鸡４种病毒抗原液的浓缩其四联没油佐剂灭活苗的研制

本研究通过超滤浓缩技术对鸡新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、产蛋下降综合征症病毒和传染性法氏囊病毒的尿囊液进行了１０倍或１０倍以上的浓缩处理，并按一定的比例配比研制成四联油乳剂灭活疫苗，对鸡的最小免疫剂量是０．２５ml，免疫接种二周后，鸡新城疫和产蛋下降综合征病毒的ＨＩ抗体效价分别达到８log2和７log２以上，传染性支气管炎和传染性法氏囊病病毒抗体Ｓ／Ｐ值均在０．２以上，抗体效价呈现明显的递增，抗体水平至少可持续４个月以上，这一结果证明该试验采用的禽类病毒性抗原的浓缩方法，适用新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、产蛋下降综合征病毒和传染性法氏囊病病毒等不同抗原液和的浓缩，同时为其他病毒尿囊液工细胞培养的浓缩以及不同种多联疫苗的研制奠定了基础。     

几种引起产蛋下降疾病的预防对策

造成蛋鸡产蛋性能低下及产蛋量下降的因素较多,有疾病、营养、环境因素、应激及体重均匀度等。其中以传染性疾病的危害性最大,如鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感、减蛋综合征和传染性鼻炎等。因为传染病的发生必定要造成产蛋的减少,还可造成鸡只     

重大禽病浓缩疫苗的研制

利用PALL滤器将灭活后的新城疫、禽流感、传染性支气管炎、产蛋下降综合征等病毒分别进行10倍浓缩，经检验合格后，分别按照一定比例将抗原浓缩液与灭菌的医用白油配比，经胶体磨制备成三联或四联油乳剂灭活疫苗，均通过了实验室的各项指标检测。经过在隔离器进行实验室安全和效力检验，以及田间试验证明，该疫苗安全有效，抗体水平高，维持时间长，能够保护鸡群抵抗新城疫、禽流感、传染性支气管炎等强毒的攻击。     

“K酉安”消毒剂对四种禽病毒杀灭效果的观察

“Ｋ酉安”消毒剂对四种禽病毒杀灭效果的观察范书才，罗玉峰，钱心元（中国兽药监察所，北京１０００８１）受天津凯伦化工制品有限公司委托，用送检的＂Ｋ酉安＂消毒剂对鸡新城疫病毒、产蛋下降综合征病毒、马立克病疱疹病毒和传染性法氏囊病病毒四种禽病毒的杀灭效果进...     

冬季养鸡疫病防制的重点——呼吸道疾病

呼吸道疾病是由鸡支原体、大肠杆菌、鸡新城疫病毒、冠状病毒、传染性喉气管炎病毒、副鸡嗜血杆菌和禽流感病毒引起的疾病。蛋鸡、肉鸡、种鸡均有发病,症状略有不同。蛋鸡、种鸡产蛋下降,死亡率高低不一,肉鸡死亡率比较高,给养殖户带来巨大损失。     

河北农业大学定州中兽医学院常年招生

25．4 疾病与药物的影响 鸡传染性气管炎、鸡新城疫、鸡白痢、肠炎，以及破坏生殖系统的其他疾病．也会使鸡产薄壳蛋或软壳蛋。为了预防鸡病，须按免疫程序及时接种鸡新城疫疫苗、鸡传染性气管炎疫苗、产蛋下降综合征疫苗、禽霍乱菌苗等；定期服用驱虫药。鸡群密度过大。环境卫生不良和受惊吓等，均可导致鸡产薄壳蛋或软壳蛋。因此，鸡群在产蛋期间，应尽量避免各种不良应激因素的发生，以保证产蛋质量和经济效益的提高。     

应用PCR技术检测鸡产蛋下降综合征病毒

根据已发表的鸡产蛋下降综合征病毒(egg drop syndrome virus,EDSV)基因序列设计特异性引物,目的基因片段大小为273 bp,采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)对EDSV进行扩增。结果表明,该方法对EDSV标准株扩增为阳性,对鸡新城疫病毒、鸡传染性法氏囊病毒及肾型传染性支气管炎病毒的扩增结果均为阴性。应用PCR技术对试验样品进行检测,均能够扩增出预期的DNA片段。由此可以得出,PCR技术可以用于鸡产蛋下降综合征病毒的检测。     

鸡新城疫和产蛋下降综合征二联灭活氢氧化铝胶疫苗免疫研究

使用鸡新城疫病毒LaSota株和产蛋下降综合征病毒分离株HE03株制备鸡新城疫和产蛋下降综合征二联灭活氢氧化铝胶疫苗。把40只16周龄SPF蛋鸡分成A、B 组,分别是30只、10只。A组接种0.5 mL鸡新城疫和产蛋下降综合征二联灭活氢氧化铝胶疫苗,B组作为对照组,每隔14 d采集血清样本直到接种后第6周。至22周龄时,A组再次分成A1和A2两组。A2组与B组的鸡接受强致病性的产蛋下降综合征病毒攻击。结果表明,A组在不同时间采集的血清抗鸡产蛋下降综合征病毒的最高的抗体出现在接种后的第4周,抗鸡产蛋下降综合征病毒的HI抗体滴度从1∶128到1∶512不等,几何平均滴度（GMT）为1∶111;第4周时,抗鸡新城疫病毒的HI抗体滴度GMT为1∶134。该疫苗能保护鸡抵抗强致病性的产蛋下降综合征病毒和鸡新城疫病毒的感染,B组在攻毒感染后产蛋率显著下降,出现畸形蛋、软壳蛋和无壳蛋。     

“蛋禽安”免疫罗曼蛋种鸡免疫保护期的测定

“蛋禽安”鸡新城疫、传染性支气管炎、产蛋下降综合征三联油乳剂灭活苗，瑞普(保定)生物药业有限公司生产，批号030205。     

抗鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及其特性的研究

本实验将鸡传染性支气管炎病毒（澳大利亚Ｔ株）进行纯化，制成抗原，应用杂交瘤技术建立了５株分泌抗鸡传染性支气管炎病毒的杂交瘤细胞株，其免疫球蛋白的亚类分别属于ＩｇＧ１、ＩｇＧ３、ＩｇＭ。杂交瘤细胞分泌抗体的能力稳定，长期传代对其抗体分泌能力没有影响。５株单克隆抗体与其它１２株鸡传染性支气管炎病毒标准株之间存在不同程度的交叉反应，但对鸡新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、产蛋下降综合征病毒及禽流感病毒均无交叉反应。用此杂交瘤细胞制备腹水的ＥＬＩＳＡ效价为１０－６～１０－７，抗体对热的稳定性有一定的差别。抗体纯化后，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶电泳表明具有单克隆抗体的特征，经快速蛋白分析鉴定其纯度为８９．４９％。竞争ＥＬＩＳＡ法证明其中４株的单抗与抗原结合位点并不完全相同。采用单抗夹心ＥＬＩＳＡ法，对抗原的检测方法进行了初步探索。     

鸡传染性喉气管炎病毒PCR诊断方法的建立与应用

根据GenBank登录的传染性喉气管炎病毒(ILTV)的TK基因序列设计并合成1对特异性引物,以ILTV疫苗株DNA为模板,建立了检测ILTV TK基因的PCR方法。应用该方法能从临床分离毒株和疫苗株中扩增到长为427 bp的目的片段;但不能从新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊病毒(IBDV)、禽呼肠孤病毒(ARV)、减蛋综合征病毒(EDSV)、H9亚型禽流感病毒(H9-AIV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌等病原中扩增出阳性条带;敏感性试验表明其DNA最小检出量为4.9 ng;应用该方法和病毒分离法对2份临床病例和人工感染鸡的检测,两者符合率为100%。上述结果表明该PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于传染性喉气管炎病毒鉴定和临床诊断。     

Comparison of two commercial enzyme-linked immunosorbent assays and conventional methods for avian serology

Sera tested for hemagglutination-inhibition (HI) activity against Newcastle disease virus (NDV) and infectious bronchitis virus (IBV) and virus-neutralizing (VN) activity against infectious bursal disease virus (IBDV) and viral arthritis (VA) virus were collected from a wide variety of accessions into the Diagnostic Services Laboratory, Poultry Disease Research Center, University of Georgia. The sera were then segregated according to HI or VN titer to NDV, IBV, IBDV, or VA virus and stored frozen at -20 C until tested by two commercial enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs). There was good correlation of mean Flockchek ELISA titers or EIA Systems sample-to-positive (S/P) ratios with specific HI or VN titers. Flockchek ELISA profile group 3 and EIA Systems mean S/P ratio of 1.12 corresponded to what were considered in our lab to be minimum protective titers for each antigen against virulent challenge in our area.     

Comparison of egg-yolk and serum antibody titers to four avian viruses by enzyme-linked immunosorbent assay using paired field samples

Eggs and blood were collected from 11 hens in each of nine broiler-breeder flocks in Quebec. Serum and egg-yolk extracts were assayed for antibody titers to infectious bursal disease virus (IBDV), infectious bronchitis virus (IBV), Newcastle disease virus (NDV), and reovirus (RV) by a commercial enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit. Comparison was made between egg-yolk and serum antibody titers by a regression analysis. A high correlation was observed between serum and yolk antibody titers to all the viruses tested (r = 0.9 for IBDV, 0.84 for IBV, 0.84 for NDV, and 0.91 for RV). Antibody monitoring of commercial breeder flocks using egg yolk instead of serum with commercial ELISA plates is thus feasible and is recommended.     

A study of breeder vaccination programs and problems in the broiler progeny in Saskatchewan utilizing enzyme-linked immunosorbent assay

A survey of antibodies against infectious bursal disease virus (IBDV), infectious bronchitis virus (IBV), Newcastle disease virus (NDV), and reovirus (RV) was conducted in broiler-breeder flocks and selected progeny broiler flocks utilizing the enzyme-linked immunosorbent assay. Marked differences in antibody titers between different breeder flocks were related to differences in vaccination programs. Poor performance in some progeny broiler flocks was related to low antibody titers against IBDV in the source breeder flocks. Progeny broiler flocks in which there was a high incidence of condemnations for airsacculitis had elevated antibody titers against IBV. A few progeny broiler flocks that experienced high mortality due to gangrenous dermatitis had no antibody titers against IBDV at processing. Antibody titers against RV were very variable and could not be related to any production problems.     

重大禽病浓缩疫苗的研制

利用PALL滤器将灭活后的新城疫、禽流感、传染性支气管炎、产蛋下降综合征等病毒分别进行10倍浓缩,经检验合格后,分别按照一定比例将抗原浓缩液与灭菌的医用白油配比,经胶体磨制备成三联或四联油乳剂灭活疫苗,均通过了实验室的各项指标检测。经过在隔离器进行实验室安全和效力检验,以及田间试验证明,该疫苗安全有效,抗体水平高,维持时间长,能够保护鸡群抵抗新城疫、禽流感、传染性支气管炎等强毒的攻击。     

朗德鹅禽流感病毒的分离与鉴定

用禽流感病毒ELISA试剂盒对某朗德鹅养殖场的病鹅气管粘液进行了检测，发现5份粘液样本均呈禽流感阳性；随后取相应气管组织材料接种于9～11日龄鸡胚分离病毒．发现尿囊液能使鸡红细胞发生凝集，用禽流感病毒H5、H7、H9标准阳性血清和新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊炎病毒抗血清作HI试验，结果禽流感病毒H5亚型抗血清的血凝抑制滴度达到2^7，而禽流感病毒H7、H9亚型及其他病毒抗血清无血凝抑制滴度，说明从朗德鹅分离到的病毒为H5亚型禽流感病毒。     

鸡传染性贫血病毒套式PCR检测方法的建立

本试验根据GenBank中登录的禽传染性贫血病毒(CAV)基因序列,设计合成2对引物,外引物的扩增片段大小为485 bp,内引物的扩增片段大小为297 bp,建立了适合CAV快速检测的套式PCR方法(nested PCR),并采用该方法对CAV阳性毒株及临床病料进行了检测。结果显示,该方法能扩增到297 bp的条带,禽流感病毒(H9亚型)、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、禽网状内皮增生病病毒、减蛋综合征病毒、禽呼肠孤病毒、马立克氏病病毒的扩增结果均为阴性。该方法第1步扩增的敏感性是100 pg,第2步PCR扩增的敏感性是1 fg,敏感性提高了10⁵倍。本研究建立的CAV套式PCR方法具有敏感性高、重复性好、特异性强等优点,可用于CAV的临床诊断和分子流行病学调查等。     

禽副黏病毒4型荧光RT-PCR检测方法的建立

本研究根据GenBank发表的禽副黏病毒4型（APMV-4）基因组序列,在保守区域分别设计了特异性RT-PCR引物和荧光探针,初步建立了可用于检测APMV-4的荧光RT-PCR方法。特异性试验表明本方法特异性强,与新城疫病毒（NDV）、禽流感病毒（AIV）、传染性支气管炎病毒（IBV）、减蛋综合征病毒（EDSV）等没有交叉反应。灵敏度试验表明本方法的检测下限为1EID50,比常规RT-PCR的敏感度高100倍左右。本研究所建立的荧光RT-PCR方法具有快速、准确、灵敏等优点,可用于APMV-4样品的检测。     

抗传染性法氏囊病病毒单克隆抗体的研究Ⅰ．抗传染性法氏囊病病毒（CJ801株）单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

应用杂交瘤技术获得了３株抗传染性法氏囊病病毒（ＣＪ８０１株）的单克隆抗体。３株单抗与鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡马立克氏病病毒均无交叉反应。ＣｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅＥＬＩＳＡ表明、３株单抗所对应的抗原位点互不重叠。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ试验表明、３株单抗所对应的抗原位点都位于ＶＰ２ｂ上。     

鸡新城疫病毒与传染性支气管炎病毒同胚培养的试验研究

将鸡新城疫病毒（NDV）和鸡传染性支气管炎病毒（IBV）按一定的稀释比例等量混合接种9~10日龄SPF鸡胚,让其在同一鸡胚中增殖（简称同胚培养）。试验结果表明,用5倍稀释的ND-Lasota病毒液与 5000倍稀释的IBH₁₂₀病毒液等体积混合后尿囊腔接种鸡胚,能在同一鸡胚中正常增殖,接种后96 h收毒,用红细胞凝集试验（HA）测得NDV、IBV两种病毒的血凝价分别为11 log2和12 log2,不低于各自病毒单独增殖的HA滴度,病毒的增殖基本趋于平衡。同时也证实了在合适的培养条件下,IBV对NDV的复制不会产生干扰。