Mise en évidence de l'effet antagoniste de Pseudomonas fluorescens vis-à-vis de la fusariose vasculaire de la tomate

Les rhizobactéries du groupe Pseudomonas fluorescens sont considérées parmi les microorganismes à effets bénéfiques sur le biocontrôle et la biostimulation de la croissance des plantes cultivées. La caractérisation de quelques souches, isolées en Algérie, a révélé des potentialités d'antagonisme appréciables in vitro vis-à-vis de Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici. La bactérisation des semences et des plantules de tomate a induit l'inhibition, voire même l'annulation de l'expression des symptômes de la fusariose.     

Isozyme analysis of Plasmopara halstedii using cellulose-acetate gel electrophoresis

Isozyme analysis by cellulose-acetate gel electrophoresis was used for the first time on Plasmopara halstedii , the causal agent of sunflower downy mildew. Forty-five isolates originating from sunflower, cocklebur and Helianthus  ×  laetiflorus were used, comprising 10 field isolates and 35 single-spore lines of an additional 30 field isolates representing 10 different virulence phenotypes. Sixteen isozyme systems were analysed, of which three, isocitrate dehydrogenase, malate dehydrogenase and phosphoglucomutase, resulted in clear, reproducible banding patterns and revealed some polymorphism among the isolates. Phosphoglucomutase differentiated two groups among the isolates collected from cultivated sunflower, while the other enzymes were polymorphic between isolates from the different hosts. Polymorphisms were not related to virulence phenotype.     

Resistance to metalaxyl in isolates of the sunflower pathogen Plasmopara halstedii

Plasmopara halstedii isolates showing an atypical reaction to metalaxyl were collected in France, in 1995 and 1996, and tested in the laboratory for their level of sensitivity to this fungicide. Primary and secondary infections caused by one of these isolates were not controlled by the metalaxyl concentration registered for seed treatment. The EC₅₀ of this isolate was 12 800 mg a.i. kg^-1 compared with 22 mg a.i. kg^-1 for sensitive isolate, indicating a 582-fold decrease in sensitivity to the compound. There was no reduction in the agressiveness of the resistant isolate. Using other anti-oomycete fungicides, it appeared that propamocarb, contact fungicides (fluazinam, folpet, mancozeb) and the mixed formulations dimethomorph + mancozeb, cymoxanil + mancozeb and ofurace + folpet were effective against primary infections made with metalaxyl resistant and sensitive isolates, but not against secondary infections. Metalaxyl mixed with fluazinam, folpet or mancozeb was more effective against primary infections with the resistant isolate than metalaxyl alone. The EC₅₀ of five other isolates ranged from 5 800 to 32 900 mg a.i. kg^-1, indicating a variability in metalaxyl sensitivity of resistant sunflower downy mildew isolates. This is the first report of physiological resistance to metalaxyl in Plasmopara halstedii.     

Pathogenic variability of Plasmopara halstedii infecting sunflower in the Czech Republic

Plasmopara halstedii was isolated from diseased sunflowers collected from eight locations in the Czech Republic from 2007 to 2014. Races of the pathogen were determined based on 84 isolates collected during the study. In total, eight races of P. halstedii were detected using a set of nine sunflower differential lines. Races 700, 704, 705, 710, 714 and 715 were proven by soil drench inoculation, and two additional races (730 and 770) proposed by the previously applied leaf disc inoculation method. Race 700 was the most dominant in the Czech P. halstedii populations, with race 710 being the second most frequent. Races 704 and 714 were found over three seasons, while other races were recorded only in one growing season (race 730 in 2010, and the new races 705 and 715 in 2014). A comprehensive study was further conducted for isolates collected in 2013–14 using an extended differential set consisting of 15 sunflower lines. According to the latter methodology which marks races with five‐digit virulence codes, races 70060, 70471, 70571, 71060, 71461 and 71571 were recorded. The growing complexity of P. halstedii pathogenicity exhibited by the ability to infect higher numbers of differential genotypes and resulting in determination of the new pathogen races (virulence profiles) 70571, 71461 and 71571 is alarming. Although the limited number of isolates studied cannot characterize the entire pathogen diversity in the Czech Republic, the trend towards more diverse virulence in P. halstedii populations is clearly demonstrated by the new records of races 704, 705, 714 and 715, all capable of overcoming the resistance gene Pl₆.     

Ultrastructural and Immunochemical Changes During the In Vitro Development of Plasmopara halstedii

ABSTRACT The asexual phase of the life cycle of Plasmopara halstedii, the causal agent of downy mildew of sunflower, plays a key role in the propagation of the disease. We investigated the morphological and ultrastructural changes that occur during the asexual development of the pathogen. Direct examination of infected cotyledons confirmed the presence of sporangiophores. In contact with water, important ultrastructural changes occurred, affecting the surface of zoosporangia, which became smoother, and their cytoplasm, which differentiated into flagellate zoospores. The subsequent encystment of zoospores was characterized by the synthesis of a cell wall and the loss of the flagella. In addition, two monoclonal antibodies (MAbs) specific for P. halstedii were used to analyze the immunochemical changes associated with these modifications. MAb 16A6, which bound to a 48-kDa glycoprotein, mainly labeled the surface of mobile or encysted zoospores and of mother cells of germ tubes. Conversely, MAb 2F9, which recognized highly glycosylated antigens, labeled the surface of zoosporangia and of flagellate zoospores, but not the encysted zoospores. These results provide new insights into the morphological and ultrastructural changes associated with the release and the encystment of zoospores which may be interesting targets for the development of new antimicrobial products.     

向日葵霜霉病——我国向日葵的一种新病害

向日葵霜霉病在我国迄今未见报导。1960—1962年,在黑龙江省牡丹江和合江农垦区进行病害稠查时,发现这一病害,在上述地区普遍发生,个别地区为害较重。1962年黑龙江八一农垦     

Methodology of virulence screening and race characterization of Plasmopara halstedii,and resistance evaluation in sunflower – a review

Sunflower downy mildew is a disease of high global economic impact as well as a causal agent that is extremely difficult to eradicate. During the past decades, several approaches for the determination of Plasmopara halstedii (Ph) races have been used worldwide and are discussed in this review. Procedures of isolation, cultivation and maintenance of Ph isolates, as well as the screening of sunflower for resistance, are also critically reviewed. The predominant, globally used resistance screening protocol is a ‘whole seedling immersion’ inoculation. ‘Soil drench’ inoculation allows more precise control of the number of Ph zoosporangia applied to a single sunflower seedling. A detached leaf assay has been described, but it has been used mainly for Ph subcultivation and fungicide tests. For race determination, a differential set consisting of nine sunflower genotypes has been used since 1988, coupled with a numerical triplet code for virulence phenotyping of Ph. The increasing variability in global Ph populations has demonstrated the inadequacy of the current set of differentials, and several researchers have proposed additional public lines as new differentials. Furthermore, bulk isolates may show different results in repeated tests, as Ph may contain genetically distinct zoospores within a single zoosporangium. For precise race determination, single zoosporangia or single zoospore isolates are advisable. However, due to low success of isolation, approximately 1–2%, this method cannot be applied in routine Ph race screening. Methods surveyed in this review have a broad spectrum of applications, including taxonomic studies.     

An optimized duplex real-time PCR tool for sensitive detection of the quarantine oomycete Plasmopara halstedii in sunflower seeds

Plasmopara halstedii, the causal agent of downy mildew of sunflower, is an oomycete listed as a quarantine pathogen. This obligate parasite resides in a quiescent state in seeds of sunflower and can be spread from seed production areas to areas of crop production by international seed trade. To prevent the spread or the introduction of potentially new genotypes or fungicide-tolerant strains, an efficient method to detect P. halstedii in sunflower seed is required. This work reports the optimization of a real-time detection tool that targets the pathogen within sunflower seeds, and provides statistically validated data for that tool. The tool proved to be specific and inclusive, based on computer simulation and in vitro assessments, and could detect as few as 45 copies of target DNA. A fully optimized DNA extraction protocol was also developed starting from a sample of 1,000 sunflower seeds, and enabled the detection of <1 infected seed/1,000 seeds. To ensure reliability of the results, a set of controls was used systematically during the assays, including a plant-specific probe used in a duplex quantitative polymerase chain reaction that enabled the assessment of the quality of each DNA extract.     

Possibilités d'application de traitements préventifs contre les ravageurs au moyen de pulvérisations à ultra-bas volume

Pour le « pest management >>, l'envergure des opérations de lutte doit se fonder sur les caractéristiques du problème et notamment sur l'importance numérique des populations d'insectes à combattre et sur leur mobilité. La lutte anti-acridienne et celle qui est pratiquée contre la mouche tsé-tsé sont exposées à titre d'exemple. En outre, la lutte synchronisée contre des ravageurs du riz à Java, basée sur une étude préalable de la situation concernant des milliers d'hectares, a permis d'enregistrer des résultats bien supérieurs à ceux que l'on aurait pu obtenir en procédant aux essais habituels sur parcelles expérimentales. L'intérêt des pulvérisations à volume ultra-bas est qu'elles permettent d'effectuer des applications d'insecticides synchronisées à l'échelle que requiert la situation en cause.     

Activité comparée du bromure de méthyle vis-à-vis de divers microorganismes du sol et mode d'action1

Les résultats obtenus montrent que l'activité biocide du bromure de méthyle est correctement mesurée par le produit C₁T (concentration du bromure de méthyle dissous en mmole 1^?1 x temps d'exposition en heures des organismes au toxique), mesure qui convient spécialement aux traitements du sol, le gaz y étant présent en solution aqueuse. Les valeurs de C₁T qui produisent un effet léthal varient selon les particularitiés morphologiques des organismes et la température pour des raisons de réactions biochimiques et de cinétiques d'échanges physico-chimiques. Il existe de plus un seuil de concentration minimale en deçà duquel l'effet pesticide n'est plus perceptible. Dans nos conditions standardisées de mesure, il apparaît que l'effet nématicide et herbicide se manifeste pour des C₁T semblables, alors que les champignons et surtout les bactéries sont plus résistants. Ainsi, les perturbations observées sur la flore bactérienne du cycle de l'azote à la suite d'un traitement ne sont généralement que temporaires. Il est prudent toutefois d'éviter les traitements à fortes doses.     

Microscopical studies of the effect of metalaxyl on the interaction between sunflower,Helianthus annuus L. and downy mildew,Plasmopara halstedii

The mode of action of the fungicide metalaxyl againstPlasmopara halstedii, the causal agent of sunflower downy mildew, was studied following its application before, during and after artificial contamination of seedlings. The development of the fungus within the treated seedlings was examined microscopically and compared to that occuring in untreated genetically susceptible or resistant genotypes. Hypersensitive-like reactions and necrotic zones leading to the inhibition of fungus growth within the hypocotyl were observed for the three modes of application. This suggests that sunflower defence mechanisms activated by genetical resistance are also involved in the control of downy mildew by metalaxyl.     

Efficacité du phoséthyl-Al contre les souches de Plasmopara viticola résistantes aux anilides (acylalanines)1

Onze souches de Plasmopara viticola ont étè prélevées en diverses régions de France (Charentes, Beaujolais, Touraine) sur des parcelles ou les traitements avec des fongicides de la famille des anilides avaient manqué d'efficacité. Elles ont été mises en culture sur vignes en serre. Dix d'entre elles ont manifesté une forte résistance aux anilides; par contre, toutes se sont montrées sensibles à une application de phoséthyl-Al. Le phoséthly-Al conserve done son activité sur les souches de mildiou de la vigne devenues résistantes aux anilides.     

Influence de traitements effectués contre Ostrinia nubilalis avec la deltaméthrine sur l'entomofaune et les pucerons du maïs1

La deltaméthrine appliquée en pulvérisation à la dose de 20 g ha^-1 au stade 1 mà 1,20 m du maïs exerce une toxicité marquée sur une population de syrphes en phase d'installation. Le traitement a un effet également négatif sur microhyménoptères adultes, mais neutre en revanche sur une population de Scymnus arrivant 3 semaines plus tard. Le chlorpyriphoséthyl appliqué au stade ‘70% panicules visibles’a un impact plus limité que la deltaméthrine sur syrphes et microhymenoptères, par contre sa toxicité est plus marquée à l'égard de Scymnus. Comme, pendant toute la durée de l'essai, la population de Rhopalosiphum padi dans les deux parcelles traitées est restée inférieure ou comparable à celle du témoin, l'hypothèse d'une relation entre la destruction de certains auxiliaires et la proliferation de pucerons n'est pas vérifiée. Néanmoins, dans trois des 15 essais sur la valeur pratique de la deltaméthrine contre O. nubilalis menés en France en 1980–1983, les populations de pucerons ont augmenté significativement en fin de saison. Les causes du phénomène sont encore mal percues.     

Evaluation des propriétés antagonistes de 11 souches de Trichoderma sur Botrytis cinereaà l'aide de plusieurs méthodes de laboratoire1

L'étude du pouvoir antagoniste des spores et du mycélium de 11 souches de Trichoderma appartenant à neuf ‘species aggregates’ (classification de Rifai) a été réalisée sur les spores et le mycélium d'une souche de Botrytis cinerea résistante au bénomyl. Six gouttes contenant chacune une suspension de spores de Trichoderma (1, 10 ou 100 spores par μ1) et de B. cinerea (1 ou 10 spores par μl) sont déposées à la face inférieure d'une feuille de vigne du cv. Muscadelle placée en chambre humide à la température de 22°C. Dix jours après l'inoculation, les nécroses formées pour chacune des huit répétitions par traitement sont notées. La confrontation mycélienne d'une culture de B. cinerea et de chaque souche de Trichoderma pendant des temps variables à la température de 22°C a permis d'observer la vitesse de recouvrement du mycélium de B. cinerea et de vérifier sa viabilité après transfert sur un milieu contenant du bénomyl. Nous avons pu montrer qu'à l'égard de B. cinerea, le pouvoir antagoniste des spores de 11 souches de Trichoderma est semblable à celui de leur mycélium. Deux groupes de souches ont pu etre différenciés: sept souches très antagonistes appartenant aux espèces T. hamatum, T. harzianum, T. koningii, T. longibrachiatum et T. viride; quatre souches non antagonistes appartenant aux espèces T. aureoviride, T. polysporum, T. pseudokoningii et T. reesei.     

Les traitements thermiques de désinfestation des céréales et des produits céréaliers: possibilité d'utilisation pratique et domaine d'application1

La désinsectisation des grains et des produits céréaliers par un choc thermique est un moyen simple de lutte curative qui peut être rapidement installé dans les entreprises agro-alimentaires. L'étude d'un procédé de désinsectisation thermique du blé et de ses produits de mouture dans un lit fluidiséà haut rendement est présentée. Il est montré qu'avec un équipement de laboratoire, puis à l'échelle pilote, les lits fluidisés à haute température (60 à 180°C) sont efficaces pour détruire rapidement l'infestation apparente ou cachée sans élever la température du produit au-dessus de 72°C et avec un refroidissement immédiat. Le choc thermique à des températures d'air n'excédant pas 120°C n'altère pas de façon significative l'ensemble des qualités technologiques des produits désinsectisés: blé tendre panifiable, blé dur et semoules. Le prix de revient global du traitement est comparable à celui d'une fumigation. Son usage systématique est possible sur une gamme de produits dérivés des céréales qui ne peuvent recevoir d'application avec un insecticide de contact.