酶联免疫吸附试验（ELISA）在畜禽饲养及疾病诊断中的应用

酶联免疫吸附试验（enzyme-1inked immunosorbent assay，ELISA）是把抗原抗体反应的特异性和酶的高效催化作用有机结合起来的一种非放射性标记免疫检测技术。自1971年瑞典学者Engval1和Perlmann,荷兰学者Van Weeman和Schuurs建立这种检测方法以来，随着单克隆抗体技术和酶标记技术的发展与应用，市场上已出现了各种各样的商品化ELISA试剂盒，广泛应用于临床医学、动植物食品检验、生物学研究等领域。本文主要是对ELISA的方法及其应用作一介绍，旨在促进该技术在畜禽饲养及传染病诊断方面的应用和推广。     

从第十一届世界禽病国际大会看禽病研究发展方向

一.以单克隆抗体、聚合酶链反应(PCR)、限制性酶切片段分析(RFA)以及基因表达为代表的分子生物学技术日趋成熟,并逐步进入常规化应用,标志着禽病诊断和疫苗研制技术已进入分子生物学时代。 以单克隆抗体为基础的ELISA检测技术,已作为多种禽病的标准诊断方法被OIE等国际组织所采纳。此次会议上,匈牙利,特别是瑞典的学者报道了用单克隆抗体阻断ELISA检测新城疫病毒、禽腺病毒、禽传染性支气管炎病毒以及支原体等病原的特异性抗体的方法,中国学者则报道了用单克隆抗体双抗夹心法ELISA检测新城疫病毒的方法。 本次会议的论文摘要集共收入论文摘要374篇,其中35篇是有关基因和表达方面的文章,占摘要总数的9.36％,研究内容包括PCR检测技术、重组病毒疫苗及其免疫效果、核酸(DNA)疫苗、限制性酶切分析在病原鉴定方面的应用等等。荷兰和德国的学者报道了他们用PCR方法鉴别新城疫病毒致病力的研究。     

ELISA技术及其在禽病诊断中的应用

ELISA,在1971年最初建立时称为酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay),在国内有人译作酶联免疫吸附试验,它是一种免疫测定,是把抗原抗体反应的特异性和酶的高效催化作用有机结合起来的一种非放射性标记免疫检测技术。近年来,随着单克隆抗体技术和酶标记技术的发展与应用,市场上已出现了各种各样的商品化ELISA试剂盒,广泛应用于临床医学、动植物食品检验、生物学研究等领域。本文主要是对ELISA技术的基本原理、类型、影响因素及其目前在禽病诊断中的应用加以综述。1ELISA技术简介1.1ELISA基本原理ELISA是以免疫…     

基于ELISA技术检测流感病毒的研究进展

流行性感冒是流感病毒引起的传染性强、传播速度快的呼吸道感染疾病。酶联免疫吸附检测(ELISA)技术灵敏度高、特异性强、操作简单等优点,受到人医、兽医、食品、化学等领域科研工作者的青睐;为了更快发现和了解流感的踪迹,科研工作者建立了不同的ELISA技术用于检测流感病毒。文章综述国内外检测流感病毒的ELISA技术研究进展,指出了ELISA技术在实践应用中存在的部分问题,为ELISA检测流感病毒方法的建立提供参考,并对该技术的应用前景进行了展望。     

免疫酶技术在弓形虫病诊断和流行病学调查中的应用

近年来,免疫酶技术以其高度的特异性和敏感性,在弓形虫病诊断和流行病学调查中得到了广泛应用,从而推动了弓形虫病的防治研究进入了一个新阶段。本文就几种常用的免疫酶方法在弓形虫病的应用概述如下: 一、酶联免疫吸附试验(ELISA) 1971年Engvall和Van Weeman等首次创立ELISA技术。其基本原理就是用酶催化底物反应的生物放大作用,提高抗原抗体免疫学反应的检测敏感性。Volley等首先将ELISA用于检测弓形虫病患     

囊虫病免疫诊断检测方法的研究进展

由于科学技术的发展,囊虫病免疫诊断检测方法有了很大的进展,主要有1.免疫学检测方法,包括酶联免疫吸附法(ELISA)、斑点酶联免疫吸附法(Dot-ELISA)、生物素-亲和素酶联免疫吸附法(BAS-ELISA)、单克隆抗体酶联免疫吸附试验(McAb-ELISA)、酶联免疫印渍技术(ELIB);2.基因检测技术,包括DIG标记DNA探针、细胞因子基因检测方法、基因重组技术;3.免疫试剂盒的应用,包括循环抗原酶联免疫试剂盒、猪囊虫短程抗体IgG4快速ELISA检测试剂盒等。     

应用葡萄球菌蛋白A的酶联免疫吸附试验用作检测病毒抗体

研制了一种用辣根过氧化物酶标记葡萄球菌蛋白A的改良间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。用辣根过氧化物酶标记蛋白A结合物取代抗球蛋白酶结合物作间接酶联免疫吸附试验,检测马、牛、猪、猫、狗、兔和人血清中的病毒抗体。该试验结果与血清—病毒中和试验作比较。并讨论了在实验室中应用该试验对各种动物血清作血清学试验的可能性。自从在1971年Engvall和Perlmann与Van Weemen和Schunrs研制了酶联免疫吸附试验(ELISA)以来,该方法已广泛用于抗体或抗原的检测。因为ELISA和放射免疫测定法同样敏感,且所用试剂稳定,又不需要复杂设备,故当今已于许多诊断实验室中应用。与大多数其它常用方法比较,ELISA方法价廉、快速、简单。各种改良ELISA试验证明是有用的,特别间接方法适用于传染病研究。然而,因为许多实验室工作用各种动物血清,故需要各种抗球蛋白酶结合物,而商业上制备的结合物种类是有限的。显然,如果有一种能够检测各种动物免疫球蛋白的结合了酶的试剂,将大大促进了间接ELISA试验的多种用途。虽然早已知道葡萄球菌蛋白A与大多数动物种类的IgG结合,但这种现象得到广泛应用仅仅是近年的事。在放射免疫电泳,免疫铁蛋白技术和免疫荧光试验中,这种蛋白已用作代替抗IgG血清。本报告的目的是叙述在间接ELISA方法中,酶标记蛋白A的应用。这种改良方法用单一种试剂可以检测多种动物的抗体。强调了此种方法便于对多种动物病进行实验室诊断。     

应用斑点酶联免疫吸附试验快速检测羊胴体中的沙门氏菌

沙门氏菌是一种常见的人畜共患性病原菌，EastAnglia大学的研究表明，沙门氏菌在适宜条件下能迅速繁殖，对人和动物的健康构成严重的威胁。人的大多数沙门氏菌感染直接或间接地与所食的动物性食品有关，且致病因素复杂多变。近年来，人和动物的沙门氏菌感染十分严重。为此，许多学者致力于沙门氏菌检验方法的研究，目前已有细菌的分离培养鉴定技术、常规ELISA法、SPA-协同凝集试验和PCR。在继承了常规ELISA方法优点的基础上，在20世纪80年代初建立和发展了一种新型的免疫酶标记技术，即酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA检测法)。应用斑点酶联免疫吸附试验诊断方法快速检测羊胴体中的沙门氏菌与常规分离培养检测比较，不仅简便，快捷，而且安全、可靠。现将此法介绍如下。     

酶联免疫吸附试验在禽病学中的应用

酶联免疫吸附试验(ELISA)是免疫酶技术的一种,主要用来检查抗体和抗原。ELISA 首次由Engvall 和 Perlman(1971)提出后,相继得到医学和兽医学工作者的高度重视。该方法1974年在英国医学领域获得试用及发展,近几年来在禽病方面也进行了广泛深入的研究,取得了初步成就。鉴于在国内禽病工作中的研究、应用尚少,特别是用ELISA 测定禽病免疫抗体的资料不多,故进行综述,以供参考。     

酶联免疫吸附试验

酶联免疫吸附试验(以下简称ELISA):是酶免疫测定技术中应用最广的技术。基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体(聚苯乙烯微量反应板)表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。     

禽流感病毒检测技术研究

禽流感病毒的检测方法主要分为血清学检测和分子生物学检测两大类。血清学检测方法包括琼脂凝胶扩散试验(AGP)、血凝抑制试验(HI)、酶联免疫吸附试验( ELISA)、神经氨酸酶抑制试验(NIT)和病毒中和试验(VN)。随着分子生物学的发展,近两年国内外学者更加注重对禽流感病毒的分子生物学检测方法的研究。分子生物学检测方法包括RT-PCR、多重RT-PCR、多种改进的RT-PCR和基因探针技术。     

多种鸡病血清抗体效价联合测定法的研究

酶联免疫吸附试验(ELISA)做为一种简便、快速、灵敏、特异的诊断方法在兽医界已得到广泛的应用。在此基础上,一些学者又建立了P/N—ET和OD-ET法,这种方法的特点在于将免疫学和统计学有机地结合起来,对血清抗体效价进行测定时,只要将血清样品做一个稀释度进行ELISA,测出结果(P/N或OD值)后代入已建立的标准直线     

应用HRP—SPA间接免疫酶染色观察实验性牛弓形体病主要脏器中虫体的分布

自从1966年Avrameas创建免疫酶技术检测体液中的可溶性抗原和抗体成分以来,免疫酶技术被广泛应用。1976年Voller首先应用ELISA检测弓形体抗体,此后,林继煌等应用酶标抗体直接染色法检查猪和兔     

酶联免疫吸附试验

酶联免疫吸附试验（以下简称ELISA）：是酶免疫测定技术中应用最广的技术。基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体（聚苯乙烯微量反应板）表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。     

酶联免疫测定法在生殖激素测定及兽医产科中应用的研究进展

本文根据最新资料,对酶联免疫测定的方法及其在兽医产科中的应用作了较详细的论述。在测定动物体液中的激素方面,以非均相ELISA应用最广。在ELISA测定系统中,用聚苯乙烯微量滴定板作为固相,分离方法比较简便;应用单克隆抗体比多克隆抗体优越;所用的酶是HRP,HRP的最佳底物是TMB。用ELISA测定生殖激素,可进行早期妊娠诊断、监定发情、排卵、预测分娩时间,监控母畜产后卵巢机能、诊断生殖系统疾病等。ELISA可以代替RIA作为兽医基础研究和临床诊断的工具。     

ELISA技术在犬病毒与抗体检测中的应用

<正>ELISA即酶联免疫吸附测定,是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性、特异性较高的试验技术。比较常用的ELISA方法有双抗体夹心法和间接法。     

ELISA操作中某些非特异性反应因素的消除

酶联免疫吸附测定(ELISA)是一种敏感性高、特异性强、简便易操作的酶免疫检测技术,近年来得到了广泛应用。但在实际应用中,容易产生非特异性反应,造成假阳性结果,影响结果判定。造成这些非特异性反应的因素,除了所用试剂原因之外,还有不少是由于ELISA操作过程中产生的。笔者根据几年来工作实践,将这些非特异性反应因素及其消除方法小结如下。     

亲和素—生物素酶联免疫吸附试验在寄生虫病免疫诊断上的应用

亲和素—生物素系统酶联免疫吸附试验是八十年代初建立起来的一种新型生物反应放大系统,是将具有高亲和力、高稳定性的亲和素—生物素系统(Avidin-Biotin System,ABS)引入ELIsA反应的免疫诊断技术.ABC—BLISA即亲和素—生物素—过氧化物酶复合物(Avidin-Biotin-Peroxidase Complex)则是预先按一定比例将生物素化酶与亲和素共温形成ABC复合物,再使ABC复合物与生物素化抗体的反应.近年来,ABC—ELISA以其明显的优越性而日益受到了国内外学者的关注,在寄生虫病的免疫诊断方面得到广泛应用,并取得了可喜进展.本文就ABC—ELISA在寄生虫病的免疫诊断方面的应用概述如下.     

酶联免疫吸附测定技术新进展

酶联免疫吸附测定(Enzyme－linked immunosorbent assay,ELISA)技术是1971年由Engvall等建立的一种生物活性物质微量测定新技术，以其灵敏度高、特异性好等优点，在生命科学各领域得到广泛应用。在实际应用过程中，该技术得到不断改进，形成了多种分析方法，并且在检测的灵敏度、特异性、操作简单化以及实时、高效等方面都有很大提高，可以说ELISA是当前应用最广、发展最快的一项技术。本文仅就近几年ELISA的发展情况作一综述。 1 常规ELISA常规ELISA试验方法如间接法、双抗夹心法及竞争法或阻断法仍然被广泛用于诊断各种病毒、…     

酶联免疫吸附试验中常见问题的产生原因及解决办法

用酶标记物进行免疫学检测的方法称为酶联免疫吸附试验(ELISA)。该技术诞生于20世纪70年代初,可进行定性或定量分析,主要有间接ELISA、阻断ELISA、双抗体夹心ELISA三种方法。目前该技术在猪瘟、口蹄疫、高致病性猪蓝耳病、猪伪狂犬病、猪乙型脑炎、猪链球菌病、猪圆环病毒病、猪传染