激光捕获显微切割技术的研究进展

介绍了激光捕获显微切割系统（LCM）的原理、发展历程和主要应用,并对目前利用LCM技术存在的瓶颈作了分析和展望。     

染色体显微切割和微克隆技术研究进展

本文对染色体显微切割和微克隆技术的初创、应用和发展前景作文献回顾。     

杨树花药激光显微切割体系的建立

鉴于以往对于杨树雄配子发育的分子调控机制的研究都基于整个花药甚至整个花序的取材,无法提供细胞特异性的表达信息,本研究建立了冷冻切片技术和激光显微切割技术联用分离杨树花药中不同发育时期的小孢子和花粉细胞的技术体系,并对其RNA进行了提取和检测。结果显示RNA的纯度、完整度均达到线性扩增的要求。这可以为更精确地研究杨树雄性生殖细胞发育的分子调控机制甚至为全面解析杨树雄配子发育的调控机制提供丰富的信息。      

激光辅助显微切割技术分离植物细胞研究进展

LAM是一种强大的工具,可用于从获取的生物标本中分离特定的组织、细胞型甚至器官,这有益于RNA、DNA、蛋白质的提取。分析该技术的原理及在植物研究中的重要性和优越性,介绍了LAM的工作原理及发展概况,并对其发展前景进行了展望。     

“牛腿”山羊染色体的研究

染色体是基因的载体，它决定着畜禽性状的发育和遗传信息的传递。开展染色体研究，不仅对生物进化、分类及遗传疾病诊断有重要意义，而且对于提高畜禽生产性状，发掘畜禽生产潜力，开发利用畜牧资源，都具有重要意义。对畜禽染色体的研究，国外在本世纪初已经开始，特别是...     

显微切割技术应用领域及研究进展

综述了显微切割技术在医学、分子病理学、刑侦及植物育种中的应用情况。     

染色体微切割、微克隆技术及其应用

介绍了染色体微切割、微克隆技术的原理及主要方法，并讨论了该技术在植物中的应用。     

黄花梨1号染色体的显微分离

用果胶酶和纤维素酶酶解黄花梨花药制备染色体标本,从大量减数分裂中期1分裂相中选择分散良好的染色体进行拍照和组型分析,建立核型图。根据核型识别目标1号染色体,应用显微操作系统成功进行单染色体分离。     

染色体微切割、微克隆技术及其在植物上的应用

染色体显微切割、微克隆技术是由细胞遗传学通往分子遗传学研究的直接桥梁。本文就其概念、发展现状、应用前景以及在植物染色体研究中存在的困难等进行了综述。     

山羊转人乳铁蛋白基因成纤维细胞和乳腺上皮细胞单克隆的制备及扩大培养

[目的]为探索单个转基因阳性细胞快速扩大培养成为细胞克隆的技术体系。[方法]对转染人乳铁蛋白(Human lactoferrin,hLF)基因乳腺特异性表达载体pBLM-C1的单个山羊胎儿成纤维细胞(Fetal Fibroblasts,FF)和乳腺上皮细胞(Mammary Gland Epithelial,MGE)细胞进行克隆。在96孔板中,首先用3种浓度(V/V:0、50%和100%)的适应性条件培养基对单个转染细胞进行细胞单克隆的制备,进而把转染细胞单克隆与非转染细胞共培养进行扩大培养,neo基因被用于筛选基因,以PCR方法鉴定转染细胞基因组DNA。并对单克隆细胞进行染色体核型分析。[结果]与非适应性条件培养基相比,100%适应性条件培养基能够显著提高细胞单克隆存活率;与对照相比,转染细胞单克隆与非转染细胞共培养,显著提高了转染细胞单克隆扩大培养后的比率(FF:53.33%vs.10.00%;MGE:33.33%vs.6.670%),且明显缩短了扩大培养汇合时间(20～30 d);PCR鉴定结果表明,上述方法获得的克隆细胞整合有hLF目的基因;核型分析表明,大部分细胞克隆染色体正常。[结论]该研究可为分离转基因细胞、理想载体的插入及诊断提供一种可靠的方法,并能节省转基因动物生产的及费用时间。     

山羊A-B导联心电图初探

探索了山羊心电图新的导联方法,结果表明Ａ－Ｂ导联的Ｐ波、ＱＲＳ波群及Ｔ波均比较稳定,波形振幅大,便于分析,为描记山羊心电图的最理想导联。     

云南山羊脑脊髓丝虫病调查研究

 我省多数地区流行着一种以腰部和后肢麻痹为主要特征的疾病,一般称腰麻病。据调查山羊感染率为2-8%。全省有山羊约500万,估计每年发病的山羊在十万头以上。绝大部份的患羊多做淘汰处理,否则常以死亡告终(能康复者仅约20%)。加以种羊患病后失去配种能力。所以此病成为山羊生长与发展的重大障碍。初步认为, 致病的原因是牛腹腔丝虫的童虫寄生在山羊脑脊髓所引起的。我们在元江检查了一万只以上的吸血蝇, 发现吸血蝇体内有指状腹腔丝虫的微丝幼虫, 这在我国是首次发现。试验证明左咪哇治疗本病效果很好。     

贵州白山羊和黔北麻羊TFAM 基因部分外显子多态性研究

利用黔北麻羊和贵州白山羊构建品种DNA池,设计1对引物分别扩增其TFAM基因第2外显子及第1内含子部分序列.PCR产物纯化后进行双向测序,DNAStar和BLAST分析确定多态性位点.利用生物信息学软件分析SNPs位点对TFAM基因RNA二级结构和TFAM蛋白二级、三级结构的影响.结果表明:在羊TFAM基因中筛选到5个SNPs:T 1005C、G1099C、A1130C、G1164C、T1287C,其中T1005C为同义突变,G1099C为错义突变,导致编码的甘氨酸(Gly)变为半胱氨酸(Cys);A1130C、G1164C、T1287C 3个突变位点均位于内含子区.SNPs位点对TFAM基因RNA二级结构和TFAM蛋白结构有一定影响.     

双元细菌人工染色体基因组文库研究进展

酵母人工染色体(YAC)、细菌人工染色体(BAC)是伴随着人类基因组计划的实施而产生的,这些大片段基因克隆载体的应用推动了分子生物学、遗传学等学科的快速发展。以农杆菌介导的直接转化植物为代表的双元细菌人工染色体(BIBAC)载体的发展,加速植物基因组的研究,成为植物基因组分析、基因功能鉴定、染色体结构与功能关系研究的重要工具。介绍了人工染色体文库的发展史,根据建库经验,着重阐述了BIBAC文库的构建、鉴定与应用。     

微卫星标记MCM38在波尔山羊及其级进杂交后代中的遗传多态性的研究

利用经筛选的与产肉性能相关的微卫星引物MCM38,对波尔山羊及其与关中奶山羊级进杂交后代的MCM38基因座进行了多态性分析,分析检测了纯种和F1-F3代中该位点的等位基因频率、杂合度、多态信息含量和有效等位基因数。结果表明,微卫星标记MCM38在波尔山羊及其级进杂交后代中都存在丰富的多态性,其中以F1代多态性最丰富(PIC=0.8441)。本研究表明微卫星标记MCM38可作为肉用山羊生长发育性状候选基因的标记辅助选择,也可为波尔山羊的杂交改良、杂种优势利用、后代标记辅助选择(MAS)提供试验依据。     

长春花碱对鼠单卵裂球染色体标本制备的影响

为了研究长春花碱对鼠单卵裂球染色体标本制备的影响。以长春花碱为纺锤体中期阻断剂,以CZB为基础培养液,研究不同的阻断培养浓度和时间对小鼠4、8-细胞期胚胎单卵裂球中期分裂相数的影响。0.5μg/ml浓度、阻断培养10 h组的4-细胞卵裂球中期分裂相检出率最高,而只有0.5μg/ml浓度6、h组,0.1μg/ml浓度8、h组,0.3μg/ml浓度、8 h组,0.7μg/ml浓度、8 h组,0.1μg/ml浓度、10 h组和0.3μg/ml浓度1、0 h组与最高值组差异不显著;0.5μg/ml浓度、阻断培养10 h组的8-细胞卵裂球中期分裂相检出率最高,而只有0.1μg/ml浓度1、0 h组和0.7μg/ml浓度1、0 h组与最高值组差异不显著;0.1μg/ml浓度8、h阻断培养的4-细胞单卵裂球的中期分裂相的检出率与0.1μg/ml浓度1、0 h阻断培养的8-细胞单卵裂球的差异不显著,其染色体标本的制备质量评分分别为2.7和1.90为确定适宜小鼠早期胚胎单卵裂球的长春花碱处理浓度和阻断培养时间提供了科学依据。     

山羊超数排卵及鲜胚移植研究

采用FSH(促卵泡素 )结合LH(促黄体素 ) ,以 2种组合分别对 1 9只和 1 4只两组供体山羊进行超排处理 ,得到 541枚的排卵结果 ,共回收胚胎 41 1枚 ,受精卵数为 32 0枚。 2种处理方法分别平均取得了 1 8.4枚和 1 3 .6枚的排卵结果 (p <0 .0 5)。将 32 0枚受精卵中的 1 92枚2 ,4和 8细胞胚胎通过手术法分别移植到 96只受体山羊输卵管内 ,每只受体移植 2枚胚胎 ,3种胚龄的胚胎移植后的妊娠率分别为 68.4% ,74.1 %和 84.0 % (p >0 .0 5)。