响应面法优化酶解海洋低值鱼肉制备抗氧化肽工艺

[目的]优化碱性蛋白酶制备海洋低值鱼抗氧化肽的工艺。[方法]以DPPH自由基清除率为指标,在酶解温度、pH、加酶量、底物浓度等条件下进行单因素试验,在此基础上运用响应面法优化碱性蛋白酶酶解低值鱼肉制备抗氧化肽的工艺条件。[结果]在温度54℃、pH 8.8、底物浓度200 g/L、加酶量2 500 U/g的条件下酶解3 h,得到抗氧化肽的DPPH自由基清除率理论值为62.66%,实际值为61.87%,相对误差为1.26%。[结论]该研究为低值鱼抗氧化肽的开发利用提供理论依据。     

米糠蛋白抗氧化肽的制备及初步分离

试验以米糠蛋白为原料,制备米糠蛋白抗氧化肽。以DPPH自由基清除率为指标,采用正交试验,优化碱性蛋白酶酶解米糠蛋白制备抗氧化肽的工艺条件;采用超滤、SephadesG-25柱层析分离纯化米糠蛋白抗氧化肽。试验结果表明,制备米糠蛋白抗氧化肽的最优工艺条件为：酶解温度45℃,pH9．0,时间60rain,米糠蛋白底物浓度3％,碱性蛋白酶加酶量3000U·g-1。在米糠蛋白酶解产物中,Mrs〈5KDa组分的抗氧化活性最强,其对DPPH自由基清除率为68．7％。通过SephadexG-25凝胶层析柱进一步分离得到4个混合组分,混合组分Ⅱ活性最强,其DPPH自由基清除率为75．83％。     

草鱼鱼鳞抗氧化肽的酶法制备及其抗氧化稳定性研究

【目的】采用碱性蛋白酶水解草鱼鱼鳞制备抗氧化肽,并探讨其稳定性。【方法】运用单因素及正交试验对酶解条件进行优化,并进行体外抗氧化活性的测定,对酶解得到的抗氧化肽进行体外模拟胃肠消化实验。【结果】在优化工艺条件下,鱼鳞酶解液中羟自由基清除率为88.71%;其体外抗氧化能力随肽质量浓度增大而增大,在浓度为0.5 mg/m L时,鱼鳞抗氧化肽清除DPPH自由基能力达到Vc的81.1%;对超氧阴离子自由基清除率为98.97%。在胃肠消化前4 h内抗氧化活性较稳定,之后随时间延长抗氧化稳定性显著下降。【结论】在酶解草鱼鱼鳞的较佳工艺条件:温度60℃、料液比1∶15、加酶量800 U/g、时间3 h下,碱性蛋白酶水解草鱼鱼鳞制备的抗氧化肽具有良好的抗氧化活性及稳定性。     

双酶水解麦胚制备抗氧化肽的工艺优化

以麦胚为原料,制备具有抗氧化活性的麦胚肽。对碱性蛋白酶Alcalase 2.4 L与胰蛋白酶双酶组合酶解麦胚的工艺进行优化。以水解度和1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基清除率为考察指标,探讨酶与底物浓度的比值([E]/[S])、酶降温度和酶解时间对制备麦胚抗氧化肽工艺的影响,采用Box-Behnken中心组合设计和响应面法(RSM)优化了麦胚双酶水解的工艺条件。结果表明:双酶水解麦胚制备抗氧化肽的工艺条件为底物浓度10.0%、碱性蛋白酶与胰蛋白酶酶活比1∶1、[E]/[S]为0.041 3、酶解温度50.3℃、酶解时间2.03 h、pH8.0。验证试验表明,在此条件下,麦胚水解度和抗氧化肽对DPPH自由基清除率分别为16.65%和50.16%;其抗氧化活性小于10 mg/ml VC。     

Alcalase碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

试验研究了以Alcalase碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白制备大豆肽的工艺,分析了温度、pH值、底物浓度、酶与底物浓度比和时间对酶水解的影响。通过均匀设计和统计分析建立了酶水解的数学模型,并以此模型得到了Alcalase碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解工艺。工艺参数为温度60℃、pH8．0、底物浓度8．38％、酶与底物浓度比4．5％、水解时间150min,水解度0．220 221。     

复合酶制备抗氧化活性核桃多肽工艺优化

以碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶复合水解核桃蛋白制备抗氧化活性多肽的工艺条件优化为对象,通过研究酶解时间、酶解温度、酶与底物浓度比及复合酶比例对核桃蛋白酶解物清除DPPH·能力的影响,并利用正交试验优化工艺条件,以提高核桃蛋白多肽对DPPH·的清除率。结果表明,酶解时间、酶解温度、酶与底物浓度比及复合酶比例对核桃蛋白酶解物清除DPPH·能力有一定影响;当木瓜蛋白酶与碱性蛋白酶复合酶解温度为45℃、时间1.5h、酶与底物浓度1500U/g、pH值7.0、复合酶比例为2∶1时,酶解物清除DPPH·的能力最强,清除率达78.7%。     

酶解鳙鱼蛋白制备活性肽的研究

以鳙鱼(Aristichthysnobilis)鱼肉蛋白为原料,采用木瓜蛋白酶对鳙鱼蛋白进行酶解,制备具有抗氧化活性的可溶性肽。研究酶浓度、底物浓度、温度、时间、pH对水解度和DPPH·自由基清除率的影响。通过正交试验设计对酶解工艺进行优化。结果表明,酶解的最佳条件是酶浓度1 400 U/g,底物浓度3.0%,温度60℃,酶解2 h,pH 7.0,在此条件下,所得可溶性肽的活性最高,对DPPH·自由基的清除率为69.09%,对羟自由基的清除率为75.22%,对O_2~-·自由基的清除率为61.92%。     

Alcalase碱性蛋白酶制备蚯蚓肽的酶解参数研究

为解决畜禽养殖污染问题及开发蛋白质饲料资源提供理论依据,以Alcalase碱性蛋白酶为工具,采用单因素(温度、酶解时间、pH值、酶用量及底物浓度比)试验考察了蚯蚓蛋白酶的酶解效果,再通过正交试验优化酶解参数.结果表明:1)单因素试验:蚯蚓蛋白水解度随酶解时间的延长而呈上升趋势,5 h后上升趋于平缓;随着温度的升高和pH值的增大均呈先上升后下降的趋势,60℃和pH值达8.0时达最大值;随酶用量的增加和底物浓度的增大均呈先上升后下降的趋势,酶用量超过4%和底物浓度达6%后开始下降.正交试验:酶解温度、时间、pH和加酶量对蚯蚓蛋白的酶解度有显著或极显著的影响,4个因素作用的主次顺序为:酶用量＞温度＞pH＞时间;最优组合为温度65℃、时间4 h、pH值8.0、加酶量5%.Alcalase碱性蛋白酶制备蚯蚓小肽的最佳工艺参数为底物浓度6%、温度65℃、时间4 h、pH值8.0、加酶量5%.     

超声辅助酶法制备山杏仁多肽

本研究以山杏仁为原料,研究了蛋白酶种类、超声功率、超声时间、超声温度、加酶量、pH值、底物浓度对水解度和多肽得率的影响。结果表明:超声功率80 w、超声时间180 min、超声温度50℃、复合蛋白酶加量5000 U/g,pH值6.0,底物浓度40 g/L,山杏仁多肽得率达到最大。该条件下,山杏仁多肽得率为56.68±0.99%。     

罗非鱼鱼鳞活性肽的提取及其抗氧化活性研究

以罗非鱼鱼鳞为材料,采用单因素试验和正交试验,探讨了酶解提取罗非鱼鱼鳞活性肽的最佳条件,应用ABTS法和DPPH法评价其抗氧化活性。结果表明,酶解提取该活性肽的最佳工艺参数为:pH值9.0、水解温度55℃、料液比4%、碱性蛋白酶5 g/L、水解时间2 h。在此条件下,罗非鱼鱼鳞水解度保持20%左右,所提取物活性肽具有较强的抗氧化活性,其对ABTS的清除率为70.76%、对DPPH的清除率为73.02%。