江汉平原一规模化猪场暴发伪狂犬病的调查研究：Ⅱ,病毒血清中和试验

应用伪狂犬病毒(PrV)阳性参照血清与分离的病毒株HS—9304进行小鼠病毒血清中和试验和IBRS—2细胞培养中和试验时,PrV阳性参照血清可完全中和HS—9304毒株对小鼠的致病力及对猪肾传代细胞系的致细胞病变作用(CPE),这进一步证实了家兔生物学试验的诊断结果,从病死猪大脑及实质器官分离出的HS—9304确系PrV。     

江汉平原—规模化猪场暴发伪狂犬病的调查研究(Ⅲ)——猪伪狂犬病毒HS-9304株的克隆纯化及检定

应用细胞培养病毒蚀斑技术,将分离的伪狂犬病毒(PrV)HS-9304株在鸡胚成纤维细胞(CEF)单层培养上覆以营养琼脂培养基,连续挑斑纯化3次,成功地获得了纯化病毒克隆株.对病毒克隆株在传代细胞上复壮增殖后进行毒价测定.接种试验动物人工造病并进行血清中和试验以及外源性污染的检定.该病毒克隆株对BHK-21细胞感染的滴度为10~(8.5)TClD_50,能使小鼠和家兔出现特异性的症状和死亡,病毒对PrV标准阳性血清的中和效价达到1:195.病毒纯净无外源性污染.     

猪伪狂犬病的诊断与防制研究现状

伪狂犬病(Pseudorabies,PR)又叫奥叶兹基氏病(Aujeszkydisease,AD)是由伪狂犬病病毒(PrV),又名猪疱疹病毒I型(Suisherpesvirus I)所引起的多种家畜、野生动物、实验动物的一种急性传染病[1].该病在成年猪常呈隐性感染或有上呼吸道卡他性症状,而妊娠母猪则发生繁殖障碍,表现为流产,产死胎或木乃伊胎、产弱仔,哺乳仔猪出现发热,脑脊髓炎和败血症症状,最后死亡.猪伪狂犬病已成为规模化养猪场猪繁殖障碍的一大疫病.     

近年来我国猪伪狂犬病的发生概况

伪狂犬病(Pseudorabies，Pr)又称奥叶兹基氏病(Aujeszky's disease，AD)是由伪狂犬病病毒(PrV)又名猪疱疹病毒1型(Suis herpesvirus 1)所引起的多种家畜、野生动物、伴侣动物和实验动物的一种     

伪狂犬病改良血凝抑制试验

伪狂犬病病毒(PrV)为疱疹病毒科成员,可引起猪群发病,具有重要经济意义。牛1型疱疹病毒、马1型疱疹病毒(马流产病毒)、猫1型疱疹病毒和传染性喉气管炎病毒的血凝反应已见报道。笔者曾报道PrV可凝集鼠红细胞,而特异性抗血清可抑制凝集反应。我们研究发现改良HI试验较常规HI试验灵敏性高。     

兔出血症病毒干扰伪狂犬病病毒复制试验

有材料记载,接种兔出血症病毒(RHDV)疫苗3d后的家兔即能抵抗RHDV强毒的攻击;在疫区,其保护率可达90%以上,而此时RHDV的有效抗体并未出现.我们在研制应用RHDV疫苗时也证实了这一点.故推测RHDV疫苗的早期免疫主要是干扰素的作用.为了验证这一推测,我们进行了RHDV干扰伪狂犬病病毒(PrV)复制的试验研究,现将结果报告如下.     

猪伪狂犬病

<正> 伪狂犬病(Psuedorabies)是由疱疹病毒科疱疹病毒属的伪狂犬病毒(Psuedorabies Virus简写PrV)所引起的家畜及野生动物的神经症状为主的疫病。病毒感染谱极广,已查明约近有35种动物可以被感染,因此病毒在自然界反复循环存在,是典型的自然疫源性疾病,也是极难防制的传染病。多数家畜及动物都呈致死性感染,猪则随日龄而异,日龄愈小致死率愈高,三月龄以上多不显症状,成年猪或母猪     

检测伪狂犬病病毒双抗体夹心间接ELISA方法的建立与应用

以猪伪狂犬病病毒（PrV）Ea株特异性单克隆抗体576株为捕获抗体，纯化的抗PrV IgG为检测抗体，建立了检测PrV抗原的双抗体夹心ELISA方法。最佳反应条件为，单克隆抗体576株的包被浓度为12．2μg／mL，IgG的工作浓度为16．0μg／mL，对PrV的检测灵敏度达15．6ng（0．156μg／mL），与乙型脑炎病毒（JEV）、猪瘟病毒（HCV）、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）、猪细小病毒（PPV）和猪流感病毒（SIV）等无交叉反应。批间和批内变异系数较小，分别为6．39％和4．1％。应用本方法对人工感染PrV的40日龄仔猪组织进行检测，肺和脑PrV抗原检出率最高，其次是脾、心、肝和肌肉。应用该方法和PrV对159份临床样本进行平行检测，发现二者的符合率可达到77．4％，比PCR敏感。实验结果表明：双抗体夹心间接ELISA方法具有敏感性高、特异性强和重复性好的特点，可广泛应用于动物组织中PrV的检测。     

猪伪狂犬病病毒双基因缺失突变株(HB-98株)安全性、稳定性和免疫原性测定

对以伪狂犬病病毒鄂A株为亲本毒株构建的TK和gG双基因缺失突变株（PrV HB-98株）的增殖能力、安全性、毒力稳定性和免疫原性进行了测定。结果表明，PrV HB-98株在BHK-21细胞上的增殖滴度为10^7.0 TCID50／0．1mL以上，与亲本毒株相当，但高于Bartha株；与PrV鄂A株相比，病毒量为10^7.0TCID50的PrV HB-98株不引起BALB／c小鼠的死亡，毒力也低于Bartha株；将PrV HB-98株在PK-15细胞连续培养25代和在猪体内上连续继代5次，各代次突变株TK基因和LacZ基因能被稳定扩增，未出现毒力回复现象．表明该毒株具有良好的遗传稳定性；以10^5.0、10^6.0、10^7.0TCID50等3个不同剂量的PrV HB-98株接种于妊娠50～60d母猪和1日龄仔猪，母猪均能正常产仔．仔猪也未出现任何临床症状，证明该毒株有较好的安全性。另外，以10^5.0TCID50的PrV HB-98株接种于妊娠50～60d母猪和1日龄仔猪，分别于接种后28d和20d，用10^7.0TCID50 PrV鄂A强毒进行攻击．结果免疫猪都能抵抗强毒的攻击．获得保护，表明该毒株具有很强的免疫原性。综合上述结果表明，PrV HB-98株可以作为候选毒株．用于伪狂犬病基因工程疫苗的研制。     

牛伪狂犬病的实验室诊断

对不明原因役牛猝死症病料组织触片镜检和分离培养皆未发现细菌，乳胶凝集试验检查发现3份送检血清皆为伪狂犬病病毒（PrV)抗体阳性，ELISA检测结果,其中2份为PrV gE抗体阳性，而且这2份血清PrV中和抗体也为阳性，以脑组织制备DNA模板进行PCR，扩增到特异性的PrVDNA片段，对健康成年兔接种病牛脑，肺等病科，表现典型的伪狂犬病症状，综合流行病学，细菌学，血清学，分子生物学和动物试验结果，确诊为牛伪狂犬病。     

实验感染伪狂犬病家兔的临床症状和病理组织学变化

伪狂犬病是由伪狂犬病病毒(PrV)引起家畜及野生动物的一种急性传染病,家兔是最敏感的实验动物之一,且发病后出现特异的奇痒症状,因此常用家兔接种来诊断伪狂犬病。我们用几株伪狂犬病毒株实验感染家兔,以便详细观察其临床表现和病理组织学变化。     

加强免疫与监测净化猪场伪狂犬病——2006年中国9省市规模化猪场伪狂犬病野毒流行病学调查与分析

伪狂犬病(Pseudorabies)给养猪业造成非常严重的直接和间接经济与商业损失,种猪感染伪狂犬病病毒后,引起母猪发情障碍、流产、产死胎、木乃伊胎和弱仔,伪狂犬病病毒先天感染或早期感染引起哺乳仔猪的神经症状和高死亡率,而对于生长育肥猪,伪狂犬病是呼吸系统疫病综合征(PRDC)的重要病原,引起呼吸系统病变和生长迟缓.     

规模化猪场猪伪狂犬病的筛查及防控措施

伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies Vilaas,PRV)引起的多种哺乳动物和鸟类的一种以发热、奇痒(猪除外)及脑脊髓炎为主要症状的疾病.该病对猪的危害很大,可致妊娠母猪流产、死胎、木乃伊胎;初生仔猪多为体温升高、神经症状和急性死亡经过;成年猪以隐性感染为主,但可排毒成为传染源.     

口蹄疫兔化弱毒疫苗ZB株L蛋白N~2D、M~(143)L和E~(147)G氨基酸突变对病毒毒力影响的研究

口蹄疫病毒(FMDV)前导蛋白L~(pro)是病毒的毒力因子之一。前期研究发现,FMDV兔化弱毒疫苗ZB株传代减毒致弱后,前导蛋白L~(pro)内仅存在3个氨基酸点突变(N~2D、M~(143)L和E~(147)G)。为确定这3个突变对病毒生物学特性的影响,本研究利用弱毒疫苗ZB株感染性分子克隆为骨架,构建获得含有这3个氨基酸回复突变的重组病毒r ZBatt-L,并比较其与亲本病毒r ZBatt生物学特性。结果显示,r ZBatt-L和r ZBatt在BHK-21细胞中均可以产生细胞病变效应,形成大小相似的噬斑,而在牛原代肾细胞(BK)中均不产生CPE;二者在BHK-21细胞中的生长曲线与病毒RNA复制动态相似(p0.05),对乳鼠的致病性也无显著差异;测定了r ZBatt-L和r ZBatt分别感染BK诱导I型干扰素(IFN-α和β)能力,结果显示r ZBatt-L和r ZBatt均可以在感染早期诱导IFN-α表达,而感染晚期抑制IFN-α表达。相对的是,r ZBatt-L和r ZBatt感染细胞后均可以诱导IFN-β含量增加,并且二者诱导IFN-β含量无差异(p0.05)。结果表明,FMDV弱毒疫苗ZB株L~(pro)蛋白中的N~2D、M~(143)L和E~(147)G突变不改变病毒的生物学特性,对病毒毒力不产生明显的影响。本研究明确了L~(pro)蛋白突变不是ZB株致弱的关键氨基酸位点。     

常见猪病诊断与控制

伪狂犬(Pseudorabies,PR)又叫奥叶兹基氏病(Aujeszkysdisease,AD)是由伪狂犬病病毒(PrV)又名猪疤疹病毒I型(Suisherpesvirus I)所引起的多种家畜、野生动物、伴侣动物和实验动物的一种急性传染病，其所致症状为神经功能失调、呼吸絮乱及繁殖障碍(流产、死胎及胎儿木乃伊化)，在猪瘟等一些危害严重的传染病得到基本控制之后，猪伪狂犬病已逐渐成为猪的主要传染病之一，经济损失严重。     

致弱过程中高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株部分生物学特性的研究

为了研制高致病性猪繁殖与呼吸综合征(HP-PRRS)弱毒疫苗,将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)HuN4株进行了致弱驯化,在Marc-145细胞上对其进行了3次蚀斑克隆和连续传代.该毒株的病变速度随着代次增高逐渐加快,传至80代以后其病毒滴度达到最高并保持稳定;电镜观察发现低代次病毒粒子形态以棒状为主,高代次病毒粒子形态以球形为主;蚀斑形态比较发现低代次病毒形成的蚀斑大小不一,而高代次病毒形成的蚀斑大小均一;序列分析和病毒抗原性分析表明HuN4株传代过程中GP5蛋白羧基端1个主要抗原表位(196QWGRL200)发生突变即196Q突变为196R,针对该表位的单克隆抗体只与HuN4株低代次病毒反应而不与高代次病毒反应.以上结果表明:在Marc-145细胞上经蚀斑克隆和连续传代致使HP-PRRSV HuN4株部分生物学特性发生改变,这些特性的改变在病毒弱化过程中的作用还有待进一步的研究.     

伪狂犬病病毒YN株的分离鉴定

本试验从患伪狂犬病牛的脑组织中分得一株病毒,通过对其理化学特性、生物学特性和电镜形态学特性鉴定,认定该每株为疱疾病毒科的伪狂犬病病毒,井暂定名为PrV—YN毒株。     

猪伪狂犬病的诊断与病理变化观察

正猪伪狂犬病(Pseudorabies virus,PrV)是由疱疹病毒科疱疹病毒属伪狂犬病病毒引起的多种动物感染和发病的传染病。感染途径主要通过公猪精液、母猪胎盘传播,亦可以水平进行传播。猪是伪狂犬病毒贮存宿主和主要传染源,且以猪的流行状况造成的危害损失最为严重。该病一年四季均可发生,尤其是冬、春季节最为多发,母猪产仔季节也可流行。     

鹅细小病毒弱毒株的培育及其致弱前后全基因组中核酸变异的分析

为制备鹅细小病毒(GPV)弱毒株并研究其传代致弱前后的基因变化情况,本研究将GPV YG株在鹅胚成纤维细胞(GEF)和鸭胚成纤维细胞(DEF)中交替传代培养至72代次,并且对F0、F24、F48和F72代次病毒进行PCR全基因组扩增和测序。序列比对结果显示,F72代与F0代相比,5'和3'非编码区存在163个核苷酸差异,多数集中于反向终端重复序列(ITR)中,5'和3'两端均有6段碱基插入;编码区氨基酸序列比对结果显示,与F0代次病毒相比,F72代次病毒共有23个氨基酸位点突变,18个位于VP蛋白,5个位于非结构蛋白。病毒致病性试验表明,随着传代次数的增加,其毒力呈减弱趋势,并且F72代次病毒进一步致弱。本研究对GPV致弱后基因变化情况的分析及动物致病性试验结果为GPV毒力致弱机制的研究奠定了基础。     

猪伪狂犬病病毒致病机理及其变异的研究进展

猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)属于疱疹病毒I型,可引起家畜和多种野生动物以发热、呼吸道症状和神经症状为特征的急性传染病。文章对猪伪狂犬病病毒的病原特征、临床症状和致病机理进行描述,尤其是对目前已发现的在致病性中存在关键作用的11种主要的糖蛋白,如g E、g D和TK等进行了详细综述,以期为猪伪狂犬病致病机理、基因变异情况和猪伪狂犬病疫苗研究提供依据。