红茂草生物碱提取方法及指纹检测技术建立的研究

红茂草[Dicranostigma leptopodum（Maxim．）Fedde]又名秃疮花、秃子花、勒马回，系罂粟科红茂草属植物。主要分布在甘肃、陕西、河南和山西等省（区）低山平川地带。红茂草中含有异紫堇碱（laooorvdine）、原阿片碱（Protopine）、紫堇碱（Corvdine）、异紫堇啡碱及木兰碱（Magnoflorine）等生物碱，其中异紫堇碱具有明显的镇痛、镇静、解除平滑肌痉挛等作用，已经制定了中药材地方标准。     

红茂草总生物碱酸水提取工艺试验

利用生物碱盐酸盐易溶于水这一特性,用稀盐酸溶液进行红茂草总生物碱的提取试验。先分别进行提取时间、料液比、pH值和温度对红茂草总生物碱提取率影响的单因素试验,在此基础上再从每个单因素中选出3个较好水平进行正交试验,从而得出酸水提取红茂草总生物碱的最佳条件。按照正交试验所确定的最佳提取条件进行总生物碱的提取。以红茂草中主要生物碱异紫堇碱为指标,对提取物进行HPLC检测。结果表明,在温度90℃,提取时间5 h,料液比1∶40,pH值1.5为提取红茂草总生物碱的最佳条件。HPLC检测结果显示,提取物中异紫堇碱含量为9.28%。分别占分离菌株的25.6%、27.9%。本试验为该区猪源肺炎克雷伯杆菌的防治提供理论基础。     

红茂草异紫堇碱对小鼠实验性肝脏损伤的保护作用

研究红茂草异紫堇碱对小鼠实验性肝损伤的保护作用。给予小鼠不同剂量的红茂草异紫堇碱灌胃10 h,后腹腔注射四氯化碳(CCl4)诱导小鼠急性肝损伤病理模型,16 h后测定小鼠肝指数、小鼠血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、肝脏中丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(T-SOD)的变化。采用环磷酰胺诱导小鼠免疫性肝损伤病理模型,用不同浓度的异紫堇碱灌服10 h,测定小鼠肝指数、血清中IL-1β、IL-2、INF-γ和TNF-α含量变化,同时进行肝脏组织结构和病理变化观察。结果发现,与模型组相比,不同剂量的异紫堇碱给药组血清中AST、ALT活性显著降低(P0.01),肝组织匀浆MDA含量显著减少(P0.01);抗氧化酶T-SOD活性显著升高(P0.01);血清中IL-2和INF-γ含量显著升高(P0.01),病理切片显示红茂草异紫堇碱作用后肝组织损伤有不同程度地减轻,高剂量的异紫堇碱(330.96 mg/kg)对肝组织的保护程度最为明显。说明红茂草异紫堇碱对实验性肝损伤具有很好的保护作用,其机制与DLF调节细胞因子水平,抑制抗氧化酶活性,清除自由基,抑制脂质过氧化相关。     

红茂草生物碱正交提取工艺模式优化及清除自由基作用的研究

为研究红茂草(Dicranostigma leptodum(Maxim.)Fedde)生物碱的正交提取工艺条件及其清除自由基作用。采用单因素水平测定,从10种相关因素中筛选出乙醇体积分数、超声波作用时间、液料比、回流时间、浸提液pH值、浸泡时间共6种主要影响因素,按照L25(56)正交表进行正交试验,用SPSS 17.0软件进行统计分析,优选出最佳正交提取工艺模式;将正交提取浓缩液进行HPLC检测,并测定其对羟自由基(·OH)和氧自由基(O₂^·-)的清除作用。结果表明:红茂草生物碱最佳提取工艺条件为乙醇体积分数65%、超声波作用时间20min、液料比15:1、回流时间2.5h、浸提液pH=8、浸泡时间4h;在最佳提取工艺条件下红茂草提取液中生物碱的含量为9.2794%;红茂草生物碱在25.0和1.8mg·mL^-1时,对·OHH和O₂^·-清除效果显著,其清除率为58.70%和49.26%,IC₅₀为23.50和1.75mg·mL^-1。该工艺方法简便、可靠、提取率高,提取液清除自由基作用显著。     

红茂草总生物碱酸水提取法研究

用酸水提取法提取红茂草总生物碱。先分别进行提取时间、料液比、pH值和温度对红茂草总生物碱提取率影响的单因素实验,在此基础上从每个单因素中选出3个较好水平进行正交试验,从而得出酸水提取红茂草总生物碱的最佳条件。结果表明,温度80℃、提取时间4 h、料液比1∶50、pH值1.5为提取红茂草总生物碱的最佳条件。     

红茂草总生物碱醇提取法与酸水提取法比较研究

试验利用乙醇溶液和稀盐酸溶液分别进行红茂草总生物碱的提取.重量法计算总生物碱的提取率(得率),并对试验结果进行t检验.结果表明,乙醇提取法提取红茂草总生物碱得率极显著高于酸水提取法(P＜0.01).     

红茂草生物碱TLC检测技术的建立及抑菌活性研究

利用醇提法提取红茂草中生物碱,并对其进行TLC检测,建立红茂草生物碱TLC检测技术;用红茂草浓缩液对3种供试菌进行体外抑菌活性研究,测定其最小抑菌浓度（MIC）。结果以95%乙醇：冰乙酸：水：浓氨水（15：0.5：2.5：0.5）为展开系统,分离效果最好,斑点清晰;对供试菌MIC测定结果分别为：大肠埃希氏杆菌0.18mg/mL、金黄色葡萄球菌0.14mg/mL、粪肠球菌0.26mg/mL。红茂草具有明显的抑菌作用。TLC检测技术可作为红茂草提取物中生物碱质量控制方法,且该法重现性好、准确度高。     

红茂草中黄酮类提取工艺优化及体外抑菌研究

以红茂草为研究对象,在单因素水平筛选测定的基础上,通过响应面法优化其提取工艺。提取物采用Diamonsil C18(4.6mm×150mm,1.8μm)色谱柱为固定相,甲醇-0.2%磷酸(65∶35,v/v)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长280nm;并对提取物进行抑菌活性测定,以大肠埃希氏杆菌和金黄色葡萄球菌为供试菌,进行体外抑菌活性研究和透射电镜观察。结果显示,红茂草中黄酮类化合物最佳提取工艺条件为:液料比15mL/g、超声时间35min、回流时间2.5h、乙醇体积分数65%,在此工艺下红茂草中黄酮类化合物含量为2.60%,HPLC检测重现性好;其提取物对大肠埃希氏杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC为0.28g/mL和0.20g/mL,MBC为0.26g/mL和0.10g/mL,IC50为0.2162g/mL和0.1805g/mL,在透射电镜下观察抑菌效果显著。研究表明,响应面法对红茂草中黄酮类化合物提取工艺的优化比较合理。     

正交试验法优选红金银花中绿原酸提取工艺的研究

为优化红金银花中绿原酸的提取工艺,本研究采用正交试验法设计对红金银花中绿原酸的提取工艺进行优化,考察了不同的提取工艺对金银花中绿原酸提取率的影响。结果显示,正交试验优选出红金银花中绿原酸的提取工艺的最佳条件,即提取时乙醇的用量为药材的10倍,乙醇浓度为75%,提取次数为2次,提取时间为2h。表明研究试验结果可靠,以优化的工艺所得金银花中绿原酸提取率高,有利于大生产。     

凯氏定氮法测定红茂草提取物中的氮含量

试验采用四种不同方法（Ⅰ-乙醇处理,Ⅱ-酸水处理,Ⅲ-样品再用三氯乙酸处理、Ⅳ-酸水乙醇处理,）提取并处理红茂草,再用凯氏定氮法测定其氮含量,并进行了数据分析。结果表明,Ⅱ样品的氮含量显著高于Ⅰ样品的氮含量（P〈0.05）,而其它三者之间差异不显著（P〈0.05）。所提取的红茂草中的蛋白氮含量较低,为0.2281%。     

正交设计优化常山碱的醇提工艺

目的:优化常山碱的乙醇回流提取工艺。方法:采用紫外-可见分光光度计测定常山碱含量,以浸膏得率和常山碱含量作为评价指标,应用正交设计法优化提取工艺参数。结果:常山碱乙醇回流提取最佳工艺:70%乙醇、提取时间1.5 h、溶媒用量7.5倍,提取2次,在此条件下,浸膏得率为10.43%,浸膏中常山碱含量为4.26%。方差分析表明,对常山碱提取率影响因素的大小顺序:提取次数溶媒用量提取时间乙醇浓度。工艺验证试验表明,3批常山的平均浸膏得率和平均常山碱含量分别为11.27%和4.11%。结论:常山碱采用乙醇回流提取工艺切实可行,具有省时、操作简便和提取率高等优点。     

酸性染料比色法测定红茂草中总生物碱含量

采用酸性染料比色法测定红茂草中总生物碱含量。以异紫定堇碱为标准品,酸性染料比色法的显色条件为：pH值4.0、波长415 nm、溴甲酚绿1.5 mL,得到标准曲线：y=0.032 x-0.033,R2=0.977 0,生物碱检测浓度在21.6-54.0 mg/mL范围内与吸收度线性关系良好,红茂草中总生物碱含量为1.386%。该方法灵敏度高、准确度好、重现性好。     

野生药用红茂草挥发油提取及抗氧化活性研究

采用CO₂超临界法萃取红茂草中挥发油,对其进行GC-MS分析,以提取的挥发油为研究对象,确定红茂草挥发油的抗氧化能力大小。研究表明,红茂草挥发油成分复杂,存在一定的抗氧化能力。     

红茂草中精油成分分析及抑菌活性的研究

为红茂草药物的进一步开发和利用,本试验以甘肃平凉地区野生药用植物红茂草为研究对象,采用水蒸气提取、蒸馏萃取(SDE)提取、超临界CO_2萃取等3种方法,分别提取红茂草中的精油成分;以GC-MS对其精油进行化学成分分析,并将超临界CO_2萃取的红茂草精油采用平板菌落计数法对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌进行抑菌活性测定。结果显示,三种提取方法中,水蒸气提取法和蒸馏萃取提取法所得精油为橙黄色,有浑浊,超临界CO_2萃取法所得精油为淡黄色,澄清液体。3种方法所得精油均含有24种共同成分,以超临界CO_2萃取法最优,其提取率为2.1220%,水蒸气提取法最低,提取率为1.7870%;将超临界CO_2萃取的红茂草精油作用于3种供试菌,测定其最小抑菌浓度(MIC)分别为:金黄色葡萄球菌0.2500 g/mL、大肠杆菌0.3000 g/mL,绿脓杆菌0.2600 g/mL,抑菌效果显著。研究结果表明,超临界CO_2萃取是提取红茂草精油的最佳方法,通过超临界CO_2萃取法提取的红茂草精油对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌具有良好的抑菌效果。     

红茂草中精油成分分析及抑菌活性的研究

为红茂草药物的进一步开发和利用,本试验以甘肃平凉地区野生药用植物红茂草为研究对象,采用水蒸气提取、蒸馏萃取（SDE）提取、超临界CO₂萃取等3种方法,分别提取红茂草中的精油成分;以GC-MS对其精油进行化学成分分析,并将超临界CO₂萃取的红茂草精油采用平板菌落计数法对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌进行抑菌活性测定。结果显示,三种提取方法中,水蒸气提取法和蒸馏萃取提取法所得精油为橙黄色,有浑浊,超临界CO₂萃取法所得精油为淡黄色,澄清液体。3种方法所得精油均含有24种共同成分,以超临界CO₂萃取法最优,其提取率为2.1220%,水蒸气提取法最低,提取率为1.7870%;将超临界CO₂萃取的红茂草精油作用于3种供试菌,测定其最小抑菌浓度（MIC）分别为：金黄色葡萄球菌0.2500 g/mL、大肠杆菌0.3000 g/mL,绿脓杆菌0.2600 g/mL,抑菌效果显著。研究结果表明,超临界CO₂萃取是提取红茂草精油的最佳方法,通过超临界CO₂萃取法提取的红茂草精油对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌具有良好的抑菌效果。     

佛耳草总黄酮的提取工艺优化与含量测定方法研究

为研究佛耳草总黄酮的提取工艺,以浸膏收率和总黄酮的含量为指标,采用正交试验法,考察乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数4个因素对提取效果的影响。结果:建立了佛耳草药材及其提取物中总黄酮的紫外-可见分光光度法,优化佛耳草最佳提取工艺为采用20倍量60%的乙醇提取2次,每次2 h。试验表明,本研究建立的分析方法精密度、准确度较高,重现性较好。优化的提取工艺经济、方便、可行。     

正交试验法优化盐地碱蓬中黄酮的超声提取工艺

为了研究盐地碱蓬中提取黄酮的最佳工艺条件,试验采用乙醇溶液作为浸提介质,结合超声波辅助方法,在单因素试验的基础上,通过正交试验设计考察了黄酮提取过程中的料液比、超声功率、乙醇浓度、提取温度对提取效果的影响。结果表明:超声强化提取盐地碱蓬黄酮最佳提取工艺条件为料液比1∶25,超声功率320 W,提取温度70℃,乙醇浓度55%。采用最佳提取的工艺条件,盐地碱蓬黄酮的提取率可达4.25%。说明优选的提取工艺稳定可行,可在大生产应用中推广。     

岷山红三叶总异黄酮提取工艺的研究

通过正交试验,对影响岷山红三叶异黄酮提取工艺中乙醇浓度、温度、料液比、提取时间等因素进行探讨.试验结果表明,影响提取效果因素的主次顺序为温度＞提取时间＞乙醇浓度＞料液比.最佳提取工艺参数为乙醇浓度80%,温度70 ℃,料液比115,提取时间4 h.     

内部沸腾法提取博落回生物碱的工艺研究

为了得到内部沸腾法提取博落回生物碱的最佳提取工艺,试验逐一考察硫酸浓度、浸泡的乙醇浓度、提取温度、料液比等因素对提取效果的影响,并采用高效液相色谱(HPLC)法测定了提取得到的博落回总碱中血根碱和白屈菜红碱含量。结果表明:当硫酸浓度为0. 10 mol/L、浸泡乙醇浓度为50%、提取温度为90℃、料液比为1∶20时,提取一次的提取率为13%,HPLC检测到的血根碱含量为6. 6%,白屈菜红碱含量为3. 1%,提取效率明显提高。     

白眉草总黄酮超声辅助提取工艺优化及抗菌活性研究

本文以白眉草为试验材料,采用超声辅助法优化白眉草总黄酮提取工艺,并研究其抗菌活性.采用单因素结合正交设计试验,考察了乙醇浓度、料液比、超声温度和超声时间对总黄酮得率的影响.结果 表明:白眉草总黄酮最佳提取工艺条件为:乙醇浓度70％,料液比1:20,超声温度60C,超声时间45 min.在最佳工艺下白眉草总黄酮得率为3....