟区田间烟草进行了病毒病病原种类的调查和鉴定。26个烟草样品经ELISA共检测到TMV,CMV,PVY及TuMV等4种病毒。所有样品均感染TMV,且病毒复合侵染严重,其中,以TMV,TuMV,CMV及PVY等4种病毒的复合侵染为主,侵染率达30．77％。ELISA结果表明,复合侵染的样品中TMV含量最高,TuMV含量最低。     

食用菌多糖对植物病毒抑制作用的初步研究

利用食用菌平菇(Pleurotus ostreatus)、金针菇(Flammulina velutipes)和香菇(Lentinus edodes)中提取的多糖,在寄主苋色藜上分别对烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)进行抑制作用试验.结果表明,在不同浓度多糖的寄主上,3种食用菌多糖对TMV和CMV都有明显的抑制作用.在不同浓度多糖的寄主之间的作用效果没有显著的差异性;在抑制和钝化作用方面,不同的食用菌多糖之间存在显著的差异性,而在治疗作用方面差异性不显著.其中平菇多糖对TMV和CMV的抑制作用显著优于金针菇和香菇多糖.     

湖南省烟草病毒种类的初步鉴定

1990年和1991年从湖南省8个地区(市)、25县(市)烟区调查采样,发现湖南烟草病毒病田间症状表现有7种类型,以花叶症状最多.通过鉴别寄主反映和A 蛋白酶联检测,初步确定湖南烟草上存在CMV,TMV,PVY 和TRSV 4种病毒的感染.它们除单独侵染外,还有TMV+CMV,TMV+PVY2种复合侵染类型,其中以CMV 侵染频率最高,达53.08%.应用A 蛋白酶联法检测314个花叶病样本,结果表明湖南烟草花叶病主要由CMV,TMV 侵染所致,其中又以CMV 侵染频率最高,达67.84%.     

黑龙江省蕃茄病毒病毒源类型的鉴定

蕃茄病毒病的主要毒源类型是烟草花叶病毒(TMV),占92.23%;其次是黄瓜花叶病毒(CMV),占2.1%;再次为 TMV 和 CMV 混合感染类型,占1.74%;在鉴别寄主上未表现症状的占3.83%。     

陕西省咸阳市、商州市烟草病毒病毒原鉴定初报

2001年在咸阳市，商州市采集了101个毒株，经过生物学测定，血清学反应（琼脂双扩散法和酶联免疫吸附法），电镜观察鉴定出5种为害烟草的病毒，它们是烟草普通花叶病毒（TMV），黄瓜花叶病毒（CMV），烟草蚀纹病毒（TEV），马铃薯Y病毒（PVY），烟草环斑病毒（TRSV），其中烟草普通花叶病毒病，黄瓜花叶病毒病和烟草蚀纹病毒病是当前生产上发病率较高，造成损失较大的3种病毒；同时，烟草普通花叶病毒（TMV）和黄瓜花叶病毒（CMV），烟草普通花叶病毒（TMV）和马铃薯Y病毒（PVY）的复合侵染也是当前生产上亟待解决的主要问题。     

南京市郊萝卜病毒病的调查和病原鉴定

南京郊区萝卜病毒病以夏秋萝卜受害最重,但品种间的感病性有差异,主栽品种泡里红、五月红等十分感病,而中秋红和六十日早白萝卜发病很轻。芜菁花叶病毒(TuMV)是危害萝卜的主要病原;黄瓜花叶病毒(CMV)也占一定的比例;从少数样本中也分离到烟草花叶病毒(TMV)。约有1/3的样本是由两种或两种以上的病毒复合侵染,复合侵染病株中的病毒主要是芜菁花叶病毒、黄瓜花叶病毒、蚕豆萎蔫病毒(BBWV)和烟草花叶病毒。     

植物及大型真菌抽提物抗植物病毒活性的研究

对40科100多种野生植物、中草药及十几种大型真菌抽提物进行了抗植物病毒筛选的研究,发现有多种植物及大型真菌抽提液对烟草花叶病毒(TMV)或黄瓜花叶病毒(CMV)有钝化作用,其中藜科植物S.L抽提液对TMV及CMV兼有钝化作用和一定的治疗效果。对部分有参考价值的植物和大型真菌材料的抗病毒筛选结果进行了总结和分析。     

新疆几种花卉病毒的鉴定

对所采集的百日菊、美人蕉、唐昌蒲病毒病的毒源标样,经鉴别寄主反应、电镜观察、物化属性测定、蚜传试验、种(球)传试验及血清学反应,百日菊的病原病毒鉴定为:黄瓜花叶病毒(CMV)、烟草花叶病毒(TMV)、番茄不孕病毒(TAV)、蚕豆萎蔫病毒(BBWV)。其中以 CMV 为主,约占64％。4种病毒均可通过汁液摩擦接种,不经种传。美人蕉病原病毒鉴定为黄瓜花叶病毒。其块根带毒率达45％以上。唐昌蒲病原病毒经鉴定为黄瓜花叶病毒。其球茎带毒率可达45％以上。     

辣椒种质资源对烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒的抗病性

通过苗期鉴定1000余份辣椒种质资源对烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒的(CMV)抗病性,筛选出抗(耐)TMV的材料185份,抗(耐)CMV的材料152份,其中兼抗二病的材料82份.研究结果表明,辣椒种质资源对CMV的抗病性与其对TMV的抗病性具有极显著回归关系,不同类型辣椒种质资源对TMV的抗病性存有显著差异,但对CMV的抗病性差异不显著.