消化道肿瘤中郎格罕氏细胞的初步研究

采用Ｓ—１００蛋白免疫组化技术，在２５例消化道肿瘤及２６个局部转移淋巴结中均发现有郎格罕细胞浸润，其数量在不同类型肿瘤中虽有差异，但并不显著。局部转移淋巴结中的郎格罕细胞数量均比原发瘤明显增多，且在各类型肿瘤中有明显差别。郎格罕细胞与肿瘤细胞关系密切，且与淋巴细胞的分布有一定关系。认为该细胞在机体内有可能与其他免疫细胞协同，发挥抗肿瘤的作用。     

Maspin在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及其意义

目的探讨maspin在宫颈鳞状细胞癌(简称宫颈鳞癌)组织中的表达及其临床病理意义。方法选取宫颈鳞癌根治性手术切除标本72例,应用免疫组化染色EliVisionTM plus两步法检测癌组织及癌旁组织maspin的表达,分析其与患者年龄、术前淋巴结转移、癌灶最大径、癌细胞间质浸润深度、分化程度、TNM分期及术后5年内复发转移的关系。结果癌组织maspin阳性率为37.5%(27/72),癌旁组织maspin阳性率为70.0%(21/30),差异有统计学意义(P0.05);Maspin阳性率在不同年龄及术前有无淋巴结转移组间差异均无统计学意义(P0.05);按照癌灶最大径、癌细胞间质浸润深度、分化程度、TNM分期、Ki-67表达指数5项临床病理指标分组,maspin阳性率差异均有统计学意义(P0.05);Maspin阳性率在术后5年内有复发转移与无复发转移组间差异亦有统计学意义(P0.05)。结论 Maspin表达下调不仅有助于鉴别宫颈良恶性病变,而且提示宫颈鳞癌恶性程度高、进展速度快、患者预后差。     

人脑胶质瘤细胞中PCNA的表达与病理分级、患者生存时间的关系

目的 :研究人脑胶质瘤细胞中增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达水平与病理分级、患者生存时间的关系。方法 :应用免疫组化检测了 5 7例人脑胶质瘤细胞中PCNA的表达水平 ,并分析人脑胶质瘤细胞中PCNA的表达水平与病理分级、患者生存时间的关系。结果 :不同病理分级的胶质瘤细胞中PCNA的表达水平不同 (Hc=30 .1 75 ,P <0 .0 0 1 ) ,Ⅰ～Ⅱ级组与Ⅲ、Ⅳ组差异具显著性 (P <0 .0 5 ) ,且胶质瘤病理分级与胶质瘤细胞中PCNA的表达水平呈高度正相关 (r’ =0 .730 ,P <0 .0 0 1 ) ;胶质瘤细胞中PCNA的表达水平不同 ,患者术后生存时间也不同 (Hc=2 3.1 6 5 ,P <0 .0 0 1 ) , 、 组与 组差异具显著性 (P <0 .0 5 ) ,且胶质瘤细胞中PCNA的表达水平与患者术后生存时间呈负相关 (r’ =- 0 .6 4 2 ,P <0 .0 0 1 )。结论 :PCNA在人脑胶质瘤细胞中的表达水平与病理分级、患者的术后生存时间有关 ,可作为预测胶质瘤患者术后生存时间的指标     

弥散性神经内分泌细胞标志物在不同生殖周期小鼠卵巢中的表达

【目的】研究卵巢内弥散性神经内分泌系统细胞的分布情况。【方法】采用间接免疫荧光染色法检测弥散性神经内分泌细胞广谱、共同的标志物S100蛋白和神经元特异性烯醇化酶(NSE)在不同生殖周期小鼠卵巢中的表达情况。【结果】S100蛋白和NSE在动情周期次级卵泡和囊状卵泡外膜细胞、妊娠期囊状卵泡外膜细胞和部分黄体细胞中表达,阳性细胞散在或成簇分布,一些细胞具有明显的突起,细胞核不着色。【结论】小鼠卵巢中存在弥散性神经内分泌细胞;弥散性神经内分泌物质在卵泡不同发育阶段发挥着不同的调控作用;在卵巢的发育过程中伴随着部分细胞神经内分泌化。     

皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌中FADD、Caspase-3的表达与细胞凋亡的关系

目的:探讨皮肤鳞状细胞癌(简称鳞癌)、基底细胞癌(简称基癌)组织中FADD、caspase-3(简称casp-3)的表达及其与细胞凋亡的关系。方法:应用原位末端标记(TUNEL)和SABC免疫组化技术检测48例鳞癌、41例基癌中FADD、casp-3表达及细胞凋亡。结果:鳞癌中FADD、casp-3表达及凋亡指数(A I)均明显高于基癌(P<0.01),两种表皮肿瘤的FADD、casp-3表达与A I均呈正相关(r=0.521,P<0.05),FADD与casp-3之间的表达亦呈正相关(r=0.437,P<0.05)。低分化鳞癌中的casp-3表达和A I低于高分化者(P<0.05),鳞癌原发灶中的A I高于转移灶(P<0.01)。结论:Fas凋亡途径可能是鳞癌、基癌的主要凋亡途径,FADD、casp-3是鳞癌、基癌细胞凋亡中重要的促凋亡因子,并有相互协同促凋亡作用。     

食管鳞癌组织中nm23的表达及临床意义

目的探讨食管鳞癌组织中nm23的表达及其与各临床病理学参数之间的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测74例食管鳞癌标本及22例癌旁正常黏膜组织中nm23的表达,并分析其与各临床病理参数之间的关系。结果①食管癌组织中nm23的表达显著低于正常组织(P<0.05);②nm23蛋白的表达与食管癌的分化程度、有无淋巴结转移明显相关(P<0.05),而与年龄、性别及浸润深度无关。结论 nm23的表达下降与食管癌的发生密切相关,nm23可作为评价食管癌预后的独立指标。     

细胞凋亡基因P53在固始鸡免疫器官内的表达及其生理意义

【研究目的】探讨细胞凋亡基因p53在固始鸡免疫器官内的表达及其生理意义;【方法】应用免疫组织化学技术和Leica显微图像处理系统;【结果】p53阳性蛋白表达于法氏囊和胸腺内淋巴细胞细胞膜、细胞质和细胞核。在不同发育阶段固始鸡法氏囊内均有少量p53表达阳性细胞,阳性细胞主要分布于黏膜上皮层与淋巴小结之间靠近上皮层的固有膜内,其次是淋巴小结边缘及淋巴小结与淋巴小结之间的固有膜层内。在1周龄和12周龄固始鸡胸腺内有少量p53表达阳性细胞,阳性细胞主要分布于胸腺小叶皮质与髓质交界处,其次是皮质内,很少出现在髓质内。p53在不同发育阶段固始鸡脾脏内均无表达;【结论】在正常生理情况下,细胞凋亡基因p53参与了固始鸡中枢免疫器官内淋巴细胞发育分化过程中的凋亡调控,对免疫器官的稳定发挥重要作用。     

人良恶性鼻咽上皮及鼻咽癌裸鼠移植瘤中ras p21蛋白的表达

用抗ras p21蛋白的单抗及免疫组化法检测人多种良恶性鼻咽上皮及鼻咽癌裸鼠移植瘤中ras p21蛋白表达水平较高。提示ras p21蛋白的表达.是正常鼻咽上皮及鼻咽癌癌细胞分化的特点,在其分化过程中可能起一定作用。在异型增生的基底细胞中ras p21蛋白表达水平升高可能是ras癌基因受到异常激活,在鼻咽癌的发生中起一定作用;报道一种新ras p21蛋白表达方式——核阳性。     

食管癌及癌旁粘膜上皮组织中郎格罕氏细胞的初步研究

本文应用 Ｓ—１００蛋白免疫组化染色、 ＺＩＯ组化染色和透射电镜观察等方法对２６例食管癌及其癌旁上皮、局部淋巴结转移癌组织中郎格罕氏细胞的分布、形态和超微结构等进行了详细观察和描述，发现癌组织中的ＬＣ有显著变化，提示ＬＣ具有摄取、处理及提呈癌抗原给淋巴细胞作用。比较了上述两种染色方法的优缺点。     

四种鲤科鱼肠道中胃泌素免疫活性细胞的免疫组织化学定位及比较

应用胃泌素抗血清,借助过氧化物酶抗过氧化物酶(PAP)免疫组织化学染色技术,在鲤鱼、草鱼、青鱼和翘嘴红鲌四种鲤科鱼的肠上皮中均发现胃泌素免疫活性细胞。它们大多数分布在前肠前段,少数分布在前肠后段。其中鲤鱼肠道中胃泌素免疫活性细胞仅分布在前肠前段,而且密度最高。这四种鲤科鱼肠道胃泌素免疫活性细胞在形态上具有多形性,其中以长梭形最为多见。并且可明显地分为开放型和封闭型二种胃泌素免疫活性细胞。有时在开放型胃泌素免疫活性细胞的胞突上可发现有一个或几个囊状膨胀体,胃泌素贮存于囊中,非一次性释放出细胞。本文比较和讨论了四种鱼的肠道中胃泌素免疫活性细胞的分布特点与鱼的食性关系以及它们可能的分泌方式和功能。     

增殖细胞核抗原在水牛腔前卵泡中的表达与卵巢组织定位

【目的】探讨在水牛中增殖细胞核抗原（PCNA）参与卵泡发生的时期及其在卵巢组织不同时期卵泡中的表达定位;【方法】采用石蜡切片结合免疫组化的方法对PCNA在卵巢组织中进行定位,利用实时荧光定量PCR（QRT-PCR）技术检测PCNA在腔前卵泡中的表达情况。【结果】免疫组化结果显示：原始卵泡中的卵母细胞能检测到PCNA的表达,但颗粒细胞并未观察到PCNA的免疫染色;初级卵泡到次级卵泡,卵母细胞和颗粒细胞中均可检测到PCNA的表达,且在颗粒细胞中的表达有增强的趋势;有腔卵泡中,颗粒细胞、卵泡膜细胞及包围卵母细胞的卵丘细胞中都能观察到很强的免疫染色。定量表达检测结果显示：PCNA在原始卵泡、初级卵泡及次级卵泡中的表达呈上升趋势,并且有显著差异（43.50333±0.138338 vs 1.633804±0.093796 vs 1±0.012219 , P<0.01）;【结论】从初级卵泡开始在颗粒细胞中能检测到PCNA的表达,并且其表达随着卵泡的发育有明显的增强趋势,腔前卵泡中PCNA表达的QRT-PCR测定结果与免疫组化结果相一致,研究结果为阐明PCNA参与卵泡发生的分子调控机制奠定了基础。     

乳腺癌患者外周血中MnSOD基因表达检测及其临床意义的研究

目的探讨锰超氧化物歧化酶（manganese superoxide dismutase,MnSOD）在乳腺癌患者和正常人外周血中的表达差异及其临床意义.方法采用实时荧光定量PCR方法检测218例乳腺癌患者和77例正常女性外周血中MnSOD基因表达水平,并进行分析.结果乳腺癌患者外周血中MnSOD基因表达水平为4.38±0.74,正常女性外周血中MnSOD基因表达水平为4.16±0.64,P〈0.001,有统计学意义.淋巴转移患者组和临床早期患者组与正常女性组比较,P〈0.001.结论淋巴转移和临床早期乳腺癌患者外周血中MnSOD基因表达水平显著低于正常女性,提示MnSOD的低表达与肿瘤的发生和发展有关.应用荧光定量PCR方法检测外周血MnSOD基因水平对监测乳腺癌有一定意义.     

DNMT1、DNMT3a在进展期直肠癌新辅助治疗中的表达及临床意义

目的探讨DNMT1和DNMT3a在进展期直肠癌新辅助治疗中的表达及临床意义。方法选取50例行新辅助治疗的进展期直肠癌患者,应用免疫组化法检测新辅助放化疗前后DNMT1和DNMT3a在直肠癌组织中的表达和临床意义,分析二者在直肠癌组织中的相关性,并根据肿瘤消退学分级(TRG)评估新辅助治疗的有效性。结果新辅助治疗前DNMT1和DNMT3a在直肠癌组中阳性表达率分别为84.00%(42/50)和78.00%(39/50),二者阳性表达与直肠癌分化程度、cTNM分期、淋巴结转移及肝转移相关(P0.05);新辅助治疗后DNMT1和DNMT3a在直肠癌组中阳性表达率分别为36.00%(18/50)和30.00%(15/50),与化疗前二者的阳性率相比差异有统计学意义(P0.05)。TRG分级:0级2例(4.00%),1级22例(44.00%),2级19例(38.00%),3级7例(14.00%)。相关性分析表明:二者在直肠癌组织中的表达呈明显正相关性(r=0.455,P0.05)。结论 DNMT1和DNMT3a在进展期直肠癌组织中的阳性表达与肿瘤分化程度、TNM分期等病理特征相关,且二者呈明显正相关性,DNMT1和DNMT3a可作为进展期直肠癌新辅助治疗疗效评估的重要分子生物学指标。     

Induced in vitro Expression of Human Lactoferrin in Goat Mammary Gland Epithelial Cell

[Objective]The aim of this study was to explore the technical system of induced expression in vitro of goat mammary gland epithelial cell,and evaluate expression efficiency of mammary gland specific vector and foreign protein at the cell level.[Method]Goat mammary gland epithelial cell transfected by human lactoferrin gene was inducted by culturing in DMEM/F12 medium supplemented with 5 mg/L insulin,5 mg/L prolactin and 1 mg/L hydrocortisone.Supernatant was collected per 6 hours and concentrated.Expression situation of foreign protein were detected by SDS-PAGE and Western blotting.[Result]There was target protein expression in the induced culture medium,which molecular weight was about 42 kD.[Conclusion]The method used in this study can induce goat mammary gland epithelial cell to express foreign gene,it lays a foundation for researching heterologous expression of foreign gene and producing mammary gland bioreactor.     

核转录因子在卵巢癌组织及细胞系的表达和意义

培养11株卵巢癌细胞系,收获细胞,对其进行胞质、胞核蛋白质提取,Western-blotting观察核转录因子(NFkB)家族蛋白及其抑制物的表达;采用免疫组化方法检测卵巢良性上皮性肿瘤、卵巢交界性上皮性肿瘤和卵巢癌中NFkB蛋白的表达。结果表明:111个卵巢癌细胞系P50、P65和IkB-α胞质表达阳性率分别为63.6%、45.5%、81.9%,胞核表达阳性率分别为63.6%、54.5%、18.2%。2在卵巢良性上皮性肿瘤、卵巢交界性上皮性肿瘤和卵巢癌中NFkB的阳性表达率分别为33.3%、37.5%和65.0%;3在卵巢癌组织,P65核染色阳性与分化程度、淋巴结转移、临床分期及肿瘤大小明显相关(P<0.05)。NFkB与卵巢癌细胞的发生、发展有关,NFkB可望成为判断卵巢癌预后新的标志物。     

转人乳铁蛋白基因山羊乳腺上皮细胞的体外诱导表达

[目的]为了探索山羊乳腺上皮细胞体外诱导表达的技术体系,评价乳腺特异性载体效率及外源蛋白在细胞水平的表达情况。[方法]用含5mg/L胰岛素、5mg/L催乳素、1mg/L氢化可的松的DMEM/F12培养液对转染人乳铁蛋白基因的山羊乳腺上皮细胞进行体外诱导培养,每6h收集1次上清液。上清液浓缩后分别用SDS-PAGE和Westernblot检测外源蛋白的表达情况。[结果]诱导培养液中有目的蛋白表达,分子量约为42kD。[结论]该研究所用的山羊乳腺细胞诱导表达方法能够诱导山羊乳腺上皮细胞表达外源基因,这为人乳铁蛋白基因的异源表达与乳腺生物反应器的研究奠定了基础。     

粒细胞集落刺激因子在羊成纤维细胞中的表达及对细胞增殖和凋亡的影响

[目的]研究粒细胞集落刺激因子(granule cell stimulating factor,GCSF)在羊成纤维细胞体外培养中对其增殖、周期和凋亡的影响,为今后基于羊GCSF为靶标诱导全能干细胞进行分子遗传育种研究提供理论依据.[方法]将羊GCSF真核表达质粒pRTL1-GCSF和对照载体质粒pRTL1分别转染到1...     

乳腺肿瘤基质金属蛋白酶-13的表达及其临床意义

目的探讨乳腺肿瘤中基质金属蛋白酶（MMP）-13的表达及其与其他生物学指标和临床预后的关系。方法采用组织芯片及免疫组织化学SP法检测183例乳腺癌组织和30例乳腺良性疾病组织中MMP-13、ER、PR、HER2、MMP-2、MMP9、表皮生长因子受体（EGFR）、基质金属蛋白酶组织抑制因子TIMP-1、TIMP-2的表达并分析相互关系,同时分析MMP-13与肿瘤临床病理分期、淋巴结转移状态、组织学分级、肿瘤大小、年龄、月经状态、病理类型、雌孕激素受体状态以及临床预后等的关系。结果MMP-13的表达与TIMP-1、TIMP-2均呈负相关,与HER2的表达呈正相关,而与ER、PR、MMP-2、MMP-9、EGFR的表达水平不相关。MMP-13的表达与淋巴结转移和高组织学分级相关（均P〈0．01）。MMP-13低表达组10年生存率与高表达组10年生存率差异有统计学意义（98．4％vs68．3％,P〈0．01）。结论MMP-13蛋白与浸润性乳腺癌的侵袭和转移相关,可作为判断预后不良的指标。     

MDM2和p53在大肠癌组织中的表达及其意义

目的：探讨抑癌基因mdm2、p53在大肠癌组织中表达情况及与临床病理之间的关系。方法：采用免疫组化SABC法检测大肠癌79例,大肠腺瘤样息肉34例,正常大肠粘膜组织15例中MDM2、p53的表达。结果：MDM2在正常大肠组织、大肠腺瘤、大肠癌中表达阳性率分别为6.67%（1/15）、41.18%（14/34）、63.29%（50/79）;p53阳性率分别为0、35.29%（12/34）、67.09%（53/79）。MDM2、p53在正常组织、大肠腺瘤、大肠癌组织中表达率逐渐增加（P〈0.01）,两者与DukesC期、D期及远处转移相关,与年龄、性别及组织细胞分化程度无关。MDM2与p53表达之间呈正相关。结论：MDM2、p53高表达与大肠癌的发生、发展和预后相关。