一种芽胞杆菌生物被膜形成缺陷培养基的研究

为寻找一种不支持芽胞杆菌正常形成生物被膜的培养基,比较枯草芽胞杆菌R31和168菌株在MSgg、NB、LB、BGM固体和液体培养基中形成的生物被膜形态差异,确定R31和168菌株生物被膜形成能力差异;根据R31在MSgg、NB、BGM培养基中振荡培养的生长方式设计出BGM1和BGDM培养基,测定R31在BGM1和BGDM培养基上的生长曲线并比较R31菌株和168菌株在BGM1和BGDM上生物被膜形成的差异,然后测定枯草芽胞杆菌TR21菌株、解淀粉芽胞杆菌R21g9菌株、短芽胞杆菌L1菌株、胶质芽胞杆菌L2菌株在BGM1和BGDM培养基上生物被膜形成情况。结果显示,R31在MSgg、NB、LB、BGM液体培养基表面形成薄皮,在MSgg、LB固体培养基和NA上形成具有褶皱的菌落,在BGM上形成光滑的菌落,R31在这些培养基中形成的生物被膜比168菌株厚实。R31在MSgg和BGM中早期(2 h)以游离状态生长,对数生长期(4 h)菌体黏连出现链状,对数生长中后期(8 h)菌体呈现网状结构,但在NB培养基中主要以游离状态生长,显示营养而非培养条件影响R31的生长方式。于是将BGM培养基中的酵母提取物换为牛肉膏获得BGM1培养基,将BGM1培养基的胰蛋白胨改为细菌学蛋白胨得到BGDM培养基,并发现R31和168菌株可以在BGM1上形成薄皮和菌落,不能在BGDM培养基上形成完整的薄皮和具有褶皱的菌落。待测菌株均能够在BGM1培养基上形成厚薄程度有差异的薄皮和有褶皱的菌落,均不能在BGDM培养基上形成薄皮和具有褶皱的菌落。在BGDM中添加甘油或Mn可以恢复R31形成薄皮和扩散的褶皱菌落。芽胞杆菌在BGDM培养基上不能正常形成薄皮和具有褶皱的菌落,BGDM可以用于筛选促进生物被膜形成的物质。     

玉米纹枯病的防治药剂筛选试验研究

为达到理想的玉米纹枯病防治效果,本文选择24％井冈霉素A+0.5％助剂、24％浓度的井冈霉素A、枯草芽孢杆菌和井冈+枯芽菌,清水空白对照.每种药剂配成500倍药液,分两次喷雾进行防效对比试验.结果表明:各参试药剂处理都可以降低玉米纹枯病的病情指数,与对照呈显著性差异,但各处理间差异不显著.井冈+枯芽菌及枯草芽孢杆菌的防...     

枯草芽胞杆菌R31施用对中粉1号粉蕉根际微生物的影响

为探索枯草芽胞杆菌R31处理对粉蕉枯萎病和根际微生物的影响,对大田施用过R31可湿性粉剂的中粉1号开展防效统计和根际微生物计数.其中R31可湿性粉剂按照1.0× 106 CFU/mL浓度施用,每次每株施用1 000mL,连续施用5次.收获前统计中粉1号不同表型植株的枯萎病发病率,并采集不同表型和健康状态植株的根际土样,土壤微生物统计采用稀释平板计数.结果表明,施用R31可湿性粉剂对中粉1号枯萎病有一定的防治效果,总防效44.00％,对低抗性“青杆”表型的防效为23.00％,对高抗性“红杆”表型的防效为56.14％.对根际可培养微生物计数结果表明,R31施用可以增加粉蕉根际细菌总量,减少根际真菌、放线菌和镰刀菌总量.显示枯草芽胞杆菌R31对粉蕉枯萎病的防效可能与其对根际微生物的调节有关.     

枯草芽胞杆菌R31施用对中粉1号粉蕉根际微生物的影响

为探索枯草芽胞杆菌R31 处理对粉蕉枯萎病和根际微生物的影响,对大田施用过R31可湿性粉剂的中粉1号开展防效统计和根际微生物计数。其中R31 可湿性粉剂按照1.0*10^6 CFU/mL 浓度施用,每次每株施用1 000mL,连续施用5 次。收获前统计中粉1号不同表型植株的枯萎病发病率,并采集不同表型和健康状态植株的根际土样,土壤微生物统计采用稀释平板计数。结果表明,施用R31 可湿性粉剂对中粉1 号枯萎病有一定的防治效果,总防效44.00%,对低抗性野青杆冶表型的防效为23.00%,对高抗性野红杆冶表型的防效为56.14%。对根际可培养微生物计数结果表明,R31 施用可以增加粉蕉根际细菌总量,减少根际真菌、放线菌和镰刀菌总量。显示枯草芽胞杆菌R31 对粉蕉枯萎病的防效可能与其对根际微生物的调节有关。     

生物制剂防治小麦赤霉病田间药效试验

为提高小麦赤霉病防治效果,筛选豫东平原防治小麦赤霉病的高效生物制剂,以‘郑麦7698’为试材,研究枯草芽孢杆菌WP、氨基寡糖素AS、申嗪霉素SC、低聚糖素AS、井冈?蜡芽菌SC 5种生物制剂和井冈?多菌灵SC、多菌灵WP对小麦赤霉病的田间防效。结果表明：小麦赤霉病重发年份,2次用药可以明显提高病穗防效和病指防效,应该进行2次用药。在小麦扬花初期、扬花盛期2次用药,对小麦赤霉病防治效果最好的处理为处理⑥井冈?多菌灵,病穗防效为78.21%,病指防效达到80.55%;处理⑦多菌灵、处理③申嗪霉素、处理①枯草芽孢杆菌次之,病指防效均在75%以上,无显著性差异。增产效果以处理⑥井冈?多菌灵最好,增产率为26.51%;处理⑦多菌灵次之,增产率为25.03 %。豫东平原防治小麦赤霉病可首选井冈?多菌灵,多菌灵仍可继续应用,枯草芽孢杆菌、申嗪霉素可作为多菌灵的替代药剂推广应用。     

生防菌株2LN3对水稻纹枯病的防效和产量构成的影响

[目的]进一步验证生防菌株2LN3对水稻纹枯病的防治效果。[方法]通过大田生产试验研究生防菌剂2LN3、生防菌剂2LN3+井冈霉素、井冈·腊芽菌、井冈霉素和清水对照5个处理对水稻纹枯病的防效和产量构成的影响。[结果]生防菌剂2LN3+井冈霉素对水稻纹枯病的防治效果较好,2次用药后第7和第15天的防效分别达60.85%和72.16%,2次调查防效均超过生防菌剂2LN3、井冈·腊芽菌和井冈霉素,而单用生防菌剂2LN3则表现为药效持续时间较短,在2次用药后的第15天防效比井冈霉素略高,但与井冈·腊芽菌相比防效则降低了6.5%;与井冈霉素相比,生防菌株2LN3具有促生作用,能显著提高有效穗数、实粒数、结实率和千粒重;喷施生防菌剂2LN3和生防菌剂2LN3+井冈霉素都具有一定的增产作用,与井冈霉素相比分别增产3.8%和12.1%,均达到显著性差异。[结论]将生防菌剂2LN3和井冈霉素复配可替代井冈霉素应用于实际生产中来提高对水稻纹枯病的防效。     

7种生物药剂对百香果茎基腐病菌的抑菌效果试验

【目的】明确7种生物药剂对百香果茎基腐病的防治效果,筛选高效安全生物药剂用于指导百香果生产。【方法】采用菌丝生长速率法测定7种生物药剂对百香果茎基腐病菌的毒力效果,观察药剂对病原菌孢子生长及形态的影响,并用离体接种法测定药剂的防治效果。【结果】7种生物药剂处理对菌落生长均有抑制作用,但对孢子的生长和形态的效果不同。室内毒力测试结果显示植物源药剂中抑菌效果最佳为井冈霉素(EC₅₀为7.79 mg/L),其次为春雷霉素(EC₅₀为26.35 mg/L)、乙蒜素(EC₅₀为28.65 mg/L)、苦参碱(EC₅₀为339.13 mg/L)和多抗霉素(EC₅₀为1 150.29 mg/L)。微生物药剂以枯草芽孢杆菌效果较好,EC₅₀为3.2×10⁶ CFU/g。筛选毒力较强的4种生物药剂均可抑制百香果茎基腐病不同菌株生长。离体试验和田间防效试验表明井冈霉素和枯草芽孢杆菌生物药剂对百香果茎基腐病防治效果显著,两者的离体防效分别为58.8%和70...     

40%博特可湿性粉剂

性能特点本品系活性生物因子(蜡芽杆菌)和有效抗生素(井冈霉素)复配而成的生物制剂,同时加入特殊表面活性剂9708,药液具有极强的粘着力,喷施出去能稳固附着于植物表面,形成药膜保护层：蜡芽杆菌迅速繁殖形成群体优势,通过位点占领和营养竞     

6%井冈霉素·240亿枯草芽孢杆菌WP对稻曲病的控制效果研究

[目的]探明6%井冈霉素.240亿枯草芽孢杆菌WP对稻曲病的田间防治效果。[方法]采用随机区组设计,于2007年在安徽省凤台县对稻曲病进行田间药剂防治试验。[结果]研究结果表明,在用量为1 500、1 800 g/hm2时,6%井冈霉素.240亿枯草芽孢杆菌WP对稻曲病的防治效果均达70%以上,与12.5%纹霉清水剂的防效无显著性差异;但在低用量（1 200 g/hm2）条件下,其对稻曲病的防治效果有所降低,防效为66.8%,与12.5%纹霉清水剂（3 000 g/hm2）防效间差异性极显著,但与20%井冈霉素水溶粉剂（6 000 g/hm2）处理间差异性不显著。[结论]6%井冈霉素.240亿枯草芽孢杆菌可用于稻曲病的田间防治。     

生物药剂对草莓灰霉病的防效与评价

为筛选出适防草莓灰霉病的药剂,选择了5种供试生物药剂,分别开展了室内抑菌实验和田间防效试验。研究结果表明,供试药剂抑制菌丝生长效果明显,生物类药剂显著优于化学类药剂(腐霉利对照),其中,多抗霉素WP和香芹酚AS抑菌效果明显,其次是枯草芽孢杆菌WP和丁子香酚SLX、哈茨木霉菌WP。田间药效结果表明,第1次施药后7d显著低于第2次施药后14d效果,各药剂处理防效得到显著提升,多抗霉素WP和香芹酚AS防效最高,防效分别为86.12%和82.32%;枯草芽孢杆菌WP和丁子香酚SLX防效次之,防效分别为75.36%和72.77%;哈茨木霉菌WP防效最差,防效为65.20%,与其它处理差异显著。生物类药剂持效性更佳,显著好于化学类药剂,故可推荐多抗霉素WP、香芹酚AS、枯草芽孢杆菌WP和丁子香酚SLX 4种药剂作为防控草莓灰霉病的生防理想药剂,旨在为徐州地区绿色发展新理念提供技术支撑。     

Fermentation,formulation and evaluation of PGPR Bacillus subtilis isolate as a bioagent for reducing occurrence of peanut soil-borne diseases

Four isolates of Bacillus subtilis coded, B4, B7, B8 and B10 were examined as biocontrol agents for their abilities and antagonistic effect on the in vitro growth of certain phytopathogenic fungi of peanut, Rhizoctonia solani and Sclerotium rolfsii. Bacillus subtilis isolate B4(GenBank accession no. EF150884) was the highly effective one for inhibiting the fungal mycelial growth. Batch fermentation of B. subtilis isolate B4 was carried out and the maximum biomass achieved was 4.53 g L~(-1) at 11 h. Bacillus subtilis isolate B4 was formulated and evaluated as a biofungicide to reduce peanut soil-borne diseases under greenhouse and field conditions at the side of Rizolex-T(fungicide) as standard. Treatments by formulated plant growth-promoting rhizobacteria(PGPR) B. subtilis B4 and Rizolex-T in a soil infested with R. solani, S. rolfsii and mixture of them were more effective in decreasing percentage of damping-off, root and pod rot disease incidence(%) in greenhouse and open field environment during the two seasons 2015 and 2016. Treatments by PGPR gave highly dry weight and number of healthy pods compared to control of fungi treatment which was nearby to dry weights of healthy pods achieved by treatments by Rizolex-T in a soil infested with S. rolfsii, R. solani and mixture of them. Formulated PGPR B. subtilis B4 gave higher increasing of yield percentage than treatment by Rizolex-T in the two evaluated seasons 2015 and 2016. It can conclude that the produced bioforumlated agent was more efficient as fungicide when compared with the other chemical synthesized fungicides, safe for human and the environment and economy.     

金黄色葡萄球菌分离株的菌膜测定及其影响因素

采用96孔细胞培养板法,对10株不同来源的金黄色葡萄球菌分离株的菌膜形成能力进行调查,并研究外部环境因素对金黄色葡萄球菌菌膜形成的影响。首先以金黄色葡萄球菌标准菌株ATCC6538为模式菌株,确定了亲水性细胞培养板、培养48 h为适宜的菌膜体外培养条件。在此条件下测定了10株分离株的菌膜形成量,并研究了不同培养温度（25~46℃）和不同营养条件（葡萄糖和氯化钠）对菌膜形成的影响。结果显示,体外培养条件下,金黄色葡萄球菌普遍可以形成菌膜,10株菌中仅1株为菌膜阴性,不同菌株菌膜形成能力差异较大;较高的培养温度有利于菌膜的形成,有3株菌在46℃时菌膜形成量达到最大;0.5%葡萄糖和1%氯化钠的添加可显著改变各菌株的菌膜形成,葡萄糖倾向于促进临床分离株菌膜形成量的增加,而氯化钠倾向于促进食品分离株菌膜形成量的增加。这一结果,可以为实际环境中菌膜的预防及控制提供指导和方向,同时也说明金黄色葡萄球菌的菌膜形成存在着不同的调控模式。     

稻瘟菌拮抗细菌的筛选与鉴定

从不同水稻根际土壤样品中分离纯化了486株细菌。采用平板测定法和微培养离体测定试验获得12株对稻瘟菌有不同程度抑制作用的拮抗细菌。结果表明:B4,B8,B18,B31,B34,B73和B74等菌株对稻瘟菌菌丝生长抑制率均在80%以上,其培养液100%抑制稻瘟菌孢子萌发;同时对水稻纹枯病菌、油菜菌核病菌、小麦赤霉病菌、草莓炭疽病菌和黄瓜枯萎病菌等多种病原真菌有较好抑制作用,经鉴定该组拮抗细菌为枯草芽孢杆菌。B1,B43和B44菌株对稻瘟菌菌丝生长和孢子萌发有较好抑制作用,对水稻纹枯病菌具有一定的抑制作用,经鉴定为短小芽孢杆菌。B48和B59为链霉菌,对稻瘟菌的抑菌带明显,但对稻瘟菌孢子萌发和附着胞的形成抑制作用不明显。     

几种因素对多粘类芽孢杆菌DN-1活性的影响

[目的]探讨pH、温度环境因素对多粘类芽孢杆菌DN-1抑菌效果的影响以及井冈霉素A降低芽孢消解作用,为提高其生物活性提供理论依据。[方法]研究不同温度、pH条件下多粘类芽孢杆菌DN-1对水稻纹枯病菌的抑制效果,测定DN-1菌株和井冈霉素A复配对其细胞消解率的影响。[结果]pH在6.0~8.0时DN-1菌株对水稻纹枯病菌均表现出较好的抑制效果,pH为7.0时抑菌率最佳;温度在15~40℃时该菌对水稻纹枯病菌均能表现出较强的抑菌效果,温度在35℃时抑菌效果最强;在DN-1菌株配成的水悬液中添加不同比例的井冈霉素A,都有降低细胞消解速率的作用。[结论]温度和pH对DN-1菌株抑制水稻纹枯病菌的效果均有影响;井冈霉素A可延长含DN-1生物农药的货架期。     

Bacillus subtilis fmbj与2-脱氧葡萄糖协同作用Rhizopus stolonifer的生物防治效果

 【目的】通过添加佐剂2-脱氧葡萄糖（2-DOG）的方法提高拮抗细菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis fmbj)菌株的生防效果。【方法】分别在PDA平板和水蜜桃上测定2-DOG对拮抗菌B.subtilis fmbj和病原菌桃软腐病菌葡枝根霉(Rhizopus stolonifer)生长的影响及B.subtilis fmbj与不同浓度2-DOG协同作用对R.stolonifer的防治效果。【结果】平板试验表明,2-DOG浓度仅为0.3 mg•mL-1时,可完全抑制R.stolonifer的生长;而2-DOG高达20 mg•mL-1,B.subtilis fmbj依然存活,表现出对2-DOG有较高的耐受性。桃上接种试验发现,单独使用浓度为3.9×108 CFU/mL B.subtilis fmbj时,桃果实发病率为30%;4 mg•mL-1 2-DOG单独使用时桃果实发病率为35%;而当4 mg•mL-1 2-DOG和3.9×107 CFU/mL B.subtilis fmbj配合使用时,可完全抑制果实的腐败。【结论】拮抗菌B.subtilis fmbj和2-DOG协同作用比单独使用对桃果实软腐病的防治效果明显,该研究结果为桃果实采后病害控制和保藏提供了有效的方法与途径。     

枯草芽孢杆菌的定殖能力及对玉米纹枯病的防治效果

从玉米植株根际土壤分离出的枯草芽孢杆菌菌株"515-126"对玉米纹枯病菌有较强的抑制作用。为了解该菌株的具体防治效果,本试验利用该菌株的抗利福平突变菌株,分别测定了其在玉米植株的根际土壤、根表和玉米叶鞘的定殖能力及其对玉米纹枯病的田间防治效果。结果表明,该菌株在根际土壤、根表有很好地定殖力,在叶鞘的定殖力较差,在灭菌土中的定殖力要强于大田里的定殖力;施入该菌株60 d后,根际土壤的菌量在大田土中下降92.8%,在灭菌土中上升15%;在45 d后,根系的菌量在大田土中下降68.9%,在灭菌土中为初始菌量的4.46倍;在40 d后,叶鞘的菌量在大田土中下降达99.95%,在灭菌土壤中下降达99.91%。该菌株在田间对玉米纹枯有一定防治效果,相对防效达到49.37%,低于井冈霉素(60.76%)。本试验的研究结果对于提高和稳定该菌的生防效果,制定科学的防治技术有重要意义。     

胜红蓟根系分泌物土壤浸提液在石榴枯萎病生物防治中的作用初探

为进一步明确胜红蓟根系分泌物在提高枯草芽孢杆菌控制石榴枯萎病的作用途径,以胜红蓟土壤提取液为研究对象,利用室内试验检测不同浓度胜红蓟土壤浸提液对生防菌枯草芽孢杆菌和石榴枯萎病菌生长的作用。结果表明,胜红蓟土壤浸提液对生防菌枯草芽孢杆菌的生长具有促进作用,而对石榴枯萎病菌没有明显的作用。以上结果说明,胜红蓟促进枯草芽孢杆菌控制石榴枯萎病防治效果主要是通过促进生防菌的生长而起作用,而对病原菌石榴枯萎病菌没有明显的直接抑制作用     

枯草杆菌B_s501抗稻瘟病菌条件优化

[目的]提高枯草芽孢杆菌的拮抗作用。[方法]通过正交试验和单因素试验研究了枯草杆菌Bs501的发酵基础培养基和最适发酵条件,明确了几丁质的添加量及添加时机,分析了二价金属离子对枯草杆菌发酵液的影响。[结果]枯草杆菌在LB培养基上培养12 h达到对数生长末期,随后生长曲线快速下降,56 h出现小波峰。各因子对枯草杆菌Bs501生长量的影响为蛋白胨>蔗糖>酵母膏>K2HPO4,它们对枯草杆菌Bs501的抑菌活性为蔗糖>蛋白胨>酵母膏>K2HPO4。最佳基础培养基确定为3%蔗糖、1%蛋白胨、0.5%酵母膏0、.45%K2HPO4。最适发酵条件为:起始pH值7.0、培养温度30℃、发酵时间48 h。培养12 h添加0.5%几丁质诱导枯草芽孢杆菌Bs501产生拮抗物质的效果最显著。Ca2+可显著提高发酵液的抑菌活性。[结论]该研究为枯草芽孢杆菌的工业深层发酵提供了技术参考。     

维药材疏花蔷薇果提取物的体外抑菌作用研究

[目的]研究疏花蔷薇果不同极性溶剂的提取物的体外抑菌活性,寻找抗菌活性成分。[方法]采用微孔板法和稀释法研究疏花蔷薇果不同极性溶剂的提取物对变异链球菌和大肠杆菌生长及其生物膜形成的影响。[结果]疏花蔷薇果的乙酸乙酯提取物对变异链球菌的生长有一定抑制作用,不同极性溶剂的提取物对变异链球菌生物膜的形成均有明显作用;疏花蔷薇果不同极性溶剂的提取物对大肠杆菌生物膜的形成均有不同程度的抑制作用,其中,氯仿提取物和乙酸乙酯提取物的抑菌效果最强。[结论]疏花蔷薇果提取物对变异链球菌生长和大肠杆菌生物膜形成具有较好的抑制作用,值得进一步研究。     

粪肠球菌和枯草芽孢杆菌的体外评价研究

测定了粪肠球菌(Enterococcus Faecalis)和枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)对致病性大肠杆菌O54、霍乱沙门氏菌A72及正常菌嗜酸乳酸杆菌CICC6075生长的影响。结果表明,粪肠球菌和枯草芽孢杆菌均可较好的抑制大肠杆菌和沙门氏菌的生长;粪肠球菌对嗜酸乳酸杆菌起到较好的促生长作用;枯草芽孢杆菌与嗜酸乳酸杆菌混合培养的前35 h,对嗜酸乳酸杆菌有一定的抑制作用,但35 h以后则对其有较好的促生长作用。