转基因马铃薯内源农杆菌脱除

[目的]解决采用抗生素抑菌导致转基因马铃薯植株生长与分化受到抑制的问题。[方法]利用转基因植株诱导试管微型薯,由试管微型薯抽枝获得转基因脱菌植株。[结果]参试3个马铃薯品种中,SI、sⅡ最佳试管微型薯诱导培养基为MS＋6-BA0．5ms／L＋GA,0．1mg／L＋cef 150me／L,NT最佳试管微型薯诱导培养基为MS＋ZT0．5mg／L＋GA,0．1mg／L＋cef150mg／L;薯块抽枝最佳培养基为Ms＋ZT0．5mg／L＋NAA0．1mg／L;薯块直径O．5～0．7cm抽枝数最高;转基因脱菌植株在无抗生素快繁培养基中经30d培养污染率为0,脱菌植株茎段粗壮,无分枝现象。[结论]建立的方法脱茵简单易行,为转基因个体的筛选和生长排除了障碍。     

马铃薯根组织培养与植株再生

利用马铃薯温室生长幼芽和组培根组织进行了以MS为培养基、附加不同种类和浓度生长素和细胞分裂素组成的8种培养基,在散光和黑暗条件下培养诱导愈伤组织,在3种分化培养基上培养分化再生植株的试验。结果表明,青薯5号和青薯8号温室生长幼芽根组织接种MS＋2,4-D 2mg/L＋BAP 3mg/L＋NAA 0.5mg/L＋蔗糖30g/L＋琼脂7g/L培养基上散光条件下培养45-90d产生愈伤组织,诱导率为0.024%;青薯5号愈伤组织接种1/2MS＋2,4-D 0.5mg/L＋BAP 2mg/L＋KT 2mg/L＋GA30.5mg/L＋ZT0.2mg/L＋蔗糖20g/L＋琼脂7g/L培养基上培养80d分化出再生植株,分化率为6.25%,再生植株切成一叶茎段接种于MS＋BAP 0.1mg/L＋IAA 10mg/L＋GA30.1mg/L＋白糖30g/L＋琼脂6g/L培养基上培养3周长成株高8-10 cm、叶7-10片、叶色深绿和根系发达的小植株。     

马铃薯品种茎段愈伤组织诱导和植株再生的研究

以2个马铃薯品种夏坡蒂和费乌瑞它茎段为外植体,研究了不同植物激素对马铃薯愈伤组织诱导及其不定芽分化的影响.结果表明,夏坡蒂和费乌瑞它的茎段最佳愈伤诱导组织培养基分别为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+GA30.5mg/L和MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+GA30.5mg/L,愈伤率均可达到100%;夏坡蒂和费乌瑞它的不定芽最佳诱导培养基分别为MS+ZT 2.0 mg/L+NAA0.1mg/L+GA3 5mg/L和MS+6-BA 2.0mg/L+ZT 2.0mg/L+GA3 5mg/L,诱导率分别为52.38%和53.6%.结果为进一步转基因工作中高效植株的再生奠定了一定的基础.     

马铃薯脱病毒与快繁技术研究

[目的]获得马铃薯脱毒试管苗及使长期保存导致生长势退化的试管苗复壮。[方法]设置不同的灭菌方法和不同的培养基进行马铃薯茎尖脱病毒及脱毒苗的快繁技术研究。[结果]芽外植体灭菌效果以质量分数5%的NaClO灭菌时间2 min与0.1%的HgCl2灭菌时间3 min组合效果最佳;茎尖诱导的最佳培养基为MS+GA30.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L,平均诱导率为58.25%;从MS液体和MS固体2种不同的培养基来看,MS液体培养基可以起到壮苗的作用;从扦插和平铺2种不同接种方式来看,平铺的接种方式可以加快脱毒苗繁殖速度。[结论]为马铃薯的组织培养快繁提供了参考依据。     

激动素对马铃薯试管薯大小的影响

[目的]研究不同浓度激动素(KT)对马铃薯试管薯大小的影响,以期获得较大的试管薯。[方法]利用"诺兰"马铃薯脱毒植株,确定形成较大试管薯的最佳KT浓度、光照时间及茎段部位。[结果]KT可诱导较大的试管薯,在全黑暗、含3 mg/L KT的MS培养基条件下,来自植株茎顶端基础苗所诱导的试管薯平均单薯重最大,为326.5 mg,且植株下部茎段的基础苗也可形成较大的试管薯,平均单薯重为237.8 mg。[结论]该研究可为"诺兰"马铃薯品种试管薯贮藏研究提供理论数据。     

玉米自交系幼胚再生体系建立的研究

[目的]探索出玉米高频诱导具有胚性的愈伤组织和植株再生的条件。[方法]以玉米自交系幼胚为外植体,研究了不同2,4-D浓度对愈伤组织诱导、6-BA浓度对试管苗分化以及IBA浓度对试管苗生根的影响。[结果]2,4-D对玉米胚性率诱导有明显影响,其最佳诱导培养基为N6＋2,4-D 2 mg/L＋水解酪蛋白（CH）500 mg/L＋脯氨酸（pro）500 mg/L＋AgNO310 mg/L;试管苗分化适宜的培养基是N6＋6-BA 0.5 mg/L＋水解酪蛋白500 mg/L;试管苗生根的最佳培养基为1/2 MS＋IBA 0.5 mg/L。[结论]该研究可为玉米抗病基因的遗传转化和优良抗病玉米品种的培育奠定基础。     

不同外源激素对马铃薯脱毒试管苗保存及试管薯诱导的影响

以马铃薯主栽品种陇薯3号脱毒苗为试验材料,研究了不同外源激素组合对试管苗保存和试管薯形成的影响,研究表明,在MS+3%蔗糖(pH5.8)固体培养基中添加PP3330.5 mg/L和GA30.1 mg/L对试管苗的保存效果最为理想,以MS+8%蔗糖(p H5.8)为诱导液体培养基,在黑暗条件下添加NAA3.0 mg/L和6-BA 5.0mg/L后,试管薯的结薯数、鲜薯重量和大薯率最为显著。     

马铃薯优良品种大西洋、云薯201茎尖诱导技术

[目的]掌握马铃薯优良品种大西洋、云薯201茎尖诱导技术,为马铃薯工厂化脱毒快繁提供技术参考.[方法]以马铃薯优良品种大西洋、云薯201的茎尖作为试验材料,从外植体的消毒灭菌、不同基本培养基、植物激素种类及浓度配比探讨对马铃薯茎尖诱导效果的影响.[结果]在两因素和3因素灭菌剂组合中,以75%酒精30 s+10%NaClO5 min+0.1%HgCl25 min为外植体芽灭菌最佳组合;MS基本培养基比其他基本培养基更利于茎芽的诱导;在茎芽诱导培养基中添加0.02 mg/L GA3可以提高芽的诱导率,以6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L+GA30.02 mg/L激素组合处理的效果最好.[结论]建立了适合马铃薯品种大西洋和云薯201茎尖诱导的体系,为其工厂化育苗奠定基础.     

马铃薯品种"大西洋"高效再生体系的建立

以马铃薯品种“大西洋”为试材,进行了叶片和茎段的离体再生研究。结果表明,叶片与茎段愈伤组织最佳诱导培养基分别为MS＋6BA2.5 mg/L＋NAA0.3 mg/L和MS＋6BA2.5 mg/L＋NAA0.2 mg/L,诱导率均达100%。叶片与茎段愈伤诱导不定芽分化的最佳培养基分别MS＋6 BA3.0 mg/L＋NAA0.1 mg/L＋GA35.0 mg/L和MS＋6 BA2.0 mg/L＋NAA0.05 mg/L＋GA35.0 mg/L,不定芽分化率分别达100%和80%。诱导试管苗生根的最佳培养基为1/2 MS＋0.2 mg/LNAA,生根率为100%,试管苗移栽成活率为91%。     

菊花脑离体培养再生植株研究

[目的]研究菊花脑离体培养再生植株技术。[方法]以菊花脑叶片、叶柄、茎段为外植体,以MS为基本培养基,研究了不同激素组合对其不定芽诱导率的影响。[结果]叶片外植体诱导率最高,叶柄次之,茎段最低。菊花脑叶片生芽的最佳培养基是MS＋1.0mg/L6-BA＋0.5mg/LNAA;叶柄生芽的最佳培养基为MS＋0.5mg/L6-BA＋0.5mg/LNAA;茎段生芽的最佳培养基是MS＋1.0mg/L6-BA＋0.5mg/LNAA。[结论]建立了菊花脑叶片、叶柄、茎段直接诱导不定芽的组织培养技术。     

黑色马铃薯的组织培养及快繁技术研究

[目的]研究黑色马铃薯的组织培养及快繁技术。[方法]以黑金刚马铃薯的块茎为外植体,于附加不同激素配的MS培养基中诱导愈伤组织、不定芽和不定根,探讨增殖培养和植株再生的条件。[结果]适宜块茎外植体愈伤组织诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L GA,诱导率可达95%以上;适宜丛生芽诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率达92%以上;1/2MS培养基易于诱导生根,部分外植体可产生紫黑色小块茎,生根率达100%。[结论]该研究可为人工规模化生产黑色马铃薯种苗提供技术资料。     

野生贵州地宝兰无菌播种及根状茎繁育技术研究

[目的]研究以贵州地宝兰种子为外植体进行无菌播种快繁技术体系,筛选出各个阶段较优的培养基,以提高繁育系数。[方法]以贵州地宝兰种子为外植体,通过无菌播种获得大量根状茎,经过根状茎增殖培养、诱导芽分化、生根壮苗培养等不同培养基试验,分别筛选出贵州地宝兰最适合各阶段成长的培养基。[结果]适宜贵州地宝兰种子萌发的培养基为:1.0 g/L Hyponex1+1.0 g/L Hyponex2+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L ZT+100.0 mg/L CM+20.0 g/L蔗糖+1.0 g/L AC。适宜原球茎的增殖培养基为:B5+0.5 mg/L NAA+100.0 g/L马铃薯+30.0 g/L蔗糖。适宜诱导根状茎分化培养基为:B5+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+100.0 g/L香蕉汁+25.0 g/L蔗糖+1.0 g/L AC。适宜生根壮苗培养基为:B5+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA+100.0 g/L香蕉汁+25.0 g/L蔗糖+1.5 g/L AC,pH 5.4~5.8。[结论]该研究为珍稀濒危贵州地宝兰野生种群恢复种植试验提供了重要的种苗资源,也为今后该快速繁育技术提供了参考数据。     

甜叶菊组培快繁技术研究

[目的]研究甜叶菊的组培快繁技术。[方法]以甜叶菊茎段为外植体,筛选其最佳外植体消毒条件、最佳不定芽增殖及壮苗生根培养基。[结果]甜叶菊外植体材料的灭菌最佳条件为75%酒精20 s,0.1%升汞5～8 min;最佳不定芽增殖培养基为MS+1.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L NAA,此时不定芽增殖率达80%;最佳壮苗生根培养基为1/2MS+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.2 mg/L IBA。[结论]该研究为甜叶菊的工厂化规模生产提供了科学依据。     

花叶夹竹桃离体培养技术研究

通过正交试验等方法对花叶夹竹桃茎段组织培养技术进行了研究．结果表明：在江苏句容,花叶夹竹桃最佳取材时间为4月下旬．在优良母株上选取外植体,经过0．1％HgCl2消毒15min,灭菌成活率为78．8％;添加3．5％的白砂糖和增加培养容器的透气性,能很好地预防玻璃苗的发生;改良MS附加ZT,BA,NAA等植物生长调节剂可以有效地促进试管芽苗的增殖和生长,其中ZT1．5mg／L＋BA2．0mg／L十IBA0．1mg／L组合最适宜增殖与生长培养,增殖达5．6倍,生长高度为3．2cm;适宜的生根培养基为1／2MS＋IBA0．5mg／L＋NAA0．3mg／L＋Charcoal3000mg／L＋白砂糖2％,生根率可达92％;经生根的试管苗移栽于V（蛭石）：V（珍珠岩）：V（泥炭）为6：3：1的混合基质中,控制温度在23～30℃,相对湿度90％,保湿12～18d,其间适当遮荫,30d后成活率达88％以上。     

红茄子叶的不定芽诱导及植株再生

【目的】研究不同激素浓度和组合对红茄不定芽及根诱导的影响,建立红茄的高频再生体系,为开展茄子的遗传转化研究奠定基础。【方法】以红茄子叶为外植体,采用0．5～2．0mg／L6-BA、0．1～0．5mg／LIAA激素组合对不定芽进行诱导,采用0～0．5mg／LIAA对根进行诱导,筛选出最佳的分化培养基和生根培养基。【结果】在不定芽诱导培养基中,当6-BA浓度在0．5～2．0mg／L时,随着浓度增加,不定芽分化率逐渐升高;当IAA浓度在0．1,-0．5mg／L时,随着IAA浓度的增加,不定芽萌发率呈先增加后降低趋势,其中以添加6．BA2．0mg／L、IAA0.3mg／L的诱导效果最好,分化率高达86％。在根诱导培养基中,随着IAA浓度的增加,根诱导率呈先降低后升高趋势,诱导率可达100．0％。【结论】红茄子叶不定芽诱导最佳培养基为MS＋2．0mg／L6-BA＋0-3mg／LIAA;不定芽生根最佳培养基为MS＋0．1mg／LIAA。     

三褶虾脊兰无菌播种陕繁技术研究

【目的】建立三褶虾脊兰（Calanthe triplieata）无菌播种快繁技术体系。【方法】以三褶虾脊兰种子为外植体,采用种子→原球茎→完整植株途径,探讨不同组合（0．5mg／L6-BA、0．1mg／LNAA和1．0g／LAC）、附加物[椰汁（CM）、土豆泥、香蕉泥]及基本培养基（花宝1号、1／2花宝1号、MS和1／2MS）对三褶虾脊兰种子萌发、原球茎诱导、增殖、分化、生根的效果,筛选适宜的培养基。【结果】成熟种子在1／2花宝1号＋0．5mg／L 6-BA＋0．1mg／L NAA＋200ml/L CM＋1．0g／L AC＋20．0g／L蔗糖培养基中培养150d左右可形成原球茎,萌发率超过80％以上;诱导原球茎在1／2MS＋100mL／LCM＋2．0mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA＋1．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上的增殖效果最好,增殖率为4．5;原球茎接种于花宝1号＋0．1mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA＋100．0g／L土豆泥＋1．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上分化培养40d后,再转入花宝1号＋0．1mg／LNAA＋100．0g／L土豆泥＋2．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上培养40d,可诱导形成完整植株。在花宝1号培养基中添加NAA和土豆泥或香蕉泥,原球茎生根率均达100．0％,但土豆泥的成本最低。【结论】建立了比较完善的王褶虾脊兰无菌播种和快繁技术体系,为其种质资源保护、种苗繁育以及产业开发提供技术支持。     

沾化冬枣茎尖培养快繁技术研究

[目的]研究沾化冬枣离体培养的快速繁殖方法。[方法]以沾化冬枣茎尖为材料,以MS基本培养基,添加不同浓度IAA和6-BA进行离体培养及再生体系研究,优选最佳培养条件。[结果]外植体最适取材时间为4月下旬,接种培养基为MS+2.5 mg/L GA3;最适增殖培养基为:顶芽切段繁殖MS+0.5 mg/L 6-BA+0.25 mg/L IAA,芽丛分割繁殖MS+0.5 mg/L IBA+2 mg/L ZT;最适生根培养基为1/2 MS+1 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA;试管苗移栽的最适基质为蛭石加草炭(1∶1,V/V),成活率可达78.8%。[结论]该方法优选了沾化冬枣离体培养的快速繁殖方法,为沾化冬枣的种质资源研究提供了可靠依据。