CaBP-D28k在蛋鸡生殖器官中的表达及其与蛋品质性状的关联分析

研究采用荧光定量PCR技术对Ca BP-D28k在蛋鸡生殖器官中的表达量进行分析,并利用SSCP技术寻找Ca BP-D28k的SNPs位点,继而与蛋品质性状进行关联分析。结果表明:1 Ca BP-D28k在各部位的表达情况为:输卵管子宫部输卵管伞部卵巢输卵管膨大部输卵管峡部。以卵巢为参照基准1,输卵管子宫部Ca BP-D28k表达量约为其73倍,差异极显著(P0.01),输卵管峡部、膨大部与卵巢Ca BP-D28k表达量差异显著(P0.05)。2 Ca BP-D28k第三外显子存在A5115G的突变位点,共检测到3种基因型(AA、AG和GG)。AG型蛋壳强度极显著高于AA和GG型(P0.01),GG型哈氏单位与AA和AG型存在显著差异(P0.05)。结果表明,Ca BP-D28k在蛋鸡生殖器官中有相对量的差异,并与蛋壳形成过程中钙离子的转运有密切联系;AG型为调控蛋壳强度和哈氏单位的优势基因型,研究结果为SNPs辅助选择育种提供了理论基础。     

蛋壳形成过程中部分生殖激素及其受体基因变化规律的研究

为了解蛋鸡产蛋过程中相关激素和受体基因的变化规律,试验采用放射免疫技术(RIA)和荧光定量PCR技术对蛋壳形成过程中血清孕酮(P4)、雌二醇(E2)2种激素含量的动态变化和孕酮受体(PR)、雌激素受体(ERα)在输卵管子宫部的表达进行测定。结果表明:蛋进入子宫前1小时孕酮含量最高,与其他时间点相比差异极显著(P0.01),蛋进入子宫部后孕酮含量逐渐下降,直到产蛋后1小时孕酮含量开始上升;雌二醇含量在蛋进入输卵管子宫部15小时最高,蛋排出时最低,产蛋后1小时开始升高;蛋壳形成过程中PGRmRNA的变化趋势是下降-上升-下降,蛋进入输卵管子宫部15小时PGR表达量较蛋排出时有极显著提高(P0.01),之后PGR表达量开始下降;在蛋壳形成过程中ERα表达量呈先上升后下降的趋势,在蛋进入输卵管子宫部45分钟时ERα表达量最高,与蛋排出时、产蛋后1小时相比差异极显著(P0.01)。     

蛋鸡不同产蛋期生殖器官中OC17,OC116和OCX32 mRNA相对定量研究

Ovocleidin-17(OC17),Ovocleidin-116(OC116)和Ovocalyxin-32(OCX32)是蛋壳中的特异性基质蛋白,对蛋壳的钙化有重要的调节作用。本试验采用RT-PCR、RT-QPCR分别检测了蛋鸡在产蛋初期、高峰期和后期的卵巢、输卵管的伞部、膨大部、峡部以及子宫部OC17、OC116和OCX32的表达量变化。结果显示:在不同产蛋期3个基因在输卵管峡部和子宫部的表达量均显著或极显著(P0.05或P0.01)高于其他组织;卵巢和输卵管中OC17、OC116和OCX32在产蛋高峰期,初期和后期的表达量变化存在显著或极显著差异(P0.05或P0.01);3个产蛋期OCX32在5个组织中的表达量均极显著高于OC17和OC116(P0.01)。研究结果揭示了蛋壳特异性基质蛋白基因OC17、OC116和OCX32在不同产蛋期蛋鸡生殖器官中的表达规律,为蛋壳形成的分子机理研究提供了理论依据。     

鸡甲状旁腺素基因质粒对蛋鸡生产性能、蛋壳质量及血液激素水平的影响

试验选用56周龄新扬州鸡产蛋鸡150只,随机分为3个处理,每个处理5个重复,各重复10只.研究经腿肌注射0、200和400μg鸡甲状旁腺素基因质粒(pCEP4-PTH)对蛋鸡生产性能、蛋壳质量和血液部分激素的影响.试验结果表明,pCEP4-PTH基因质粒可改善蛋鸡生产性能;200μg注射量可显著改善蛋壳强度(P<0.05),400μg注射量对蛋壳质量影响不显著;pCEP4-PTH基因质粒可在蛋鸡体内良好表达,甲状旁腺素(PTH)水平均显著升高(P<0.05),且注射400 μg时达到极显著水平(P<0.01),注射400 μg pCEP4-PTH基因质粒具有促进内源降钙素(CT)和雌激素(E2)分泌的作用(P<0.05),因而不利于其生物学效应的发挥,两试验组骨钙素(BGP)与对照组差异不显著,提示生产性能和蛋壳质量的改善未对骨骼造成不良影响.pCEP4-PTH基因质粒可改善蛋鸡生产性能和蛋壳质量,且不影响骨骼质量.     

雌激素和孕酮对犬子宫内膜基质细胞增殖和孕酮受体表达的影响

本试验应用不同消化分离途径获取犬子宫内膜基质细胞,调节培养液中雌激素(E₂)和孕酮(P₄)的浓度,采用MTT法测定E₂和P₄浓度水平对犬子宫内膜基质细胞体外增殖的影响,利用细胞免疫组织化学法鉴定细胞并测定细胞孕酮受体(PR)表达与激素浓度水平的相关性。结果表明,E₂浓度变化(15、30、100 pg/mL)对犬子宫内膜基质细胞的增殖和PR的表达均没有显著的调节作用(P>0.05);P₄(15、30 ng/mL)对犬子宫内膜基质细胞的增殖有显著促进作用(P<0.05),P₄(3、15、30 ng/mL)对犬子宫内膜基质细胞PR的表达具有显著的抑制作用(P<0.05),其影响程度与浓度和作用时间关系密切。     

海兰褐蛋鸡卵巢与输卵管ESR基因定量研究

为了研究海兰褐蛋鸡卵巢、输卵管漏斗部(以下简称漏斗部)与输卵管子宫部(以下简称子宫部)雌激素受体基因表达水平,试验采用荧光定量PCR技术检测蛋鸡的卵巢、漏斗部与子宫部的雌激素受体表达情况。结果表明:漏斗部组织ESR1 mRNA表达水平与其他两组相比差异极显著(P0.01);子宫部、卵巢组织ESR1 mRNA表达水平差异不显著(P0.05)。说明雌激素受体与漏斗部功能可能存在着密切的关系。     

孕酮对绵羊输卵管上皮细胞β-防御素2表达的影响

研究孕酮(P4)对绵羊输卵管上皮细胞β-防御素2(SBD2)基因表达的影响,探讨P4调节SBD2表达的潜在机制。建立绵羊输卵管上皮细胞体外培养体系,用不同浓度(10^-6、10^-7、10^-8、10^-9、10^-10mol/L)P4分别处理绵羊输卵管上皮细胞0、2、6、12、24、48h,筛选P4诱导绵羊输卵管上皮细胞SBD2mRNA表达的最佳条件。然后使用10-6mol/L孕激素核受体拮抗剂RU486,50μmol/L蛋白激酶C(PKC)信号通路阻断剂H7预处理细胞1h,再使用P4诱导SBD2mRNA表达的最佳条件处理细胞,同时设只添加阻断剂(RU486和H7)处理组、只添加孕酮(P4)处理组和空白对照组,通过RT-qPCR技术检测SBD2mRNA的表达变化。10-9mol/LP4诱导绵羊输卵管上皮细胞6h和24h时SBD2mRNA表达显著高于对照组(P<0.01),且与P4组相比,添加RU486和H7后显著抑制了P4诱导的SBD2mRNA的表达水平(P<0.01)。P4以浓度和时间依赖性方式显著增加SBD2mRNA表达,并且诱导可能通过孕酮核受体(PR)介导的基因组途径以及PKC信号通路来提高绵羊输卵管上皮的先天免疫防御能力。     

M41型IBV对输卵管中雌激素、孕激素受体及胰岛素生长因子-Ⅰ表达的影响

本试验通过相对定量RT-PCR检测接种M41型鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)对蛋鸡输卵管各部分(蛋白部、峡部、伞部和子宫)雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及胰岛素生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)mRNA表达的影响,研究IBV早期感染(10 d)抑制蛋鸡输卵管发育的作用机制。结果显示,输卵管各部均有ER、PR和IGF-Ⅰ mRNA的表达,染毒组ER、PR mRNA的表达量较正常对照组显著减少(P＜0.05),而IGF-Ⅰ的表达量较正常对照组显著增加(P＜0.05)。可见IBV可通过降低ER和 PR mRNA的表达水平,抑制输卵管对雌激素的应答能力而影响输卵管的发育;而IGF-Ⅰ可能是以自分泌、旁分泌方式在输卵管局部起作用,是输卵管生长的调节因子。     

“益母散”对蛋鸡输卵管修复和产蛋性能的影响

试验旨在研究"益母散"(由淫羊藿、益母草、菟丝子组成)对病愈低产蛋鸡产蛋率、输卵管发育和修复的影响。通过对150只健康高产蛋鸡和150只低产蛋鸡对比试验,首先检测"益母散"对产蛋率和输卵管重的影响,然后对采集的样本进行HE染色、PCR扩增、血液激素水平测定,以进一步研究"益母散"对输卵管修复的作用机理。结果显示:"益母散"1%和2%添加剂量均能使病愈低产蛋鸡产蛋率极显著提高(P0.01),但对高产蛋鸡的产蛋率无明显影响(P0.05);"益母散"1%和2%添加剂量均能使低产蛋鸡输卵管重量极显著增加(P0.01)、血清雌激素水平明显提高(P0.01)、蛋白分泌部和子宫部雌激素受体mRNA表达明显增加。研究表明:"益母散"可通过提高蛋鸡内源性雌激素水平和输卵管雌激素受体表达促进输卵管的发育和修复,从而提高低产蛋鸡的产蛋率。     

孕酮对鸡蛋壳品质的影响

本试验旨在通过腿肌注射孕酮来研究孕酮对蛋壳品质的影响。选取72只40周龄的海兰褐蛋鸡,随机分为6组,每组12只蛋鸡,单笼饲养。对照组注射花生油;处理1在排卵后5 h注射1.00 mg/kg体重(BW)的孕酮;处理2和处理3分别在排卵后5 h和2 h注射0.25 mg/kg BW的孕酮;处理4和处理5分别在排卵后2 h和1 h注射0.15 mg/kg BW的孕酮。处理后第2天上午收集各组所产鸡蛋,测定蛋壳强度和厚度。结果表明:处理1所产蛋均为破壳蛋,处理2含部分破壳蛋和部分蛋壳完好的鸡蛋,处理3、处理4和处理5没有破壳蛋;与对照组相比,处理1和处理2的蛋壳厚度降低(P<0.05),处理4蛋壳强度和厚度增加(P<0.05),处理3和处理5的蛋壳强度和厚度无显著差异;与对照组比,处理1和处理4的蛋壳超微结构差异显著。结果显示,孕酮可以影响蛋壳强度和厚度,改变蛋壳超微结构,其影响程度与剂量和注射时间有关。     

Effects of Estradiol and Progesterone on the Numbers and Distribution of Mastocytes in the Uterus of Ovariectomized Rats

The purpose of this study was to investigate the effects of estradiol(E)and progesterone(P)on mastocyte distribution in the uterus of ovariectomized rats.Thirty-five adult female rats were divided randomly into seven groups:one sham operated control group(SHAM);one ovariectomized group(OVX);three ovariectomized plus E treatment groups(OVX+E 20,100,or 500 μg/kg body weight·d);and two ovariectomized plus P groups(OVX+P 2 or 10 mg/kg body weight·d).Seven days after treatment,the contents of estradiol and progesterone in serum were detected by radioimmunoassay,and mastocytes in the uterus were stained by toluidine blue staining.Results were as following:① Compared to ovariectomized rat,the concent ration of estradiol in serum increased by 97.13 % in OVX+E 20(P0.05),204.84 % in OVX+E 100(P0.05),and 936.45 % in OVX + E 500 group(P0.05);the progesterone concent ration increased by 77.25 % in OVX+P 2(P0.05)and 235.25 %in OVX+P 10 group(P0.05).② Compared to ovariectomized rat,the number of mast cells in uteri decreased by 32.65% in OVX+E 20,64.50 % in OVX+E 100(P0.05),74.49 % in OVX+E 500(P0.05)and 70.67 % in OVX+P 10 groups(P0.05).However,the number of mast cells increased by 66.73% in OVX+P 2 group(P0.05)compared with OVX.The trend of mast cells number in the rat uterus was decreased gradually with the increase of estrogen or progesterone concent ration.The number of mast cells in ovariectomized rat uterus was affected by estrogen or progesterone.These results demonstrated that estrogen or progesterone directly affected the number of mast cells in the uterus of rat.     

能量对蛋鸡卵巢促卵泡素受体mRNA表达及产蛋率的影响

为了探讨不同日粮能量水平对蛋鸡性成熟过程中卵巢促卵泡素受体(FSHR)mRNA表达及产蛋率的影响,试验选取360只体莺相近的8周龄海兰褐壳蛋鸡,采用单因素随机试验,随机分为5个组,每个组4个重复,每重复18只鸡.在蛋鸡采食其他营养成分相同的情况下,配制不同梯度的能量饲料,采用相对定量反转录-聚合酶链反应方法,测定蛋鸡性成熟过程中卵巢FSHR mRNA表达量.结果表明:高能组卵巢FSHR mRNA的表达量呈先升后降的趋势;对照组、低能组随周龄的增加鸡卵巢FSHR mRNA表达量逐渐增加.14周龄,低能Ⅱ组卵巢FSHR mRNA表达量显著低于其他4组(P<0.05);18周龄,对照组鸡卵巢FSHR mRNA表达量显著高于低能Ⅱ组(P<0.05),除对照组外的其他4组间差异不显著(P>0.05);22周龄,对照组与高能Ⅱ组和低能Ⅰ组间没有差异(P>0.05),却显著高于高能Ⅰ组和低能Ⅱ组(P<0.05).鸡22周龄卵巢FSHR mRNA表达量与22、28周龄产蛋率呈极显著正相关(P<0.01),与35周龄产蛋率呈显著正相关(P<0.05),而与46周龄产蛋率无显著相关(P>0.05).结果提示,适当的能量水平可以提高FSHR mRNA的表达,进而提高产蛋率.     

山楂叶黄酮对产蛋后期种鸡蛋壳品质的影响

山楂叶黄酮（HF）是山楂叶提取物,具有抗氧化、抗炎和降血脂的作用。本试验旨在研究日粮HF对产蛋后期种母鸡蛋壳品质的影响。选取体重相近的60周龄健康种母鸡（栖岭草鸡）270只,随机分为3组,每组6个重复,每个重复15只鸡。对照组（CON）饲喂玉米-豆粕型基础日粮（BD）,低剂量组（LHF）饲喂BD+30 mg·kg^-1 HF日粮,高剂量组（HHF）饲喂BD+60 mg·kg^-1 HF日粮。试验预饲2周,正式饲喂8周,最后,采集种蛋测定蛋壳品质,采集血样测定钙和磷含量,采集壳腺组织观察组织形态学、细胞凋亡和抗氧化蛋白的变化。结果显示：1）与CON组相比,HF处理显著提高了蛋壳厚度和蛋壳强度（P<0.05）,对蛋黄颜色、蛋白高度、哈氏单位和壳腺的器官指数没有显著影响（P>0.05）。2）与CON组相比,HF处理显著提高了血清钙的含量（P<0.05）,显著上调了壳腺部CaBP-D28K、OPN和OC-116基因mRNA的表达水平（P<0.05）,HHF组壳腺部Ca²⁺ATP酶的活性显著提高（P<0.05）。3）组织学切片分析表明,HF处理显著降低了壳腺细胞的凋亡率（P<0.05）,并显著提高了壳腺部绒毛的长度和腺体的密度（P<0.05）。4）与CON组相比,HF处理组壳腺部MDA的含量显著降低（P<0.05）,HHF处理显著提高了GSH-Px酶的活性（P<0.05）。5）HHF组壳腺部KEAP1、p-NFκB/NFκB和Bax/Bcl2蛋白表达水平较CON组显著降低（P<0.05）;Nrf2、HO-1和PCNA蛋白的表达量则显著提高（P<0.05）。综上,日粮中添加60 mg·kg^-1的HF通过激活Nrf2/HO-1信号通路增强壳腺的抗氧化能力,改善细胞凋亡进程和钙离子转运能力,从而提高产蛋后期种鸡的蛋壳品质。     

孕酮对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞表达TNF-α、IL-1β、TLR4、CD14和MD2的影响

先分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,经差速贴壁法纯化后,随机分为6组：空白对照组、0.5mg/L脂多糖（LPS）组、10-6 mol/L孕酮（P4）组、LPS＋10-5 mol/L P4组、LPS＋10-6 mol/L P4组、LPS＋10-7 mol/L P4组。各组在处理12、24h分别提取上清液,ELISA法测TNF-α和IL-1β的含量;各组在处理24h分别提取细胞总RNA,用RT-PCR法测TLR4、CD14、MD2mRNA的表达。结果显示,处理12、24h,0.5mg/L LPS组TNF-α和IL-1β的含量均极显著高于对照组（P〈0.01）;10-6 mol/L P4组与对照组差异不显著（P〉0.05）;LPS＋10-5 mol/L P4组极显著低于对照组（P〈0.01）;LPS＋10-6 mol/L P4组显著低于对照组（P〈0.05）;而LPS＋10-7 mol/L P4组TNF-α的表达差异不显著（P〉0.05）,IL-1β的表达差异显著（P〈0.05）。说明P4可降低LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α和IL-1β的分泌,且呈剂量依赖关系。LPS单独处理,TLR4和CD14mRNA的表达极显著高于对照组（P〈0.01）;10-6 mol/L P4单独处理与对照组无显著差异（P〉0.05）;分别添加1-5、10-6、10-7 mol/L P4组均极显著降低LPS诱导TLR4和CD14mRNA的表达（P〈0.01）,而MD2mRNA的表达差异不显著（P〉0.05）。说明P4可极显著降低LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞TLR4和CD14mRNA表达,但对MD2mRNA表达影响不显著。结果显示,P4能抑制LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α和IL-1β的分泌,此过程与细胞TLR4和CD14表达下降相关,而与MD2的表达无关。     

产蛋循环过程中TRPV6、CaBP-D_（28K）和PMCA 1b在蛋壳腺的动态表达

将40羽220日龄ISA蛋鸡分为5组,于产蛋后0、2、4.5、8、16h断头处死,采集蛋壳腺组织,运用Real-time PCR和Western-blot方法检测产蛋循环过程中瞬时性受体单位香草精受体6（Transient receptor potential vanilloid receptor 6,TRPV6）、钙结合蛋白（calbindin D28K,CaBP-D28K）、质膜钙离子ATP酶1b（plasma membrane Ca2＋-ATPase 1b,PMCA 1b）mRNA和蛋白浓度的动态变化。结果显示,卵子未进入蛋壳腺前（产蛋后0~4.5h）,蛋壳腺内TRPV6、CaBP-D28K和PMCA 1bmRNA表达水平较低,随后表达量逐渐升高,在蛋壳钙化过程中达到最大值（产蛋后16h）,与0h相比,TRPV6和CaBP-D28KmRNA表达差异均极显著（P〈0.01）;另外,产蛋循环过程中,TRPV6、CaBP-D28K和PMCA 1b蛋白浓度变化与mRNA变化一致,产蛋后16h到达最大值,其中CaBP-D28K蛋白浓度与0h相比,差异显著（P〈0.05）。结果表明,产蛋循环可调控蛋壳腺内TRPV6、CaBP-D28K和PMCA 1b的表达,并提示钙离子跨细胞转运途径在钙离子进入蛋壳腺形成蛋壳过程中发挥重要作用。     

共轭亚油酸对蛋鸡生产性能、蛋壳质量和血清生化指标的影响

为了研究共轭亚油酸（ＣＬＡ）对蛋鸡生产性能和蛋壳质量的影响及机理,试验选用 ４０周龄健康、体重和产蛋率相近的海兰白蛋鸡 ４８０只,采用单因素试验设计,随机分为 ４组,每组 ３个重复,每个重复４０只,试验组分别添加０．５％、１．０％和２．０％的 ＣＬＡ,对照组不添加,试验期８周。试验结束时,每组选 ６只采血并屠宰,测定血清中三碘甲腺原氨酸（Ｔ３）、四碘甲腺原氨酸（Ｔ４）、皮质醇、雌二醇（Ｅ２）、钙离子、磷离子含量和碱性磷酸酶（ＡＬＰ）活性及肝脏肉毒碱棕榈酰转移酶（ＣＰＴ Ⅰ）活性。结果表明：１）各试验组蛋鸡生产性能与对照组均差异不显著（Ｐ＞０．０５）。２）各试验组蛋壳强度均显著大于对照组（Ｐ＜０．０５）,蛋壳厚度均差异不显著（Ｐ＞０．０５）。３）２．０％ＣＬＡ组蛋鸡血清 Ｔ３、Ｔ４、皮质醇和 Ｅ２含量显著高于对照组及 ０．５％和 １．０％ＣＬＡ组（Ｐ＜０．０５）;各试验组蛋鸡血清钙、磷离子浓度与对照组差异不显著（Ｐ＞０．０５）;０．５％和 １．０％ＣＬＡ组蛋鸡血清 ＡＬＰ活性显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。４）１．０％和 ２．０％ＣＬＡ组蛋鸡肝脏 ＣＰＴ Ⅰ活性显著低于对照组（Ｐ＜０．０５）。由此可见,在本试验条件下,饲粮添加 １．０％的ＣＬＡ能显著提高蛋鸡血清中 ＡＬＰ活性,并在一定程度上促进 Ｅ２的分泌,显著提高蛋壳强度,且不影响蛋鸡的生产性能。     

子宫内膜炎患牛子宫内膜PGR和ESR-1 mRNA的表达特征

为探讨卵巢激素及其子宫内膜受体在奶牛子宫内膜炎中的作用,以产后6～10d健康及患急性化脓性子宫内膜炎的中国荷斯坦奶牛为研究对象,通过ELISA法检测子宫内膜中PGF2a,血清中孕酮和雌二醇浓度,SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测子宫内膜PGR和ESR-1mRNA的表达。结果显示,病牛子宫内膜PGF2α水平为（6.503±0.122）μg/L,血清孕酮为（0.816±0.281）μg/L,血清雌二醇为（35.462±2.523）μg/L,而对照组分别为（14.408±0.285）,（0.543±0.142）,（37.6±1.317）μg/L;子宫内膜炎患牛组PGF2a水平极显著低于对照组（P〈0.01）,孕酮含量显著高于对照组（P〈0.05）,PGF2a与孕酮水平呈显著负相关（r=0.893）,雌二醇含量组间差异不显著。PGR基因的mRNA水平极显著高于对照组（P〈0.01）,而ESR-1基因的mRNA水平低于对照组,且差异极显著（P〈0.01）。上述结果表明,孕酮浓度显著升高及PGR mRNA高表达,可能抑制子宫收缩;ESR-1mRNA低表达使子宫新陈代谢减慢,子宫内膜合成PGF2a功能下降,这些改变有可能促进了产后子宫内膜炎的发生发展。     

牛磺酸对中后期蛋鸡蛋壳质量影响的研究

采用单因子随机化设计,将所选的378只体质健康的47周龄海塞克斯褐蛋鸡随机分为6组,每组3个重复,每个重复21只。第1~6组在饲喂基础日粮的基础上分别添加牛磺酸0,20,40,80,160,320 mg/kg。以谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶酶活(SOD)和甲状腺激素(T3、T4)的含量作为血清生化指标,以破壳软壳蛋数、蛋壳钙含量作为蛋壳质量的评定指标,以此来研究牛磺酸是否能提高中后期蛋鸡的蛋壳质量,为牛磺酸在蛋鸡中的应用提供理论基础。结果表明中后期蛋鸡日粮中添加不同水平的牛磺酸,可以提高中后期蛋鸡全血中GSH-PX、血清中SOD两种酶的酶活;提高了血清中的T3含量,降低T4含量;提高了蛋壳钙含量和降低破壳蛋数。     

Dietary supplementation with sodium bicarbonate improves calcium absorption and eggshell quality of laying hens during peak production

1. The advantage of supplemental sodium bicarbonate (NaHCO₃) on eggshell quality in laying hens changes with age. Besides increasing calcium (Ca) secretion in the eggshell gland, it may improve Ca absorption in the intestine or kidney.

2. Hy-Line Brown layers (n = 384), 25 weeks of age, were allocated to two treatment groups in two experiments, each of which included 4 replicates of 24 hens. Hens were fed a basal diet (control) or the basal diet containing 3 g NaHCO₃ g/kg for 50 or 20 weeks in Experiment 1 or 2, respectively. A 24-h continuous lighting regimen was used to allow hens to consume the dietary supplements during the period of active eggshell formation.

3. In Experiment 1, particularly from 25 to 50 weeks of age, and in Experiment 2, NaHCO₃ supplementation favoured hen-d egg production at the expense of lower egg weight. The increased eggshell thickness should have nothing to do with the additional eggshell formation, because of the unchanged egg mass and daily eggshell calcification.

4. At 35 weeks of age in both experiments, NaHCO₃ supplementation increased duodenal expression of calbindin-d28k (CaBP-D28k) protein, contributing to higher Ca retention and balance.

5. From 50 to 75 weeks of age in Experiment 1, the hens had little response to NaHCO₃ supplementation and showed a negative trend on eggshell thickness and strength.

6. It is concluded that dietary supplementation with 3 g NaHCO₃ g/kg improves Ca absorption and eggshell quality of laying hens during the peak but not late production period, with the introduction of continuous lighting.