生猪饲料中莱克多巴胺的酶联免疫测定与分析

利用抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用相结合原理,快速测定生猪饲料中莱克多巴胺含量,该方法简便、快速、灵敏。     

间接酶联免疫吸附法测定大鲵凝集素

[目的]建立基于大鲵凝集素多克隆抗体酶联免疫定量分析的方法。[方法]以大鲵凝集素为抗原,免疫新西兰白兔获得多克隆抗体,建立间接非竞争酶联免疫检测方法,并对该方法的精密度及准确度进行了测试。[结果]获得的抗血清效价为1∶16 000,多克隆抗体血清的最佳稀释度为1∶3 000,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔二抗最佳稀释度为1∶30 000,抗原浓度在31.25~1 000.00 ng/m L范围内呈良好的线性关系,相关系数R~20.99,板内及板间变异系数范围分别为2.50%~9.88%和2.69%~11.59%,回收率为91.5%~109.5%。分布结果显示,大鲵凝集素在躯干部肌肉组织中的含量较高。[结论]成功建立了大鲵凝集素间接非竞争酶联免疫检测方法,该方法灵敏度高,重复性好,可用于实际检测大鲵肌肉组织中的凝集素含量。     

农药残留检测中酶联免疫吸附技术的研究进展

随着农药种类和用量的不断增加,农药的残留对人体的危害以及食品进出口的影响日益严重,因此进行农药残留检测工作非常重要,其中最重要的是建立高效的检测方法。而EIA技术中的酶联免疫吸附(ELISA)技术特异性高、灵敏性强,在农药残留检测中的研究和应用也越来越多。笔者主要综述了农药残留的现状、酶联免疫吸附技术原理和分类及其在农药残留检测方面的应用,并根据当前研究现状及存在问题进行了研究展望并提出了发展建议。     

酶联免疫吸附试验检测姜片虫感染者血清抗体

超声粉碎制备姜片吸虫成虫冷浸抗原,以1:3500工作浓度包被酶标板;采用Kato—Katz氏定透法普查姜片吸虫病,对虫卵阳性者用ELISA法测定血清抗体,同时测定健康居民的血清和其他吸虫病患者血清,以评价ELISA法检测姜片虫病血清抗体的敏感性、特异性和交叉反应性。按常规ELISA方法操作,目视与酶标仪判断结果。普查2 189人中姜片吸虫卵阳性者168例;168例中165例ELISA阳性,ELISA与Kato—Katz氏定透法的阳性符合率98.21％;健康居民血清147份,阳性6份,阳性率4.08％;与血吸虫病交叉阳性为9.38％,肺吸虫病交叉阳性为5.36％。应用此法检测姜片虫感染者血清抗体具有敏感性高、特异性强和交叉反应率低等特点,可代替粪检法广泛用于姜片吸虫感染的检测。     

酶联免疫法测定水产品中氯霉素的残留量

[目的]探索水产品中氯霉素残留量的快速检测方法。[方法]采用酶联免疫法(ELISA)测定鱼、虾类水产品中氯霉素的残留量。[结果]检测的20个水产品中有1个阳性样品,其他样品均为阴性。ELISA方法的检出限为0.01μg/kg,平均回收率为76.1%~90.7%,相对标准偏差(RSD)≤3.21%,在0.025~1.600 ng/ml范围内有良好的线性关系,相关系数为0.997 5。[结论]该检测方法灵敏度、准确度和精密度均符合残留分析质量控制的要求,适用于大批量水产品中氯霉素残留的快速检测。     

酶联免疫吸附法测定猪肉中的盐酸克伦特罗

本文介绍了酶联免疫吸附法测定猪肉中的盐酸克伦特罗的方法.利用盐酸克伦特罗试剂盒对猪肉组织中残留的盐酸克伦特罗用酶标仪进行测定分析.该法操作简便快速,是保证肉品卫生安全较好的检测方法.     

恩诺沙星人工抗原及多克隆抗体的制备

[目的]制备恩诺沙星人工抗原及多克隆抗体。[方法]采用活性酯法合成恩诺沙星的人工抗原,并通过紫外光谱扫描和SDS-PAGE电泳对其进行鉴定。利用免疫原(ENR-BSA)免疫新西兰大白兔,制备抗恩诺沙星的高亲和力和高特异性的多克隆抗体。[结果]恩诺沙星成功地偶联到载体蛋白上。通过动物免疫,获得了高效价的抗血清,最高效价达到1∶100 000,说明人工抗原成功地诱导机体产生免疫应答。[结论]恩诺沙星的人工抗原合成路线简单易行,可为进一步建立恩诺沙星的免疫检测方法奠定了基础。     

农药残留酶联免疫吸附分析技术研究进展

酶联免疫吸附分析法具有灵敏度高、特异性强、方便快捷的特点,在现场筛选和大量样品的快速检测中显示了其独特的优势。简要介绍了农药残留酶联免疫吸附分析技术的关键环节及其应用,并对该技术存在的问题和应用前景进行了讨论。     

农药吡虫啉酶联免疫检测方法研究进展

对目前国内外应用于吡虫啉检测的酶联免疫检测方法进行综述,论述了该方法建立过程中主要技术环节及其主要进展,以及目前市场上吡虫啉农残酶联免疫检测试剂盒,并展望该技术的应用前景。     

酶联免疫法快速检测食品中重金属含量的研究进展

重金属超标是食品安全的重要问题之一,因此,需通过严格的监测,确保食品中的重金属含量在限量范围之内.传统的重金属检测方法灵敏度高、重复性好,但操作较为复杂,检测费用高,不适用于大量样本的快速筛选.近年来,随着酶联免疫检测技术的快速发展,酶联免疫(ELISA)法已广泛应用于食品中重金属的检测.从样品前处理、重金属人工抗原及特异性抗体的制备、ELISA法的选择三个方面介绍了该法在重金属检测方面的最新研究成果,并对ELISA法的发展进行了展望.     

金黄色葡萄球菌B型肠毒素的酶联免疫检测

[目的]为细菌毒素的检测提供理论依据。[方法]以BALB/c小白鼠为免疫对象,以自制的高纯度金黄色葡萄球菌B型肠毒素(SEB)为免疫抗原,研究其抗体的产生过程和效价,并建立SEB的间接竞争ELISA检测方法。[结果]自制SEB纯度较高,能较好地刺激动物产生抗体。以自制SEB为免疫抗原注射BALB/c小白鼠,其最高效价为1∶100 000。SEB浓度在1~1 000 ng/ml范围内,竞争抑制率与SEB浓度的对数值呈显著线性关系。当SEB的浓度为5~500 ng/ml时,随样品中SEB浓度的增加,污染样品的回收率变异系数减小,检测准确度提高。[结论]对不同污染程度的牛奶样品,利用间接竞争ELISA法检测其SEB残留的灵敏度远远高于生化法。     

酶联免疫吸附法检测鸡蛋中三聚氰胺的残留

将三聚氰胺与琥珀酸酐反应以合成半抗原,再采用混合酸酐法合成人工完全抗原,然后免疫新西兰白兔获得针对三聚氰胺的特异性抗体(IC50为42 ng/mL),以此抗体为核心建立了检测三聚氰胺的间接竞争酶联免疫吸附检测法,检测限为8.5 ng/mL。鸡蛋样品以氨化乙腈提取,正己烷去脂,微孔滤膜过滤后检测;在空白样品中添加不同浓度的三聚氰胺,回收率范围为88.9%～96.1%,变异系数小于11.6%。表明:酶联免疫吸附法,快速、简便且灵敏,可作为鸡蛋或其他动物性食品中三聚氰胺残留的常规筛选方法。     

动物饲料中玉米赤霉烯酮ELISA检测方法的建立

为检测动物饲料中玉米赤霉烯酮的含量,建立酯联免疫检测法(ELISA).结果显示:该方法检测回收率范围为67%～99%,其最低检出限为0.1 μg/kg;以建立的ELISA法对随机添加的35个普通动物饲料样本进行分析,并以HPLC法对同一批样品进行检测,两种方法回收率相关系数为0.956 1.证明建立的ELISA检测方法适合动物饲料中玉米赤霉烯酮的检测.     

双抗夹心酶联免疫分析法检测食品中鸡蛋过敏原

[目的]建立食品中鸡蛋过敏原的酶联免疫检测方法。[方法]以卵白蛋白为检测对象,分别制备抗卵白蛋白的多克隆和单克隆抗体。将单克隆抗体作为包被抗体,辣根过氧化物酶标记多克隆抗体为二抗构建卵白蛋白的双抗夹心ELISA方法。[结果]该方法的IC50为260 ng/ml,检出限为10 ng/ml,样品的添加回收率为84.2%～89.8%,相对标准偏差小于10%。[结论]该试验建立的分析方法稳定可靠,能满足食品中鸡蛋过敏原准确、快速的检测需要。     

微囊藻毒素(MC-LR)ELISA检测方法的改进及误差分析

针对间接竞争ELISA检测微囊藻毒素(MC-LR)方法,利用微振荡免疫反应可缩短整个检测时间约60min.同时考察了水样中盐分、金属离子和pH值对测定结果的影响,并提出了可以利用稀释法减少甚至消除这些误差影响.     

鸡肉中呋喃它酮代谢物（AMOZ）残留检测方法-酶联免疫吸附试验

为监测上市鸡肉中兽药残留情况,确定养殖户在养殖过程中对禁用药的控制是否符合国家检测标准,应用间接竞争性酶联免疫方法 对合同养殖户随机抽取的15批待上市鸡肉中呋喃它酮代谢物含量进行了检测.取待测鸡腿部肌肉经过16 h衍生化及前处理后,取处理后样本加入酶标板.用酶标仪以双波长450/630 nm下读取吸光度值,得出样本中呋喃它酮的残留量.经测定,所测15个样本中呋喃它酮含量水平均未超出国家质量监督检验检疫总局0.5 μg/kg最这个最低检测限,符合国家动物源性食品中兽药残留标准,允许上市和出口.     

三氮苯类除草剂的酶联免疫吸附测定（ELISA）方法研究

根据三氮苯类除草剂的结构特征，合成了三种不同的抗原，制备了三种高效价抗体，建立了检测莠去津、西玛津、扑草净残留量的酶联免疫吸附测定（ELISA）方法，方法的检测极限分别为1ng·mL－1，0．5ng·mL－1和2ng·mL－1。三种抗体对待检农药均有很高的特异性，H1BSA抗体对莠去津、西玛津、扑草净、西草净和环嗪酮的交叉反应分别为100％，10％，7．1％，1．4％和0；H2BSA抗体分别为44．6％，100％，0．31％，0．25％和0；H3BSA抗体分别为50．1％，8．9％，100％，25．1％和0．08％。对五种非三氯苯类除草剂丁草胺、氟乐灵、麦草畏、甲草胺、氟磺胺草醚均无交叉反应。     

应用酶联免疫吸附试验检测牛肺疫血清抗体的研究

本文用普通ELISA和BA--ELISA检测牛肺疫血清抗体并与间接血凝试验和补体结合试验作比较,结果表明阳性检出率BA--ELISA(86.7%,13/15)>普通ELISA(80%,12/15)>间接血凝(53.3%,8/15)>补反试验(40%,6/15)。8种类症鉴别血清中6种呈现ELISA阴性。故认为ELISA是一种特异、敏感、快速、简便的血清学检测牛肺疫的方法,适于在现地检验时应用。     

山羊关节炎-脑炎ELISA方法的建立及其应用

 应用间接酶联免疫吸附试验（ELISA），检测了山羊关节炎-脑炎病毒（CAEV）试验感染山羊和自然感染山羊的血清抗体，确定了最适宜的反应条件。CAEV感染山羊血清终点滴度结果表明：ELISA比琼脂扩散试验（ID）敏感性高，对自然感染山羊检出率比ID高3%左右。CAE标准阳性血清和自然感染阳性血清预先被特异性抗原中和后的ELISA反应均呈阴性，从而证实了本方法的特异性。因此，本方法适于CAE的流行病学调查和监测工作。     

醋糟在畜禽养殖中的应用

随着畜牧养殖行业的快速发展,畜禽养殖的规模和数量得到迅速提高,畜禽对于饲料的需求量大幅度上升,传统饲料原料开始出现短缺的情况,一定程度上影响了畜禽养殖产业的快速发展。非常规饲料原料的开发利用对于缓解这种状况具有非常关键的作用,醋糟作为一种营养价值丰富的非常规饲料原料具有非常高的开发价值。文章对醋糟在畜禽动物养殖中的应用进行介绍,旨在为醋糟的推广应用带来帮助。