鸡大肠杆菌病和新城疫二联油乳剂灭活疫苗研制与应用

本研究采用致病性大肠杆菌O1,O2,O78 三个血清型菌株接种适宜培养基 ,收获菌液 ,经浓缩后 ,与灭活的鸡新城疫Lasota株鸡胚尿囊液混合 ,制备成油乳剂二联灭活疫苗。应用二联灭活疫苗免疫18日龄鸡 ,0.25ml/只 ,皮下注射 ,免疫后21天攻毒测保护力 ,新城疫保护率100 %,大肠杆菌病保护率80 %～100 %,免疫持续期可达4个月 ,产蛋鸡在开产前2～3周免疫二联苗0.5ml/只 ,免疫后6个月ND保护率为100 %,大肠杆菌病保护率为80 %,免疫期可达8个月。安全试验结果 :18日龄雏鸡0.5ml/只 ,120日龄成鸡2ml/只 ,试验鸡全部健活。疫苗在4～8℃保存期为12个月 ,10℃保存期为4个月 ,1998～1999年在全省不同地区、不同品种鸡应用20万羽份 ,取得良好的应用效果     

鸡大肠杆菌病多价蜂胶灭活疫苗研究(I报)——疫苗制备及免疫效力试验

要研究以鸡大肠杆菌常见致病性血清型O_1、O_2、O_(78)3个血清型菌株制备成鸡大肠杆菌多价蜂胶灭活疫苗,以1ml/只免疫1月龄鸡,3周后攻毒保护车100%;每ml含10~(10)菌,10mg蜂胶佐剂的疫苗外观呈深褐,颗粒微小均匀,流动性好,使用方便;固体培养可获得大量抗原,简化浓缩工艺,其免疫效果明显好于液体培养菌疫苗.     

鸡大肠杆菌病多价蜂胶灭活疫苗研究（Ⅱ报）：疫苗免疫持续期,安全性,保存 …

以鸡在肠杆菌常见致病性血清型Ｏ１、Ｏ２、Ｏ７８３个血甭型菌株制备５批鸡大肠杆功病多价蜂胶灭活疫苗,并对其进行免疫持续期、安全性及保存期试验。免疫试验效果表明,５批疫苗近期保护率８７．５％～１００％,６个月保护率７５％～８７。５％;成年冰蛋鸡在产蛋前２周开始免疫,免疫后３个月和６个月抽样攻毒,３个月保护率１００％,６个月保护率８７．５％以上。安全１４日观肉鸡０．５ｍｌ,４０日龄蛋鸡注射１ｍｌ／只无临     

鸡新城疫/传染性支气管炎二联油乳剂灭活疫苗试验研究报告(Ⅲ)——二联苗安全性、免疫效力及保存期试验

用同胚培养的含NDV、IBV胚液制备的二联油乳剂灭活苗(简称鸡二联灭活苗),经免疫效力试验表明,用50倍稀释的鸡二联灭活苗,0.5ml/只剂量免疫18日龄鸡,4周后试验免疫鸡分别进行NDV、IBV强毒攻击,攻毒保护率均在50%以上,证明0.5ml剂量含有50个半数保护量(50个PD_(50)),NDHI抗体≥1:16,IBVN抗体≥1:8便可保护.三批疫苗免疫18日龄鸡,0.5ml/只组免疫鸡体内有效抗体可维持16周以上,0.25ml/只组有效抗体可维持到12周.疫苗在20℃保存4个月有效,4~8℃普通冰箱中保存15个月有效.以3倍免疫量免疫18日龄鸡4周内无任何毒副反应.     

鸡大肠杆菌油乳剂灭活疫苗的研制及效果观察

用自制的大肠杆菌油乳剂灭活疫苗进行试验，结果表明，自制的疫苗性能良好，安全可靠，雏鸡注射0．2ml／只，成鸡注射0．5ml／只，免疫期达6个月。     

鸡传染性鼻炎(三价)和新城疫二联灭活疫苗的研究

利用Page A型、B型、C型副鸡禽杆菌和新城疫病毒La Sota株,研制鸡传染性鼻炎(三价)和新城疫二联油乳剂灭活疫苗。用3个批次疫苗进行单剂量(0.5mL/次)3次接种和大剂量(2.0mL)单次接种的安全性试验、SPF鸡的免疫效力试验、商品鸡的免疫持续期试验和疫苗的保存期试验。结果表明,3批疫苗对试验鸡安全无副作用;免疫接种SPF鸡只30d后对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥80%,用20μL/只疫苗免疫接种SPF鸡21d后新城疫的平均HI抗体24;商品鸡42日龄首免,110日龄二免,二免后9个月对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥70%,对新城疫病毒强毒100%保护;用4℃~8℃保存12个月和15个月的3批疫苗进行了SPF鸡的近期免疫效力试验,结果对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥70%,用20μL/只疫苗免疫SPF鸡,免疫接种后21d新城疫病毒的平均HI抗体24,对新城疫病毒强毒的攻毒保护率70%。说明研制的疫苗安全有效。     

禽霍乱、大肠杆菌病和克雷伯菌病多价蜂胶三联灭活疫苗的研制

利用禽巴氏杆菌C48-1、C48-2强毒株、禽大肠杆菌O78和O1血清型强毒株及克雷伯菌临床分离株制苗,通过疫苗对鸡的免疫效力试验、疫苗最小免疫剂量试验、疫苗产生坚强免疫力时间的测定、疫苗免疫期的测定和疫苗保存期的测定等,研制出禽霍乱、大肠杆菌病和克雷伯菌病多价蜂胶三联灭活疫苗.结果该三联灭活疫苗安全可靠,免疫原性良好,最小免疫剂量为0.5 mL/只,免疫7 d后产生坚强保护力,疫苗对上述疾病的保护率为100%,免疫期为6个月,4 ℃条件下保存期为9个月.     

狐貉犬瘟热、细小病毒性肠炎和脑(肝)炎三联疫苗研制

用CDV弱毒、FPV弱毒和CAV-2型弱毒研制成功了狐貉三联疫苗.该三联疫苗安全可靠,免疫原性强,免疫期6个月以上,室温可保存3d,4℃可保存2周,-20℃可保存6个月,该三联疫苗免疫剂量为3ml/只,CDV、FPV和CAV-2型弱毒疫苗滴度分别为106.0～108.0,现场应用100余万只狐貉,抗体阳转率93%.     

AE油佐剂灭活疫苗对鸡胚和仔鸡的保护力试验研究

用三批AE（Avian Encephalomyelitis）油佐剂灭活疫苗免疫开产前种鸡，免疫后定期采集种蛋进行孵化，当孵至6日龄时取部分鸡胚，卵黄囊途径接种AEV VR株，进行鸡胚AE易感性试验，余鸡胚孵化出雏，分别为1、7、14、21日龄雏鸡采用肌肉途径攻击AEV VR株，攻毒后观察不同日龄仔代雏鸡AE的保护能力。结果疫苗免疫后2－3个月的种鸡所产种蛋的鸡胚AE易感性试验的保护率达100％，而同期所产种蛋孵出的仔代雏鸡，在出雏后3周内对AEV工VR株攻毒的保护率亦达100％，免疫后6－7个月种鸡所产种蛋的鸡胚AEV VR易感性试验的保护率达75％－805，而同期所产种蛋孵出的仔代雏鸡，在出雏后3周内对AEV VR株攻毒的保护率达70－90％。试验结果表明，鸡胚AE易感笥试验的鸡胚保护率与同批种蛋孵出雏鸡对AEV VR肌肉途径攻毒的保护率基本相同。     

AE油佐剂灭活疫苗对鸡胚和仔鸡免疫保护力试验观察

用 3批AE (AvianEncephalomyelitis)油佐剂灭活疫苗免疫开产前种鸡 ,免疫后定期采集种蛋进行孵化。当孵至 6日龄时取部分鸡胚 ,卵黄囊途径接种AEVVR株 ,进行AE鸡胚易感性试验。剩余鸡胚孵化至出雏后 ,分别于 1 ,7,1 4 ,2 1日龄肌肉注射AEVVR株攻毒。攻毒后观察不同日龄子代雏鸡AE的保护能力。结果疫苗免疫后 2～ 3个月的种鸡所产种蛋胚对AEV保护率达 1 0 0 % ,而同期所产种蛋孵出的子代雏鸡 ,在出雏后 3周内对AEVVR株攻毒的保护率亦达 1 0 0 %。免疫后 6～ 7个月种鸡所产种蛋胚对AEVVR保护率达 75 %～ 80 % ,而同期所产种蛋孵出的子代雏鸡 ,在出雏后 3周内对AEVVR株攻毒的保护率达 70 %～ 90 %。试验结果表明 ,AE鸡胚易感性试验的鸡胚保护率与同期雏鸡对AEVVR肌肉注射攻毒的保护率基本相同     

口蹄疫O-A-Asia Ⅰ型三价灭活疫苗免疫效力和最小免疫剂量的研究

为确定口蹄疫O-A-AsiaⅠ型三价灭活疫苗的安全性和免疫效果，按OIE口蹄疫疫苗效检标准和我国口蹄疫灭活疫苗质量标准，对实验室条件下制备的4批疫苗进行了安全性试验、免疫效力试验、免疫持续期试验、疫苗保存期试验和最小免疫剂量试验。结果显示，4批疫苗均对靶动物和实验动物安全，无任何毒副反应；对O、A、AsiaⅠ型口蹄疫的平均免疫效力分别为4．73、6．84和8．10PD50／头份；一次接种的有效免疫期达6个月；2～8℃下的疫苗保存期为12个月；适宜的免疫剂量为，6月龄以上牛每头3．0mL，6月龄以下牛每头1．5mL。该疫苗对接种动物安全，免疫效果良好，一次接种可同时预防O、A、AsiaⅠ型3个血清型的口蹄疫。     

N_(79)型疫苗和法氏囊疫苗对雏鸡联合饮水免疫试验

本实验是用克隆化N_(70)型Lasota系新城疫弱毒疫苗简称N_(70)型疫苗)和法氏囊弱毒疫苗(简称IBD细胞苗),按一定配比对雏鸡联合饮水免疫。试验分4组:1组是N_(70)型疫苗和IBD细胞苗对14日龄雏鸡1次联合饮水免疫,间隔21天再用IBD细胞苗单独饮水1次,免疫后66天,免疫鸡HI抗体为2.2～3.8(Log_2),IBD琼扩试验4/5出现阳性;2组为N_(70)型疫苗和IBD细胞苗经二次联合饮水免疫,第一次在4日龄,然后间隔3周进行第二次联合免疫,免疫后61天HI抗体为2.2～6(Log_2),IBD琼扩9/10出现阳性;3组是N_(70)型疫苗和马立克疫苗对1日龄雏鸡联合免疫(皮下接种),间隔21天用N_(70)型疫苗和IBD细胞苗联合饮水免疫;4组为对照组仅于1日龄鸡注射马立克疫苗。试验进行二批,这二批试验鸡分别在80日龄和75日龄时,每组抽取10～12羽免疫鸡用新城疫强毒株攻击,结果保护均为100％;二周后再用法氏囊强毒株攻击,结果全部保护。试验表明,这两种疫苗同时免疫对新城疫免疫力没有明显影响,说明这两种疫苗联合饮水免疫是可行的。     

牦牛大肠埃希氏菌疫苗保存12个月抗体效价测定

用牦牛大肠埃希氏菌灭活疫苗对实验动物家兔进行疫苗稳定性(保存期)测定。4批牦牛大肠埃希氏菌病灭活疫苗,批号分别为200401、200501、200502、200503,将这4批疫苗4℃保存3、6、9、12个月后,分别接种试验兔,每批接种5只。初次接种疫苗0.5mL/只,14d再次接种疫苗1.0mL/只。每次设对照组5只,注射肉汤,其剂量和方法与试验兔相同。疫苗接种前和再次接种疫苗后21d分别在试验和对照家兔耳静脉采血,用微量凝集试验进行抗体效价检测。通过抗体检测表明,疫苗保存了3、6、9、12个月后接种兔,采血测免疫抗体效价为2.709～3.612。同时对照组全部死亡。证明这些疫苗存放12个月能有效保护家兔免受大肠杆菌攻击。     

狐貉犬瘟热、细小病毒性肠炎和和脑（肝）炎三联疫苗研制

用CDV弱毒、EPV弱毒和CAV-2型弱毒研制成功了狐貉三联疫苗。该三联疫苗安全可靠，免疫原性强，免疫期6个月以上，室温可保存3d，4℃可保存2周，-20℃可保存6个月，该三联疫苗免疫剂量为3ml/只，CDV、FPV和CAV-2型弱毒疫苗滴度分别为10^6.0-10^8.0，现场应用100余万只狐貉，抗体阳转率93%。     

鸡大肠杆菌病多价蜂胶灭活疫苗研究（Ⅰ报）——疫苗制备及免疫效力试验

要研究以鸡大肠杆菌常见致病性血清型Ｏ１,Ｏ２,Ｏ７８ ３个血清型菌株制备成鸡大肠杆菌多价蜂胶灭活疫苗,以１ｍｌ／只免疫１月龄鸡,３周后攻毒保护率１００％,每ｍｌ含１０＾１０菌,１０ｍｇ蜂胶佐剂的疫苗外观呈深褐,颗粒微小均匀,流动性好,使用方便;固体培养可获得大量抗原,简化浓缩工艺,其免疫效果明显好于液体培养菌疫苗。     

含硒型牛副伤寒活疫苗的研究

为了解决牦牛主产区牛副伤寒和牛缺硒病,研制出了含硒型牛副伤寒活疫苗。经试验表明,该苗以1个免疫剂量免疫6月龄以下牦犊牛,第7 d可产生免疫应答,第15 d经颈静脉用S8002强毒株的2个MLD攻毒,可产生5／5保护,而对照组2／2死亡;免疫后6、13个月强毒攻击均产生100%的保护;同试验动物豚鼠取得的试验结果一致。以3倍免疫剂量肌肉注射牦犊牛,安全性良好。含硒型牛副伤寒活疫苗与牛副伤寒活疫苗在预防牛副伤寒病的性能上一致。该疫苗对2～6月龄牦犊牛免疫,24 h血硒浓度明显上升,且免疫后3个月血硒浓度维持在0.05 μg/ml以上。含硒型牛副伤寒活疫苗在-20℃可保存2年、4～8℃可保存1年、室温下可保存2个月。免疫牦犊牛后,与对照组相比能显著提高牦牛红细胞C3bR花环率。      

鸡大肠杆菌病中草药佐剂多价灭活苗的研制Ⅱ.疫苗免疫产生期、免疫持续期及保存期试验

对鸡大肠杆菌中草药佐剂多价灭活苗进行了免疫产生期、免疫持续期、疫苗保存期试验。研究表明 :雏鸡接种该疫苗 3～ 5d后便产生免疫力 ,到 9d时抗体产生水平已经很高 ;以免疫攻毒保护率不低于 80 %为标准 ,疫苗的免疫持续期可在 7个月以上 ;以物理性状合格和免疫攻毒保护率不低于 80 %为标准 ,疫苗置 4℃时保存期为 18个月 ,2 5℃保存 6个月为宜。     

水貂犬瘟热,病毒性肠炎和肉毒梭菌中毒三联疫苗的研究

用FPV弱毒、CDV弱毒和肉毒梭菌C型疫苗研制成功了水貂三联疫苗。该苗安全可靠、免疫原性强、免疫期达6个月以上,同各单苗相比抗体产生期及效价相近,室温可保存3天;4℃可保存2周;-20℃可保存6个月。该苗的免疫剂量为2ml,其中CDV和FPV弱毒滴度分别为10~(3.0),肉菌梭菌C型疫苗为2mg/ml。现场应用26000余只水貂,抗体阳转率达90％以上。     

鸽新城疫油乳剂灭活疫苗保存期试验研究

为了观察四元材料制备的ND油乳剂灭活疫苗的最佳保存期,用4批ND油乳剂灭活疫苗（批号为0701、0702、0703、0704）分别置4～8℃冰箱、11～20℃室温,经保存0、1、2、3、4、6个月后,检查其物理性状,并按1个免疫剂量免疫ND阴性的30日龄乳鸽,免疫后21日检测血清中HI抗体。结果表明,这4批疫苗于4～8℃和11～20℃分别保存6个月和3个月,物理性状不变。4～8℃保存6个月HI抗体有所下降,但仍能达到较高的抗体滴度水平,起到免疫保护作用。在11～20℃保存3个月HI抗体下降到7.4log2左右,但仍远远高于保护水平。因此,本疫苗保存期4～8℃暂定为6个月,11～20℃暂定为3个月。     

鸽新城疫蜂胶佐剂灭活苗保存期试验研究

为了观察四元材料制备的ND蜂胶佐荆灭活疫苗的最佳保存期,用四批ND蜂胶佐剂灭活疫苗(批号为 0601、0602、0603、0604)分别置4～8 ℃冰箱、11～20 ℃室温,经保存0、1、2、3、4、6个月后,检查其物理性状,并按1个免疫剂量免疫ND阴性的30日龄乳鸽,免疫后14 d检测血清中HI抗体.结果表明,这四批疫苗于4～8 ℃和11～20℃分别保存6个月和3个月,物理性状不变.4～8 ℃保存6个月HI抗体有所下降,但仍能达到较高的抗体滴度水平,起到免疫保护作用.在11～20 ℃保存3个月HI抗体下降到7.510g2左右,但仍远远高于保护水平.因此,本疫苗保存期4～8 ℃暂定为6个月,11～20 ℃暂定为3个月.