鸡胚胎代用蛋壳及异体胚盘移植孵化的研究

对鸡胚胎蛋壳培养的研究结果显示 :( 1 )在± 4 5°的转角下 ,不同体积的代用蛋壳的胚胎发育率 ,普通蛋代用蛋壳前 6d的胚胎发育率 ( 48.5% )显著高于双黄蛋代用蛋壳 (平均 2 2 .7% ) ,但是 ,双黄蛋代用蛋壳的孵化率 ( 8.3 % )显著高于普通蛋代用蛋壳。普通蛋代用壳无小鸡孵化 ,说明普通蛋壳对于移植等量鸡胚后期的发育空间不够。( 2 )双黄蛋作为代用壳时 ,可以不添加任何物质。( 3 )换蛋壳培养鸡胚胎 ,转蛋角度± 4 5°比± 3 0°的效果要好。异体胚盘移植结果显示 :同一动物间的同功物质具有通用性 ,异体胚盘移植鸡胚可以继续发育。     

兽医临床皮肤移植的研究进展

<正>在兽医临床上,家畜皮肤的大面积撕裂缺损创、蜂窝织炎引发的大面积皮肤坏死、重度的皮肤烧伤等,皮肤缺损处常以肉芽组织赘生,长期不愈合,形成大的瘢痕和引发运动障碍。因此,皮肤移植在修复家畜大面积皮肤缺损创中具有重要意义。     

一例皮肤型鸡痘病诊治

鸡痘病是养鸡业中的消耗性病毒病,每年初春和深秋季节都发生大范围流行,依临床侵害部位可表现好几个类型,常见的黏膜型．皮肤型危害最大,因l临床上死亡率低或没有死亡常被忽视。皮肤型痘病的特点是,病程长,吃药多,生长停滞,因而是消耗性损失大的慢性传染性病。一个痘看来简单,极易继发感染,不仅影响肉鸡的生长．严重的会因继发感染导致死亡,造成经济损失。     

一例犬咬伤所致皮肤大面积坏死皮瓣移植病例的诊治

一例4岁雌性杂交犬因咬伤所致皮肤大面积坏死而入院诊治,临床检查基本生命体征未见异常,血液检验白细胞显著升高,感染、坏死严重。通过彻底剔除坏死组织后行皮瓣移植术,病犬术后30d创口完全愈合。体会:皮瓣移植时游离皮瓣面积以创缘部能吻合为度,必要时可在垂直于张力方向作减张切口;严重创伤和感染需注意纠正低蛋白血症。     

受体胚龄对鸡原始生殖细胞移植后归巢的影响

【目的】探究受体胚龄对鸡原始生殖细胞(Primordial germ cell,PGC)移植后归巢的影响,确定最佳回注时间窗口,为提高转基因鸡的生产效率提供参考依据。【方法】从广西黄羽鸡胚分离获得PGC,体外培养并进行转基因操作后,移植回注到不同胚龄的受体鸡胚中,移植5 d后分离性腺拍照观察,对比受体鸡胚孵育至14HH~17HH时对PGC迁移归巢到性腺的影响。【结果】分别在14HH~17HH胚龄时移植回注PGC,移植5 d后的鸡胚死亡率为30.0%~60.9%,但不同移植胚龄间的差异不显著(P>0.05)。根据鸡胚性腺中的GFP阳性细胞数可划分为6个等级(I~VI),且随着移植胚龄的增加,PGC迁移效率呈下降趋势。14HH胚龄移植的鸡胚性腺GFP阳性细胞集中在V级(40.0%),15HH胚龄移植的集中在III级(42.1%),16HH和17HH胚龄移植的则集中在II级(45.4%和54.5%),GFP阳性细胞含量最高等级(VI级)仅出现在14HH胚龄移植的鸡胚性腺中。【结论】随着受体胚龄的增加,PGC迁移效率呈下降趋势,但鉴于实际操作的难易程度,确定PGC移植回注的最佳时间窗口为14HH鸡胚(孵育50 h)。     

鸡跗,膝,髋关节部皮肤初级传入纤维向脊髓的投射—HRP法

将ＣＢ－ＨＲＰ分别注入鸡跗关节骨外侧皮肤、膝关节外侧皮肤和髋关节侧的皮肤内，逆行其追踪其初级传入神经元的及初级传入纤维向脊髓的投射。结果：１。跗关节皮肤的初级传入神经元胞体位于同侧Ｔ６－Ｓ５脊神经节内，以Ｓ２节为最高峰，Ｌ２节为１较低的峰，两峰间为１低谷。２膝关节外侧皮肤的初级传入神经元胞体位于Ｔ４－Ｓ５脊神经节内，集中在Ｔ４－Ｌ４节内，高峰位于Ｌ３节。３．髋关节背侧皮肤的初级传入神经元胞体位于同     

鸡痘的治疗

鸡痘一般分为两种类型:一种是皮肤型,主要发生在鸡的无毛部位,如鸡冠、肉髯和眼睑等处.     

增益素对鸡细胞免疫功能的影响

给8周龄鸡人工感染传染性法氏囊病病毒(IBDV),破坏鸡的法氏囊器官,从而造成鸡的免疫缺陷。在9周龄时,实验组1饲喂增益素,实验组2接种鸡新城疫(ND)油乳剂疫苗,通过测定淋巴细胞转化率来监测细胞免疫效果。结果表明,饲喂过增益素的鸡外周血T淋巴细胞活化指数增加的百分数高于仅接种ND疫苗的鸡(P<0.01),说明增益素对感染了传染性法氏囊病病毒的鸡细胞免疫有增强作用。     

同种异体气管移植的病理学研究

目的：探讨同种异体气管移植的临床效果及吻合口病理学变化。方法异体羊新鲜心包经过0.625％戊二醛处理后，包绕6 cm Sigma不锈钢丝网支架，制成人工气管。切除实验用羊颈段气管5 cm，人工气管与实验羊断端气管头尾端吻合。手术后60、120、180 d行支气管镜检查、X线片检查，定期处死实验羊行人工气管病理学检查，观察人工气管、吻合口愈合、血运及肉芽组织情况。结果人工气管可以诱导受体羊气管周围组织生成气管样组织，填充缺损区。60 d，移植区上皮组织不明显；120 d，移植区覆盖有部分纤毛柱状上皮，气管各层次比较完整；180 d，黏膜层有纤毛柱状上皮覆盖，黏膜下层、外膜等小血管丰富，移植区气管各层次完整。结论人工气管可以诱导受体羊气管周围组织生成完整的气管样组织，气管各层次比较完整，实验动物有望长期存活。     

皮肤型鸡痘病de诊断要点及防制措施

一、皮肤型鸡痘病的诊断要点 皮肤型鸡痘根据流行季节和鸡痘形成的特征性痘疹,诊断鸡痘较容易.黏膜型鸡痘需要与鸡传染性喉气管炎、传染性支气管炎、新城疫、传染性鼻炎及霉形体病等进行鉴别诊断.在剖检中,根据口腔、咽喉头、气管等黏膜上的痘疹和坏死性假膜,大致可以诊断为鸡痘.     

重组人白介素-10对兔皮肤移植排斥反应及外周血T细胞亚群的影响

目的 观察重组人白介素-10（rhIL-10）对白兔皮肤移植排斥反应及外周血T细胞亚群的影响.方法 36只白兔随机等分为供体组和受体组,再将18只受体白兔随机分为rhIL-10组（5、10μg·kg-1·d-1）、环孢素（CsA）阳性对照组（5、10 mg· kg-1·d-1）、rhIL-10＋ CsA联合组（5μg·kg-1·d-1 hIL-10＋5 mg·kg-1·d-1 CsA）、生理盐水阴性对照组（1 mL/d）.在移植前1d至术后8d连续肌注药物,观察各组皮片移植排斥反应情况及外周血CD4＋和CD8＋细胞数、CD4/CD8细胞比值.结果 rhIL-10组排斥反应发生时间比阴性对照组延长（P＜0.05）,而rhIL-10＋ CsA组排斥反应发生时间比低剂量rhIL-10及CsA组延长（P＜0.05）.在发生急性排斥反应时,CD4＋细胞数及CD4/CD8细胞比值升高,在皮片坏死时达到峰值.结论 rhIL-10可抑制白兔皮肤移植排斥反应,CD4/CD8细胞比值有助于监测排斥反应发生.     

一起麻鸡皮肤型鸡痘的诊断及病原分离鉴定

采用PCR检测、动物回归试验、病原分离鉴定、病理组织学观察和间接免疫荧光检测等方法,对一起疑似鸡痘病毒(FPV)感染的临床病例进行了系统的分析.结果表明:PCR扩增结果为阳性;将病料处理上清液经尿囊膜途径接种SPF鸡胚,可见尿囊膜上形成有灰白色突起的痘斑;将分离获得的病毒以背部接种1月龄的SPF雏鸡,感染雏鸡表现精神萎靡,食欲减退,在接种部位出现典型的痘疹,出现与自然感染病例相类似的临床症状;采集攻毒感染SPF雏鸡各组织器官进行病理组织学观察和IFA检测,仅在感染部位皮肤的胞浆内见有特异性的嗜酸性病毒包涵体及绿色荧光信号,而其他组织脏器未见有阳性反应.确诊该起病例为鸡痘病毒感染所致的皮肤型鸡痘.     

马立克氏病鸡皮肤（羽囊）琼扩抗原的研制及应用

利用马立克氏病病、死鸡的皮肤（羽囊）打碎、制成ＭＤ琼扩抗原。结果表明，自制的ＭＤ皮肤（羽囊）琼扩抗原与参考抗原检查ＭＤ抗体的敏感性和特异性相同，以皮肤琼扩抗原制造方法简单，并且可制造更多的ＭＤ琼扩抗原。     

RP-HPLC法测定鸡血浆中头孢拉定浓度

鸡血浆样品用甲醇沉淀蛋白后,过DikmacC18柱(100mm×4.6mm,5μm),柱温:室温;流动相:甲醇-0.02mol/L乙酸胺缓冲液(28∶72),pH4.9;流速:1.0mL/min;检测波长:254nm;检测器:紫外检测器;进样量:10μL。结果表明,检测线性范围为0.5～32.0μg/mL(r=0.9999);最低检测浓度为0.25μg/mL;回收率分别为92.5%、96.4%、98.9%;日内和日间变异系数均小于5%。该方法操作简便、灵敏、重现性好,适用于头孢拉定的临床药代动力学研究。     

鸡Wnt3a的SNPs筛选及其与皮肤毛囊密度性状关联分析

目的 Wnt信号通路在动物皮肤毛囊的发生发育中具有重要作用, 前期研究结果表明Wnt3a可能是影响鸡皮肤毛囊密度性状的重要候选基因。为进一步验证Wnt3a在皮肤毛囊生长发育中的作用, 研究以金陵花鸡为研究对象, 筛选Wnt3a SNPs, 并分析其与毛囊密度性状的相关性, 以期找到对皮肤毛囊密度有显著影响的分子标记, 为培育屠体美观的屠宰型肉鸡的“分子编写育种”提供参考。方法 采用PCR扩增直接测序法对Wnt3a 的SNPs位点进行筛查, 分析单个SNP标记与皮肤毛囊密度性状的相关性。采用Haploview软件分析这些SNP位点的连锁不平衡（LD）程度, 并分析不同单倍型组合与毛囊密度性状的相关性。结果 共发现14个SNP位点, 在第2外显子发现1个SNP位点（SNP1）, 为同义突变;第2内含子发现4个突变位点（ SNP2—SNP5）, 在第3内含子发现9个SNP位点（SNP6—SNP14）。卡方检验表明, 第2外显子的1个突变位点（SNP1）和第2内含子的3个突变位点（SNP3—SNP5）的3个位点均处于哈代-温伯格平衡状态（P>0.05）, 第3内含子的9个SNPs（SNP6-SNP14）偏离哈代-温伯格平衡（P<0.05）。SNP1—SNP5的He均小于0.50, PIC均小于0.25, 这5个SNP位点遗传多样性较低。第3内含子的9个突变位点, SNP6、SNP7、SNP9位点PIC<0.25, 其他6个突变位点 0.25< PIC<0.5, 为中度多态。单标记关联分析表明, 公、母鸡SNP2位点的AG基因型的毛囊密度显著高于GG基因型（P< 0.05）;母鸡SNP8位点的AA与GG基因型的毛囊密度显著高于AG基因型（P < 0.05）, 在公鸡中3种基因型的毛囊密度差异不显著。14个SNPs连锁不平衡分析表明, SNP3、SNP4和SNP5的强连锁产生了2种单倍型, H1（GAT）频率为0.882和H2（TCC）频率为0.118;SNP6—SNP13之间的强连锁产生了5种单倍型, 其中H1（ACATTATC）和H2（ACGTCCCA）, H3（ACGTTCCA）, H4（GTGCTATA）, H5（ACGTCCCC）, 单倍型频率分别为0.469、0.275、0.123、0.113、0.014。SNP3、SNP4和SNP5连锁产生的2 种单倍型组合后产生了3种单倍型组合, 关联分析发现在公、母鸡中3种单倍型组合的毛囊密度均差异不显著;将SNP6—SNP13连锁产生的5种主要单倍型组合后, 公鸡有7种组合单倍型组合, 毛孔数量差异不显著;母鸡有8种主要单倍型组合, 其中H1H1（AACCAATTTTAATTCC）毛囊密度最大。SNP2和SNP8位点与皮肤毛囊密度显著相关, 单倍型组合H1H1（AGAA）、H1H2（AGAG）为母鸡优势单倍型。结论 筛选到Wnt3a的14个SNPs位点, 其中, SNP2（rs2587721 G >A）和SNP8（rs2555967G>A）位点与毛囊密度显著相关, 8个SNPs（SNP6—SNP13）位点处于强连锁不平衡, 母鸡H1H1单倍型毛囊密度最大。Wnt3a的SNP2和SNP8位点的单倍型组合H1H1（AGAA）、H1H2（AGAG）和SNP6—SNP13连锁产生的H1H1（AACCAATTTTAATTCC）单倍型组合与母鸡毛囊密度显著相关, 可以为鸡毛囊密度“分子编写育种”提供重要遗传信息。     

鸡波氏杆菌的毒力试验

本文介绍了鸡波氏杆菌对鸡胚、雏鸡、小白鼠、幼兔的毒力试验。结果表明，鸡波氏杆菌可致鸡胚、雏鸡、幼兔、小白鼠发病、病程为急性经过，呈出血性败血症病变，从病程和病变可看出，鸡胚、幼雏、家兔的日龄与抵抗力成正相关、1月龄以上的鸡有较强抵抗力，呈隐性带菌，通过成年兔，豚鼠的汞氏皮内反应表明鸡波氏 力可产生毒性很强的坏死毒素。