猪巨细胞病毒的PCR检测及其gB基因特征分析

根据GenBank登录的猪巨细胞病毒(PCMV)gB基因序列设计检测引物和全长gB基因引物,对来自湖南浏阳和江西景德镇不同养殖场的猪鼻拭子样品(51份)进行PCR检测,60.78%(31/51)的鼻拭子样品扩增出了260 bp的特异性条带.再以阳性样品为模板扩增全长gB基因,并将其克隆到pMD18-T载体,核苷酸序列测定和结果分析表明,所获得PCMVgB基因序列全长2 580 bp,编码860个氨基酸,与国外PCMV分离株的核苷酸同源性为97.6% ～ 98.9%,氨基酸同源性为97.0%～98.6%,且 PCMV可分为2个群:一群为中国湖南株、英国株和德国株,命名为A群;另一群为日本株、瑞士株和西班牙株,命名为B群.抗原表位优势、亲水性、表面可及性预测分析表明,PCMVgB蛋白是理想的免疫学抗原候选蛋白.     

100例献血员巨细胞病毒感染的检测

人类巨细胞病毒(HCMV)不仅可见于先天性感染,器官移植、恶性肿瘤及免疫功能低下者在接受供血者带病毒的血液时,也可引起水平感染,常导致严重后果甚至死亡。因而对供血者引起的医院内感染倍受人们关注。为了解我市供血者中HCMV的感染情况,我们对本市100例献血员作了检测,现将结果报道如下:     

人巨细胞病毒pp150抗原区基因片段的克隆与表达

为了研制人巨细胞病毒(HCMV)核酸疫苗,根据HCMV基质磷蛋白pp150基因序列设计引物,利用高保真PCR从HCMV AD169株基因组DNA中扩增出编码pp150抗原决定簇区域的基因片段.序列分析结果显示其与发表的该段序列同源性为100%.将此基因片段克隆进原核表达质粒pET30a,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达后经SDS-PAGE及Western blotting检测到约35 h的外源蛋白.表达产物免疫小鼠,所得抗体具有低滴度中和作用.     

肾移植术后巨细胞病毒视网膜炎的诊断和治疗

目的：报道2例肾移植术后巨细胞病毒(CMV)视网膜炎的诊断和治疗。方法：详细分析肾移植后巨细胞病毒视网膜炎病例的临床情况。结果：1例早发现，给予及时治疗，疗效满意；另1例因发现较晚，治疗不及时，治疗效果差。结论：某些药物如OKT3／ATG／ALG，或激素、硫唑嘌呤会增加CMV视网膜炎发病机会，更昔洛韦治疗有效。早期发现及时处理对CMV视网膜炎的治愈有意义。     

人巨细胞病毒ppl50抗原区基因片段的克隆与表达

为了研制人巨细胞病毒(HCMV)核酸疫苗，根据HCMV基质磷蛋白pp150基因序列设计引物，利用高保真PCR从HCMV AD169株基因组DNA中扩增出编码pp150抗原决定簇区域的基因片段。序列分析结果显示其与发表的该段序列同源性为100％。将此基因片段克隆进原核表达质粒pET30a，重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，诱导表达后经SDS-PAGE及Western blotting检测到约35ku的外源蛋白。表达产物免疫小鼠，所得抗体具有低滴度中和作用。     

猪巨细胞病毒福建株gB基因的克隆和序列分析

为明确猪巨细胞病毒福建株(PCMV-FJ01)的gB基因特征,根据其序列特征,设计特异性引物对其进行分段扩增,并对目的片段进行克隆测序。结果发现,PCMV-FJ01株gB基因全长为2 580bp,编码859个氨基酸;其和GenBank数据库中的PCMV分离株的gB基因的核苷酸和氨基酸同源性分别均在98.3%和97.9%以上。此外,本研究还发现部分(约50%)PCMV代表株的gB基因存在ACA三核苷酸缺失(436位氨基酸存在谷氨酰胺Q的缺失)。除ZZ株外,PCMV不同分离株的gB基因是否存在基因缺失和其遗传进化正相关。     

巨细胞病毒感染与输卵管妊娠的关系分析

目的：探讨巨细胞病毒（CMV）感染与输卵管妊娠的关系。方法：应用多聚酶链反应（PCR）技术检测输卵管妊娠患者98例（观察组）和行附件切除术、无输卵管妊娠史的卵巢囊肿患者43倒（对照组）的宫颈分泌物和输卵管组织标本中CMV DNA。结果：观察组宫颈分泌物和输卵管组织检查出CMV DNA的阳性率分别为20．4％（20／98）、17．3％（17／98）;对照组宫颈分泌物和输卵管组织检查出CMV DNA的阳性率则分别为4．7％（2／43）和2．3％（1／43）。两组比较．差异均有显著性（P〈0．05）。结论：CMV感染与输卵管妊娠的发生关系密切．定期监测和及时治疗CMV感染可减少输卵管妊娠的发生。     

1例肾移植术后并发巨细胞病毒性肺炎及成人呼吸窘迫综合征的抢救体会

患者 ,男 ,47岁 ,于 1 999年 3月 30日因“双腰疼痛 1 0α,尿少、四肢乏力 2周”入住泌尿外科。外院腹部 B超示 :双侧多囊肾、多囊肝。既往体健 ,否认有慢性咳嗽、咯痰及肝炎、肺结核病史。入院体查 :生命体征平稳 ,呈慢性病容 ,贫血貌 ,心、肺体查未见异常 ,腹平软 ,肝、脾肋下未及 ,双肾可于肋下触及 ,表面欠光滑 ,微压痛 ,双肾区叩击痛可疑阳性 ,双输尿管行程无压痛 ,膀胱区无胀 ,无压痛 ,双下肢无水肿。入院时血尿素氮 (BUN)34.1 2 mmol/ L,血肌酐 (Scr) 1 2 1 .2 6μ mol/ L。 4月 1日上午行血液透析术。于当天 1 9时送手术室在持续…     

更昔洛韦高剂量、长程治疗小儿巨细胞病毒肝炎的疗效观察

目的观察更昔洛韦治疗小儿巨细胞病毒肝炎的临床效果.方法将确诊为巨细胞病毒肝炎的患儿49例分为治疗组28例和对照组21例.治疗组采用高剂量、长程更昔洛韦治疗(诱导期7.5 mg·kg-1),每隔12 h静滴1次,连用14 d;维持治疗剂量10 mg·kg-1静滴,隔天静滴1次,维持3个月);对照组采用常规护肝治疗.比较两组治疗前后黄疸消长情况及肝脏大小、谷丙转氨酶(ALT)、血CMV-IgM,血CMV-IgG变化.结果治疗组CMV-IgM全部转阴,对照组转阴率为42.9%,两组比较差异有显著性;且治疗组较对照组黄疸消退时间、ALT下降时间明显缩短.结论更昔洛韦治疗小儿巨细胞病毒肝炎有较好的疗效,值得临床推广.     

人鼻咽上皮裸小鼠移植及诱癌实验中的EB病毒DNA检测

人鼻咽组织移植于２０只裸小鼠，分三组再分别多次以ＥＢＶ（７头）、ＥＢＶ＋ＴＰＡ（５头）或生理盐水（对照８头）皮下注射，诱癌后处死，将移植物作常规病理切片观察，并同时提取ＤＮＡ为模板，以ＥＢ病毒ＢａｍＨＩＷ片段特异性引物作ＰＣＲ检测ＥＢ病毒。结果显示：ＥＢＶ组与ＥＢＶ＋ＴＰＡ组中，７只可见鼻咽组织移植物发生癌前或癌变（原位癌、早期浸润癌各１只），而对照组均未见上述改变，两组比较差别有显著意义（０．０１＜Ｐ＜０．０５）；无形态变化的受试动物中ＩＢ病毒阳性２只，阴性１１只；有癌前病变和癌变的动物中，阳性５只，阴性２只，两组差别有显著性（０．０１＜Ｐ＜０．０５），提示观察到的病变与ＥＨ病毒感染有关。     

新生儿脐血红细胞铁蛋白含量的测定

用放射免疫测定法检测１２６名足月新生儿脐血红细胞铁蛋白含量的结果表明：１２６例新生儿脐血红细胞铁蛋白为１６１．４±６７．５ａｇ／ｃｅｌｌ，脐血红细胞铁蛋白含量与血清铁蛋白及血红蛋白含量均呈显著正相关。红细胞铁蛋白含量与体内铁储备密切相关，它不受其他因素的影响，对评价新生儿铁储备的作用优于血清铁蛋白。     

猪瘟病毒的免疫酶组织化学定位

本实验结果证实PAP法在检测、定位猪瘟病猪组织中的病毒抗原是一种特异性强、敏感性高的一种新技术。主要优点是:①背景浅,阳性显色好,色深清楚;②适于检测、定位微量抗原。为病理诊断和鉴别诊断提供了可靠的形态学和免疫学依据。     

日粮硒水平对山羊全血谷胱甘肽过氧化物酶活性和组织硒含量的影响

实验考察了在舍饲条件下,饲喂混合精料和干草时补硒对断乳山羊全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、组织硒含量及其它指标的影响。风干基础日粮含硒0.03ppm,各实验组的补硒量分别为0、0.05、0.10、0.20、0.30ppm。结果表明;日粮含硒0.23ppm试羊全期增重、饲料/增重最佳,但各组间差异不显著。补硒后试羊全血GSH-Px活性显著升高,日粮含硒量大于或等于0.23ppm时酶活呈平稳状态,全血GSH-Px活性是表示山羊硒营养状况的较好指标。组织含硒量随日粮硒水平增加而上升,血硒、肾硒含量在日粮含硒0.23ppm时上升程度增大。由此可见,断乳山羊风干日粮硒需要量约为0.23ppm。     

人与大鼠(SD)外周血淋巴细胞DNA的非程序合成(UDS)水平的比较

以外周全血为材科,紫外线(UV)照射为损伤源,经短期外周血培养和~3H-TdR掺入,观察外周血淋巴细胞DNA的非程序合成(Unscheduled DNA Synthesis,简称UDS)水平,以比较人与大鼠DNA损伤修复能力的差异,并为机体DNA损伤修复的研究提供一个简便可行而有效的实验方法。     

肉鸡腹水症血液生理生化指标的研究

对１５只腹水症肉鸡、２０只心扩张病鸡及２０只对照组肉鸡的６项血液学参数和４项血液生化参数进行了测定,其统计结果如下：（１）腹水症病鸡血液ＲＢＣ、ＰＣＶ和Ｈｂ（３．５５±０．４３×１０＾１２／Ｌ、３９．６８±１．４３％、１１．５８±８．３ｇ／ｄｌ）显著地高于心扩张病鸡（３．０６±０．４９、３５．９３±１．５６、９．８１±０．４１ｇ／ｄｌ）和极显著地高于对照组肉鸡（２．３９±０．２０、３２．００±０．     

直接ELISA与PCR联合检测人粪便中的沙门氏菌

采用直接酶联免疫吸附试验(ELISA)与PCR相结合的方法,对某市饮食行业健康人群的1 426份人粪便样品进行沙门氏菌检测,并与国家标准方法对比,直接ELISA法的敏感性和特异性分别达100%和97.2%,PCR法的敏感性和特异性均为100%.确定的沙门氏菌快速检测优化程序为对大量样品采用直接ELISA筛检,去除阴性样品,阳性样品采用PCR法作进一步鉴定;需要定型时则用国家标准方法.此法具有高度的特异性、敏感性和快速简便等优点.     

"果-草-鹅"模式中鹅产品的铅残留检测与安全性

采用火焰原子吸收分光光度法对重庆市涪陵区南沱生态农业示范园区“果—草—鹅”模式下饲养的四川白鹅肌肉和肝脏中铅的残留量进行检测。结果表明被测鹅肉和鹅肝样品中铅残留量均符合我国铅允许量标准GB 14935—1994。     

饲粮不同锌水平对幼猪血液生化指标和组织器官矿物元素浓度的影响

本试验研究了饲粮不同锌水平对幼猪血清碱性磷酸酶活性、血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量,以及心脏、肝脏、肾脏、脾脏、肺脏、肌肉、胰脏、血液、骨骼和被毛中锌、钙、镁、磷、铁、铜和锰浓度的影响.结果末见饲粮锌水平对幼猪生长发育有影响.根据血液生化指标和组织器官锌浓度,作者建议6～43公斤幼猪锌需要量为106～114毫克/公斤饲粮.对组织器官各元素浓度的相关分析表明,锌与其它矿物元素在代谢上可能存在一定关系.     

枸杞多糖对缺氧小鼠血气分析的影响

小鼠连续灌胃枸杞多糖（ＬＢＰ）７ｄ,密闭缺氧后采集血样进行血气分析,ＬＢＰ组与对照组比较,二氧化碳分压（ＰＣＯ２）,肺泡－动脉氧分压差（ＡａＤＯ２）,无显性差异;氧分压（ＰＯ２）,二氧化碳总量（ＴＣＯ２）,碳酸氢根（ＨＣＯ３＾－）,氧饱和度（Ｏ２ｓａｔ）,氧含量（Ｏ２ｃｏｎｔ）则降低,试验结果显示,ＬＢＰ可提高小鼠组织对Ｏ２的利用。