毛泡桐体细胞胚胎发生及植株再生研究

以毛泡桐(Paulowniatomentosa)无菌苗叶片和茎段为外植体,在附加NAA0.3mg·L-1或2,4 D0.3mg·L-1与6 BA5～20mg·L-1植物生长调节物质组合的MS培养基上进行体细胞胚胎发生及植株再生的研究.结果表明,毛泡桐叶片和茎段在不同植物生长调节物质组合的12种培养基上愈伤组织诱导率可达100%,但在2,4 D与6 BA植物生长调节物质组合的MS培养基上,叶片和茎段胚性愈伤组织诱导率为0,而在MS+NAA0.3mg·L-1+6 BA17mg·L-1培养基上,叶片和茎段的胚性愈伤组织诱导率分别达到88.3%和46.7%.胚性愈伤组织在该培养基上可发育为成熟的体细胞胚胎,进而成为完整植株.     

宽皮橘蕉柑的胚性愈伤组织诱导、悬浮细胞系建立及植株再生

取蕉柑花后 5周幼果的幼胚接种于含不同浓度BA、KT与IAA组合的MT培养基上 ,结果表明 ,暗培养条件是蕉柑胚性愈伤组织诱导成功的关键 .胚状体在后期发育中畸形胚的比例很高 ,经切割后 ,在MT +BA2 .0mg·L-1+IAA0 5mg·L-1+蔗糖 0 0 3kg·L-1培养基上可诱导产生丛芽 ,诱导率为 2 6 7% .幼芽在 1/ 2MT +NAA 1 0mg·L-1培养基上生根率达到了 87 0 % .蕉柑胚性愈伤组织在MT液体培养基中不断地继代培养 ,可形成生长稳定的胚性悬浮细胞系 ,体胚诱导实验证明悬浮细胞系具有很强的体细胞胚胎发生能力 .     

沙田柚杂种胚性愈伤组织的诱导及遗传鉴定

【目的】沙田柚（Citrus grandis [L.] Osbeck cv.Shatian）是中国的特有品种，其愈伤组织难以诱导。为进一步进行细胞工程研究，本研究通过与其它品种杂交的方法获得杂种胚性愈伤组织。【方法】以沙田柚为母本，用体细胞杂种橘柚+无酸甜橙 ([C.reticulata Blanco× C.paradisi Macf.] cv.Nova+C.sinensis [L.] Osbeck cv.Succari)为父本进行杂交，90 d后将幼胚取出，在MT + ME（麦芽提取物，500 mg·L-1）和MT + GA3（1 mg·L-1）两种固体培养基上培养。【结果】幼胚培养约5个月左右，在两种培养基上从胚状体和幼小植株的下胚轴处都长出了可继代保存的胚性愈伤组织，经细胞流式仪和SSR鉴定，该胚性愈伤是三倍体杂种愈伤，继代保存两年后，在MT+乳糖（50 g·L-1）培养基上仍可以产生大量的胚状体，具有较强的胚状体发生能力。【结论】沙田柚与体细胞杂种杂交后，可以较容易地获得其杂种的胚性愈伤，对沙田柚种质资源的保存和利用具有重要价值。     

枇杷胚性愈伤组织的诱导和保存

不同的基本培养基对枇杷胚愈伤组织的诱导有较大影响 ;不同品种的鱼雷形胚的愈伤组织的诱导率有明显差异 ;不同生长调节剂组合和碳源对愈伤组织的形成有较大的影响 .比较而言 ,以 B5为基本培养基并添加 0 .5mg· L-12 ,4 - D和 1mg· L-1BA组合诱导的愈伤组织的质量最佳 .蔗糖作为碳源 ,有利于愈伤组织生长 ,而山梨醇则对细胞分化有利 .附加 0 .1mg· L-12 ,4 - D和 0 .5mg· L-1BA的 B5培养基有利于胚性愈伤组织的继代、增殖 ,低温和弱光照有利于胚性愈伤组织的保存 .     

刺五加组培苗的胚性愈伤组织诱导和植株再生

以悬浮培养刺五加体细胞胚发育而来的再生植株作为实验材料,进行胚性愈伤组织的诱导。研究结果表明:在添加1mg.L-1GA3的固体培养基中,胚性愈伤组织诱导率高于不加任何植物生长调节物质的培养基的诱导率;而且1mg.L-12,4-D均适合于固体和液体培养基中胚性愈伤组织的增殖;胚性愈伤组织转到不加植物激素的培养基后,固体和液体培养基都能分化出大量体细胞胚,而液体培养基中形成的体胚数量比固体培养基要高,但是后期的植株再生率及土壤移栽成活率都是固体培养基高于液体培养基。     

巴西橡胶树花药体细胞胚胎发生的研究—培养基配方优化及体胚发生的组织学观察

利用来自巴西橡胶树(Hevea brasiliensis Muell.Arg)未成熟花药的愈伤组织进行了体细胞胚胎发生的研究。采用附加BAP、NAA及2,4-D各1mg/L的改良MS培养基诱导获得带有明显前胚结构的胚性愈伤组织。将这些愈伤组织再转移到含有1mg/L激动素及0.1mg/LIAA的培养基上进行培养继而获得体细胞胚胎。胚性愈伤组织的组织学研究结果显示,体细胞胚胎产生于愈伤组织外表的分生组织细胞。此外,在愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生中均观察到克隆变异的发生。     

不同植物生长调节物质对杂种落叶松胚性愈伤组织增殖的影响

以日本落叶松×长白落叶松的胚性愈伤组织为材料,研究不同植物生长调节物质对胚性愈伤组织增殖和体细胞胚形成能力的影响。结果表明:2,4-D质量浓度对胚性愈伤组织增殖有显著影响,胚性愈伤组织增殖率随2,4-D质量浓度的升高而下降。在添加2,4-D0.1mg·L-1 BA0.05mg·L-1 KT0.05mg·L-1与NAA0.5mg·L-1 BA0.05mg.L-1 KT0.05mg.L-1的培养基中,胚性愈伤组织可以长期维持与增殖;在添加IBA0.5mg·L-1 BA0.05mg·L-1 KT0.05mg·L-1的培养基中愈伤组织的增殖效果最好,增殖系数达到4.6倍,而且转到体细胞胚成熟培养基后形成的体细胞胚数也最多,达到88.6个·g-1。在添加2,4-D0.1mg·L-1 BA0.05mg·L-1 KT0.05mg·L-1的培养基增殖的胚性愈伤组织形成的体细胞胚的萌发率和植株再生率最高,分别为66.7%和50%。     

柑橘愈伤组织内源激素代谢与体细胞胚胎发生能力关系的研究Ⅰ.柑橘不同愈伤组织体细胞胚胎发生能力的比较

为了探明柑橘愈伤组织内源激素代谢与体细胞胚胎发生能力的关系，研究了长期继代保存的纽荷尔脐橙和伏令夏橙不同愈伤组织的体细胞胚胎发生.结果表明，无论是在加有3%蔗糖的MT增殖培养基上，还是在加有30 mL/L甘油的MT分化培养基上，纽荷尔脐橙的胚性愈伤组织和二倍体伏令夏橙愈伤组织的体细胞胚胎发生能力均较强，而纽荷尔脐橙的非胚性愈伤组织，四倍体和六倍体伏令夏橙愈伤组织的体细胞胚胎发生能力较弱.     

百合基因转化胚性愈伤组织受体系统的建立

为建立稳定高效的胚性愈伤组织基因转化受体系统,以麝香百合Liliumlongiflorum花丝为外植体进行了愈伤组织诱导、植株再生研究以及抗生素敏感性试验。结果表明:愈伤组织诱导增殖培养基为MS+NAA1 0mg·L-1+BA0 5mg·L-1,分化培养基为MS+KT1 0mg·L-1+NAA0 2mg·L-1。抗生素敏感性试验表明,百合基因转化胚性愈伤组织的卡那霉素选择压为75mg·L-1,潮霉素的选择压为20mg·L-1,头孢霉素选择压为250mg·L-1。表4参10     

柑橘愈伤组织内源激素代谢与体细胞胚胎发育能力关系的研究Ⅰ．柑橘不同愈伤组织体细胞胚胎发生能力的比较

为了探明柑橘愈伤组织内源激素代谢与体细胞胚胎发生能力的关系，研究了长期继代保存的纽荷尔脐橙和伏令夏橙不同愈伤组织的体细胞胚胎发生。结果表明，无论是在加吸3％蔗糖的MT增殖培养基上，还是在加有30mL/L甘油的MT分化培养基上，纽荷尔脐橙的胚性愈伤组织和二倍体伏令夏橙愈伤组织的体细胞胚胎发生能力均较强，而纽荷尔脐橙的非胚性愈伤组织，四倍体和六倍体伏令夏橙愈伤组织的体细胞胚胎发生能力较弱。     

复方溴氯海因消毒剂的性能

研究了复方溴氯海因消毒剂的稳定性、刺激性、毒性及其对细菌、病毒、细菌芽胞的杀灭效果.结果表明,室温下本品有效期至少为1a,对皮肤无刺激性,半数致死量(LD50)为2787mg·kg-1.18-22℃条件下,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、溶血性链球菌的杀灭率达99.9%,分别需7.5、5.0、7.5mg·L-1有效溴氯海因作用10min;对枯草杆菌黑色变种芽胞杀灭率达99.9%,需200mg·L-1有效溴氯海因作用60min;对猪水泡病强毒、猪瘟病毒和猪细小病毒灭活率达100%,分别需1500、150和1500mg·L-1有效溴氯海因作用30min.     

木霉Y对毒死蜱和甲胺磷的降解作用

从连续施用毒死蜱的土壤中分离了1株可降解毒死蜱和甲胺磷的真菌,经鉴定为木霉属,命名为木霉Y.木霉Y对毒死蜱和甲胺磷的降解效能测定结果表明:木霉Y对50mg·L-1的毒死蜱作用1d后,降解率比对照提高了19.75%,7d后达到88.53%;对500mg·L-1的毒死蜱作用1d后无降解作用,3和7d后降解率分别提高了33.75%和47.67%;对5000mg·L-1的毒死蜱作用1d后无降解作用,3和7d后降解率分别达到19.62%和21.87%;对50mg·L-1的甲胺磷作用1d后,降解率提高了41.33%,3d后即达到100%;对500mg·L-1的甲胺磷作用1d后无降解作用,3和7d后降解率分别达到38.58%和80.38%;对5000mg·L-1的甲胺磷无降解作用.     

三倍体毛白杨组培快繁技术

试验研究了不同基本培养基(1/2MS和WPM)和不同浓度的NAA和BA组合对三倍体毛白杨离体快繁的影响.结果表明:1/2MS+BA0.3mg·L-1+NAA0.05mg·L-1为适宜的增殖培养基,芽分化率达86.4%,平均芽数达4.4;1/2MS+NAA0.05mg·L-1为适宜的壮苗生根培养基,生根率达94.1%,平均根数为3.1,平均根长为3.5cm,试管苗平均高度达7.4cm;在移栽过程中发现,带愈伤组织的试管苗成活率高于不带愈伤组织的试管苗,达97.0%.     

育成牛不同铜源的生物利用率研究

将５６头１３～１８月龄育成牛随机分成７组,每组８头,第１组不添加铜作对照组,第２,３,４组日粮分别添加５,１５和２５ｍｇ·ｋｇ－１硫酸铜,第５,６,７组日粮分别添加５,１５和２５ｍｇ·ｋｇ－１蛋氨酸铜,于试验的０,５,２０和４０ｄ分别采集日粮,牛毛和血液进行铜,血浆铜蓝蛋白和红细胞超氧化物歧化酶活性测试。观察两种铜源的立刻效应（５ｄ）和长远效应（４０ｄ）,找出干旱地带奶牛添加不同铜源的最佳地方化标准,并比较两者的生物学利用率。结果表明,育成牛日粮铜为４．６７ｍｇ·ｋｇ－１,牛毛铜为６．４６ｍｇ·ｋｇ－１,全血铜为０．５９８７ｍｇ·ｋｇ－１,均低于ＮＲＣ标准,说明试验牛处于缺铜状态。试验的第５ｄ。红细胞超氧化物歧化酶活性,１５和２５ｍｇ·ｋｇ－１硫酸铜组,５ｍｇ·ｋｇ－１蛋氨酸铜组与本底值差异显著（Ｐ＜００５）,１５和２５ｍｇ·ｋｇ－１蛋氨酸铜组与本低值差异极显著（Ｐ＜０．０１）。第２０ｄ蛋氨酸铜各剂量组全血铜测值上升幅度大,但组间差异不显著,与其相应的本底值和对照组值差异也不显著,第４０ｄ测值与第２０ｄ一样。血浆铜蓝蛋白第２０～４０ｄ时除对照组和５ｍｇ·ｋｇ－１硫酸铜组与其相应的本底值差异不显著外,其余各?     

利用矮败小麦诱导单倍体的初步研究

用化学药剂和远缘花粉处理矮败小麦筛选诱导单倍体的最佳处理组合.结果表明:单独用药剂或玉米花粉授粉诱导效果不理想,其中以0.5mg·L-12,4-D的最好,诱导率为12.7%-13.1%;油菜或玉米花粉授粉后24和48h再经10g·L-1二甲基亚砜(DMSO)+15mg·L-12,4-D处理,以及玉米花粉授粉后再经4mg·L-1BA+10g·L-1DMSO处理,诱导频率较高,达54.8%-77.0%,与其他处理的差异达极显著水平;玉米花粉授粉的诱导效果明显好于油菜花粉的;10g·L-1DMSO+15mg·L-12,4-D处理优于4mg·L-1BA+10g·L-1DMSO处理,两处理诱导率的差异达显著水平.     

茄子种子打破休眠的预处理技术

为了打破茄子种子休眠,采用ＨＣｌ、Ｈ２Ｏ２、ＧＡ３、６－ＢＡ及变温处理等技术对采收晒种前及播种前的种子进行预处理,共计３５个组合．试验结果表明,ＧＡ３效果最佳,其次为６－ＢＡ及Ｈ２Ｏ２,ＨＣｌ处理效果也较好,但应注意药剂含量与时间．其中体积分数为０．０１的ＨＣｌ处理０．５ｈ、０．００５的Ｈ２Ｏ２处理０．２５ｈ,ＧＡ３以８０ｍｇＬ－１处理０．２５～０．５ｈ,６－ＢＡ以２０ｍｇＬ－１处理０．２５ｈ的效果最好,变温处理也有同等效果．总体上看,处理效果以晒种前比播种前好,但两者未达到显著差异．     

甘薯品种鉴定中指纹图谱的建立和应用

应用RAPD分析技术体系,构建了甘薯品种的指纹图谱.结果表明,在20μLPCR反应体积中,含有10mmol·L-1Tris-HCl(pH8.3)、50mmol·L-1KCl、2.5mmol·L-1MgCl2、100μmol·L-1dNTP、0.3μmol·L-1引物、40ng模板、1.5UTaq酶的反应体系适合甘薯RAPD分析.利用上述甘薯RAPD分析的指纹图谱,鉴定了10个供试品种.     

发根农杆菌感染导致紫果西番莲遗传转化

将发根农杆菌ＭＡＦＦ０３－０１７２４株系,涂布于逆向插入未添加任何生长调节剂的ＭＳ培养基中的紫果西番莲的茎段切口上．４周后,切口上出现瘤状突起,次周产生不定根．切下不定根根尖,培养于含Ｃｌａｆｏｒａｎ０．５ｇＬ－１的培养基中,分化出发状根．发状根转入含有ＢＡ１ｍｇＬ－１和２,４－Ｄ０．１ｍｇＬ－１的ＭＳ培养基中,分化出植株．再生植株经滤纸电泳检测,测出了农杆碱和甘露碱,说明紫果西番莲已发生了遗传转化．     

盐胁迫对柚、福橘种子萌发和幼苗生长的影响

通过水培和沙培试验,研究了盐胁迫对柚、橘种子萌发和幼苗生长的影响.结果表明:(1)20-40mmol·L-1NaCl胁迫不影响坪山柚和福橘种子萌发率、芽及胚根生长,但发芽时间延长.(2)NaCl浓度≥60mmol·L-1,显著降低坪山柚和福橘种子萌发率、芽及胚根长度,种子相对盐害率显著升高;相同浓度NaCl胁迫,坪山柚种子相对盐害率低于福橘,芽及胚根受抑制程度比福橘低.(3)NaCl浓度≥80mmol·L-1,坪山柚和福橘幼苗株高、叶面积、地上部干重、根部干重和根冠比(坪山柚根冠比在NaCl浓度为120mmol·L-1时)显著下降;同一浓度NaCl胁迫,坪山柚幼苗生长受抑制程度比福橘小.(4)坪山柚地上部及根部较低的Na+和Cl-含量及保持较高的根冠比是坪山柚幼苗耐盐胁迫的主要原因.     

关于化学反应速度常数的探讨

反应速度的单位是摩·升－１·时间－１,大多数为ｍｏｌ·ｌ－１·ｓ－１或ｍｏｌ·ｌ－１·ｍｉｎ－１。速度常数ｋ的单位取决于反应的级数,例如一级反应,速度常数的单位为ｓ－１,二级反应速度常数的单位是ｌ·ｍｏｌ－１·ｓ－１。对于可逆反应,当反应达平衡时,正逆反应的速度相等,得到Ｋ＝ｋｆ／ｋｒ。如果正逆反应的反应级数不同,所得的平衡常数Ｋ就有量纲。由热力学数据计算所得的平衡常数是无量纲的。为使热力学平衡Ｋ与Ｋ＝ｋｆ／ｋｒ所得的Ｋ一致,速度常数的单位只能是ｍｏｌ·ｌ－１·ｓ－１或ｍｏｌ·ｌ－１·ｍｉｎ－１。