荞麦降血压肽的结构、功能及作用机理

植物源降血压多肽能通过抑制血管紧张素I转换酶(ACE)的活性调节肾素-血管紧张素系统(RAS)的生理功能达到降血压的效果。本文综述了荞麦蛋白酶解产物中降血压肽的结构、功能及作用机制。     

昆嵛山血管紧张素转换酶抑制剂原料植物资源调查

血管紧张素转换酶抑制剂是近年来正迅速发展的一类心血管药物。对昆嵛山血管紧张素转换酶抑制剂原料植物资源进行调查,为该资源的开发利用提供基础资料。     

响应面法优化青蛤降血压肽酶解制备工艺

[目的]采用响应面法优化青蛤降血压肽的酶解制备工艺。[方法]以青蛤肉为原料,木瓜蛋白酶为酶种,血管紧张素转换酶抑制率为指标,在单因素试验的基础上,选择pH、酶解时间和料液比为影响因素,进行3因素3水平的Box-Behnken试验设计,采用响应面法分析3个因素对青蛤降血压肽制备工艺的影响。[结果]木瓜蛋白酶酶解制备青蛤降血压肽的最佳工艺条件为pH 5.8、酶解时间8.4 h、料液比1∶3.1,该条件下酶解产物对血管紧张素转换酶抑制率达93.58%。[结论]该研究为青蛤的高值化利用和降血压肽的制备提供了新思路。     

开搏通治疗慢性充血性心力衰竭疗效观察

开搏通为血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI),通过影响内源性神经内分泌机理引起动脉、静脉扩张.在临床上应用血管扩张治疗慢性充血性心力衰竭(CHF)的疗效得到了充分肯定.     

海洋生物源抗高血压肽的制备和构效关系研究进展

高血压已成为全球最常见的心血管疾病,其中肾素-血管紧张素-醛固酮系统(renin-angiotensin-aldosterone system,RAAS)发挥着重要的血压调节作用,血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)催化血管紧张素Ⅰ转化为血管紧张素Ⅱ,并使缓激肽失活,因此,其抑制剂成为抗高血压药物研究的靶点.许多研究表明小肽具有ACE活性抑制作用,存在调控高血压的潜力.海洋生物种类丰富,具有潜在的生物活性肽的开发价值.对来自海洋生物的抗高血压生物活性肽的生产和构效关系(Structure-Activity Relationship,SAR)的研究现状进行综述.     

食源血管紧张素转化酶抑制肽研究进展

高血压是心血管疾病最重要的危险因素。血管紧张素转换酶（Angiotensin converting enzyme,ACE）抑制肽是预防和治疗高血压的生物活性物质,食源ACE抑制肽在高血压预防和治疗中起着重要作用。主要介绍了动物、植物和微生物发酵食品源ACE抑制肽降高血压的研究进展,并根据文献中分子对接的研究结果分析ACE抑制肽与ACE之间相互作用的分子机制,阐述降高血压作用的其他途径,讨论ACE抑制肽降高血压的临床研究进展。     

牛磺酸对预防大鼠发生高血压的影响

通过检测补充不同水平牛磺酸和β-丙氨酸(牛磺酸转运抑制剂)大鼠血液中血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,ATⅡ)含量和血管紧张素转换酶(angiotensinconvertingenzyme,ACE)活性及一氧化氮含量,探讨牛磺酸对高血压发生的预防作用。试验结果证明补充牛磺酸可使大鼠血中ATⅡ含量、ACE活性降低(P<0.05)和提高了NO的含量(P<0.01)。     

（R）-2-羟基-4-苯基丁酸及其乙酯的生物催化研究进展

(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯是合成血管紧张肽转化酶抑制剂普利类系列(ACEI)的关键手性中间体.综述了(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的各种合成路线及国内外利用生物催化进行转化的研究进展.     

猫血管紧张素转换酶2的三维结构模拟与真核表达

家猫能自然及人工感染SARS病毒,本研究旨在探讨家猫ACE2潜在的SARS病毒受体功能。以人血管紧张素转换酶2(ACE2)序列为模板,用同源模建法模拟了家猫ACE2的三维空间结构,发现家猫ACE2与人ACE2结构十分相似,其结合严重急性呼吸综合症(SARS)病毒囊膜纤突(S)蛋白的关键氨基酸的同源性很高(15/18)。将家猫血管紧张素转换酶2基因N端1-367 aa对应的基因片段及其跨膜区克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-his( )B中,构建了表达质粒pcDNA-mA367,转染HeLa细胞,间接免疫荧光检测表明fACE2的N端片段已在细胞膜上成功表达。     

鲢头酶解物对ACE的抑制活性

通过测定鲢Hypophthalmichthys molitrix头酶解物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制率(I),确定了蛋白酶酶解鲢头制取ACE抑制肽(ACEI)的酶种及其最佳酶解工艺条件,并用Sephadex G-15凝胶柱对酶解物进行分离,测定酶解物中ACE抑制肽的相对分子质量分布。结果表明：在胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶和复合风味蛋白酶5种酶中,胃蛋白酶为酶解鲢头制备ACE抑制肽的理想蛋白酶;其最佳酶解工艺条件为温度37℃、pH2．0、酶解时间3h、酶的质量分数为1．4％、底物浓度ω(原料)：ω(水)=1：3,在该条件下得到的酶解物对ACE的抑制活性最强,其I=83．58％;在最佳酶解工艺条件下得到的酶解物经层析分离,在最大洗脱峰处得到的ACE抑制肽抑制活性最高,其I=86．72％,相对分子质量为1096。     

鱿鱼肝脏活性肽的制备及生物活性研究

[目的]为鱿鱼肝脏的高值化利用提供基础研究数据。[方法]以鱿鱼肝脏蛋白为原料,通过蛋白酶水解来制备生物活性肽,研究了多种蛋白酶水解鱿鱼肝脏制得水解液的抗凝血活性、抑制血管紧张素Ⅰ转换酶（ACE）活性及抗氧化活性。[结果]当鱿鱼肝脏水解液浓度为5 mg/ml时,中性蛋白酶的水解液对ACE抑制率为68.0%;APTT值为59.8 s,TT值为34.2 s,比空白对照组分别延长26.7和20.6 s,表明鱿鱼肝脏的中性蛋白酶水解液具有抗凝血活性。中性蛋白酶解液对Fe3＋的还原力为0.588,羟自由基清除能力为64.5%,说明鱿鱼肝脏中性蛋白酶水解液具有较好的抗氧化活性;而其余的木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶的鱿鱼肝脏水解液的抗凝血活性和ACE抑制活性均低于中性蛋白酶水解液的酶解液活性。[结论]鱿鱼肝脏蛋白质具有较好的综合利用价值。     

Drying Technology of Angiotensin Converting Enzyme Inhibitory Peptide Derived from Bovine Casein

Drying technology of angiotensin converting enzyme （ACE） inhibitory peptides derived from bovine casein was investigated. No significance was observed on ACE inhibitory activity of products prepared by spay drying and freeze drying （P〉0.05）. Spay drying was the best drying process for practical industry production. The inlet temperature ranged from 140℃ to 160℃ and the exit temperature ranged from 70 ℃ to 90 ℃ during the spay drying process. Under the optimal conditions, scale-up of angiotensin converted enzyme inhibitory peptide from 1 L to 10 L and the experiment was successively conducted. Peptide yield was 29% and half inhibitory concentration （IC50） was 0.53 g. L^-1.     

斑马鱼血管紧张素转换酶(ACE)的生物信息学分析

采用生物信息学方法对模式生物斑马鱼中的血管紧张素转换酶进行了系列预测分析.结果表明,斑马鱼中有两个ACE基因,它们所编码的蛋白分别由1 324和785个氨基酸组成,其中1个是酸性蛋白,在水中不稳定,没有信号肽,属线粒体跨膜蛋白;另一个为酸性水溶性稳定蛋白,有信号肽.它们均含保守的Pfam Peptidase_M2结构域,属于M2家族蛋白.通过ESTs搜索发现这两个基因在斑马鱼不同组织和不同发育期的表达情况存在较大的差异.同源性比对和系统发育分析表明,斑马鱼ACE蛋白与低等脊椎动物(红原鸡、热带爪蟾等)、高等脊椎动物(人、鼠等)的同源性较高,达60%以上,说明ACE蛋白在系统演化上比较保守.     

醋蛋中ACE抑制肽的分离及其活性保护的研究

ACE抑制肽在体内稳定性的研究对于其功能活性的保护具有重要意义。采用凝胶色谱层析法对经酶解后的醋蛋液进行分离纯化,收集具有较高抑制活性的多肽组分。再将其与卵磷脂结合形成复合物,目的是利用卵磷脂的乳化性保护多肽活性。利用FT-IR、XRD对复合物的结合效果进行验证分析,结果发现卵磷脂与活性肽结合后,活性肽的ACE抑制活性在体外模拟前后相较于未经结合处理得到明显的升高。红外光谱研究发现复合物中活性肽与卵磷脂发生相互作用。通过XRD进一步验证并推断是活性多肽被卵磷脂吸收后以无定形或分子态的形式存在。因此,可认为经过卵磷脂复合的多肽可以很好保留ACE抑制活性且可以降低其被胃肠道酶降解的风险。     

A Novel Angiotensin I Converting Enzyme Inhibitory Peptide from the Milk Casein: Virtual Screening and Docking Studies

Angiotensin I converting enzyme (ACE) plays an important physiological role in the regulation of hypertension. In this study, we applied virtual screening to discover a novel angiotensin I converting enzyme inhibitory peptides from milk casein. One potential hit was identified based on docking scores, subsequently confirmed by activity studies in vitro (IC50=20.85 μmol L-1). The proposed peptide in this study contains a unique sequence, Lys-Val-Leu-Ile-Leu-Ala. Moreover,we performed the docking studies to understand the binding mode between the enzyme and peptide hit.     

猪肺血管紧张素转化酶的提取与纯化

[目的]研究猪肺血管紧张素转化酶（ACE）的提纯方法,为其生产利用提供技术支撑.[方法]以新鲜猪肺组织为试验材料,匀浆离心后经硫酸铵分级沉淀透析,然后采用离子交换-超滤离心联合法对猪肺ACE粗提物进行纯化,测定ACE的分子量、酶活力、纯化倍数及酶活力回收率.[结果]通过离子交换-超滤离心联合法分离纯化猪肺ACE,可得到相对分子量182 kDa、酶比活力1.2476 U/mg的电泳级纯品ACE,其纯化倍数达357.31倍,酶活力回收率达12.28％.ACE催化反应动力学米氏常数（Km）为0.849 mmol/L,最大反应速率（Vmax）为9.775 nmol/min.[结论]采用离子交换-超滤离心联合法纯化猪肺ACE能够极大缩短分离与纯化时间,且获得较高的纯化倍数和酶活力回收率,是猪肺ACE的高效纯化方法.     

不同品种芹菜可食部分的降压活性成分及其体外血管紧张素转换酶抑制活性

以青梗芹菜、白芹菜、紫芹等19个品种芹菜为研究对象,在相同条件[料液比1∶30 (g·mL^-1)、时间2 h、温度60 ℃]下提取得到可食用部分(茎和叶)的水提取液,用于筛选具较高体外血管紧张素转换酶(ACE)抑制活性、总酚和总黄酮含量的芹菜品种及其部位。结果表明,芹菜叶水提物的体外ACE抑制活性显著(P<0.05)高于乙醇溶液提取物;不同品种芹菜叶水提物的体外ACE抑制活性集中在80%~100%;总黄酮含量集中在200~250 mg·L^-1,白梗芹菜叶中含量最高,白芹叶中含量最低;总酚含量集中在130~150 mg·L^-1,紫芹叶中含量最高,空杆绿芹叶中含量最低。相关性分析表明,芹菜叶的体外ACE抑制活性与其总酚和总黄酮含量均呈正相关,其相关系数均在0.3~0.6。体外ACE半抑制浓度(IC₅₀)表明,青梗芹菜叶水提物的IC₅₀最低(1.258 mg·mL^-1),其次为四季慢芹菜叶和白芹菜叶,分别为1.368 mg·mL^-1和1.829 mg·mL^-1。     

山羊血管紧张素转换酶2基因的克隆表达与生物信息学分析

[目的]血管紧张素转换酶2(ACE2)是RAS系统的关键调控酶,在动物上的研究较少,本试验研究了山羊ACE2的相关理化性质和功能。[方法]利用同源克隆及RT-PCR技术,根据牛的ACE2基因mRNA序列设计引物,从山羊肾脏组织中扩增出ACE2基因编码区的特异性片段,TA克隆到p MD19-T载体并转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,对生长出的单菌落进行验证后测序分析。根据测序分析结果设计引物,经PCR扩增和酶切连接,构建原核表达载体p ET-28a-ACE2,经过验证后转化大肠杆菌BL21(DE3)并用IPTG诱导表达ACE2蛋白。[结果]山羊ACE2基因c DNA编码区共包括2 415个核苷酸,编码804个氨基酸残基。同源性比对发现,山羊ACE2基因核苷酸序列同源性与绵羊ACE2最高,为99%,与斑马鱼最低,仅为60%。遗传进化分析也表明该ACE2基因与绵羊的遗传距离最近,与斑马鱼处在两个不同的分支上。蛋白结构及理化性质分析预测该山羊ACE2蛋白属于稳定型蛋白,蛋白信号肽序列位于第1氨基酸(aa)~18氨基酸(aa)之间,蛋白跨膜螺旋预测为Ⅰ型跨膜蛋白。成功构建山羊ACE2蛋白胞外部分(19~738 aa)表达载体,表达出的蛋白相对分子质量约为90×103,主要以包涵体的形式在BL21(DE3)中表达。[结论]本试验首次成功克隆了山羊ACE2基因编码区(基因序列号:KF921008.1),并对其蛋白结构及理化性质进行了初步预测,同时在大肠杆菌中高效表达了其胞外区蛋白。     

喷施污泥热碱液对叶菜产量及氮转化酶的影响

污泥通过碱性热水解工艺（ATH）提取的富含多肽、蛋白质类的液体已被证实无毒性,用于农业生产中可显著促进作物生长。为研究该液体对作物氮素吸收的影响及其同化机制,以小青菜为研究对象,以喷施清水为对照,研究了200、400、600、800倍和1 000倍5个稀释倍数处理条件下喷施热碱液对小青菜产量、氮素养分吸收及氮同化关键酶活性的影响。结果表明：随着喷施热碱液稀释倍数的增加,各指标均呈先升高后降低的趋势,当热碱液稀释400倍时,小青菜收获后,其氮素累积量、叶绿素相对含量（SPAD值）和产量等达到较高水平,且小青菜中硝酸还原酶（NR）、亚硝酸还原酶（NiR）、谷氨酸脱氢酶（GDH）、谷氨酰胺合成酶（GS）、谷氨酸合成酶（GOGAT）在生育期间均可保持较高的活性;偏最小二乘路径模型（PLS-PM）表明,喷施热碱液后小青菜的氮素吸收主要受NR、GS、GOGAT的影响,同时GOGAT对小青菜产量的提升有显著作用。研究表明,喷施适宜稀释倍数的热碱液会提高小青菜氮素同化相关酶的活性,促进小青菜生长和对养分的吸收,从而提高产量。