甜菜抗氧化性的电喷雾串联质谱研究

使用电喷雾质谱检测了糖用甜菜水提取液和乙醇提取液,并且采用串联质谱技术分析了这些提取液中化合物的碎裂规律。实验结果表明水提取液和乙醇提取液都适合在电喷雾正离子模式和负离子模式下检测,说明甜菜中化学成分复杂,种类较多。在串联质谱中,这些成分大多丢失水、二氧化碳、葡萄糖等中性碎片,说明这些化合物含有羟基、羧基、葡萄糖基,这些基团在化合物抗氧化性能中都起到重要作用,这些与文献中的研究结果相同。说明使用电喷雾质谱技术分析甜菜的抗氧化性能十分可靠,甜菜提取液不需经过复杂的前处理就可以检测,操作简单、快速,灵敏度高,可以用于复杂体系抗氧化性的快速筛选。     

UPLC-MS/MS法同时测定生菜叶片中五种植物内源激素

以有机生菜为试材,采用甲醇∶甲酸∶水=15∶1∶4作为提取剂,经过超声、离心、氮吹,DiKMA ProElut PXA固相萃取柱分离纯化后得到植物激素提取液,在38℃恒温水浴中氮吹浓缩干燥,甲醇作为复溶液进行复溶,得到植物激素待测液.采用ACQU-ITY UPLC BEN反相色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)对5种植物激素进行分离,流动相A为0.1％甲酸水溶液,流动相B为甲醇溶液,梯度洗脱,流速为0.30 mL·min-1,柱温为40℃;在液相色谱质谱联用多反应监测(MRM)模式下进行定性定量分析,外标法测定植物激素回收率.建立了应用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS),同时测定叶菜类蔬菜中赤霉素、生长素、脱落酸、水杨酸、茉莉酸5种植物内源激素含量的方法,并优化了生菜基质中激素的前处理方法、质谱色谱条件等.结果 表明:生菜在低、中、高浓度加标时,5种激素的加标回收率为60.15％～107.73％,且相对标准偏差均小于7.6％,检出限为0.30～0.52 μg·kg-1,定量限为0.68～1.56μg·kg-1.该方法快速灵敏,可适用于其它叶菜类植物中赤霉素、生长素、水杨酸、茉莉酸、脱落酸含量的检测,以期为叶菜类植物叶片中多种内源激素的同时检测提供了一个快速有效的方法.     

液相色谱-质谱联用技术在果品质量安全风险研究中的应用进展

准确、快速、高效、稳定的检测技术是保证果品安全生产、有效监管和安全消费的重要手段。液相色谱-质谱联用技术,特别是超高效液相色谱-串联质谱联用技术,是目前果品质量安全研究中最重要且应用最广泛的一种检测方法。对液相色谱-质谱联用技术及其前处理方法在果品农药残留、真菌毒素、其他污染物等风险分析中的应用进展进行综述,并对其应用前景进行展望,以期为相关研究提供参考。     

超高效液相色谱-串联质谱检测蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留

以番茄、茄子、西葫芦、大白菜、甘蓝为试材,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术建立了蔬菜中12种氨基甲酸酯类农药残留的检测方法。结果表明:样品经乙腈提取,氨基固相萃取小柱净化,以waters BEH T3色谱柱分离,采用多反应检测模式对试材进行检测,外标法定量;在质量浓度1~100μg/L范围内呈良好线性,相关系数均大于0.99。在空白基质中添加3个水平加标试验,回收率为65.2%~119.2%,相对标准偏差均小于5%。该方法灵敏度高、准确可靠、精密度好、选择性强,可以满足蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留检测的要求。     

气相色谱-串联质谱法测定鲜香菇中25种有机磷类农药残留

建立了气相色谱-串联质谱测定香菇中25种有机磷农药残留的检测方法。样品用氯化钠、乙腈提取,C18分散固相萃取净化。采用EI源电离多反应监测(MRM)模式进行检测,基质标准溶液校正,外标法定性、定量。分别讨论了氯化钠加入先后顺序对提取效果的影响和C18的用量对净化效果的影响。结果表明,25种化合物色谱峰分离度高,在各自的线性范围内线性关系良好(r2>0.99),在3个添加水平下的平均回收率为70.7%～116.6%,相对标准偏差(RSD)为4.4%～14.0%,方法的定量限为0.002～0.010 mg·kg-1。该方法简单、快速,能保证批量样品连续检测的稳定性,适用于香菇样品中多种有机磷类农药残留的同时检测。     

桃果实叶片和土壤草甘膦和氨甲基膦酸残留的HPLC-MS/MS检测方法

建立了桃果实、叶片和土壤中草甘膦(PMG)及其代谢物氨甲基膦酸(AMPA)的高效液相色谱—串联质谱(HPLC-MS/MS)的检测方法。样品经碳酸氢钠水溶液和二氯甲烷共同提取,以9–芴基甲基三氯甲烷为衍生剂室温下衍生3 h,多反应监测(MRM)模式检测。草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸在1~2 000μg·L~(-1)的质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999;在0.01~1.0 mg·kg~(-1)添加水平下平均回收率为76.7%~93.0%,相对标准偏差(RSD)为2.2%~8.7%;方法定量限(LOQ)均为0.01mg·kg~(-1);适用于桃果实和叶片及土壤中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸残留的快速检测。     

HPLC-DAD-MS-DPPH在线筛选与定性黑脉羊肚菌抗氧化活性成分

为建立在线高效液相色谱-高分辨质谱-2,2-二苯代苦味酰基苯肼(high-performance liquid chromatogra phy-diode array detection-mass spectrometry-DPPH,HPLC-DAD-MS-DPPH) 快速筛选和定性黑脉羊肚菌(Morchella angusticeps)中抗氧化活性成分的方法,对黑脉羊肚菌样品的水提物、50%乙醇提取物、95%乙醇提取物和氯仿提取物进行检测,并应用高分辨质谱对筛选所得抗氧化活性成分进行定性分析.结果 显示,黑脉羊肚菌水提物抗氧化活性最优,筛选获得抗氧化活性成分3个,应用高分辨质谱进行定性分析,获得抗氧化成分分别为山梨醇、未知化合物和柠檬酸.故可知,黑脉羊肚菌抗氧化活性成分主要为水溶性小分子极性化合物,以水提取物中含量最为丰富.本方法直观、快速、准确,适用于复杂天然产物中抗氧化活性成分的快速筛选与定性.     

甜樱桃果实GA_3的测定技术研究

【目的】寻求建立甜樱桃果实中赤霉酸的定性定量检测方法,为研究赤霉素在大棚甜樱桃的使用安全性上提供方法参考。【方法】样品经乙腈提取,液-液分配法进行净化,采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法在SRM模式下对目标物质进行定性和定量检测。【结果】方法的最低检出限(S/N=3)为1.21μg·kg~(-1),定量限(S/N=10)为4.03μg·kg~(-1),在5.0~100.0μg·L~(-1)内呈现良好的线性关系,相关系数r2为0.999 3,添加浓度为0.001、0.002、0.01 mg·kg~(-1)时赤霉素加标回收率分别为89.69%,91.84%和95.37%(n=6),相对标准偏差分别为7.46%,6.21%和4.85%,方法的不确定度为0.13μg·kg~(-1),5份大棚樱桃样品中GA_3含量在21.3~71.1μg·kg~(-1)。【结论】本方法简单快速,灵敏度高,定量准确,可用于樱桃果实中的赤霉素残留量测定。     

甜樱桃果实GA_3的测定技术研究北大核心CSCD

【目的】寻求建立甜樱桃果实中赤霉酸的定性定量检测方法,为研究赤霉素在大棚甜樱桃的使用安全性上提供方法参考。【方法】样品经乙腈提取,液-液分配法进行净化,采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法在SRM模式下对目标物质进行定性和定量检测。【结果】方法的最低检出限(S/N=3)为1.21μg·kg^(-1),定量限(S/N=10)为4.03μg·kg^(-1),在5.0~100.0μg·L^(-1)内呈现良好的线性关系,相关系数r2为0.999 3,添加浓度为0.001、0.002、0.01 mg·kg^(-1)时赤霉素加标回收率分别为89.69%,91.84%和95.37%(n=6),相对标准偏差分别为7.46%,6.21%和4.85%,方法的不确定度为0.13μg·kg^(-1),5份大棚樱桃样品中GA_3含量在21.3~71.1μg·kg^(-1)。【结论】本方法简单快速,灵敏度高,定量准确,可用于樱桃果实中的赤霉素残留量测定。     

高效液相色谱法同时测定水果中7种合成色素

建立的高效液相色谱法同时测定水果中柠檬黄、新红、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、酸性红7种人工合成色素。样品经提取后,采用C18反相色谱柱分离,以20mmol/L乙酸铵-甲醇为流动相进行梯度洗脱,柱温35℃,流速0.8m L/min,进样量10μL,采用二极管阵列检测器进行检测。以目标物的色谱保留时间和光谱图进行定性,以色谱峰的峰面积用标准曲线外标法进行定量。在优化的色谱条件下,7种色素的线性范围为0~100μg/m L,相关系数均大于0.999。各目标物的加标回收率为95.8%~103.9%,相对标准偏差均小于4%(n=6)。方法准确、快速、灵敏,适用于水果中违规添加合成色素的检测。     

辣椒风味物质萃取方法比较研究

采用气相色谱／质谱（GC—MS）技术对辣椒果实风味物质进行分离鉴定,比较同时蒸馏萃取（SDE）、顶空吸附（HAS）和顶空固相徽萃取（SPME）三种方法对辣椒果实风味物质的提取效果。结果表明：SDE法吸附的香味物质多,GC—MS分析总离子流图清晰、丰满,萃取过程复杂程度介于HAS和SPME两者之间。结论：SDE法适宜辣椒风味物质分析,并建立了辣椒风味物质SDE萃取方法。     

多效唑对芋种质离体保存影响的初步研究

以荔浦芋无菌试管苗为材料,研究了试管苗保存过程中不同浓度多效唑（PP粥）对试管苗保存效果的影响。研究结果表明,多效唑对芋种质资源的离体保存有显著影响,在光照时间14～16h／d,光照强度1500lx,室温（26＋2）℃的培养条件下,在MS＋6-BA2．5mg／L＋NAA0．02mg／L＋30g/L蔗糖的培养基中添加0．6mg／LPP粥,试管苗可保存240d,存活率为89．7％,且恢复生长后试管苗形态正常、长势良好,与对照株无明显差异。     

铅胁迫下硒处理的彩叶草根系和叶片的SEM/XRD 光谱学分析

 以彩叶草（Coleus blumei Benth.）为材料，在含1.0 mmol · L^-1 Pb ²⁺ 的营养液中直接添加不同 浓度（0.1、0.5、1.0、2.5、5.0 mg · L^-1）亚硒酸钠，利用X–射线衍射技术（XRD）和扫描电镜技术（SEM） 从光谱学角度初步探讨铅胁迫下不同浓度硒处理对彩叶草根系和叶片粉末的形态结构的影响。结果表明， 不同浓度硒对彩叶草根系和叶片粉末样品表面颗粒物微观形貌有较大影响，其中1.0 mg · L^-1 硒处理的 SEM 图中颗粒分布较其它浓度处理的均匀，结构紧密，成扁平褶状；XRD 衍射角向右移，强度、峰高、 峰面积和半高宽减小。这说明1.0 mg · L ^-1 的硒能降低溶液中铅的迁移和转化；颗粒的分布，衍射角的移 动，强度、峰高、峰面积和半高宽等变化说明彩叶草体内铅结合形态有所变化。     

蜡梅不同品种和花期香气变化及其花茶适制性

采用顶空固相微萃取结合气相色谱质谱联机分析方法研究了蜡梅4个品种不同开花期的香气成分,并分析了其花茶适制性。结果表明：4个品种主要香气成分为别罗勒烯、罗勒烯、乙酸苄酯和水杨酸甲酯,相对含量之和占总量80%以上。从花蕾期到盛开期,香气成分变化不大,在开花过程中萜烯类化合物相对含量增加,而酯类化合物相对含量减少。随着蜡梅花内被片紫色条纹数量增加,香气中萜烯类和酯类化合物相对含量比值（T/E）减小,而在开花过程中,T/E值增加。花蕾期和盛开期香气相似率达0.990以上,表明开花过程中香气类型变化不大。花蕾期和萎蔫期的鲜花窨制的花茶香气弱,香气和滋味得分低于盛开期,红心品种窨制的花茶幽香不足,香气和滋味得分低于其他品种。在花茶生产上,以选择内被片紫色条纹较少的素心和乔种品种,且盛开的鲜花为宜。     

La~（3＋）缓解碱性盐胁迫引起的西瓜幼苗光合能力下降的作用

研究了在NaHCO3和Na2CO3共同胁迫下,不同浓度的硝酸镧溶液预处理对西瓜苗叶片光合能力的影响,结果表明,叶面喷施0.1mmol·L-1硝酸镧对碱性盐胁迫下西瓜苗的光合能力下降具有良好的缓解效果,有效减缓了西瓜幼苗叶片叶绿素含量、净光合速率、Mg2＋-ATP酶、RuBPCase活性的下降,缓解了碱胁迫对叶片PSⅡ最大光化学效率（Fv/Fm）、光化学猝灭（qP）、实际光化学效率（ФPSⅡ）的抑制,提高了非光化学猝灭（qN）,促进了过剩光能的耗散。不同浓度硝酸镧处理对碱性盐胁迫下西瓜苗叶片乙醇酸氧化酶活性没有显著影响,不阻碍光呼吸的进行。而硝酸镧浓度超过一定值时则加重碱胁迫带来的伤害。因此,适宜浓度的硝酸镧预处理可减缓碱性盐胁迫引起的西瓜幼苗光合能力的下降。     

Screening and identification of specific serum biomarkers of Parkinson disease

AIM：To screen the possible serum biomarkers of Parkinson’s disease. METHODS：The surface-enhanced laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry (SELDI-TOF-MS) was used to screen the serum samples from 44 cases of Parkinson’s disease and 60 control subjects. The differentially expressed protein peaks were selected and isolated with high-performance liquid chromatography (HPLC), and processed with enzyme before analysis by liquid chromatography-mass spectrometry tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). The data mining was performed by Xcalibur program component BioWorks 3.2. RESULTS：Three differentially expressed protein peaks were selected as potential serum biomarkers from the patients of Parkinson’s disease: the protein at 8 937 m/z peak showed significant increase (27.47±16.58 in Parkinson’s disease group, and only 5.01±3.47 in control group), and the proteins at 6 636 and 8 697 m/z peaks showed significant decreases (5.43±2.66 and 20.22±9.57, respectively, in Parkinson’s disease group, and 18.85±7.56 and 51.13±26.22, respectively, in control group). The proteins at 6 636, 8 697 and 8 937 m/z peaks were identified as apolipoprotein C-I, apolipoprotein C-III and complement 3a,respectively. Combined use of these 3 biomarkers effectively distinguished the subjects between Parkinsons disease group and control group. The detection rate of the patients with Parkinsons disease was 90.0% (27/30), and the detection rate of the healthy sibkects was 92.5% (37/40). CONCLUSION：The apolipoprotein C-I, apolipoprotein C-III and complement component 3a identified as potential markers of Parkinson’s disease have diagnostic value in clinical application.     

杂交鹅掌楸组培技术研究

对园林植物杂交鹅掌楸组培技术进行研究。结果表明：最适诱导培养基为：MS＋6-BA 1.0 mg/L＋IBA 0.1 mg/L＋GA_3 0.5 mg/L＋3%蔗糖＋0.7%琼脂粉;最佳增殖培养基为：MS＋6-BA 0.5 mg/L＋IBA 0.1 mg/L＋3%蔗糖＋0.7%琼脂粉,增殖系数达3.0以上,适宜的光照为：1 000～2 000 lx;适宜的生根培养基为：1/2 MS＋IBA 0.05 mg/L＋2%蔗糖＋0.6%琼脂粉,生根率达到67%以上,生根苗平均根数2.3条。     

琼花挥发性成分的GC-MS分析

采用顶空固相微革取操作,结合气相色谱质谱联用技术对琼花的挥发性成分进行鉴定分析,并用面积归-法测定其相对含量。共分离了48个色谱峰,初步鉴定了其中的24个成分,占其挥发性成分的81．64％。主要包括烷烃、烯烃、醇、酚、酯、及芳烃类等6类化合物,其中烯烃化合物占总色谱馏出峰面积的51．57％,烷烃类占11．95％,芳烃类占9．61％,醇类占5．47％,酯类占2．43％,酚类含量最低,只占0．7％。其主要化合物有：石竹烯（13．5％）,5,6-二亚甲基环辛烯（11．11％）,古巴烯（7．42％）,2-乙烯基-1,1-二甲基-5-亚甲基环已烷（8．47％）,十一烷（2．59％）,5-己烯-1-醇（5．15％）等化合物。     

响应黄龙病侵染的柑橘乙醇脱氢酶基因CsADH1的克隆与表达分析

对前期在感染黄龙病的‘晚锦橙’中发现的明显差异表达的柑橘乙醇脱氢酶(CsADH1)基因进行克隆测序分析,结果表明,CsADH1的CDS序列长为1143bp,编码380个氨基酸。蛋白质结构预测显示,CsADH1含有乙醇脱氢酶Gro ES(ADH_N)和ADH_zinc_N保守结构域。进化树分析显示,CsADH1蛋白与拟南芥、蓖麻和中国莲的ADH蛋白亲缘关系最近。亚细胞定位结果显示,CsADH1蛋白定位在细胞质中。以感病‘晚锦橙’的根和叶脉为材料,q PCR分析显示CsADH1在感病根和叶脉中均上调表达,且根中的表达水平是叶脉中的10倍。离子胁迫试验和外源植物生长调节剂诱导试验表明,Zn、水杨酸(SA)、生长素(IAA)和脱落酸(ABA)均显著诱导CsADH1上调表达,并且根中的表达水平明显高于叶中。本结果表明,CsADH1可能在柑橘根响应黄龙病菌侵染中起着重要作用。