富硒秀珍菇菌粉的抗氧化作用及其安全性初步研究

采用急性毒性试验和D-半乳糖氧化损伤小鼠模型试验研究富硒秀珍菇菌粉的急性毒性和对D-半乳糖致氧化损伤小鼠的抗氧化作用。急性毒性试验结果表明,富硒秀珍菇菌粉对雌雄小鼠经口最大耐受量(MTD)均大于20.0g·kg-1,初步评价认为,富硒秀珍菇菌粉不存在急性毒性风险。D-半乳糖氧化损伤小鼠模型试验表明,与模型对照组比,富硒秀珍菇菌粉三组的丙二醛(MDA)和蛋白质羰基含量均明显降低(P0.01),低、中、高剂量组的MDA分别降低20.08%、22.19%、39.26%,蛋白质羰基分别降低38.31%、44.16%和25.32%;富硒秀珍菇菌粉3个剂量组的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力与模型对照组比均提高,其中,中剂量组和高剂量组均显著提高18.50%左右(P0.05)。值得特别注意的是,与空白对照比,富硒秀珍菇菌粉3个剂量组的MDA、蛋白质羰基、GSH-Px没有显著差异;说明富硒秀珍菇菌粉对氧化损伤的修复效果基本达到空白对照小鼠水平。     

不同硒源对仔猪组织硒沉积和抗氧化能力的影响

将32头体重15 kg左右的三元杂交(杜×长×大)断奶仔猪均分成4组,对照组日粮中不添加硒,3个补硒组分别添加富硒益生菌、富硒酵母、亚硒酸钠,其剂量以硒计,均为0.3 mg.kg-1。试验期为60 d。结果表明:(1)试验结束时,3个补硒组的肌肉、肾、肝中硒含量均极显著高于对照组(P<0.01),其中富硒益生菌组和富硒酵母组极显著高于亚硒酸钠组;(2)在30和60 d时,3个补硒组血液中GSH-Px活性、SOD酶活性、全血硒含量均显著或极显著高于对照组,血清中MDA含量均显著低于对照组(P<0.05);(3)富硒益生菌能显著提高仔猪的生长性能。     

内质网分子伴侣GRP94对伪狂犬病毒增殖的调节作用

为探究葡萄糖调节蛋白94(GRP94)对伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)增殖的影响,以及GRP94与PRV结构蛋白之间的相互作用。利用慢病毒转染构建GRP94基因过表达的BHK-21细胞,以及CRISPR/Cas9技术构建GRP94基因敲除的BHK-21细胞,检测PRV感染不同细胞的增殖水平,比较内质网应激相关蛋白表达水平,探索GRP94与PRV结构蛋白之间的互作关系。结果表明,GRP94基因过表达细胞株显著有利于PRV增殖,而GRP94基因缺失细胞株对PRV增殖无显著影响。蛋白免疫印迹结果显示,在GRP94基因缺失细胞株中,GRP78表达水平显著上调。免疫共沉淀结果表明,GRP94与gB、gD、gL具有相互作用。GRP94基因过表达有利于PRV增殖,检测未折叠蛋白反应(unfolded protein response, UPR)相关蛋白,研究GRP94在病毒增殖过程中的具体作用,可为PRV与内质网应激提供分子方面的研究基础,于对抗PRV病毒的感染具有重要意义。     

富硒酵母对蛋鸡生产性能、全血GPX活性和鸡蛋硒含量的影响

将300羽罗曼蛋鸡随机均分成3组,1组为对照组,饲以基础蛋鸡日粮;2组和3组为试验组,分别添加富硒酵母和亚硒酸钠,其剂量以硒计算,均为0．2mg／kg。试验期为35d。试验过程中,记录蛋鸡的生产性能,于试验的14d和35d采取全血测定GPX活性,于试验的14d、28aN35d采取鸡蛋测定硒含量。结果表明,日粮中添加富硒酵母或亚硒酸钠对蛋鸡的生产性能均无显著影响（P〉0．05）;日粮中添加富硒酵母或亚硒酸钠均能显著提高蛋鸡全血GPX活性（P〈0．05）,而亚硒酸钠提高蛋鸡全血GPX活性的能力优于富硒酵母（P〈0．05）;日粮中添加富硒酵母或Ⅱ硒酸钠均能显著提高鸡蛋硒含量（P〈0．05）,而富硒酵母提高鸡蛋硒含量的能力优于亚硒酸钠（P〈0．05）。     

黄芪多糖在小鼠肝脏脂肪变性中的作用

研究黄芪多糖对饮食诱导的小鼠肝脏脂肪变性的预防作用与机制。采用高脂果糖饮食诱导小鼠肝脏脂肪变性模型,造模同时采用400 mg/kg黄芪多糖灌胃预防组小鼠,观察各组小鼠的肝脏组织病理学特征,检测肝功能、血脂与肠道通透性相关指标,免疫印迹分析肝脏TLR4和MyD88蛋白表达。结果表明,与模型组相比,黄芪多糖预防组小鼠肝脏脂肪变性程度减轻,血清ALT、AST、ALP、TG、TC和GLU水平显著降低,VDL水平显著升高,肠道通透性减小,肝脏TLR4和MyD88蛋白表达水平下降。黄芪多糖可预防小鼠肝脏脂肪变性的发生,其机制与改善肠道屏障,调控TLR4/MyD88信号通路有关。     

不同硒源对仔猪生产性能和抗氧化能力的影响

为研究日粮中不同硒源及添加水平对仔猪生产性能及抗氧化能力的影响,选用35日龄断奶三江白猪仔猪90头,随机分为10组。第1组到第9组日粮中分别添加纳米硒、酵母硒、亚硒酸钠,剂量以硒计,均为0.1、0.3、0.5 mg.kg-1三个水平,第10组对照组日粮中不另添加硒,试验期为35 d。试验期结束测定血清中的GPX、SOD、MDA、T-AOC、CAT。结果显示:①不同硒源及各添加水平的仔猪平均日增重、日采食量、料重比,各组间差异均不显著(P0.05);②血清中GPX、SOD、T-AOC的水平均以0.5 mg·kg-1纳米硒组最高,其中GPX水平显著高于0.1 mg·kg-1的纳米硒、酵母硒、亚硒酸钠添加组及对照组(P0.05)。MDA水平以0.5 mg·kg-1纳米硒组最低,且显著低于0.5 mg·kg-1的亚硒酸钠组及对照组(P0.05)。CAT的水平0.3 mg·kg-1酵母硒添加组最高,且显著高于0.1 mg·kg-1各个硒源添加组及对照组(P0.05)。结论:日粮中添加0.3、0.5 mg·kg-1水平的硒能在一定程度上提高断奶仔猪的抗氧化能力,纳米硒优于酵母硒和亚硒酸钠,纳米硒以0.5 mg·kg-1添加量的效果较好。     

木犀草素对对乙酰氨基酚诱导肝损伤的保护作用

【目的】基于内质网应激（ERS）和氧化应激途径，探讨木犀草素（luteolin）对对乙酰氨基酚（APAP）诱导的肝损伤的保护效果及其潜在的作用机制。【方法】将48只昆明小白鼠随机分为6组，分别为正常对照组（NC）、木犀草素对照组（MD）、APAP肝损伤模型组（APAP）以及木犀草素低、中、高剂量组（ML、MM、MH），每组8只小鼠，NC和MD组腹腔注射生理盐水，其余各组小鼠按300 mg/kg的剂量腹腔注射APAP注射液，每天2次，连续注射4 d，给药4 d后NC组和APAP组灌胃生理盐水，MD、ML、MM、MH小鼠分别按照100，25，50，100 mg/kg的剂量灌胃木犀草素药液，每天2次，连续灌胃3 d，最后一次灌胃12 h后，分别检测小鼠血液中的谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）活性以及肝脏中的氧化应激指标（超氧化物歧化酶（SOD）活性及过氧化氢（H₂O₂）、谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）含量），在显微镜下观察各组小鼠肝组织的病理变化，并采用探针药物法测定肝脏微粒体细胞色素P450 2E1酶(CYP2E1)活性，采用qRT-PCR检测CYP2E1 mRNA表达水平，用Western Blot检测肝组织葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、增强子CCAAT结合蛋白同源蛋白（CHOP）、CYP2E1蛋白表达水平。【结果】与NC组相比，APAP模型组的ALT和AST活性极显著升高，MD组上述2种酶活性无显著变化。与APAP模型组相比，MM、MH组ALT和AST活性显著或极显著下降。与APAP模型组相比，ML、MM、MH组的GSH含量和SOD活性均明显增加，MDA和H₂O₂含量均明显降低。小鼠肝组织病理形态显微观察结果表明，MM、MH组可以改善APAP导致的肝索消失以及肝细胞排列散乱和细胞核溶解等病理症状。探针药物法测定结果显示，0.1，0.01和0.001 mg/mL的木犀草素可以显著降低CYP2E1活性。qRT-PCR和Western Blot结果显示，木犀草素可以显著或极显著降低CYP2E1基因及其蛋白的表达水平，极显著降低GRP78和CHOP蛋白表达水平。【结论】木犀草素具有明显的抗APAP诱导的肝损伤作用，其作用机理可能是通过抑制CYP2E1的表达、减轻氧化应激和内质网应激水平，从而减轻APAP诱导的肝损伤。     

酸茶对高脂饮食小鼠白细胞、血脂及肝功能的影响

为探究酸茶水提物对高脂饮食小鼠白细胞、血脂水平、ALT、AST活性及肝脏组织形态学变化的影响,分别以酸茶1.0 (低)、2.0 (中)、3.0 g·kg~(-1)(高)剂量对高脂饮食小鼠干预12周后,检测小鼠外周血象白细胞变化情况,以及检测血清中胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)与高密度脂蛋白胆固醇(HDL)含量及肝脏中谷丙转氨酶(ALT)与谷草转氨酶(AST)活性变化,并计算动脉粥样硬化指数(AI)值,同时采用HE染色观察肝组织形态学变化。结果表明:酸茶水提物能显著抑制高脂饮食小鼠白细胞数、中性粒细胞数、单核细胞数及淋巴细胞数显著升高;低剂量酸茶水提物显著降低高脂饮食小鼠肝脏AST活性;中剂量酸茶水提物显著降低高脂饮食小鼠血清TG含量、AI值及肝脏ALT、AST活性,显著提高小鼠血清HDL含量;高剂量酸茶水提物显著降低高脂饮食小鼠血清TG、LDL含量、AI值及肝脏AST活性。肝组织病理切片显示,中、高剂量酸茶水提物可改善高脂饮食小鼠肝组织脂肪变性,其中高剂量效果较好。酸茶水提物可使高脂饮食小鼠升高的白细胞数恢复到参考值范围内,改善高脂饮食小鼠血脂水平,减少肝组织的脂肪变性。     

不同硒源对肉鹅免疫与抗氧化功能的影响

为研究不同硒源对肉鹅免疫与抗氧化功能的影响,试验选用1日龄健康、体重相近(P0.05)的肉鹅96只,按单因素完全随机设计分成4组,在基础日粮一致的情况下,分别添加同水平(0.3 mg/kg)的不同硒源。结果表明:除9周龄纳米硒组脾脏指数与对照组差异不显著(P0.05)外,第4,9周龄其余各试验组胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指数均显著高于对照组(P0.05),但不同硒源间差异不显著(P0.05);第4,9周龄T淋巴细胞转化率与对照组相比,亚硒酸钠组、纳米硒组均显著提高(P0.05),酵母硒组极显著提高(P0.01),且酵母硒组显著高于亚硒酸钠组(P0.05)。各试验组4,9周龄血清与肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)均显著高于对照组(P0.05);各试验组4,9周龄血清与肝脏中丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)均显著低于对照组(P0.05)。GSH-PX活力,4周龄血清不同硒源间差异不显著(P0.05),4周龄肝脏、9周龄血清与肝脏酵母硒组均显著高于亚硒酸钠组(P0.05)。T-SOD活力,4,9周龄血清与肝脏不同硒源间差异不显著(P0.05)。T-AOC,4,9周龄血清,4周龄肝脏酵母硒组均显著高于亚硒酸钠组(P0.05),9周龄肝脏纳米硒组显著高于亚硒酸钠组(P0.05)。MDA含量,4,9周龄血清与肝脏酵母硒组均显著低于亚硒酸钠组(P0.05)。H2O2含量,4,9周龄血清与肝脏不同硒源间差异不显著(P0.05)。上述结果表明,日粮中添加硒可以提高鹅的免疫与抗氧化功能;与亚硒酸钠和纳米硒相比,酵母硒影响更为显著。