犬冠状病毒的分离鉴定及其纤突蛋白基因的克隆与序列比较

以犬胎原代细胞，采用同步接种、带毒传代和添加新细胞的方法，从１例腹泻犬脾脏和１例临床健康犬肠内容物中分离出２株犬冠状病毒（ＣＣＶＹＳ１，ＣＣＶ ＣＩ１）。该２株病毒可使ＣＲＦＫ细胞出现典型的细胞融合病变，与从美国引进的ＣＣＶＮＬ－１８参考株形成的细胞病变相似；电镜负染和超薄切片观察，分离毒株细胞培养物中均含有典型的冠状病毒粒子，并形成胞浆内包涵体；经理化学、生物学鉴定，濉有ＣＣＶ的特性；间接免疫荧     

犬冠状病毒感染

犬冠状病毒感染高偲琥（兰州路铁公安局警犬基地武威南７３３００９）（一）概况犬冠状病毒（简称ＣＣＶ）感染，是以胃肠道炎症为主要症状的传染性疾病。１９７１年美国从腹泻的德国军犬中检出首例犬的冠状病毒，之后在美国（１９７５，１９７９）、德国（１９７５）、英...     

犬冠状病毒病的病原,诊断及免疫研究进展

犬冠状病毒病是由犬冠状病毒（ＣａｎｉｎｅＣｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ，ＣＣＶ）引起犬发生的一种以胃肠炎为主要症状的高度接触性传染病。该病最初由Ｂｉｎｎ等［１］首先报道。血清学调查研究发现，该病呈世界性分布，我国也有军犬、警犬、实验犬和民用犬的发病报道，且有流行趋势。犬冠状病毒病在临床上主要表现为呕吐、血便和严重脱水，对幼犬危害严重，发病率和死亡率都很高，是当前对养犬业危害较大的疾病之一。目前国内随着犬瘟热、犬细小病毒性肠炎等疫苗的研制成功和广泛应用，犬这些急性恶性传染病已基本得到了控制，但对于犬冠状病…     

ELISAA法检测犬腹泻粪样中的犬冠状病毒

用ＦＥ细胞增殖犬冠状病毒（ＣＣＶ）参考株，分别免疫家兔和ＢＡＬＢ／ｃ小鼠制备ＣＣＶ多抗和单抗，建立了夹心ＥＬＩＳＡ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断方法。在检测的８４例犬腹泻粪样中，多抗、单抗夹心法显示ＣＣＶ阳性１６例，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阳性１３便，后１３例包括在前１６例中，从８４例腹泻犬粪样中随机取３例作ＣＣＶ、犬细小病毒（ＣＰＶ）双项检测，ＣＣＶ阳性１６例，ＣＰＶ阳性６例，ＣＣＶ、ＣＰＶ混合感染４例。结     

检测犬冠状病毒中和抗体的方法与应用

在２４孔组织培养板上应用从美国引进的犬冠状病毒（ＣＣＶ）参考株ＮＬ１８与猫肾传代细胞（ＣＲＦＫ）,采用固定病毒（１００ＴＣＩＤ５０）稀释血清法建立了ＣＣＶ中和试验。运用该方法测定了１４２条群养犬和３５条散养犬的中和抗体水平,以１∶４作为阳性血清的判定标准,群养犬与散养犬的血清阳性率分别为１００％和８２９％;测定了母犬的血清与乳汁、所产仔犬及仔犬脐带血的ＣＣＶ抗体效价,证实母犬可以通过胎盘及乳汁将抗体转移给仔犬,吮食乳汁是仔犬获得母源抗体的主要途径。本试验从抗体水平上证实我国的犬已发生ＣＣＶ感染。     

ELISA法检测犬腹泻粪样中的犬冠状病毒

用ＦＥ细胞增殖犬冠状病毒（ＣＣＶ）参考株，分别免疫家兔和ＢＡＬＢ／ｃ小鼠制备ＣＣＶ多抗和单抗，建立了夹心ＥＬＩＳＡ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断方法。在检测的８４例犬腹泻粪样中，多抗、单抗夹心法显示ＣＣＶ阳性１６例，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阳性１３例，后１３例包括在前１６例中。从８４例腹泻犬粪样中随机取３８例作ＣＣＶ、犬细小病毒（ＣＰＶ）双项检测，ＣＣＶ阳性１６例，ＣＰＶ阳性６例，ＣＣＶ、ＣＰＶ混合感染４例。结果显示，在南京地区流行的犬腹泻中，ＣＣＶ感染比例有超过ＣＰＶ的趋势。     

犬冠状病毒在我国首次分离成功

犬冠状病毒在我国首次分离成功犬冠状病毒（ＣＣＶ）是引起犬急性传染性胃肠炎的病原之一，但病毒分离一直未能成功。１９９５年６月解放军农牧大学军事兽医研究所犬病研究中心和校中心实验室分别应用ＭＤＣＫ、Ａ７２、ＣＲＦＫ、ＭＤＢＫ等细胞，采用胰酶处理、同步接毒...     

犬冠状病毒压力灭活苗的制备与应用研究

使用静水压高压灭活的方法制备犬冠状病毒（ＣＣＶ）蜂胶佐剂灭活苗,将此灭活苗免疫接种易感犬,同时以ＣＣＶ甲醛灭活苗作对比试验。结果表明,ＣＣＶ压力灭活苗安全可靠,其诱导试验犬产生中和抗体的能力明显高于该病毒的甲醛灭活苗,临床应用证明该灭活苗可以控制犬冠状病毒笥肠炎的发生与流行。     

犬冠状病毒超免疫血清的制备及应用

采用犬冠状病毒（ＣＣＶ）弱毒株和强毒株多次免疫健康犬，采集超免疫血清，其ＣＣＶ血清中和（ＳＮ）抗体效价高达１：２１０。试验结果表明，该超免疫血清安全、特异，无毒副作用，每只幼犬注射１．５ｍＬ／ｋｇ体重的该血清即可使９０％以上的犬获得１０￣１５ｄ的被动免疫保护；对１１０只患ＣＣＶ性肠炎病犬的临床治疗结果表明，该超免疫血清治疗效果可靠，其治愈率达９４％。     

口鼻接种后犬的CCV感染

本文对口鼻接种后至１４天的１０周龄幼犬的犬冠状病毒（ＣＣＶ）感染的发病机理进行了研究。     

ELISA双抗体夹心法诊断犬冠状病毒肠炎

从冠状病毒（ＣＣＶ）阳性病犬粪便提取物中提纯抗原，制备豚鼠抗血清，用饱和硫酸铵盐析法粗提，再经ＱＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０离子柱层析，提取ＩｇＧ，以辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记，制备酶标抗体，按ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法操作术式，建立检测犬冠状病毒的ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法，诊断犬冠状病毒肠炎粪样，并以电镜检查比较，证明该法特异、敏感，可在４小时内报告结果。     

犬冠状病毒YS1株的致弱驯化与免疫试验

应用猫肾传代细胞（ＣＲＦＫ）单层接毒方法将犬冠状病毒（ＣＣＶ）强毒ＹＳ１株连续传代驯化至６０代,经安全性试验和免疫原性测定,该强毒株已驯化对弱毒水平,对犬安全,免度原性良好。     

犬冠状病毒YS1株人工感染犬试验

使用从腹泻犬体内分离获得的犬冠状病毒ＹＳ１第５代ＣＲＦＫ细胞培养物,以不同剂量人工感染５０只２￣３月龄健康幼犬 ,１４ｄ内计有１６只犬发病,其中１４只耐过,２只死亡,发病率为３２％,死亡率为１２．５％,患犬粪便经电镜检查和ＲＴ－ＰＣＲ检测,前者见有ＣＣＶ样病毒,后者扩增出ＣＣＶ特异核酸片段。４８只试验犬血清对该病毒的ＳＮ抗体效价随接毒量的不同分别平均为１：３１０、１：２４５、１：１８５、１：１１５     

犬腺病毒免疫的研究情况

犬腺病毒（Ｃａｎｉｎｅ ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ， ＣＡＶ）属于腺病毒科成员，是在已发现的哺乳动物腺病毒属中致病性最强、感染动物最广的单分子、线状、双股ＤＮＡ病毒，其１型（ＣＡＶ－１）主要引起犬传染性肝炎和熊、狐脑炎；２型（ＣＡＶ－２）主要引起犬科动物传染性喉气管炎和传染性腹泻。犬腺病毒广泛分布于全世界，是对我国养犬业、毛皮动物养殖业危害最大的疫病之一。本文就ＣＡＶ的主动免疫和被动免疫作一简介。１犬腺病霉的主动免疫 人工接种疫苗是防制本病的根本方法。１．１ＣＡＶ－１灭活苗 Ｒｕｂａｒｔｈ和Ｇｒｅｅｎ等人…     

犬冠状病毒分子生物学研究

本研究根据Ｗｅｓｓｅｌｉｎｇ发表的犬冠状病毒（ＣＣＶ）Ｋ３７８株纤突蛋白（Ｓ）基因序列，设计合成了４条寡聚核苷酸引物Ｐ１（１８ｂｐ，１５２０－１５３７ｂｐ），Ｐ２（１９ｂｐ，２０７２－２０９０ｂｐ）和Ｐ３９（２０ｂｐ，２６２１－２６４０ｂｐ），Ｐ４（２０ｂｐ，２９４４－２９６３ｂｐ），以Ｐ１，Ｐ２和Ｐ３，Ｐ４为引物，以美国ＣＣＶＮＬ－１８株反转发产物为模板，建立了ＣＣＶＲＴ－ＰＣＲ方法，并将其中纯     

北京地区腹泻犬细小病毒感染情况调查

在校动物医院用试剂盒对１３６例门诊腹泻犬粪便进行犬细小病毒（ＣＰＶ）检验，其中阳性７２例（阳性率５２．９％）。阳性病例中，公犬占５２．４％，母犬占５１．６％，因此ＣＰＶ感染与犬性别无关。ＣＰＶ阳性率，以２－４月龄犬为最高（６０．３％），５－６月龄次之（１７．６％），７月龄以后较少。未注射或未按程序注射ＣＰＶ疫苗犬，ＣＰＶ检验阳性率高，即使按程序接种ＣＰＶ疫苗的犬，也仍有感染ＣＰＶ的，其原因有待研究     

北京地区腹泻犬细小病毒感染情况调查

在校动物医院用试剂盒对１３６例门诊腹泻犬粪便进行犬细小病毒（ＣＰＶ）检验，其中阳性７２例（阳性率５２．９％）。阳性病例中，公犬占５２．４％，母犬占５１．６％，因此ＣＰＶ感染与犬性别无关。ＣＰＶ阳性率，以２～４月龄大为最高（６０．３％），５～６月龄次之（１７．６％）。７月龄以后较少。未注射或未按程序注射ＣＰＶ疫苗犬，ＣＰＶ检验阳性率高，即使按程序接种ＣＰＶ疫苗的犬，也仍有感染ＣＰＶ的，其原因有待研究．     

犬2型腺病毒对犬的口服免疫研究

对未经犬腺病毒免疫的两月龄左右杂交狼犬，随机分为６组每组５只，另设５只对照，用作者分离鉴定和致弱驯化的犬喉气管炎病毒的第６０代ＤＫ细胞培养物（ＳＹＣＡＶ－２－ＤＫ６０）对犬进行免疫试验，在免疫第４周采血分离血清，测定犬腺病毒的血凝抑制抗体（ＨＩ）效价，结果３０只试验犬全部产生了ＨＩ抗体，表明ＳＹＣＡＶ－２可通过口服或饵料的途径对犬实施免疫，为犬口服联合疫苗以及犬２型腺病毒为勒体的口服狂犬 －腺病毒     

犬病毒性肠炎与冠状病毒病并发的诊治

犬病毒性肠炎与犬冠状病毒病是目前常见的重要传染病。其临床主要特征为呕吐和腹泻。该病的发生无明显的年龄、性别、品种之分，各年龄犬都可感染，但幼犬先发病，然后很快波及其他年龄的犬。病犬的粪、尿、呕吐物和康复犬的粪便为主要传染源，其传播途径主要是通过污染的饲料、饮水，经消化道传染。二者常合并感染，使病程加剧，常于1．2d内死亡，死亡率达到90％以上。     

犬瘟热、犬细小病毒特异转移因子的研究

以免疫犬脾为原料，应用静置透析法，制备了犬瘟热、犬细小病毒特异转移因子（ＣＰＶ，ＣＤＶ—ＳＰＴＦ），并进行了理化性质及生物学特性检测。结果表明：ＣＰＶ；ＣＤＶ—ＳＰＴＦ无菌、无热原、无过敏性、不含大分子蛋白质、能增加受体Ｔ细胞比值、特异性提高ＣＰＶ、ＣＤＶ抗体水平，和疫苗联用时有协同作用，增强疫苗效果，具有对细胞免疫和体液免疫的双重调节作用。