RAPD技术鉴定苦瓜杂种一代的研究

利用RAPD技术对苦瓜杂种一代顶优苦瓜及其父母本的特异性进行分析,结果引物OPU19扩增的OPU19-1600bp片断在父本和F1中出现,在母本中不出现;对该一代杂种的F2、B1、B2代进行的遗传分析表明:OPU19-1600bp片断可能与父本的某一对基因连锁,在F2、B1、B2代中符合孟德尔一对显性基因的分离规律,从而证实其可用于区分杂交种与母本的自交种。     

应用RAPD标记对桃品种间亲缘关系的分析

以普通桃的36个品种为试材，应用RAPD标记进行品种间亲缘关系的分析，探讨应用RAPD标记划分桃品种的可行性，试验结果表明，利用筛选的20个引物在36个桃品种中共扩增出111条带，其中多态性带86条，占标记总数的77．5％，可用于样品间亲缘关系的分析．利用这些多态性带构建二元数据矩阵，计算样本间的遗传距离，并用UPGMA法对36个样品进行聚类分析，以遗传距离0．14为接合线，将供试类型分为五类．若进一步在遗传距离0．13处划分，可明显将水蜜桃、黄肉桃、油桃区分开，认为RAPD标记可用于桃品种分类，以肉质类型划分桃品种是可行的。     

RAPD标记在桃品种鉴定中的应用

以34个桃品种为试材利用100个随机引物进行PCR的结果，只在23个引物上获得了清晰而具有重复性的多态性DNA带．利用23个随机引物进行RAPD分析的结果共获得了122条多态性DNA带．供试的34个品种中，29个品种可由1个引物的1个或2个多态性DNA带(RAPD标记)与其他的品种相互区别．其中，上海水蜜桃等7个品种可由1个多态性DNA带与其他的品种相互区别，白桃、有明等22个品种可由2个多态性DNA带与其他的品种相互区别．本实验采用的23个引物中A12引物能区分12个桃品种，A17及B20引物各能区分5个品种，D15、C05及C083个引物各能区分3个品种．由此可认为这6个引物可以有效地利用于桃的品种鉴定上．     

AFLP标记在珲春桃×正满早生杂种F1的分离方式

以珲春桃、正满早生及其F1为试材，利用16对引物组合对AFLP标记的多态性和分离方式进行分析．结果表明：AFIP标记在F1呈3种分离方式：盂德尔分离、偏离孟德尔分离、异常分离．3种分离位点出现的频率和数量分别为：11．07％、83，11．87％、89，3．86％、29．本试验对偏离孟德尔分离比例和异常分离的AFLP标记进行了分析，为该群体是否适合构建遗传连锁图谱进行评价及进一步利用该群体提供理论依据．     

用RAPD标记鉴定甘蓝型油菜杂种H9909的纯度

通过对杂交组合H9909两亲本的指纹图谱分析，初选出4个引物S374、S1334、S1365和UBC523用于杂种纯度鉴定。引物S1334和UBC523在两亲本中均扩增出特异带，引物S374和S1465能扩增出父本标记带。以两亲本和手工杂种F1为模板对上述4个引物再一次进行RAPD扩增，S1334并没有在F1的RAPD图谱产生理想的双亲型或偏父型标记带，UBC523在F1扩增得到的父本标记带和在母本中扩增的标记带大小相近，不易辨别；引物S374、S1365均能使F1扩增出父本的特异带，进一步确定引物S374和S1365可用于杂种鉴定。引物S374的RAPD标记将待鉴定100个单株中的5个不育单株标记为假杂种，与田间育性调查的结果完全一致。引物S1365的RAPD分析结果显示，除上述5个不育单株外，另外2个可育单株亦为假杂种，可能由外来花粉串粉或机械混杂引起。     

西瓜和甜瓜杂种一代种子纯度的RAPD鉴定

选用100条随机引物(S71-S190)对西瓜、甜瓜杂种一代和其父、母本的种子进行随机扩增多态性DNA(RAPD)分析,探索西瓜和甜瓜杂交品种种子纯度鉴定的便捷途径.结果表明:在100条引物中筛选出4条有特征条带的引物,其中S92号引物能使甜籽一号、白兰蜜和黄河蜜6号与其母本有效区分开来;S162号、S181号引物能使甜籽一号与其母本区分开来;S175号引物能使白兰蜜与其母本区分开来;但未发现使T×14E与其母本区分开来的引物.     

RAPD分子标记在甘蔗杂种鉴定中的应用研究

从甘蔗杂种梁河78／121及其亲本华南56/12和崖城58／47共3个材料的幼嫩叶片中提取DNA,使用PCR仪,建立了适合甘蔗PAPD分析的PCR条件,对115个随机引物进行筛选,74个引物可获得甘蔗RAPD多态性,从中找到可用于鉴定该杂种的引物OPR—17,OPK—17和OPR—18。利用该法鉴定甘蔗杂种简单、迅速、可靠,DNA用量少,且不影响被检植株的后期生长。     

桃品种种质资源的RAPD分析

用筛选的20个随机引物对42个桃品种（种）进行RAPD扩增,用扩增产生的107条多态性带计算样品间的遗传距离,UPGMA法聚类分析,在遗传距离0．14处可将供试样品划分为四类,认为RAPD标记可用于分析桃种质资源间亲缘关系。在遗传距离0．11处可将水蜜桃、黄肉桃、油桃明显区分开,但存在一定交叉现象,若以肉质类型划分桃品种,还应考虑桃品种的遗传背景。供试样品中珲春桃是优先保存的种质,其次是Fireprince、上海水蜜桃等。根据聚类分析结果和遗传距离,认为珲春桃不是桃和山桃的杂交后代,应为桃的一个变种。     

桃品种种质资源的RAPD分析

用筛选的20个随机引物对42个桃品种(种)进行RAPD扩增,用扩增产生的107条多态性带计算样品间的遗传距离,UPGMA法聚类分析,在遗传距离0.14处可将供试样品划分为四类,认为RAPD标记可用于分析桃种质资源间亲缘关系.在遗传距离0.11处可将水蜜桃、黄肉桃、油桃明显区分开,但存在一定交叉现象,若以肉质类型划分桃品种,还应考虑桃品种的遗传背景.供试样品中珲春桃是优先保存的种质,其次是Fireprince、上海水蜜桃等.根据聚类分析结果和遗传距离,认为珲春桃不是桃和山桃的杂交后代,应为桃的一个变种.     

鲤抗寒性状的RAPD标记转化为SCAR标记的研究

以黑龙江鲤Cyprinus carpio haematopterus、荷包红鲤抗寒品系、荷包红鲤Cyprinus carpio var.、柏氏鲤Cyprinus pellegnini pellegnini以及荷包红鲤抗寒品系(父本)与柏氏鲤(母本)杂交F2的DNA样品为材料,用300个随机引物对其进行PCR扩增,获得2个与鲤抗寒性状相关的分子标记AL04986和AR02788。回收、纯化这两个RAPD标记,连接到pMD18-T载体中,转化DH5α大肠杆菌感受态细胞,并对插入片段进行测序。根据测序结果,设计了3对SCAR引物SCAL04L/SCAL04R1、SCAL04L/SCAL04R2和SCAR02L/SCAR02R,其中SCAR02L/SCAR02R这对引物可以成功的反映出杂交F2两个群体在抗寒能力上的差异,适宜的退火温度为57℃,将此标记命名为SCAR02788。根据AL04986的测序结果设计的两对SCAR引物并没有反映出这种差异。SCAR02L/SCAR02R标记可以用作鲤抗寒基因分子辅助选择的依据。     

RAPD标记鉴定番茄杂交种子纯度的研究

 应用RAPD标记鉴定番茄杂交种子纯度,从160条随机引物上筛选出BS273引物,能在杂交一代父母本中各自产生特异的RAPD标记,并且父母本的特异标记能在杂交一代中同时表现,从而利用一个引物便可将杂交一代及其父本、母本三者清楚地区分开,同时也能鉴别其它混杂种子。结果表明:利用RAPD标记技术鉴定番茄杂交种子纯度有着快速和准确的优势,对于杂交种子生产具有广阔的应用前景。     

利用RAPD技术对桃种内种质的分析

利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对毛桃 2 0个品种进行基因组DNA多态性分析 ,利用筛选出的14个 10碱基随机引物共扩增出 181条带 ,其中 14 3条具有自身特征性标记 ,利用这些DNA片段 ,按UPGMA法进行聚类分析 ,并建立树状图。在遗传距离 0 .70 2以上 ,将供试的 2 0个桃品种分为 5类 ,从分子生物学角度为桃种质的保存和育种提供理论依据     

用RAPD和SSR分子标记鉴定小金海棠F1代 杂种实生苗的研究

小金海棠(Malusxiaojinensis)具有多种抗逆特性,是苹果属植物中一种珍贵的野生种质资源。由于小金海棠具有无融合生殖特性,早期准确、快速、有效地鉴定其F1代杂种实生苗对于研究利用其众多抗逆基因具有重要意义。RAPD技术是现有鉴定果树杂种实生苗最为简单、快速和有效的分子标记技术,但RAPD技术本身存在一定的不稳定性。笔者对小金海棠和山荆子(M.baccata)F1代杂交实生苗79个单株进行了RAPD分析,并用SSR标记对RAPD标记的初步鉴定结果进行了进一步的验证。结果显示,RAPD标记鉴定出的杂种实生苗有72.2%得到SSR标记的证实。研究的结果还表明,“叠加”和“新带”两种RAPD带型,结合RAPD标记特异位点数可以为小金海棠F1代杂种实生苗提供可靠的鉴定依据。研究为利用RAPD技术早期快速鉴定果树杂种实生苗提供了新的信息和依据。     

AFLP分子标记在香菇F_1代群体中的多态性及分离方式

利用8对引物组合对AFLP标记在两个香菇菌株间(IB01×IB15)杂交F_1代的多态性及分离方式进行研究,结果显示,AFLP标记在该F_1代群体中的多态性较高,分离位点出现的平均频率是32.55%,分离方式有孟德尔分离、偏孟德尔分离及异常分离3种方式.3种分离位点出现的数量与平均频率分别为602、28.86%,271、12.99%,49、2.35%,其中孟德尔分离位点占分离位点总数的53.99%.15.34%的AFLP标记表现了偏分离,偏离的方向趋于亲本.     

Detection of RAPD Markers Linked to Gene 1X1 in Soybeans

Near-isogenic lines of soybean lipoxygenase, which contain genes Lox, lx1, lx2, lx3, lx1.3, lx2.3,respectively, were used for polymorphic analysis by RAPD technique.520 10-mer-oligonucleotide primers were screened, and thirteen primers showed polymorphism among near-isogenic lines.There were six primers showed special polymorphic bands among lines lx1 and lx1.3. Especially,primer S352 presented the stable results in which a 900 bp band was found in the lines lx1 and lx1.3, and primer S352900 was detected with F2 generation of cross 96P11×Century-1, indicated primer S352900 could be identified as a RAPD marker linked to gene lx1 in soybeans, the distance of linkage was 7.6 cM.     

梨SRAP体系的优化及其在杂交后代中的分离方式

采用正交设计建立并优化了梨的SRAP-PCR分子标记技术体系,在20 μL的反应体系中含有DNA15 ng/mL,Primer o.5μmol/L,dNTPs 0.1 mmol/L,Mg2+2 mmol/L,Taq DNA聚合酶1.5 U。应用20对引物组合对SRAP标记在“红巴梨×南果梨”F1群体的多态性和分离方式进...     

RAPD标记分析棉花种间杂种后代的遗传相似性

选用８０个随机引物,对栽培种陆地棉、野生种雷蒙德氏棉、它们的杂种一代以及从回交代中选育的９个种质系进行了ＲＡＰＤ指纹图谱和遗传相似性研究。结果表明：２９个随机引物扩增的带具多态性,并能将两个不同棉种、Ｆ１和种质系相互间加以区别。在９个种系中分别检测到５～９条（３．７％～５．３％）带与野生种相同的特异带,大多数带与陆地棉回交亲本一致。野生种与种质系间的相似系数为０．３８８～０．４７９,陆地棉亲本与种