冷刺激下AA肉鸡FBP1基因表达量的研究

为了解冷刺激条件下果糖-1,6-二磷酸酶1(FBP1)基因在肉鸡组织中的表达情况,试验选择75只AA肉鸡随机分成了对照组(正常饲养温度)和4个处理组(比正常饲养温度低3 ℃),从雏鸡8日龄开始每天分别进行1、3、5和24 h的冷刺激,在21日龄时结束冷刺激,并于22日龄屠宰测定FBP1基因在AA肉鸡各组织中的表达情况。结果表明,在冷刺激条件下,FBP1基因表达量存在组织特异性,在1 h处理组中FBP1基因在肝脏中的表达量显著高于其他各组织(P< 0.05),在3 h处理组中FBP1基因在肺脏中表达量显著高于除肝脏外的其他各组织(P< 0.05),在5 h处理组中FBP1基因在肝脏中的表达量显著高于其他各组织(P< 0.05),在24 h处理组中FBP1基因在胸腺中的表达量明显高于其他各组织(P< 0.05)。在相同组织不同处理组中,心脏FBP1基因的表达量除3 h组明显降低外,其余处理组随冷刺激时间延长呈下降趋势,肝脏中FBP1基因表达量在5 h组中显著高于其他各处理组(P< 0.05),脾脏中FBP1基因的表达量除在1 h组中明显降低外,其余各处理组随冷刺激时间延长呈下降趋势,肺脏中FBP1基因的表达量呈先上升后下降的趋势,肾脏中FBP1基因表达量除在24 h组中明显降低外,其余各组没有明显变化,胸腺中24 h组FBP1基因表达量显著高于其他处理组(P< 0.05),且其他处理组与对照组差异不显著(P >0.05)。     

女贞子对AA肉鸡肌肉抗氧化能力及GPx4基因表达的影响

本试验旨在研究女贞子原粉对肉鸡肌肉抗氧化能力、鲜肉货架期挥发性盐基氮(TVB-N)的影响,并对肉鸡肌肉磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(GPx4)基因表达进行分析。试验选用1日龄体重相近的AA肉鸡公雏320羽,随机分为4组。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加5 mg/kg黄霉素,0.5%、1%女贞子(生品)原粉,试验期为8周。结果表明:日粮添加女贞子可有效提高肉鸡肌肉的抗氧化酶活性和总抗氧化能力,抑制丙二醛(MDA)产生,其中肉鸡日粮中添加1%女贞子可显著提高肉鸡总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性(P<0.05);胸肌货架期TNB-N有降低趋势,并且第5天肌肉TNB-N显著低于对照组(P<0.05);日粮添加女贞子还可显著提高肉鸡肌肉GPx4基因的相对表达量(P<0.05),说明女贞子可从分子水平来提高肉鸡肌肉抗氧化能力,抑制鸡肉产品腐败。     

民猪脂蛋白脂酶基因在冷诱导后表达变化的研究

脂蛋白脂酶（lipoprotein lipase,LPL）是动物分解代谢的限速酶,是影响脂肪代谢通路中的一个重要基因。本研究将LPL基因作为影响民猪抗寒特性的候选基因,对其在心脏、肝脏、胃、脾脏、肾脏、肺脏、大肠、小肠、子宫、卵巢、背肌、腿肌、脂肪共计13个组织内的表达情况和低温冷诱导后在民猪肌肉组织内的表达变化情况进行了分析。结果表明,LPL基因在所检测的13个组织中均有表达,但表达量存在差异,心脏、背肌、腿肌、脂肪组织中的表达量较高,子宫和卵巢组织的表达量较低;LPL基因在民猪被冷诱导后表达水平无显著变化。     

AA肉鸡和北京油鸡早期消化器官发育规律研究

本试验旨在比较AA肉鸡和北京油鸡在胃肠道消化生理上的差异.选择1日龄雄性AA肉鸡和北京油鸡各50只,每个品种为1个处理,2个处理的日粮和饲养管理一致,每个处理5个重复,每个重复10只鸡.试验期28 d.在0、7、14、21、28日龄,每个品种分别选择10只鸡屠宰,测定其体重、肝脏、胰腺、腺胃、肌胃、小肠及小肠各段的重量...     

口服利福昔明片对 AA 肉仔鸡肠道正常菌群的影响

考察利福昔明片对AA肉仔鸡肠道正常菌群的影响，为其在兽医临床上推广应用提供科学依据。选用10日龄健康 AA 肉鸡，分别以25、50、100 mg／kg 经口灌服利福昔明片，连续用药3 d，并于首次用药后第4、7、10天处死仔鸡，取盲肠和回肠内容物进行乳酸杆菌和大肠埃希菌的选择性培养并计数，以此评价利福昔明片对肉仔鸡肠道菌群数量的影响。结果显示，利福昔明片高、中、低剂量组对回肠和盲肠的大肠埃希菌菌群数目与空白对照组相比数量减少，其中100 mg／kg 剂量组在首次用药后第4 天对盲肠大肠埃希菌影响差异显著，其他各剂量组无显著差异。利福昔明片高、中、低剂量组对回肠和盲肠的乳酸杆菌与空白对照组相比数量增加，但差异不显著。结果表明，利福昔明片对肠道内乳酸杆菌等益生菌没有影响，但能降低肠道内大肠埃希菌的数量。     

人体醛缩酶C cDNA的克隆及其在家蚕体内的表达(英文)

利用人体醛缩酶C cNDA的一对特异性引物A ld-5′(5′-ggatcccctcactcgtaccca-3′)和A ld-3′(5′g-gatcctcag-taggcatggtt-3′),从人脑cDNA文库中PCR扩增出人体醛缩酶C cDNA,并依次被克隆进克隆载体pCR2.1、转移载体pAcGP67B以及来源于AcNPV和BmNPV的杂交重组病毒HyNPV。通过对家蚕血液的SDS-PAGE电泳和酶活力测定,证明人体醛缩酶C cDNA在家蚕体内成功得到表达。     

动物冷应激反应中多种基因调控机制的研究

冷应激可引起动物生产性能下降,诱发多种疾病,甚至造成死亡。研究动物冷应激发生机制,探索科学的应激监测方法,对提高应激预防水平,保障畜牧业发展有重要意义。动物应激可涉及多种基因表达的改变。作者简要综述了包括抗冻蛋白(AFP)基因、热休克蛋白(HSP70)基因、即刻早期基因(c-fos)、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)基因在动物冷应激反应中的表达调控机制。     

AA肉鸡腿肌重活体估测方法的探讨

以AA肉鸡商品代为试验材料,分析0、7、14、21、28、35、42日龄公、母鸡整体和腿肌的累积生长,建立腿肌重(y)与活重(x)之间的直线回归、幂回归、指数回归、对数回归及多项式回归方程,探讨腿肌重的活体估测方法。结果表明,AA肉鸡的腿肌在后期生长迅速,尤其是公鸡在35～42日龄时期表现突出;腿肌重(y)与活重(x)的幂回归、直线回归、多项式回归方程的拟合精度均在0.95左右,效果较好。     

CPT-1基因在湘西黄牛不同组织中的发育性表达研究

[目的]为了比较分析肉碱脂酰转移酶-1(carnitine palmitoyltransferase 1,CPT-1)基因在湘西黄牛不同组织中的发育性表达规律,以探讨CPT-1基因与肉牛脂肪代谢的关系。[方法]试验选取湖南德农牧业集团有限公司国家级保种场不同月龄(6月龄、18月龄和30月龄)湘西黄牛各4头,利用实时荧光定量PCR检测肝脏、背最长肌、皮下和腹腔脂肪组织CPT-1基因的相对表达量。[结果]结果表明,(1)CPT-1基因在湘西黄牛肝脏、背最长肌、皮下脂肪和腹腔脂肪的4个部位中的表达量随月龄增加依次极显著降低(P<0.01)。(2)在6月龄、30月龄时,CPT-1基因在湘西黄牛肝脏、背最长肌、皮下脂肪和腹腔脂肪的4个部位中的表达量无显著差异(P>0.05)。(3)在18月龄时,CPT-1基因在皮下脂肪中的表达量显著高于背最长肌(P<0.05),肝脏与腹腔脂肪中CPT-1基因的表达量与其他3个组织中CPT-1基因的表达量无显著差异(P>0.05)。[结论]说明CPT-1基因对湘西黄牛机体脂肪代谢具有重要作用,CPT-1基因在湘西黄牛主要脂肪代谢部位(肝脏、背最长肌、皮下脂肪和腹腔脂肪)均有表达,且CPT-1基因的表达量随月龄与部位的不同,存在月龄间差异性和组织间相似性与差异性。     

散养黄羽肉鸡CAPN1、H-FABP基因表达的发育性变化及其肌内脂肪含量的研究

为探讨在散养条件下黄羽肉鸡CAPN1、H-FABP基因与其生长发育和肌内脂肪(IMF)含量的关系,试验以130羽3周龄体重接近,健康商品代黄羽肉鸡母鸡为试验材料,随机分为笼养组(对照组)和散养组(试验组),采集在不同周龄(3、4、6、8、10、13 w)的胸肌、腿肌和腹脂组织样品共360份,采用实时荧光定量PCR法对不同生长阶段组织中CAPN1和H-FABP基因mRNA表达量进行检测,同时采用索氏抽提法测定胸肌和腿肌的IMF含量。结果表明:黄羽肉鸡的CAPN1、H-FABP基因在胸肌、腿肌和腹脂中均有不同程度的表达。随着周龄的增加,散养肉鸡CAPN1基因表达的整体变化趋势为增加—减少—增加—减少,且3～6 w其在胸肌和腹脂中的表达量均表现为笼养显著高于散养(P<0.05)。H-FABP基因的整体表达趋势随着周龄的增加而降低,在胸肌和腿肌中变化趋势相同,且均表现为散养显著高于笼养(P<0.05),在腹脂中表现为笼养高于散养(P>0.05)。与散养鸡相比,笼养鸡生长速度较快,腹脂率、IMF含量较高。本试验结果可为散养黄羽肉鸡CAPN1和H-FABP基因分子选育提供一定参考。     

环境低温和T3对肉鸡内皮素、一氧化氮和肺动脉压的影响

20 0只 AA肉鸡随机等分为对照组 (C)和试验组 (T) ,C组和 14日龄前 T组鸡按常规饲养。 T组自 14日龄起舍温从 2 5℃起每天降 1～ 2℃逐渐降至 12℃ ,同时在日粮中按 1.5 m g/ kg的剂量添加三碘甲腺原氨酸 (T3 )以诱发肺动脉高压综合征 (PHS)。分别于 2 1、2 8、35、42、49日龄测定 2组肉鸡平均肺动脉压 (m PAP)、红细胞压积 (PCV)、右心全心比 (RV/ TV)、血浆内皮素 (ET- 1)及一氧化氮 (NO)水平 ,同时记录 PHS发病率。结果显示 ,试验组肉鸡 m PAP升高 ,PHS发病率增加 ;PCV、RV/ TV及血浆 ET- 1水平与对照组相比都显著升高 (P<0 .0 1) ;m PAP变化与血浆 ET- 1含量变化之间存在显著正相关 ,2组间血浆 NO水平无显著差异 (P>0 .0 5 ) ,但都出现随日龄增加血浆 NO水平升高的现象。     

乳酸芽孢杆菌制剂对AA肉鸡生产性能的影响

本试验研究在日粮中分别添加200mg/kg乳酸芽孢菌制剂和50mg/kg土霉素,对1～49日龄AA肉鸡生产性能的影响。结果表明,乳酸芽孢菌制剂组和土霉素组的全期平均日增重比对照组提高15.29%和9.10%(P<0.05),乳酸芽孢菌制剂组比土霉素组提高5.67%(P>0.05);乳酸芽孢菌制剂组和土霉素组的全期料肉比分别比对照组降低9.09%和7.36%(P<0.05),乳酸芽孢菌制剂组比土霉素组低1.87%(P>0.05);各组成活率差异不显著。     

鸡传染性支气管炎M41毒株S1基因的克隆与真核表达研究

根据Genbank中公布的IBVS1基因序列 ,设计了一对引物 ,克隆出IBV强毒株M41的S1基因 ,基因大小为 1 .62kb ,导入真核表达载体系统pIRS1neo中 ,表达蛋白分子量为 61ku ,并具有中和活性。为今后开发鸡传染性支气管炎基因工程疫苗奠定了基础。     

鸡传染性支气管炎X毒株S1基因的克隆与真核表达

根据GenBank中报道的鸡传染性支气管炎病毒（IBV）S1基因序列，设计了1对引物，克隆了IBV强毒株X的S1基因，基因大小为1．62kb。将其导入真核表达载体系统pIRES1neo中，表达蛋白为61000。     

Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因的克隆和表达

通过RT-PCR方法克隆出GD株Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-1)的结构蛋白VP1基因片段,VP1基因片段和原核表达载体pMAL-C2X均以EcoRⅠ、HindⅢ双酶切后构建获得重组质粒pMAL-C2X-VP1,经限制性酶切和序列测序证明,目的基因正确插入表达载体,转入E.coli BL21(DE3),构建重组表达菌E.coliBL21/pMAL-C2X-VP1,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测结果表明,DHV-1的结构蛋白VP1能在E.coliBL21(DE3)中表达,获得可溶性重组蛋白,表达产物的分子质量约为69ku。     

猪细小病毒NS1基因的克隆及表达

根据Bergeron等报道的猪细小病毒基因组序列设计引物，在下游引物中引入BglⅡ酶切位点以便于构建表达载体。利用PCR技术扩增得到NS1全基因，将其克隆到pMDl8-T载体中进行序列测定并分析，进而构建重组转移载体pFast-NS1，在DH10Bac大肠杆菌中与改造过的苜蓿夜蛾核型多角体病毒(AcNPV)基因组(Bacmid)发生同源重组，获得重组穿梭载体Bacmid—NS1，经脂质体介导转染Sf9细胞后，得到重组杆状病毒(AcNPV-NS1)。SDS—PAGE、West-ern-blotting分析可见大小约为84000的特异性带，表明NS1蛋白在杆状病毒：Bac-To-Bac表达系统中成功地实现了表达。从而为研究其结构与功能创造了条件。     

小鼠Wip1基因的表达及其对受精能力的影响

本研究旨在探讨Wip1基因的表达及其对精子受精能力的影响,为阐明Wip1基因对雄性繁殖的影响提供新的着眼点。选取相同饲养环境、同一遗传背景的8周龄左右的野生型雄鼠,利用实时荧光定量PCR技术检测Wip1基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑组织及雄性生殖器官中的表达情况,利用免疫荧光技术检测Wip1蛋白在睾丸组织及精子细胞中的分布情况。以Wip1敲除型雄鼠为试验组,野生型雄鼠为对照组,利用ELISA试剂盒检测两组小鼠血清中睾酮水平;通过体外受精试验比较两组的2-细胞率及囊胚率。结果显示,Wip1基因mRNA在野生型雄鼠各组织中广泛表达,且在雄性生殖器官中表达量较高,其中睾丸中表达量最高,附睾体、附睾头、附睾尾次之;Wip1蛋白主要定位于睾丸组织中的长形精子细胞及附睾成熟精子细胞的头部。ELISA检测结果发现,与野生型雄鼠相比,Wip1敲除型雄鼠血清内睾酮含量极显著下降（P<0.01）。体外受精结果表明,Wip1敲除后2-细胞率及囊胚率均极显著下降（P<0.01）。结果表明,Wip1基因敲除能够引起雄性小鼠受精能力降低,这可能与Wip1基因在精子发生过程中发挥作用相关。     

1～28日龄AA肉鸡VE需求参数的研究

试验采用单因子随机设计法,设4个不同的VE水平,每个水平3个重复。选取96只1日龄爱拔益加(AA)肉鸡,采用玉米—豆粕型基础饲粮,饲粮VE添加量分别为5、15、150及1 500 IU/kg。各处理间除VE水平不同外,其他营养及饲养管理条件均一致。试验期28 d,试验结束时,计算各组AA肉鸡的日采食量、日增重、料肉比、吞噬指数、免疫器官指数和新城疫抗体滴度。试验结果表明,当饲粮中的VE适当超量(150~1 500 IU/kg)供给时,可提高AA肉鸡新城疫抗体滴度、脾脏指数和法氏囊指数,但肉鸡生产性能下降。综合生产性能及免疫机能各项指标得出,1~28日龄AA肉鸡日粮中VE适宜添加水平为5 IU/kg。     

CPT1A基因在广西麻鸡的表达研究

该研究旨在阐明CPT1A基因在广西麻鸡组织表达和时序表达谱,为研究鸡体内脂肪代谢提供一定的基础资料.选取胚胎期到性成熟时的广西麻鸡,在不同发育时间点采集胸大肌、腓肠肌、心脏和肝脏组织样品,利用实时荧光定量方法,分析CPT1A基因在不同组织不同发育阶段表达规律.组织表达结果显示,CPT1A在广西麻鸡不同发育阶段4种组织中...     

O型口蹄疫病毒VP1基因的克隆及其在重组杆状病毒中的表达

利用杆状病毒表达系统进行了口蹄疫病毒VP1基因在Sf9细胞中的表达研究。首先克隆了VP1基因片段．将pMD18-VP1质粒及杆状病毒转座载体质粒pFastBacⅠ分别用BamHⅠ及Hind Ⅲ酶切后，用T4 DNA连接酶连接。构建了重组质粒pFastBac-VP1；再将该重组质粒转化DH10Bac感受态细菌。在菌体内进行重组，并经三重抗性与蓝白斑筛选。得到杆状病毒重组质粒Bacmid-VP1；将Bacmid-VP1转染Sf9细胞．获得重组杆状病毒．并进行表达水平的检测。经SDS-PAGE和Western-blotting检测。结果表明，VP1蛋白在重组杆状病毒中获得表达。