中国石竹叶片愈伤组织形成·分化及植株再生

[目的]为了研究中国石竹叶片愈伤组织的诱导及植株的再生。[方法]通过叶片愈伤组织诱导再分化和叶片直接诱导不定芽2种途径获得了石竹的再生植株。[结果]以植株中部带叶基的叶片愈伤组织诱导再分化效果最好。叶片愈伤组织在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L培养基中不定芽分化率最高(50%～60%)。幼叶在MS+NAA 0.3mg/L+6-BA1.0mg/L培养基上培养47d可直接诱导出不定芽。与愈伤组织分化成芽相比,幼叶直接诱导不定芽芽数少,但生长快,苗较高。最佳增殖培养基是MS+6-BA 0.2mg/L+IAA 0.2mg/L,最佳生根培养基是1/2MS+IBA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+0.2%活性碳。[结论]叶片作为外植体具有来源丰富、取材方便、操作简单的优点,探讨植物叶片的再生分化特性具有实际的意义。     

黑莓叶片组织培养及植株再生的初步研究

以美国黑树莓叶片作为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA或IAA进行愈伤组织诱导及植株再生试验.结果表明:树莓叶片外植体在培养基MS+6-BA 2.0～ 4.0 mg/L+NAA(IAA)0.01～0.5 mg/L都能不同程度地形成愈伤组织 ,但以MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 4.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L愈伤组织的诱导率最高,诱导率可达100%;所试验的各种不定芽分化培养基,都能不同程度地诱导愈伤组织分化出不定芽,在添加6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的MS培养基上,愈伤组织分化不定芽的比例最高,达49.7%的;所产生的不定芽在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L的培养基上的生根率可达89.3%.     

箭胡毛杨组培繁殖技术的研究

采用箭胡毛杨幼叶作为外植体进行组织培养,以MS为基本培养基获得了再生植株。从IAA与6-BA间进行的9个正交试验中,选择出适宜脱分化培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.1 mg/L,对箭胡毛杨愈伤组织诱导率为90 %;种生长素与6-BA 配比的再分化培养基中,1/2 MS +IAA 0.1 mg/L+6-BA 0.1 mg/L对不定芽的分化诱导率可达到67.1 %;MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L的培养基可使单芽直接增殖出5.6个芽。在MS+IAA 0.8 mg/L的生根培养基上,试管苗的生根率可达82.6 %。     

川芎的组织培养技术研究

探索川芎的不同组培条件,优化其诱导和分化培养基。以川芎根、茎段和叶片作外植体进行组织培养,获得了大量的组培苗,建立了相应的植株再生系统。川芎根诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 1.2 mg/L;茎段及叶片诱导愈伤组织的最佳培养基均为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L;根愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.2 mg/L+IAA 0.3 mg/L;茎段及叶片愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+KT 2.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L。根外植体在愈伤组织、分化不定芽和生根方面的诱导率分别为84%、86%和87%;茎段和叶片愈伤组织的诱导率达到92%和96%,其不定芽分化率为98%,生根率为93%。经炼苗后,获得的组培苗的移栽成活率达98%。提出了优化激素搭配的培养基,得到了高效的诱导率、分化率和生根率。     

香叶天竺葵组培快繁体系的研究

以香叶天竺葵无菌苗叶片为外植体,MS为基本培养基进行组培快繁研究,结果表明:愈伤组织诱导最佳培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L;不定芽诱导最佳培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L;不定芽增殖最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;最佳生根培养基为MS+NAA 0.1 mg/L,生根率达100%,且根系长势良好.     

“全明星”草莓叶片诱导不定芽发生的研究

以"全明星"草莓脱病毒试管苗叶片为试验材料,诱导不定芽发生,为草莓再生体系建立及遗传转化奠定基础。在MS基本培养基中添加不同浓度的6-BA和IAA,调控叶片分化不定芽,筛选出适宜叶片分化不定芽的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+3%蔗糖+0.65%琼脂,不定芽分化率达53%。     

圣女樱桃番茄再生体系的研究

以圣女樱桃番茄为试材,通过对其子叶和下胚轴的离体培养,研究不同培养基和激素浓度及配比对愈伤组织诱导、不定芽分化及生根诱导的影响,以筛选最佳再生体系,并研究VC对番茄组培过程中褐化现象的影响。结果表明:诱导圣女樱桃番茄愈伤组织的最适培养基为MS+(0.2~0.4)mg/L IAA+2.0mg/L6-BA,不定芽分化的最适培养基为MS+0.1mg/L IAA+(1.0~3.0)mg/L 6-BA,诱导生根的最适培养基为1/2MS+0.1mg/L NAA;子叶为最佳外植体,其不定芽的分化速度、分化率及生长情况均优于下胚轴;在愈伤组织诱导培养基中添加10mg/L VC,能有效抑制褐化的发生。     

丽格海棠‘宣言’离体再生因素的优化

丽格海棠再生分化受到多种因子的影响,通过对丽格海棠离体再生影响因素的优化试验表明:以叶片为外植体,MS+6-BA2.0mg· L-1+NAA0.2 mg·L-1最利于海棠的不定芽诱导;不定芽增殖分化的培养基为MS+ 1/2MS(Trace element)+6-BA 1.5 mg·L-1+ NAA0.1 mg·L-1+ Sucrose 30 g·L-1;生根壮苗培养基为1/2MS +IAA0.1 mg· L-1.     

利用甘蓝游离小孢子不定芽叶片再生DH植株技术研究

【目的】探索一种能将有限的DH株快速扩繁的植株再生技术,扩大DH株数量以提高育种效率。【方法】以甘蓝小孢子胚状体不定芽叶片为试材,MS为基础培养基,分别添加不同质量浓度的6-BA(1.0,2.0,3.0,4.0 mg/L)和NAA(0.05,0.1,0.2,0.4 mg/L),筛选出最优质量浓度组合;在6-BA和NAA最优质量浓度组合上,继续添加不同质量浓度的GA-3(0.5,1.0,1.5,2.0 mg/L),比较筛选小孢子不定芽叶片的最佳再生方法。最后,在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L不定芽诱导培养基上,研究不同生长日龄DH株叶片的诱导效果。【结果】 在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L中,不定芽再生频率最高,为64.29%,分化系数4.03;添加6-BA、NAA和 GA-3 3种激素,对不定芽再生频率促进作用更大,其中MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA-3 1.5 mg/L诱导效率最高,不定芽再生频率达到了80.36%,分化系数为4.15。当DH株叶片生长日龄为25 d时,不定芽再生频率相对最大,达到68.76%,分化系数为3.62,35 d后诱导效果下降。【结论】 甘蓝DH株叶片诱导植株再生的适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L+GA-3 1.5 mg/L;以生长日龄为25 d左右的甘蓝DH株叶片作为外植体诱导植株再生效果较好。     

利用甘蓝游离小孢子不定芽叶片再生DH植株技术研究

【目的】探索一种能将有限的DH株快速扩繁的植株再生技术,扩大DH株数量以提高育种效率。【方法】以甘蓝小孢子胚状体不定芽叶片为试材,MS为基础培养基,分别添加不同质量浓度的6-BA(1.0,2.0,3.0,4.0mg/L)和NAA(0.05,0.1,0.2,0.4mg/L),筛选出最优质量浓度组合;在6-BA和NAA最优质量浓度组合上,继续添加不同质量浓度的GA3(0.5,1.0,1.5,2.0mg/L),比较筛选小孢子不定芽叶片的最佳再生方法。最后,在MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L不定芽诱导培养基上,研究不同生长日龄DH株叶片的诱导效果。【结果】在MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L中,不定芽再生频率最高,为64.29%,分化系数4.03;添加6-BA、NAA和GA33种激素,对不定芽再生频率促进作用更大,其中MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+GA31.5mg/L诱导效率最高,不定芽再生频率达到了80.36%,分化系数为4.15。当DH株叶片生长日龄为25d时,不定芽再生频率相对最大,达到68.76%,分化系数为3.62,35d后诱导效果下降。【结论】甘蓝DH株叶片诱导植株再生的适宜培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+GA31.5mg/L;以生长日龄为25d左右的甘蓝DH株叶片作为外植体诱导植株再生效果较好。     

东北点地梅下胚轴再生体系的建立

为保存野生资源和满足需要,以东北点地梅的下胚轴为材料,采用组织培养的方法进行了愈伤组织诱导与分化、不定芽生根、试管苗的生根、生根继代及移栽和定植的研究。结果表明,MS+ZT0.2 mg/L+6-BA0.1 mg/L+2,4-D2.1 mg/L是下胚轴愈伤组织诱导培养的理想培养基;MS+NAA0.1 mg/L+ZT0.6 mg/L是愈伤组织分化培养和不定芽分化继代增殖培养的理想培养基;用10 mg/L的IAA溶液对不定芽处理24 h,将不定芽接种到1/2 MS培养基上生根是不定芽生根培养的理想方法。在温室中试管苗移栽成活率为94.1%,定植成活率为98.5%,定植成活的试管苗保持了野生东北点地梅的生物性状。     

大丁草愈伤组织及试管苗培养的研究

[目的]研究大丁草愈伤组织及试管苗的培养条件。[方法]以大丁草花柄为外植体,采用组织培养方法,进行愈伤组织诱导和分化培养、不定芽的继代分化增殖培养以及试管苗生根培养、移栽和定植的研究。[结果]花柄愈伤组织诱导培养的理想培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.5 mg/L 2,4-D;愈伤组织分化培养和不定芽继代分化增殖培养的的理想培养基为MS+0.8 mg/L AgNO3+0.1 mg/LNAA+1.2 mg/L6-B;将继代分化增殖培养不定芽用浓度为1.2 mg/L IAA溶液处理24 h,再接种到1/2MS+0.1 mg/L NAA的培养基上进行生根培养的方法,是不定芽生根培养的理想方法;试管苗移栽成活率为92.8%,定植成活率为97.7%。[结论]定植成活的试管苗保持了野生大丁草的所有植物学特征,且生长旺盛,可用于进行培养繁殖。     

蛇床组织培养及无性系的建立

为保护野生资源,实现人工栽培,以蛇床嫩茎的鳞茎为材料,采用组织培养的方法,进行了愈伤组织诱导、不定芽分化、试管苗生根、移栽和定植的研究,建立起了蛇床无性系。结果表明,MS+6-BA0.2 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L是嫩茎愈伤组织诱导培养和继代培养的理想培养基;1/2 MS+AgNO31.2 mg/L+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA30.5 mg/L是愈伤组织分化培养和不定芽分化继代增殖培养的理想培养基;White+IBA 0.1 mg/L+IAA 0.2 mg/L是不定芽生根培养的理想培养基。其试管苗的繁殖速度可达每年50万株,定植的试管苗保持了野生蛇床的所有植物学性状。     

聚铃花的组织培养与无性系的建立

为获得大量种苗,满足观赏栽培的需求,采用组织培养建立无性系的方法对聚铃花进行了研究。结果表明:MS+0.6mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA是带叶茎段生长分化培养的理想培养基;White+1.5mg/L GA3+0.1mg/L IAA是分化不定芽生长培养的理想培养基;生长芽下部剪口在10mg/L NAA的无菌溶液中处理5min后,接种到1/3MS+0.1mg/L IAA+0.2mg/L NAA培养基上是聚铃花生长芽生根培养的理想方法;试管苗移栽定植易成活,定植的试管苗生长正常,观赏效果好。     

金边北海道黄杨再生体系的建立及其快繁初探

[目的]探索金边北海道黄杨再生体系建立的方法和条件。[方法]以MS为基本培养基,配置不同种类和不同浓度激素的培养基,对金边北海道黄杨幼嫩叶片和腋芽进行不定芽诱导培养、增殖培养和生根培养。[结果]MS可作为金边北海道黄杨再生体系的基本培养基。6-BA配合NAA有利于叶片、腋芽愈伤组织和不定芽的诱导,以MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L培养基效果最佳,腋芽诱导率高达66.67%。较高浓度的6-BA配合较低浓度的NAA有利于丛生芽的增殖,以MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L培养基增殖效果较理想,增殖率高达328.57%。MS+IAA0.5 mg/L+蔗糖3%或1/4MS+IAA0.5 mg/L+蔗糖2%可获得最佳生根效果。[结论]该体系的建立为金边北海道黄杨种苗快速繁殖提供参考依据。     

无籽西瓜的组织培养研究

为了研究无籽西瓜快速繁殖技术,以无籽西瓜试管苗的茎段为外植体,进行组织培养研究.结果表明,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.1 mg/L,愈伤组织正常且长势较好;以培养基MS +6-BA 2.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L不定芽分化现象出现最早;生根阶段以培养基1/2 MS+IAA 0.2 mg/L生根效果最好, 生根时间短且根系长而粗.该技术可用于无籽西瓜的快速繁殖.     

虎杖的组织培养及高效无性系的建立研究

研究了虎杖嫩茎愈伤组织诱导和分化、不定芽的分化和生根、试管苗移栽和扦插及田间栽培所需要的条件,并建立起虎杖嫩茎的高效无性系及快速繁殖技术。结果表明:MS+6-BA0.4 mg/L+NAA1.2 mg/L是诱导形成具有分化能力愈伤组织的理想培养基;MS+AgNO30.8 mg/L+6-BA0.3 mg/L+NAA0.1 mg/L是愈伤组织和不定芽分化的理想培养基;1/3MS+IAA0.4 mg/L+NAA0.1 mg/L是不定芽生根培养和试管苗生根继代培养的理想培养基;炉灰渣是试管苗移栽和扦插的理想基质。移植的试管苗具有长势粗壮旺盛、春天发芽早、秋天枯萎晚、根系发达的性状,其他各种性状保持不变。     

秦岭野生宜昌百合的组织培养研究

为了有效地保存、扩繁秦岭野生宜昌百合资源,以秦岭野生宜昌百合为材料,研究了鳞片和叶片不同部位,以及不同激素配比对不定芽诱导、增殖及生根的影响。结果表明,鳞片诱导不定芽的适宜培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,鳞片分化不定芽的能力为基部>中部>上部,三者之间差异极显著;叶片诱导不定芽的适宜培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+2.0 mg/L 2,4-D,叶片不定芽的诱导率为基部高,中部和尖部低,且基部与中部和尖部差异极显著;不定芽增殖的适宜培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA;适宜生根的培养基为1/2MS+0.4 mg/L NAA+1.0 g/L活性炭(AC)。以上结果表明,鳞片和叶片分化不定芽存在明显的位置效应,6-BA和NAA配合对不定芽增殖有良好的效果,NAA和AC配合适宜生根。     

湖北麦冬叶片快繁体系的建立

[目的]建立湖北麦冬叶片的快繁体系。[方法]以湖北麦冬幼嫩叶片为外殖体,以MS为基本培养基,向其中添加不同浓度的6-BA、NAA、GA后进行培养,探讨外源激素对其愈伤形成、不定芽分化、增殖与不定根形成的影响。[结果]采用MS+0.1～2.0 mg/L 6-BA+0.01～0.5 mg/L NAA培养基,愈伤诱导率在20%以上;采用MS+0.1～1.0 mg/L 6-BA+0.01～0.5 mg/LNAA+0.1～1.0 mg/L GA培养基,对芽的生长及增殖效果好,说明GA具有提高成苗率的作用;采用1/2MS+0.1～0.5 mg/L NAA或0.1 mg/L IBA或0.1～0.5mg/L IAA,20 d内生根率可达97%以上。在腐叶土∶珍珠岩=5∶3的基质中驯苗,成活率可达90%以上。[结论]优选出了湖北麦冬叶片的最佳快繁体系,为麦冬的开发利用提供了理论依据。