禽致病性大肠杆菌外膜蛋白研究现状与进展

对近年来国内外关于大肠杆菌外膜蛋白的生理功能、致病作用、免疫原性以及疫苗开发等方面的研究现状及发展进行了综述.     

兔源高致病性大肠杆菌外膜蛋白型的差异性分析

从山东某地区大、中型兔场连续三年（2002-2004年）分离、鉴定的43株高致病性大肠杆菌体内提取外膜蛋白（OMP）,测定其外膜蛋白型（OMPs）,通过SDS-PAGE分析,比较不同年份间高致病性大肠杆菌分离株的外膜蛋白型。结果表明：三年共产生了三种OMP型（A-C）。且在同年份内具有多样性,不同年份之间具有差异性。     

兔源高致病性大肠杆菌外膜蛋白型的差异性分析

从山东某地区大、中型兔场连续三年(2002-2004年)分离、鉴定的43株高致病性 大肠杆菌体内提取外膜蛋白(OMP),测定其外膜蛋白型(OMPs),通过SDS-PAGE分析,比 较不同年份间高致病性大肠杆菌分离株的外膜蛋白型。结果表明:三年共产生了三种OMP型 (A-C)。且在同年份内具有多样性,不同年份之间具有差异性。     

鸭致病性大肠杆菌外膜蛋白型研究

测定了从我国分离到的130株鸭病原性大肠杆菌外膜蛋白型（Outer membrane protein patterns,OMP型）,其中O93、O92、O78和O76优势血清型53株,O46等30个其他血清型分离株77株,这些分离株共产生了4个OMP型,其中OMP-1型81株,占62.3%（81/130）,覆盖O93、O92、O78和O76等29个血清型,占85.3%（29/34）,为主要的OMP型;根据GenBank中大肠杆菌K-12外膜蛋白A基因（ompA）的核苷酸序列设计引物,从9株优势血清型和1株O46血清型的鸭大肠杆菌中分别扩增得到ompA基因,进行序列测定及分析,发现优势血清型9个菌株的ompA均由1 171个碱基组成,均只有1个大的开放阅读框（ORF）,长1 053 bp,编码由350个氨基酸组成的前外膜蛋白A（pro-OmpA）,前21个氨基酸残基组成信号肽,成熟的OmpA由329个氨基酸残基组成;O46菌株的ORF全长1 041 bp,在400-411 bp位缺失了12个碱基,成熟的OmpA由325个氨基酸残基组成;10个鸭致病性E.coli的ompA基因核苷酸序列高度同源,相似性达95.8%~100%。     

陕西省部分禽源性大肠杆菌的外膜蛋白型

从陕西省部分优势血清型的禽源性大肠杆菌中提取外膜蛋白 (outer membrane protein,OMP) ,用 SDS- PAGE进行 OMP分型。 18株菌共产生了 3种 OMP型 ,其中 4株 O1菌株 ,4株 O2菌株 ,4株 O78菌株和 3株 O89菌株各属2个 OMP型 (OMP- 1,2型 ) ;3株 O75菌株属 3个 OMP型 (OMP- 1,2 ,3型 )。结果表明 ,陕西省分离的优势血清型禽源大肠杆菌具有多样性的 OMP型 ,且多种血清型间具有共同的 OMP型。     

禽致病性大肠杆菌外膜蛋白SDS-PAGE分析

提取4种血清型的禽致病性大肠杆菌外膜蛋白,进行SDS-PAGE分析,证明这些血清型的外膜蛋白主要由2条带组成,位于30～43KD.用血清型O78的免疫血清进行免疫印迹反应,结果显示,其与这4种血清型的外膜蛋白均发生反应,表明4种血清型的主要外膜蛋白不仅具有抗原性,而且具有交叉免疫性.     

广东地区5种优势血清型猪大肠杆菌的外膜蛋白型研究

对从广东地区部分猪场分离的大肠杆菌进行血清型鉴定后,选取优势血清型O₉、O₂₆、O₆₀、O₁₀₁和O₁₀₇的8个致病性较强的分离株,采用超声波裂解、N-十二烷基肌氨酸钠处理和超速离心技术提取大肠杆菌的外膜蛋白（OMP）,利用SDS-PAGE电泳进行OMP分型。结果8个菌株共有3个OMP型（Ⅰ～Ⅲ型）,其中O₂₆、O₁₀₁、O₁₀₇型的3个分离株的外膜蛋白型由1条带组成,为OMP-Ⅰ型;O₆₀、O₁₀₁、O₁₀₇型的4个分离株的外膜蛋白型由2条带组成,为OMP-Ⅱ型;O₉型的1个分离株的外膜蛋白型由3条带组成,为OMP-Ⅲ型。这表明,优势血清型O₉、O₂₆、O₆₀、O₁₀₁、O₁₀₇的分离株OMP型不单一;同一血清型的分离株,存在不同OMP型;而不同血清型的分离株却可有相同的OMP型。     

天津地区鸡致病性大肠杆菌血清型分布及其优势血清型的外膜蛋白型研究

从天津地区各区县养鸡场分离 ,鉴定出 45株鸡致病性大肠杆菌。对 45株致病性大肠杆菌进行血清型鉴定 ,共定型出 3 1株 ,分属 1 4个血清型 ,其中 O78、O88、O2 、O4 5、O53、O14 5为优势血清型 ,占定型菌株的 58.3 %。提取 O78、O88、O2 、O4 5、O53和O14 56个血清型 1 8个分离株的外膜蛋白 ( Outermembrane protein,OMP) ,测定外膜蛋白型 ( Outmembrane protein patterns,OMPS) ,SDS-PAGE分析表明这些分离株共产生了 3个 OMP型 ( 1～ 3型 )。 OMP-1型为 O78、O88、O2 、O53、O14 55个血清型分离株所共有 ,OMP-2型为 O78、O4 5、O14 53个血清型分离株所共有。这表明同一血清的菌株可能属于完全不同的 OMP型 ,而血清型不同的菌株也可能为同一 OMP型。     

大肠杆菌外膜蛋白研究概述

大肠杆菌具有一种独特的外膜蛋白结构,此结构在大肠杆菌生长的任何一个阶段都起着非常重要的作用。本文主要对大肠杆菌外膜蛋白的组成和功能、致病作用以及免疫原性等方面的研究进展作一概述。     

肠道外致病性大肠杆菌外膜蛋白研究进展

肠道外致病性大肠杆菌病(Extraintestinal pathogenic Escherichia coli,ExPEC)是一种常发肠道外疾病,危害人类、动物的健康,也导致禽类产蛋量的下降及肉用动物的上市延迟,严重的则引起死亡。因此,对于肠道外致病性大肠杆菌的致病机制也是许多学者研究的热点,肠道外致病性大肠杆菌致病机理的研究近些年主要集中在脂多糖(LPS)、外膜蛋白(Outer membrane protein,Omp)、菌毛、鞭毛、等毒力因子方面。     

禽病原性大肠杆菌6种血清型分离株外膜蛋白型的研究

从病鸡中分离的６ 种血清型（ Ｏ２、 Ｏ４６、 Ｏ１８、 Ｏ１２１、 Ｏ７６、 Ｏ１３１）及５ 种标准血清型（ Ｏ１、 Ｏ１５、 Ｏ３５、 Ｏ３６、 Ｏ７８）大肠杆菌中提取外膜蛋白（ Ｏｕｔｅｒ ｍ ｅｍ ｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ）,经 Ｓ Ｄ Ｓ－ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 分析表明,分离株 Ｏ７６、 Ｏ１３１及标准株 Ｏ１、 Ｏ３５的外膜蛋白型由２ 条带组成,为 Ｏ Ｍ Ｐ－ １ 型;分离株 Ｏ２、 Ｏ４６、 Ｏ１８、 Ｏ１２１和标准株 Ｏ１５、 Ｏ３６、 Ｏ７８的外膜蛋白型由３ 条带组成,为 Ｏ Ｍ Ｐ－ ２ 型,结果表明,不同血清型菌株之间有相同的 Ｏ Ｍ Ｐ型。     

NDV和IBV感染对肉鸡大肠杆菌病发病的影响

为了解新城疫弱毒苗和传染性支气管炎弱毒苗接种对肉鸡大肠杆菌病发病的影响。对8日龄肉仔鸡用不同剂量NDVclone-30株或IBV-H120株进行滴鼻及饮水,48h后相同途径接种2株不同“O”血清型的致病性大肠杆菌。结果表明,致病性大肠杆菌单独接种鸡死亡率在20%-25%之间,而NDVclone-30株或IBVH120株与致病性大肠杆菌联合接种鸡死亡率有明显增加达40%-75%。     

静注与内服氟苯尼考在大肠杆菌感染肉鸡体内的药代动力学

以30 mg@kg-1单剂量静注(设健康对照)和内服氟苯尼考(florfenicol),研究了其在人工感染大肠杆菌肉鸡体内的药代动力学.给健康和感染肉鸡静注氟苯尼考后,血药浓度与时间关系均符合二室开放模型,选择的权重为1/C2,其主要药代动力学参数如下t1/2a为(44.67±9.42)min和(40.79±9.90)min,t1/2β为(161.02±27.30)min和(118.91±14.17)min,Vd(ss)为(1.15±0.41)L@kg-1和(1.02±0.22)L@kg-1,ClB为(0.73±0.12)L@kg-1@h-1和(0.76±0.14)L@kg-1@h-1,AUC为(41.65±6.94)mg@L-1@h和(40.88±6.03)mg@L-1@h.与健康肉鸡药动学参数比较,感染鸡的β(P＜0.01)、K21(P＜o.05)和K10(P＜0.01)显著性提高,t1/2β(P＜0.01)显著性下降,其他参数没有显著性改变(P＞0.05).给感染肉鸡内服氟苯尼考后,血药浓度与时间关系符合一室开放模型,其主要药代动力学参数如下t1/2ka为(25.49±14.04)min,t1/2ke为(104.31±14.55)min,tmax为(65.91±26.24)min,Cmax为(7.90±3.00)mg@L-1,AUC为(29.01±6.59)mg@L-1@h,F为(70.94±1.09)%.以上结果表明,鸡感染大肠杆菌后,氟苯尼考仍表现出分布迅速、广泛和消除较快的特点.内服给药后,氟苯尼考在大肠杆菌感染肉鸡体内生物利用度较高.     

禽源大肠杆菌O2,O78分离株外膜蛋白型的研究

从１７个禽大肠杆菌病病例的Ｏ２、Ｏ７８分离株提取的主要外膜蛋白（ＯＭＦ），在ＳＤＳ－ｐＡＧＥ中出现了２个ＯＭＰ型。其中，９个Ｏ２分离株属２个ＯＭＰ型，８个Ｏ７８分离株均属其中的１个ＯＭＰ型。结果表明，分离到的Ｏ２、Ｏ７８大肠杆菌具有多样性的ＯＭＰ型，而且两者存在着共同的ＯＭＰ型。     

酵母铬对肉鸡胫骨发育的影响

120只1日龄艾维茵肉鸡，随机分为3组，分别饲喂添加0，400，600μg/kg酵母铬的玉米-豆粕型日粮．用以研究酵母铬对肉鸡胫骨发育及Ca、P代谢的影响，试验期7周。结果表明：添加400μg/kg铬可以较好地调节Ca、P代谢，促进AKP活性和胫骨发育。     

鸡大肠杆菌异型外膜蛋白原生质体融合菌株的构建

以鸡大肠杆菌Ww1株(O78,OMP-3,AmpR,KS)和WD2株(O2,OMP-1,AmpS,KR)作为亲本菌株,采用溶菌酶-EDTA法制备原生质体,以PEG作为助溶剂,进行原生质体融合,得到4株双耐药融合菌株,融合菌株的形态、染色特性和生化特性均符合大肠杆菌的特性,且均能同时表达两个亲本菌株的外膜蛋白(OMP)抗原(OMP-3,OMP-1)和O抗原(O78,O2),表明两个亲本菌株发生了融合和染色体重组。经多次传代证明融合菌株是稳定的。     

磺胺类衍生物对肉鸡生长代谢的影响

将3种不同剂量(12、16、20mg/kg配合料)磺胺类衍生物(简称G98)添加到基础日粮中，通过调动肉鸡内源性激素代谢促进肉鸡生长。研究结果表明，7～52日龄肉鸡，试验各组与对照组相比，体增重、采食量、饲料转化率以及胸肌粗蛋白均不同程度提高；胸肌粗脂肪均下降；与生长有关的内源性激素水平也相应改善；屠宰测定中相关指标发生改变。结果表明，采用G9816mg/kg配合料饲喂肉鸡，生长代谢的效应最好。     

热应激对肉鸡试验性大肠杆菌病发病过程的影响

研究37℃热应激对肉鸡试验性大肠杆菌病发病过程的影响。结果表明,热应激条件下感染大肠杆菌肉鸡比单纯感染大肠杆菌肉鸡的临床症状出现晚、持续时间短,脏器病变率降低,死亡率极显著下降(P<0.01)(10%,55%),体温和呼吸频率极显著升高(P<0.01)。结论:37℃热应激在一定程度上可能会阻断肉鸡大肠杆菌病的发病过程。