恶疫霉有性生殖交配行为的研究

 对同宗配合疫霉种——恶疫霉(Phytophthora cactorum Schroter)抗甲霜灵突变株和抗地茂散突变株的抗药性在游动孢子和卵孢子后代的遗传分析,筛选到抗性分别由细胞核纯合显性单基因控制的抗甲霜灵突变株和由细胞质可稳定遗传的线粒体基因控制的抗地茂散突变株。将携带抗甲霜灵对地茂散敏感(即Mt^rCn^s)标记的亲本与携带抗地茂散对甲霜灵敏感(即Mt^sCn^r)标记的亲本共同培养,在200个有性生殖单卵孢后代中检测到携带3种不同抗药性标记的单孢株,其中32株携带Mt^rCn^s标记,165株携带Mt^sCn^r标记,另有3株同时携带双亲的标记性状即MtrCnr。结果表明:恶疫霉种内不同菌株共同培养时,有性生殖以配对亲本的各自自交为主,同时配对亲本间也可发生一定频率的杂交。     

大豆疫霉病菌的分离及其生物学特性的研究

大豆疫霉病菌是我国重要的对外检疫对象之一,而栽培大豆又起源干我国。依据植物病理学中寄主与病原菌在原产地长期共存共同进化的原理,在我国极有可能有大豆疫霉病菌的存在,只是因为分离检测技术以及生态等方面的原因,较长时间内一直未能在我国分离到此病原菌。1989～1990年我们从大豆病组织中分     

大豆疫霉病菌在中国的发现及其生物学特性的研究

 本文通过对从黑龙江、吉林和北京等地的大豆上分离的7个疫霉菌株的一系列生物学特性的研究,并以美国的Phytophthora megasperma标准菌株为对照,将该7个菌株鉴定为Phytophthoramegasperma f.sp.glycinea。接种试验表明,该菌在不同大豆品种上致病力表现差异明显,而且对三叶草和紫花苜蓿不侵染。用MTT染色法定期检测埋在不同处理的土壤中的卵孢子活性。经一年后,所有处理中90%以上的卵孢子均处于活性状态;而温度对卵孢子的休眠期有较大的影响。     

KMnO4和H2O2刺激掘氏疫霉卵孢子萌发对单卵孢株生物学性状的影响

 本文对经KMnO₄、H₂O₂刺激掘氏疫霉(Phytophthora drechsleri)卵孢子萌发建立的单卵孢株群体应用于掘氏疫霉遗传研究的可行性做了研究。2个掘氏疫霉菌株(A₁、A₂交配型各1株)经聚碳膜间隔配对产生的卵孢子用KMnO₄、H₂O₂以及不用上述氧化剂处理分别建立K、H、C 3个单卵孢株群体(卵孢子萌发率8-16%)。在群体水平上对来自同一亲本的上述3个群体生物学性状比较结果表明,H₂O₂处理刺激卵孢子萌发不影响生长速度、菌落形态、耐35℃高温生长、致病力及交配型的遗传稳定性,所建立的单卵孢株群体可用于上述性状的遗传研究;KMnO₄处理导致掘氏疫霉A₁和A₂交配型在自交后代各自分离为A₁、A₂、A₁A₂和A₂、A₁A₂,但不影响其他生物学性状的遗传稳定性,所建立的单卵孢株群体可用于除交配型性状以外的其他生物学性状的遗传研究,不宜用于交配型正常遗传规律的研究。用KMnO₄处理掘氏疫霉A₁或A₂交配型菌株单株自交产生的卵孢子,从A₁菌株自交后代获得A₂和A₁A₂以及从A₂菌株自交后代获得A₁A₂交配型单卵孢株的结果说明,掘氏疫霉异宗配合菌株体内可能同时包含控制A₁和A₂交配型的遗传因子,在正常条件下有1种交配型遗传因子不表达。KMnO₄处理可望作为揭示交配型遗传本质的有用试验手段。     

重庆地区辣椒疫霉对氟吡菌胺的敏感性及抗性突变体的生物学性状

为明确重庆地区辣椒疫霉对氟吡菌胺的抗性风险,采用菌丝生长速率法测定了采自重庆未使用过氟吡菌胺地区的110株辣椒疫霉菌株对氟吡菌胺的敏感性,并对辣椒疫霉抗氟吡菌胺突变体的诱导方法及抗性突变体的主要生物学性状进行了研究。结果表明:110株辣椒疫霉对氟吡菌胺的EC₅₀平均值为(0.32 ± 0.11) μg/mL,不同菌株的敏感性频率呈连续单峰曲线分布,未出现敏感性明显下降的亚群体,因此可将该EC₅₀平均值作为重庆地区辣椒疫霉对氟吡菌胺田间抗性监测的敏感基线。通过紫外诱导菌丝体的方法,共获得3株可稳定遗传的抗氟吡菌胺突变体,抗性倍数介于69.5~98.5之间,突变频率为0.86%;抗性突变体BS11-5-1与亲本菌株BS11-5在菌丝生长速率、温度适应性、产孢子囊能力及致病力方面均无显著差异,而抗性突变体JLP11-4-2和JLP11-4-3在菌丝生长速率、温度适应性、产孢子囊能力及致病力方面均显著低于亲本菌株JLP11-4;不同抗性突变体对渗透压的敏感性与亲本菌株之间均存在不同程度差异;3个抗性突变体对Biolog PM1中95种碳源的利用情况与亲本菌株基本相似。交互抗性测定表明,辣椒疫霉抗氟吡菌胺突变体对甲霜灵、霜脲氰、烯酰吗啉、丁吡吗啉及嘧菌酯之间均不存在交互抗性,建议可将氟吡菌胺与上述几种杀菌剂交替或混合使用。     

辣椒疫霉对双炔酰菌胺的敏感性测定及其 抗药突变体生物学性状研究

研究了辣椒疫霉对双炔酰菌胺的敏感性及其抗药性风险。采用菌丝生长速率法测定了分别采自河北定兴、藁城和山东寿光、青州等地的173株辣椒疫霉菌株对双炔酰菌胺的敏感性,结果表明,其EC50值介于0.002 7~0.049 9 μ g/mL之间,平均EC50值为0.021 9±0.010 2 μ g/mL,敏感性呈单峰曲线分布;采用紫外诱导+菌落角变和药剂驯化的方法分别处理10个供试菌株,各获得7株和1株突变体,其抗性倍数在41.50~394 437.77之间,突变频率分别为1.46%和1.43%。对突变体部分生物学性状的研究表明,抗性突变体与其亲本菌株在菌丝生长速率、致病性、产孢能力、适合度指数和竞争力方面均具有不同程度的差异;抗性突变体DX 2-3 20m和DX 2-3 F7的产孢量、适合度和竞争力均高于亲本菌株,有利于抗性群体的形成。研究表明,辣椒疫霉对双炔酰菌胺存在中等抗性风险。     

苎麻疫霉抗甲霜灵突变株的生物学特性研究

 甲霜灵对疫霉菌生物学性状的影响较为复杂,从田间或室内诱变获得的抗甲霜灵(Mt^r)突变株,除抗药性性状发生变异外,其它生物学性状(如致病力、产孢能力、孢子萌发、培养性状等)亦可能发生变异^[1]。但亦有报道指出,疫霉菌的Mt^r与Mt^s菌株的生长速率、孢子囊形成、孢子萌发等性状基本相似^[2]。     

抗甲霜灵辣椒疫霉菌株的生物学特性

为了明确抗甲霜灵辣椒疫霉菌株的适生性,以田间自然产生及室内诱变获得的抗甲霜灵辣椒疫霉菌株为材料,测定了抗甲霜灵辣椒疫霉菌株的主要生物学性状。各菌株的游动孢子囊产生量为9.6×103～13.0×103个/mL,孢子囊释放率为61.3%～68.4%,游动孢子萌发率为35.3%～42.1%,适温条件下的菌丝平均生长速率约为10.28～11.55 mm/天;各菌株在含100μg/mL孔雀石绿的CA培养基上均不能生长,淀粉水解指数为0.18～0.95;接种辣椒、番茄、南瓜、西葫芦和茄子等果实所致病斑平均直径分别为34.11、18.47、30.19、37.78和32.73 mm。经方差分析,抗甲霜灵辣椒疫霉菌株的生物学性状与敏感菌株无显著差异,表明甲霜灵并未改变其生物学性状,辣椒疫霉对甲霜灵具有较高的抗性风险。     

掘氏疫霉卵孢子萌发研究

 掘氏疫霉(Phytophthora drechsleri)种内菌株直接交配产生的卵孢子分别用0.1% KMnO₄处理20分钟和0.3% H₂O₂处理2分钟在S+L培养基上(26℃)培养7天萌发率>70%。H₂O₂是本研究首次报道的一种刺激掘氏疫霉卵孢子萌发的处理剂,其效果略优于KMnO₄。用KMnO₄和H₂O₂处理均可有效地抑制卵孢子悬浮液中菌丝片段及菌丝膨大体的萌发生长。在一定时期内卵孢子萌发率随卵孢子保存时间的增加而增加,保存30天和45天的卵孢子分别用KMnO₄和H₂O₂处理萌发率最高。卵孢子保存期间有无光照对萌发率无显著影响,但卵孢子荫发时给予光照对萌发有明显的促进作用,保存30天的卵孢子在光照下萌发率为60-70%,在黑暗中仅0-16%。卵孢子萌发过程中的光照条件以黑光灯8小时,日光灯16小时交替连续照射7天效果最好,其次为黑光灯单独连续光照,以日光灯单独照射效果较差。所测定的6种培养基中以S+L培养基对卵孢子萌发的效果最好,其次为V₈+L和WA+L。蜗牛酶、纤维素酶、土壤浸出液和黄瓜果提取液对掘氏疫霉卵孢子萌发无明显刺激作用。     

苎麻疫霉遗传学研究

 本文首次对引致我国棉花、苎麻疫病的重要同宗配合疫霉种-苎麻疫霉(Phytophthora boehmeriae Sawada)的菌落形态、生长速率、同宗配合特性、致病力、对甲霜灵抗性以及雄器着生位置等生物学性状的遗传与变异进行了较系统的研究。     

Variability Resulting from Selfing and Outcrossing in Phytophthora cactorum

Self and hybrid oospore progeny and zoospore progeny of two pairs of Phytophthora cactorum mutants carrying a metalaxyl-resistance (M^r) nuclear gene or a chloroneb resistance (Cn^r) mitochondrial gene were compared for variation in growth rate, production of sporangia and oospores, and pathogenicity. Zoospore progeny were relatively uniform, whereas oospore progeny resulting from both selfing and outcrossing displayed great dissimilarity in all the traits tested. For pathogenicity, both pairs of tested mutants had greater variation in hybrid progeny than self progeny. For growth rate and oospore production, the same is true only for the first pair, but not the second pair. The variation in sporangium production displayed by one parental self progeny was greater than that by hybrid progeny in both pairs tested. These results show that isolates and traits selected for study have considerable effect on the variation in hybrid and self progeny and suggest that different mechanisms may be operating in creating variation in these two types of progeny. Received 23 October 2000/ Accepted in revised form 11 January 2001     

同宗配合的马铃薯晚疫病菌曾在中国被发现

 在1964年分离的84株菌中,有一株从甘肃岷县隆安洋芋马铃薯病薯上分离到的晚疫病菌,不经交配即能在纯培养上长出具有典型的围生雄器和藏卵器的卵孢子。经单孢子囊或单游动孢子分离都证明这一特性能保持下来,说明该菌是同宗配合交配型。致病性试验也证明是标准的晚疫病菌。由此可见,马铃薯晚疫病菌除异宗配合外还存在同宗配合形成卵孢子的这一条途径,虽不普遍但不应忽视。     

大豆疫霉菌部分生物学特性及其药剂筛选研究

采用大豆疫霉菌在不同条件下菌丝生长速度法研究了大豆疫霉菌的部分生物学特性,并应用杀菌剂室内生测、盆栽药剂防效对药效作了评价。研究结果表明,大豆疫霉菌营养生长的最适温度为25～30℃;最适pH为6;光暗交替有利于该菌营养体的生长,在Rye或CA培养基上生长最快。室内药效测定结果表明,烯酰吗啉EC₅₀为0.165 4μg/mL,抑菌效果最好,甲霜灵、甲霜灵.锰锌和氟吗啉.锰锌的EC_{50分别为0.261 00、.451 0和0.984 2μg/mL,效果次之。盆栽试验结果表明,几种药剂在活体条件下对大豆疫病的防治效果较好,并有较长持效期。}     

Biocontrol of Phytophthora Root Rot of Angelica Trees by Enterobacter cloacae and Serratia ficaria Strains

Bacterial strains isolated from the rhizosphere of angelica trees were evaluated for their antagonistic activity against Phytophthora cactorum, a causal agent of Phytophthora root rot. Of these, three bacterial strains, designated as T-1-8, T-1-14 and T-1-23, strongly inhibited mycelial growth of P. cactorum ARE-862 in a dual-culture plate assay. Biocontrol activity of these strains was then examined by dipping root of young seedlings of angelica trees into a bacterial suspension. The incidence of Phytophthora root rot was markedly suppressed for at least 79 days in pot tests when treated seedlings were planted in naturally infested soil. The suppression was maintained through June of the next year. In addition, these strains significantly reduced the development of Phytophthora root rot up to 47 days in naturally infested field and up to 63 days (the last day of testing) in an artificially (moderately) infested field. Based on their main bacteriological properties, strain T-1-14 was identified as Enterobacter cloacae and T-1-8 and T-1-23 were identified as Serratia ficaria. Received 5 July 1999/ Accepted in revised form 25 October 1999     

西洋参疫病菌的水滴飞溅传播规律

本项研究通过实验模拟手段揭示了水滴飞溅散布对西洋参疫病菌传播的机制。从定量的角度确立了西洋参疫病菌传播数量与水平距离、水滴碰撞速率的数学模型: Ln(Y)=b_0 b_1D b_2V 在自然雨滴的直径范围内,垂直下落高度在3.5m以内,飞溅传播直径约1m,在三维空间里,以低于碰撞源水平面的传播效果最为明显。     

人参疫病发生和综合防治的研究

作者探讨了恶疫霉卵孢子和游动孢子在人参疫病侵染循环中的作用。接触侵染是人参疫病烂根蔓延的主要途径。试验证明：参根疫病发生适宜温度为１７－２５℃，最适相对湿度９８％，病菌不同株系在致病力上存在差异；搭防雨棚，用落叶覆盖参床，土壤处理及参苗消毒是防治人参疫病的有效措施；有效杀菌剂为瑞毒霉，甲霜灵锰锌，代森锰锌，乙磷铝，ＴＰＮ及Ｓａｎｄｏｚ铜粉。     

大豆疫霉菌单孢分离物生物学性状的遗传变异研究

 本文研究了大豆疫霉菌单游动孢子无性分离物和自交单卵孢子分离物的菌丝生长速率、菌落形态、同宗配合性状、产孢量以及对甲霜灵敏感性的遗传变异。结果表明:菌落形态、生长速率和同宗配合性状在单游动孢子后代和自交后代可稳定遗传,控制上述性状的遗传因子是纯合的;大豆疫霉菌的游动孢子产生能力和对甲霜灵的敏感性在单游动孢子后代和自交后代中均发生连续性变异,表明这两种性状可能是数量遗传性状,也可能控制这两种性状的基因为杂合基因或细胞质遗传因子。     

影响大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)游动孢子产生的条件

 间歇性地给菌丝块换水可以诱导菌丝产生孢子囊,进而释放游动孢子。挑取5~8块直径为8mm于利马豆或V₈汁平板上培养4~8d的菌块,置于直径7cm的培养皿内,加入蒸馏水正好没过菌块表面,每30 min换水一次,换水4次后加入15 ml Petri培养液,25℃、黑暗条件下培养18~20 h,可诱发菌块大量产孢。     

Phenotyping Castanea hybrids for Phytophthora cinnamomi resistance

Castanea sativa is susceptible to Phytophthora spp., a serious root pathogen causing ink disease, while C. crenata and C. mollissima show resistance to infection. Interspecific controlled crosses were established for introgression of resistance genes from the resistant species into the susceptible C. sativa, and two mapping populations were created. Phytophthora cinnamomi resistance of each progeny was evaluated by root and excised shoot inoculation tests. The number of days of survival after root inoculation was the best discriminator of resistance to P. cinnamomi while the percentage of shoots with internal lesions was the symptom most associated with survival. The lesion progression rate in the excised shoot inoculation test was strongly and negatively correlated with survival in the root inoculation test. The excised shoot inoculation test appears to be a reliable approach for screening the resistance of chestnut genotypes to P. cinnamomi. Strong genetic correlations were obtained between survival and ink disease symptoms and among symptoms, indicating that common or linked genes might influence resistance to P. cinnamomi. The most resistant genotypes selected from this study will be tested for other commercial variables, such as ease of vegetative propagation and stock–scion compatibility.