杜仲四倍体的诱导与鉴定

 以杜仲籽苗为材料,采用秋水仙素药液处理生长点的诱变方法及茎尖细胞染色体数目检测和DNA相对含量测定的倍性鉴定方法,研究了秋水仙素药液浓度,处理时间的诱变效果。结果表明,诱变率因处理的药液浓度和处理时间而异,除0.05%处理48 h外,其它浓度（0.1%,0.2%,0.4%）均以处理12 h效果最好,变异株率在43.3%~63.3%, 最佳处理组合为0.1%秋水仙素处理生长点12 h, 变异株率和四倍体株率分别为63.3%和36.7%。在获得的148个变异株中,染色体计数表明47株植株为四倍体（2n=4x=68）,占31.76%;染色体计数结果进一步被流式细胞仪分析验证。四倍体植株表现出多倍体特征,叶片变厚,叶面积增大,叶形指数减小,保卫细胞增大,单位面积气孔数减少,叶绿体数明显增多。     

秋水仙素诱导薄皮甜瓜四倍体研究

以自选薄皮甜瓜品种‘RT-1’为研究对象,用秋水仙素进行茎尖拨滴的方式进行甜瓜同源四倍体的诱变。通过对诱变植株进行形态学和细胞学鉴定,结果显示获得了四倍体植株,最高诱变率达到19.63%,最佳处理为0.2%浓度秋水仙素处理2 d。统计分析结果显示,不同秋水仙素处理时间对诱变率的影响呈现极显著差异。     

黄瓤西瓜四倍体的诱导与鉴定

以优质黄瓤二倍体西瓜为材料诱导四倍体,采用剥滴法对幼苗生长点进行0.3％或0.4％秋水仙素处理,并对变异株进行形态学鉴定、流式细胞仪鉴定、杂交鉴定和品质鉴定,再经连续3季种植观察,获得了稳定的四倍体材料。试验结果表明,诱导四倍体最有效的处理是在播种后第8天剥除心叶,再用0.3％秋水仙素连续处理裸露的生长点6 d,可使幼苗成活率达80％以上,诱变率稳定在16％以上。再结合几种鉴定方法,可提高四倍体材料筛选的准确性。     

鹤顶兰四倍体植株的诱导与鉴定

 以鹤顶兰原球茎为材料,使用秋水仙素进行了四倍体的离体诱导。结果表明,采用秋水仙素浸泡法可以诱导鹤顶兰原球茎发生倍性变化,含0.02%秋水仙素的“花宝一号”溶液浸泡处理6 d诱导率最高,达22.5%。细胞学鉴定发现,诱变成活植株中有3株为四倍体,其植株形态、气孔大小、气孔密度与二倍体存在差异,细胞核明显增大。     

秋水仙素处理对芦笋“达宝利”四倍体诱导效果的影响

以芦笋“达宝利”露白种子为试材,秋水仙素(添加2%DMSO)处理浓度和处理时间作为诱导因子,设计多个梯度的正交实验,研究秋水仙素对芦笋四倍体诱导率的影响,以期获得最佳的芦笋多倍体诱导条件。结果表明:最佳的秋水仙素处理组合为0.15%的秋水仙素(添加2%DMSO)处理16h,诱导率高达28.33%;经鉴定发现二倍体芦笋的染色体数目为20条,而四倍体染色体数目为40条;与二倍体相比,四倍体芦笋植株粗壮、叶片长度和直径增加,气孔细胞密度减少,气孔细胞体积增大,叶绿体数目和叶绿素含量增加。     

紫菜薹同源四倍体的诱导鉴定及特性研究

为获得优质、抗病的同源四倍体紫菜薹(Brassica campestris var. purpurea Bailey)新材料,使用0.2 g·L^-1秋水仙素溶液点滴二倍体子叶顶端分生组织,经形态和解剖学、细胞学鉴定筛选得到同源四倍体植株。通过对二倍体、四倍体植株农艺性状和营养品质分析发现：四倍体植株的株高极显著增高;开展度、叶片宽、叶柄长显著增加;叶片数极显著降低。营养品质方面,可溶性蛋白、花青苷含量显著增高;可溶性糖和纤维素含量极显著降低;硝态氮含量显著降低。光合特性分析发现,四倍体植株的净光合速率、胞间CO₂浓度、气孔导度、蒸腾速率均高于二倍体,表明四倍体更能适应强光。抗病性分析发现,四倍体受灰霉菌侵染后,菌斑面积小,颜色淡,具有更强的抗病性。     

芦笋四倍体诱导、倍性鉴定及生物学特性的研究

以南方主栽品种"井岗701"二倍体芦笋的露白种子和幼苗为试材,研究了秋水仙素浓度、处理时间及浸泡时的转速对芦笋四倍体诱导效果的影响,并对四倍体和二倍体芦笋的部分抗性和形态特征进行了比较。结果表明:以0.2%的秋水仙素浸泡露白种子6h效果最好,四倍体诱导率最高,为20%,但浸泡时的不同转速对四倍体诱导影响差异不显著;而用0.3%的秋水仙素连续滴苗4d,四倍体诱导率最高为18%;浸泡露白种子法比滴苗法诱导效果好;四倍体植株较二倍体更加粗壮,在抗热性和抗旱性方面也明显优于二倍体。     

四倍体黑芥的获得与鉴定

以黑芥为材料进行了同源多倍体的诱导和鉴定研究。结果表明,用0.1%秋水仙素药液处理黑芥籽苗生长点24 ~ 72 h均可诱导获得多倍体植株,其中处理48 h的诱导效果最好,四倍体株率达73.33%。四倍体黑芥长势良好,叶片和花变大,叶柄变短,叶色和花色变深,开花期较二倍体晚2 ~ 3 d。四倍体黑芥能正常开花散粉,但结籽率较低,仅为13.83%。     

黄芩同源四倍体的诱导及细胞形态学观察

在组织培养条件下,把带有绿色芽点的黄芩(Scutellaria Baicalensis Georgi)愈伤组织通过在培养基中添加不同浓度的秋水仙素的培养基上培养的方法,或经0.1%、0.2%、0.3%秋水仙素溶液浸泡一定时间后再进行培养,均可诱发黄芩多倍体的产生,前者以20 mg/L的秋水仙素浓度诱导效果最好,诱导率可达20%,而后者以0.2%秋水仙素溶液浸泡12 h效果较好,诱导率可达43.3%.     

秋水仙素离体诱导冬枣和酸枣四倍体

 以冬枣和酸枣组培苗丛芽为材料, 研究了秋水仙素诱导染色体倍性变异的最佳浓度与时间组合、多倍体的特征及其纯化技术。结果表明: 秋水仙素处理的最佳组合为50 mg·L ^{- 1}秋水仙素处理40 d,诱导酸枣和冬枣染色体加倍的频率分别达36.37%和26.67%。嵌合体经3～4次继代分离得到了纯化, 并对纯化后的变异株进行了增殖和生根。变异株根尖染色体数加倍(2n = 4x = 48) , 叶片增厚, 栅栏组织、海绵组织明显发达, 茎尖LⅠ、LⅡ和LⅢ层细胞均显著变大, 充分表明获得的变异株为同质四倍体。同质四倍体的主要特征为: 叶片增大, 叶色浓绿, 叶缘锯齿增大, 保卫细胞增大, 气孔密度降低。变异株在诱导期间表现出生长缓慢、叶片变圆、节间变短的暂时现象。     

秋水仙素和胺磺灵除草剂诱导小型西瓜四倍体研究

用0.2%秋水仙素水溶液和不同浓度胺磺灵除草剂滴苗处理诱导小型西瓜四倍体。结果表明,用秋水仙素处理,诱变频率基因型间差异较大,高的可以达到26.3%,低的仅有1.4%。胺磺灵诱导小型西瓜四倍体有一定的效果,但整体诱导频率不高。     

秋水仙素注射大蒜花苞诱导四倍体的研究

为获得染色体加倍的大蒜植株,用0.05%、0.10%、0.15% 和0.20% 的秋水仙素注射苍山糙蒜和金蒜3 号的花苞,并在不同生长调节剂组合的MS 培养基上培养花苞内形成的气生鳞茎,当再生体系建立后,对根尖进行倍性鉴定。结果表明,MS 基本培养基添加0.05 mg·L-1 NAA 和2.0 mg·L-1 KT 能诱导较多的气生鳞茎萌发,直径4～5 mm 的气生鳞茎萌发率最高,且苍山糙蒜气生鳞茎的萌发率整体比金蒜3 号高。秋水仙素注射花苞后,金蒜3 号的花苞死亡率远远高于苍山糙蒜。随着秋水仙素浓度增大,花苞内形成气生鳞茎数不断降低,染色体加倍率升高。苍山糙蒜以0.20% 秋水仙素浓度处理下四倍体诱导率最高,为7.69%;金蒜3 号以0.15% 秋水仙素浓度处理下四倍体诱导率最高,为11.76%。     

金冠苹果成熟胚离体诱导四倍体的研究

 以自然授粉的‘金冠’苹果种子为材料，研究了秋水仙素处理成熟胚离体诱导四倍体技术和嵌合体分离方法。结果表明：将完整胚在0.5%秋水仙素+1%二甲基亚砜的混合溶液中暗处理48 h，然后接种在MS+TDZ 1.0 mg·L^-1+IBA 0.5 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1的再生培养基中，变异率高达10.6%。与二倍体相比，四倍体试管苗生长缓慢，节间变短，叶片增大，叶形指数趋小化，气孔密度降低，保卫细胞增大。经压片法鉴定茎尖染色体数和流式细胞仪分析DNA含量，表明多数变异植株为同质四倍体。利用叶片离体再生器官技术，从诱导获得的嵌合体植株中分离出同质突变体。     

丰产早熟四倍体长豇豆新品种一桶天下的选育

采用系谱法对秋水仙素化学诱变的米美小叶进行选育,获得四倍体长豇豆一桶天下。植株蔓生,生长势强,平均株高306.5 cm,节间长度20.2 cm。早熟,始花节位位于第3节,生育期93 d(天)左右,出苗至始收58 d(天)左右。连续结荚能力强,双荚四荚率高,商品荚绿白色,荚面光滑有光泽,缝线不显,喙红色,无鼠尾,不鼓籽,荚长89.3 cm左右,荚粗0.9cm左右,平均单荚质量27.4 g,单株结荚20根左右,每667 m~2产量2 200 kg左右。田间对病毒病、白粉病和锈病的抗性强于对照早豇4号,综合性状表现优良,适宜在江苏、浙江、安徽、河南等地栽培。     

秋水仙素诱变薄皮甜瓜同源四倍体研究

为了获得四倍体薄皮甜瓜材料,研究薄皮甜瓜多倍体的特征特性,以二倍体薄皮甜瓜金美为材料,以0.2%、0.4%、0.6%的秋水仙素采用滴苗和浸种2种方法进行诱变四倍体试验,并通过染色体观察和细胞学鉴定对其进行倍性分析。结果表明,滴苗法比浸种法诱变率高,其中以0.4%秋水仙素滴苗诱变率最高,为6.67%;与二倍体相比,四倍体植株子叶和真叶长宽比变小,茎增粗,节间变短,花冠变大,果肉变厚,种子增宽,可育性降低,中心可溶性固形物含量增高;保卫细胞变大,气孔密度变小,保卫细胞内叶绿体数目增加;获得了同源四倍体材料。     

秋水仙素浸根法诱导优质小型西瓜四倍体试验初报

用不同浓度的秋水仙素对优质小型西瓜进行浸根和滴苗处理诱导四倍体,结果表明,随着浸根所用秋水仙素浓度和时间的增加.四倍体诱导率有增加的趋势,最高诱导率达到了20.0%,比滴苗处理高出11.3%.将加倍的四倍体果实与二倍体果实进行比较,四倍体果实皮厚增加,瓤质变硬,结籽数下降.     

抗菌肽MB39基因导入‘皇家嘎啦’苹果及其四倍体植株的培育

 采用农杆菌介导法, 将抗菌肽MB₃₉基因转入‘皇家嘎啦’苹果, 获得了7 个转基因株系。通过秋水仙素诱变染色体组工程育种技术, 由转化体叶片获得了20 个四倍体植株。经PCR 检测和Southern Blotting 杂交证明, 抗菌肽MB₃₉基因已经整合到皇家嘎啦苹果的染色体组中。转基因株系TR21、TR23 提高了对火疫病的抗性。采用流式细胞技术( Flow Cytometry) 确定植株为四倍体。     

秋水仙素处理离体叶片获得皇家嘎拉苹果四倍体植株

采用皇家嘎拉苹果（Malus domestica Borkh．）离体新梢叶片作为外植体，研究了不同浓度的秋水仙素长时间处理（5 d）诱导四倍体的效率。结果表明，以不定芽再生培养基附加25 mg／L秋水仙素效果最好，最高在36．7％的叶片外植体上获得了四倍体植株。高浓度（75～200　mg／L）秋水仙素处理严重抑制组织的再生。采用流式细胞技术测定出诱变植株的细胞核DNA含量比对照高出一倍，确定了植株为四倍体。四倍体植株不仅在遗传上而且在外观形态上也明显区别于二倍体。四倍体植株已移栽于大田，并进行了嫁接育苗和大树高接。