香莲芪中药制剂抗鸡体内大肠杆菌的试验研究

为观察香莲芪中药制剂抗鸡体内大肠杆菌的效果,将16日龄雏鸡用O2型大肠杆菌攻毒并开展预防和治疗试验。预防试验是用16日龄雏鸡O2型大肠杆菌攻毒同时口服香莲芪中药制剂0.5m L、1.0m L及2.0m L,1次/天,连用10d,测定发病率、死亡率和保护率;治疗试验是先用O2型大肠杆菌攻毒并建立疾病模型后口服上述药物,2次/天,连用10d;以乳酸环丙沙星作为阳性对照,测定治愈率、有效率和死亡率。预防试验结果表明,香莲芪中药制剂组试验动物死亡率均极显著低于感染对照组(P﹤0.01);中、高剂量组对试验动物的保护率超过86%;在18日龄时,给药组试验动物发病率均极显著低于感染对照组(P﹤0.01)。治疗试验结果表明:香莲芪中药制剂试验组感染雏鸡死亡率显著低于乳酸环丙沙星阳性对照组(P﹤0.05);中、高剂量组治愈率显著高于阳性对照组(P﹤0.05或P﹤0.01),高剂量组有效率显著高于阳性对照组(P﹤0.05)。由此表明,香莲芪中药制剂能够有效预防和治疗鸡大肠杆菌病。     

增免肽颗粒增强鸡新城疫疫苗免疫效果试验

首先取11日龄青脚黄羽肉鸡150只分为5组,每组30只,分别为给予1%、0.8%、0.6%、0.4%浓度的增免肽颗粒混饮4个给药组和1个空白对照组,经连续给药7d、观察14d的药物耐受性试验证实,增免肽颗粒以1%浓度下连续对雏鸡无不良反应和毒性作用,且0.4%以下浓度混饮有明显的促进生长作用。再取462只11日龄雏鸡,随机分为7组。空白对照组30只隔离饲养,不做任何处理。其余6组每组72只,设3个重复,每个重复24只;次日3个药物剂量组开始混饮高、中、低剂量的增免肽颗粒,药物对照组混饮盐酸左旋咪唑-黄芪多糖粉,连续5d,疫苗对照组和攻毒对照组不给药;14日龄各组用ND-La Sota苗滴鼻点眼免疫;26日龄重复以上给药,连续5d,28日龄重复免疫;40日龄重复以上给药,连续5d,42日龄除疫苗对照组外各组均用新城疫强毒攻毒。分别于21、28、35、42日龄每组随机抽取12只颈静脉采血,分离血清,用血凝抑制法测定新城疫抗体效价;于21、35、42日龄每组随机抽取6只,采血分离外周血淋巴细胞,用MTT法测定其增殖;于21和42日龄每组随机抽取6只称重、扑杀,测免疫器官指数;攻毒后每天观察14d内各组发病和死亡情况,计算发病率、死亡率和免疫保护率;于21、42、56日龄统计攻毒前后的平均日增重、耗料量和料重比。结果表明,增免肽颗粒显著提高血清抗体效价,促进外周血淋巴细胞增殖,提高免疫器官指数和攻毒保护率,并能提高增重和降低料重比。高、中剂量组效果较好,明显优于盐酸左旋咪唑-黄芪多糖,两组之间多无显著差异,建议中剂量(按0.2%混饮)为临床应用剂量。     

中药对人工感染IBDV鸡产生免疫抑制的调节作用

２２０只非免疫鸡随机分为Ａ,Ｂ,Ｃ,Ｄ,Ｅ５组,每组４４只。Ａ组给中药２次,Ｂ组５次,Ｃ、Ｄ、Ｅ组不给中药。于１４日龄对Ａ,Ｂ,Ｃ组人工感染传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）,于２１日龄对Ａ,Ｂ,Ｃ,Ｄ组接种新城疫（ＮＤ）Ⅱ系疫苗,于４６日龄每组随机抽取１５只鸡均攻ＮＤ强毒。结果表明：攻ＩＢＤＶ后一周,Ｃ组的死亡率显著高于Ａ组和Ｂ组（Ｐ〈０．０５）,新城疫Ⅱ系苗免疫后,Ｂ组鸡新城疫血凝抑制（ＨＩ）抗体效     

鸡新城疫-禽流感二联灭活疫苗免疫不同日龄商品肉鸡的效果比较

使用鸡新城疫-禽流感（H9N2 HP株）二联灭活疫苗分别免疫3、7、14日龄三组商品肉鸡各40羽,同时设一组空白对照组。各免疫组及对照组于3、7、14、21、28、35、42日龄采血检测新城疫、禽流感抗体,于21、28、35日龄进行禽流感病毒攻毒,对比不同日龄免疫组的抗体消涨情况及不同日龄禽流感攻毒结果。发现对照组随鸡日龄增加,新城疫与禽流感抗体逐渐下降,在42日龄时下降至0,而不同免疫组新城疫与禽流感抗体均先下降,21日龄左右开始上升,至35日龄新城疫与禽流感抗体升至6log2以上。3日龄免疫组的禽流感免疫保护效果最好,21、28、35日龄时禽流感强毒攻毒保护率均达100%;7日龄免疫组在21、35日龄时禽流感强毒攻毒保护率均达100%,28日龄时禽流感强毒攻毒保护率达70%;14日龄免疫组在28、35日龄时禽流感强毒攻毒保护率均达100%,21日龄时禽流感强毒攻毒保护率只达30%。试验表明,商品肉鸡选择3日龄免疫鸡新城疫-禽流感（H9N2 HP株）二联灭活疫苗时禽流感免疫保护效果最好,采用3日龄免疫程序可以提高新城疫与禽流感的免疫保护效果,减少养殖业的经济损失。     

川牌立复康片对鸡大肠杆菌的疗效研究

3组25日龄雏鸡人工感染鸡大肠杆菌病，攻毒后36h出现临床病理症状，用中药制剂川牌立复康片治疗，连用3d。同时选用恩诺沙星作药物治疗对照。实验结果表明，从攻毒开始到14d后实验结束，治疗组在死亡率为2.5%，对照药物治疗组的死亡率为7.5%。人工发病未治疗组临床症状，症理变化都较典型，死亡率为37.5%。健康对照组无死亡，中药制剂川牌立复康片和恩诺沙星组对鸡大肠杆菌病的治愈率分别是95%和86.5%，中医药费制剂川牌立复康片的治愈率显著高于恩诺沙星组。     

复方中药制剂防治鸡柔嫩艾美耳球虫病效果的研究

选用12日龄体重无显著差异的海兰蛋公雏50只,分成5组:空白对照组(不攻毒不给药)、阳性对照组(攻毒不给药)、0.5%中药组、1%中药组、莫能菌素组。以抗球虫指数作为判定标准,对自制的复方中药制剂治疗柔嫩艾美耳球虫感染鸡的效果进行评价。结果表明:0.5%中药组、1%中药组、莫能菌素组的抗球虫指数分别为154.6、170.2和174.2,该中药制剂具有抗球虫作用,1%剂量组的效果好于0.5%剂量组。     

牛蒡苷元对猪圆环病毒2型感染仔猪体内病毒复制及组织病理影响

为了评价中药活性成分牛蒡苷元(arctigenin,ACT)对猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)人工感染仔猪体内病毒的复制及组织病变的影响,选取16头30日龄健康断奶仔猪,随机分为空白对照组、攻毒对照组、给药组1(20μg·kg~(-1))和给药组2(50μg·kg~(-1))。两个给药组连续肌内注射给药3 d(空白和攻毒对照组注射生理盐水)后进行攻毒,在攻毒前2 d和攻毒后0、7、14、21 d分别采集仔猪外周血进行PCV2定量检测;攻毒后21 d将试验仔猪全部剖杀,采集腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、扁桃体、肺和脾组织进行PCV2定量检测和组织病理学观察。结果显示,两个给药组均能显著降低攻毒后7、14和21 d仔猪外周血病毒核酸拷贝数(P 0. 05或P 0. 01);攻毒后21 d,给药组1(20μg·kg~(-1))能显著抑制腹股沟淋巴结(P 0. 05)、肠系膜淋巴结(P 0. 05)组织中PCV2的增殖,给药组2(50μg·kg~(-1))能显著抑制腹股沟淋巴结(P 0. 001)、肠系膜淋巴结(P 0. 01)、扁桃体(P 0. 05)和肺(P 0. 05)组织中PCV2的增殖;并且两个剂量均能减轻PCV2感染造成的上述器官组织的病理损伤。ACT对PCV2在人工感染仔猪体内的增殖有明显的抑制效果,并能减轻由PCV2感染引起的病理变化。     

重组鸭β-防御素-2对多重耐药性大肠杆菌攻毒雏鸡的治疗效果研究

试验旨在研究重组鸭β-防御素-2(DAvBD2)对多重耐药性大肠杆菌攻毒雏鸡的治疗效果。经测定多重耐药性大肠杆菌对15日龄黄羽肉鸡的最小致死量为4×10~8cfu/m L。将100只15日龄黄羽肉鸡随机分为5组,每组20只。A组作为健康对照组,不攻毒,也不用给药;B组作为攻毒对照组,多重耐药性大肠杆菌攻毒,但不给药;C、D、E三组为治疗组,多重耐药性大肠杆菌攻毒2 h后,分别肌内注射200、250、300μg的重组DAvBD2,连用3 d。结果显示:最小致死量多重耐药性大肠杆菌攻毒后,B组死亡率是100%;C组死亡率70%、存活率30%、治愈率为20%;D组死亡率10%、存活率90%、治愈率70%;E组死亡率为0、存活率100%、治愈率80%。电镜观察发现,多重耐药性大肠杆菌经重组DAvBD2作用后,大肠杆菌细胞外膜外翻、凹凸不平、起泡,甚至出现孔洞,导致菌体内容物外泄。表明重组DAvBD2对感染多重耐药性大肠杆菌的雏鸡有较好的治疗效果,在临床治疗有很好的应用价值。     

复方金银花对鸡体内NDV分布的影响

选用1日龄雏鸡,无污染环境饲养21 d后,随机分成感染组、中药治疗组、空白组。中药治疗组饮水给予复方金银花制剂。以单克隆抗体介导的免疫组化（IHC）法检测攻毒鸡体内NDV抗原的分布及定位,以确定复方金银花对新城疫病毒感染鸡的组织嗜性的影响。结果显示,感染组和中药治疗组鸡的16个组织器官中均能检测到NDV抗原,病毒以气管、肺脏、十二指肠、空肠等器官中分布为最高。复方金银花对新城疫的组织损伤有一定的保护作用,可缩短组织修复的时间。     

四种清热方剂对人工诱发鸡大肠杆菌腹泻的药效研究

为观察4种清热方剂对人工诱发鸡大肠杆菌腹泻的治疗效果,试验将360只21日龄健康青脚麻肉用仔鸡随机分为6组,每组设3个重复,每个重复20只。Ⅰ组为空白对照组,常规饲养,不攻毒不给药;Ⅱ组为阴性对照组,只攻毒不给药;Ⅲ～Ⅵ组分别在基础日粮中添加4种清热方剂,平均每只鸡每天投药1.5 g,连续用药5 d,停药后观察5 d,分别统计治愈率和保护率。结果表明:4种清热方剂对鸡大肠杆菌腹泻都有一定的治疗作用,其中白头翁汤和黄连解毒汤有较好的治疗效果,有效率在85.00%以上。     

Evaluation of a modified-live virus vaccine administered in ovo to protect chickens against Newcastle disease.

The B1 strain of Newcastle disease virus (NDV-B1), which is nonpathogenic for newly hatched chickens, killed embryos when it was used to inoculate chicken eggs at embryonation day 18. Treatment of NDV-B1 with an alkylating agent, ethylmethane sulfonate (EMS) markedly reduced the pathogenicity of the virus for 18-day-old chicken embryos. Eggs inoculated with the modified virus (NDV-B1-EMS) hatched, and the virus was isolated from lungs and spleen of 1-day-old chickens. The hatched chickens developed antibody to NDV and were protected against challenge exposure (at 4 weeks of age) with a highly virulent GB-Texas strain of NDV. Presence of maternal antibody to NDV in embryonating eggs did not influence the protective ability of NDV-B1-EMS, which also induced protective immunity when administered to 4-week-old chickens. The 50% protective dose of NDV-B1-EMS in maternal antibody-negative and -positive embryos was calculated to be 10.77 and 17.70 embryo 50% lethal doses, respectively. Results of the study indicated that NDV-B1-EMS may be used as an embryo vaccine to protect chickens against Newcastle disease.     

米糠凝集素的提取及其对新城疫病毒血凝效价的影响

用萃取、浸泡等方法,提取米糠凝集素,分别测定了对鸡红细胞的凝集作用及对新城疫病毒血凝效价的影响。结果显示,无论萃取法,还是浸泡法提取的植物凝集素,其血凝集价没有差异,均为25;在体外提高新城疫血凝效价2滴度,并能在一定程度上抑制Lasota病毒在鸡胚繁殖。这提示米糠凝集素对鸡新城疫苗血凝效价和繁殖有影响。     

鹅源新城疫病毒云南流行株免疫交叉保护试验

用分离的鹅新城疫病毒KM2007株尿囊液制成油乳剂灭活苗,和NDV油乳剂灭活苗分别接种10日龄未免疫雏鸡和未免疫雏鹅,并设非免疫对照组。免疫后21 d,试验组和对照组每只鸡和鹅分别注射0.1 mL鹅新城疫病毒KM2007株尿囊液10-1稀释液,结果对照组鹅和鸡分别出现典型的鹅新城疫和鸡新城疫的症状和病理变化,而试验组鹅和鸡全部健活。结果表明,鹅新城疫病毒KM2007株油乳剂灭活苗及NDV油乳剂灭活苗均可保护鹅和鸡免受鹅新城疫病毒野毒的攻击。     

鸭源新城疫病毒的分离鉴定

从病死肉鸭肝脏中分离到2株病毒(ZH1、ZH2),均能够凝集鸡、肉鸭、绵羊、山羊、猪、人、兔、牛等的红细胞,且这种血凝性可被NDV标准阳性血清所抑制.参照NDV毒力判定标准及其方法对分离毒株ZH1、ZH2进行了鸡胚最小致死量平均死亡时间(MDT)、鸡胚半数感染量(EID50)以及1日龄鸡脑内接种致病指数(ICPI)测定,结果ZH1、ZH2株的MDT为52 h和44 h,EID50为106.4/0.1mL和108.64/0.1mL,ICPI为1.93和1.975.表明这2株分离病毒均为NDV强毒株.     

Pathogenicity and immunogenicity of different recombinant Newcastle disease virus clone 30 variants after in ovo vaccination

Even though Newcastle disease virus (NDV) live vaccine strains can be applied to 1-day-old chickens, they are pathogenic to chicken embryos when given in ovo 3 days before hatch. Based on the reverse genetics system, we modified recombinant NDV (rNDV) established from lentogenic vaccine strain Clone 30 by introducing specific mutations within the fusion (F) and hemagglutinin-neuraminidase (HN) proteins, which have recently been suggested as being responsible for attenuation of selected vaccine variants (Mast et al. Vaccine 24:1756-1765, 2006) resulting in rNDV49. Another recombinant (rNDVGu) was generated to correct sequence differences between rNDV and vaccine strain NDV Clone 30. Recombinant viruses rNDV, rNDV49, and rNDVGu have reduced virulence compared with NDV Clone 30, represented by lower intracerebral pathogenicity indices and elevated mean death time. After in ovo inoculation, hatchability was comparable for all infected groups. However, only one chicken from the NDV Clone 30 group survived a 21-day observation period; whereas, the survival rate of hatched chicks from groups receiving recombinant NDV was between 40% and 80%, with rNDVGu being the most pathogenic virus. Furthermore, recombinant viruses induced protection against challenge infection with virulent NDV 21 days post hatch. Differences in antibody response of recombinant viruses indicate that immunogenicity is correlated to virulence. In summary, our data show that point mutations can reduce virulence of NDV. However, alteration of specific amino acids in F and HN proteins of rNDV did not lead to further attenuation as indicated by their pathogenicity for chicken after in ovo inoculation.     

鸽禽Ⅰ型副粘病毒油佐剂灭活苗对雏鸡免疫效果评价

用鸽Ａ／ＰＭＶ－１油佐剂灭活苗与ＮＤＶ油佐剂灭活苗分别免疫雏鸡,免疫后２１ｄ抗体水平达到峰值,免疫后４２ｄ用新城疫强毒对两种疫苗免疫鸡分别进行攻击,鸽Ａ／ＰＭＶ－１油佐剂灭活苗免疫组保护率为７３．３３％,ＮＤＶ油佐剂灭活苗免疫组保护率为９９．６７％。     

人参皂苷体外抗鸡新城疫病毒的效果观察

采用细胞培养法,在药物安全浓度范围内,测定人参皂苷对新城疫病毒(NDV)感染鸡胚成纤维细胞的保护效果,旨在观察人参皂苷抗NDV的效果,以筛选出作用较好的抗病毒中药,为研制新型抗病毒药物提供理论依据.     

表达新城疫HN和F基因重组禽痘病毒的免疫效力测定

将8日龄SPF鸡随机分组.分别接种rFPVHN、rFPVF、rFPVNHF重组禽痘病毒,接种量为每只鸡105PFU,另一组群用La Sota活苗经点眼、滴鼻接种10<'6>EID<,50>.于免疫后6d、12d和18d测定HI和微量中和抗体.结果发现,3种重组病毒均能刺激鸡群产生抗新城疫病毒特异抗体,但抗体产生时间比La Sota活苗缓慢,且抗体滴度亦低.然而共表达HN和F的rFPVNHF免疫鸡群的中和抗体水平明显比rFPVHN和rFPVF组群高.表明rFPVNHF的保护性免疫更优于HN或F单基因重组禽痘病毒.