雌激素α、β受体在雌性山羊星状神经节的分布

【目的】研究雌性山羊星状神经节中雌激素受体(Estrogen receptor,ER)的分布特点,探讨雌性山羊星状神经节神经元对雌激素是否具有反应性。【方法】取雌性山羊星状神经节,制作石蜡切片,经免疫组化SP法染色后,在数码显微镜下拍照,用高清晰图像分析系统对ER的分布特点进行分析,并计算相对表达量。【结果】在星状神经节的神经元胞体、卫星细胞和过路纤维中均有ERα、ERβ免疫阳性产物分布,但主要分布于神经元胞体。在神经元胞体中,细胞膜和细胞质为强阳性染色,而细胞核为弱阳性染色。ERα在神经元胞体中的相对表达量显著高于非神经细胞结构(P0.05),ERβ在神经元胞体中的相对表达量极显著高于非神经细胞结构(P0.01)。【结论】雌性山羊星状神经节神经元具有对雌激素刺激反应的受体,提示星状神经节可能作为雌激素作用于心血管的内分泌途径和自主神经对心血管调节的神经途径之间相互协调的网络节点,从而对心血管系统起调节作用。     

FSH受体在雌山羊腹腔肠系膜前神经节的分布

为探讨雌山羊腹腔肠系膜前神经节是否具备FSH调控胃肠功能活动的条件,取成年雌山羊的腹腔肠系膜前神经节各5对,经免疫组织化学SP法染色后,观察FSH受体在腹腔肠系膜前神经节的分布特点。结果显示,在腹腔肠系膜前神经节内,FSH受体免疫阳性产物主要存在于神经元的细胞质,为强阳性或中等阳性染色,而细胞核呈空泡状,不着色。另外,在神经节内过路纤维、施万细胞中FSH受体呈弱阳性染色。图像分析表明,该神经节内神经元胞体的FSH受体相对表达量极显著高于其他非神经元胞体结构(P0.01)。说明雌山羊腹腔肠系膜前神经节神经元是FSH作用的主要靶细胞,提示FSH可能通过影响腹腔肠系膜前神经节的神经元活动,从而影响其发出的交感节后神经,对胃肠器官功能活动进行调控。     

白细胞介素-18受体在雌性山羊腹腔肠系膜前神经节的分布

旨在探讨雌性山羊腹腔肠系膜前神经节是否存在IL-18受体((Interleukin-18receptor,IL-18R)。取雌性山羊腹腔肠系膜前神经节(Celiac Superior Mesenteric Ganglion,CSMG),通过免疫组化SP法检测IL-18R在CSMG的分布情况。结果显示,雌性山羊CSMG的神经元、卫星细胞和神经纤维均有IL-18R免疫阳性产物分布,且主要分布于CSMG的神经元胞体,说明雌性山羊CSMG具备对IL-18刺激做出反应的条件。提示:雌性山羊CSMG可能是IL-18对胃肠道免疫内分泌调节与神经调节协调的关键点。     

催产素受体在雌性山羊颈前神经节中的分布

【目的】研究催产素受体(Oxytocin Receptor,OTR)在雌性山羊颈前神经节中的分布情况。【方法】以健康未怀孕的成年雌性山羊为研究对象,采用SP免疫组织化学染色法研究雌性山羊颈前神经节中OTR的分布特点。【结果】OTR在雌性山羊颈前神经节中分布广泛,OTR免疫阳性产物主要分布在神经元胞质,有的呈黄褐色,为中等阳性,有的呈棕褐色,为强阳性;细胞核呈空泡状,着色极淡或不着色,为阴性。支持细胞和血管内皮细胞内也有少量OTR阳性产物存在,呈淡黄色,为弱阳性。图像分析表明,颈前神经节内神经元细胞OTR的相对表达量与非神经元差异极显著(P0.01)。【结论】在雌山羊颈前神经节中,OTR主要分布于神经元中,说明颈前神经节的交感节后神经元具备接受OT调节的条件,提示颈前神经节的交感节后神经元可能是OT对头颈部内脏器官进行内分泌调节以及颈前神经节对颈部内脏器官进行神经调节2种途径相互协调作用的节点。     

孕激素受体在雌性山羊肠系膜后神经节的表达

【目的】探究肠系膜后神经节是否对孕激素具有反应性。【方法】试验选取雌山羊肠系膜后神经节,经免疫组织化学SP法,检测孕激素受体（progestogen receptor,PR）在肠系膜后神经节的表达及分布情况。【结果】孕激素受体阳性神经元在雌山羊肠系膜后神经节广泛存在,强阳性产物存在于神经元胞核中,阳性产物存在于整个神经元胞体以及神经元核仁中。在神经节中神经纤维,微血管及毛细血管内皮细胞中也出现了阳性产物。【结论】在雌山羊肠系膜后神经节中存在孕激素受体。     

γ-干扰素受体在山羊颈前神经节的表达

旨在探索山羊颈前神经节是否具备接受γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)作用的条件,是否有IFN-γ受体(interferon-γreceptor,IFNGR)的存在,进而明确神经调节与免疫调节之间的关系。分别取雌雄成年山羊颈前神经节各5对,用免疫组化SP法和PCR方法检测IFNGR在颈前神经节的表达情况。结果表明,在山羊颈前神经节的神经元、卫星细胞和神经纤维均有IFNGR免疫阳性产物分布,但主要分布于神经元胞体,IFNGR在神经元胞体的相对表达量显著高于非神经细胞结构(P0.05)。在山羊颈前神经节扩增到IFNGR1基因的cDNA片段全长376bp,与绵羊、牛、野猪、家兔、褐家鼠IFNGR1基因同源性分别为98%、97%、84%、73%、66%。在山羊颈前神经节中IFNGR主要在交感节后神经元表达与分布,具备对IFN-γ刺激做出反应的条件,提示山羊颈前神经节可能作为IFN-γ对靶器官免疫内分泌调节途径和自主神经对靶器官调节的神经途径之间相互协调的关键点。     

LHR在雌性山羊颈前神经节中的分布

采用免疫组织化学SP法检测促黄体生成素受体(LHR)在雌性山羊颈前神经节(SCG)中的分布特点及表达情况。结果显示,在雌性山羊SCG中,LHR免疫反应阳性物质主要分布在神经元胞体的胞膜和胞质中,为LHR强阳性或中等阳性。部分神经元胞体可见其突起,为LHR中等阳性。图像分析表明,LHR在神经元和非神经元中的表达量呈极显著差异(P0.01)。研究表明,SCG具备接受LH作用的条件,提示LH可能会影响SCG交感节后神经元胞体对其支配的头面部腺体、血管以及眼睛、咽喉等器官的调控作用。     

LH受体在雌性山羊肠系膜后神经节中的分布

【目的】探讨促黄体生成素(LH)是否可以通过影响雌性山羊肠系膜后神经节(CMG)参与动物机体生殖活动的调节。【方法】取5只未怀孕健康成年雌性山羊肠系膜后神经节,于多聚甲醛中固定,经石蜡包埋并制作厚度7μm的连续石蜡切片后,采用免疫组织化学SP染色方法观察雌性山羊CMG中LH受体(LHR)的分布特点,并计算LHR免疫反应阳性细胞的相对表达量。【结果】在CMG中,神经元细胞均为LHR免疫阳性反应,多数细胞呈中等阳性,少数细胞呈强阳性,LHR免疫阳性产物主要分布在神经元的细胞膜、细胞质和细胞核膜上,但细胞核为阴性反应。神经纤维和卫星细胞中的LHR免疫阳性产物为弱阳性表达。神经元细胞上LHR的相对表达量(7.057±0.797)极显著高于其他非神经元细胞(1.497±0.690)(P<0.01)。【结论】CMG中神经元细胞是LH发挥作用的主要靶细胞,提示CMG神经元细胞中存在的LHR可能是协调LH对生殖器官的内分泌调节和自主神经对生殖器官的神经调节的中转站。     

LCGR在山羊星状神经节的分布及其意义

【目的】检测促黄体激素/绒毛膜促性腺激素受体（luteinizing hormone/choriogonadotropin receptor,LCGR）在山羊星状神经节（stellate ganglion,SG）中是否存在,探讨促黄体激素（luteinizing hormone,LH）和绒毛膜促性腺激素（choriogonadotropin,CG）是否可以影响星状神经节的活动。【方法】取雄性和雌性成年山羊的星状神经节各5对,经免疫组织化学SP法后,观察LCGR在星状神经节的分布特点,Image-Pro Plus 6.0 (IPP 6.0)软件图像半定量分析技术,分析星状神经节中的神经元和非神经元的LCGR分布差异。【结果】山羊星状神经节的神经元和非神经元均有不同程度的阳性染色。LCGR强阳性产物分布于神经元的胞质中和神经突起上,但细胞核中无LCGR分布;卫星细胞、血管内皮细胞的胞质中有弱阳性产物,LCGR在神经元和非神经元中的表达量呈极显著性差异（P＜0.01）。【结论】LCGR受体广泛分布于山羊星状神经节中,且主要分布于神经元的细胞质中和细胞膜上,星状神经节具备接受LH和CG调节的条件。     

IFNGR在山羊腹腔肠系膜前神经节的表达

【目的】为了解山羊腹腔肠系膜前神经节（celiac cranial mesenteric ganglion, CCMG）是否具备接受γ-干扰素（interferon-γ, IFN-γ）作用的条件,即是否有IFN-γ受体（interferon-γ receptor, IFNGR）存在。【方法】取健康雌、雄性成年山羊的CCMG,经40 g·L^-1多聚甲醛磷酸缓冲固定液固定4 h后,用自来水冲洗10 h,经梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋后,制作石蜡切片。石蜡切片分4套：第1套做H.E.染色;第2套经脱蜡复水,抗原热修复后,再进行免疫组化SP法染色;第3套经免疫组化SP法染色后用苏木精复染;第4套用作阴性对照组。染色后在光学显微镜下观察记录切片,使用Motic数码显微镜下拍照后,对图片分析处理,计算CCMG的IFNGR相对表达量。将相对表达量数据用SPSS18.0软件分析处理,并利用单因子方差分析（One-way ANOVA, LSD）进行显著性检验。取健康雌性、雄性成年山羊的CCMG,经充分研磨后,使用总RNA提取试剂盒提取总RNA,再以牛的IFNGR1 cDNA序列为模板设计IFNGR1的引物,克隆山羊IFNGR1 cDNA序列并进行扩增。将扩增产物使用琼脂糖凝胶电泳检测是否有目的条带,并进行DNA双向测序。将测序结果在NCBI上进行比对和确认,并与其他的物种的序列进行了同源性比对。【结果】免疫组化染色显示,在CCMG内IFNGR免疫阳性产物分布广泛,在神经元胞体、卫星细胞及神经纤维中均有不同程度的着色。其中神经元均为IFNGR免疫阳性。几乎所有的神经元胞质为黄褐色,IFNGR呈中等阳性,仅有少数神经元胞质染色弱为淡黄色,IFNGR呈弱阳性;在神经元细胞核中,核质部分明显呈棕褐色,IFNGR为强阳性,而核仁染色相对较弱或无着色,IFNGR为弱阳性或阴性。在非神经元结构中,卫星细胞染色呈棕褐色或棕色,IFNGR为强阳性或中等阳性。神经纤维和血管内皮细胞为黄褐色或淡黄色,IFNGR为中等阳性或弱阳性。图像分析表明与其他非神经元结构成分相比,神经元胞体IFNGR的相对表达量差异性极显著（P＜0.01）。PCR检测结果显示,IFNGR1 PCR产物的泳道在300 bp与400 bp处看到一个清晰的白色条带。测序结果显示,在山羊CCMG中克隆出了376 bp的IFNGR1的部分cDNA序列。通过在NCBI上与其他物种的基因序列同源性比对显示,这段序列与绵羊的同源性最高（98%,XM_004011371.1）,其次为牛（97%,NM_001035063.1）,野猪（84%,NM_001177907.1）,家兔（73%,XR_085137.1）,与褐家鼠（66%,NM_053783.1）的同源性最低。【结论】在山羊CCMG中有IFNGR的表达与分布,并且IFNGR主要在交感节后神经元表达与分布。所以CCMG具备对IFN-γ刺激做出反应的条件,CCMG的交感节后神经元可能是 IFN-γ作用的主要靶细胞,提示山羊CCMG可能作为IFN-γ对胃肠道免疫调节途径和自主神经对胃肠道调节的神经途径之间相互协调的关键点。