猪繁殖与呼吸综合征病毒垂直传播及其危害研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染引起的繁殖障碍在妊娠早期表现为母猪受胎率低、不规律返情及孕早期流产;怀孕后半期流产、早产,产死胎、木乃伊胎及弱仔等。先天感染的仔猪抵抗继发感染的能力低,可持续排毒并感染周围的阴性动物。PRRSV穿过胎盘屏障感染胎儿很可能是经巨噬细胞/单核细胞介导的,并在母胎界面造成病理损伤,病毒在胎儿着床点的复制可能是导致胎儿死亡和母猪流产的原因。预防PRRSV垂直传播必须控制母猪感染PRRSV,缩短已感染母猪的病毒血症持续时间,此外,通过生物安全、限制猪群流动和严格的消毒措施控制水平传播,通过疫苗免疫和药物保健消除易感动物。作者概述了妊娠各阶段母猪感染PRRSV发生垂直传播的情况及其后续的繁殖障碍。     

Research Progress on the Nonstructural Proteins of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus

Porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) is a highly contagious disease that spreads all over the world.It is caused by porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV).Once infected with PRRSV,NSPs (nonstructural proteins) were expressed firstly.At least 14 kinds of NSPs,including NSP1α,NSP1β,NSP2,NSP3,NSP4,NSP5,NSP6,NSP7a,NSP7b,NSP8,NSP9,NSP10,NSP11 and NSP12,were produced during PRRSV life,which plays an important role in virus proliferation,virus virulence,immunological characteristics and so on.In this paper,we make a brief overview in terms of the research progress on NSPs to make a basis for the prevention of PRRS.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白研究进展

猪繁殖与呼吸综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS）是一种遍布于全世界的高度传染性疾病,其病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）。感染PRRSV后,最先在机体内进行表达的是非结构蛋白（nonstructural proteins, NSPs）,PRRSV基因组编码区经翻译后至少产生14种NSPs（NSP1α、NSP1β、NSP2、NSP3、NSP4、NSP5、NSP6、NSP7a、NSP7b、NSP8、NSP9、NSP10、NSP11、NSP12）,这些NSPs在病毒增殖、病毒毒力、免疫学特性等方面都发挥着重要作用。作者就NSPs的研究进展进行简要概述,以期为PRRS疫苗研发及技术防控奠定基础。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒实验室诊断方法的研究

猪繁殖与呼吸综征（PRRS）自1987年首次在美国发现以来,已给世界养猪业造成了巨大的损失。快速精确的诊断是有效防制该病的前提。随着分子生物学技术的不断发展,已建立了许多敏感性高、特异性强、易于操作的诊断及检测PRRS抗体和抗原的方法。作者就PRRSV实验室检测方法的研究进展进行了概述,为进一步检测和控制该病提供参考。     

猪生殖——呼吸综合征病毒研究进展

对猪生殖与呼吸综合征病毒新的分类地位,基因结构特点,病毒蛋白的功能、病毒在细胞的增殖过程,增殖特点、毒株变异等新进展及病毒独特的生物学行性作了综述,提出了病毒变异和毒力差异的分子基础是需要进一步研究的问题。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒实验室检测技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的临床症状表现为母猪繁殖性能下降、不孕、流产等。感染猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)后病理及组织学变化往往不太典型,而且易与其它病原感染所引起的病理变化相混淆,给该病的诊断带来一定困难,因此,对于PRRSV的确诊有赖于实验室诊断,不同的诊断方法敏感性、特异性及成本方面存在差异,而现有的血清学方法无法区分疫苗抗体和野毒抗体。作者就PRRSV抗原或抗体的检测技术（如病毒分离、RT-PCR、免疫过氧化物酶技术、酶联免疫吸附试验等）的研究现状作一简单的概述。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定

从辽宁某猪场采取病料,经处理后接种Marc-145细胞进行PRRSV分离,结果有2份病料在该细胞上盲传后可见典型的CPE,经测定其毒价为10^-6.5TCID₅₀/mL。间接免疫荧光试验可见黄色荧光,用电镜对纯化的病毒进行观察,可见有囊膜包裹的圆形病毒粒子,直径约为50~70 nm。该病毒对氯仿、紫外线、酸碱度变化和热敏感。对有CPE的细胞培养物进行RT-PCR,结果为阳性。接种试验动物出现典型的PRRS临床症状和死亡。结果表明,成功分离到一株PRRSV。     

猪繁殖与呼吸综合征疫苗的研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的严重危害世界养猪业的一种传染病,该病可造成猪的繁殖障碍、呼吸系统病症与生长受阻。本文着眼于PRRSV疫苗的免疫原性、保护效力和安全性,涉及市场上现有的商品化疫苗与已报道的处于试验阶段的相关疫苗研究成果,以期为PRRSV的防控与疫苗研发提供有益的参考。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒安徽株的分离与鉴定

从安徽地区的发病猪场的病料中,分离到3株致Marc-145细胞病变的病毒（命名为AH1、AH2、AH3）,负染电镜观察结果可见直径约50 nm的有囊膜的球形病毒粒子,细胞超薄切片可见病毒粒子分散在细胞浆内,直径为40～80 nm。理化特性研究结果表明,3株分离毒均对氯仿、乙醚、甲醛、温度(56 ℃)敏感;间接免疫荧光试验结果显示,分离株与美洲型PRRS阳性血清反应,发出强特异性荧光;对分离毒株Nsp2基因序列分析发现：安徽分离毒株Nsp2基因存在两处共90个碱基缺失现象,与JXA1 PRRSV变异株亲缘性最近。初步鉴定该分离株为高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒。     

一株猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株的分离与鉴定

试验旨在分离并鉴定从发病猪场分离的一株疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株。从某疫情猪场病猪体内分离到一株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株,经细胞传代培育成功增殖性能稳定的新毒株,命名为PRRSV-CHD。该毒株接种细胞后能够产生细胞病变(CPE),病毒滴度达10^-6 TCID50/0.1 mL,在Vero与BHK-21细胞上不出现细胞病变。采用间接免疫荧光法(IFA)检测病毒抗原分布在细胞浆中。与VR2332、CH-1a、HUN4序列比对及系统进化树分析结果表明,该分离株属于美洲型PRRSV;与PRRSV VR2332、CH-1a等比对,Nsp2基因序列在2780—2782 nt有3个核苷酸小缺失和2933—3019 nt的87个核苷酸大缺失,属PRRSV变异株。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒的危害及免疫策略

Porcine reproductive and respiratory syndrome is a serious disease, causing significantly economical impacts on the swine industry worldwide. Because of the mechanism of virus infection, the characteristics of antibody-dependent enhancement and a high degree of variability, the commercial vaccines currently exist defects that can’t completely prevent the respiratory system and placental transmission of porcine reproductive and respiratory syndrome virus （PRRSV）. Therefore, according to the pathogenic characteristics, PRRSV immune characteristics and biological characteristics, the new vaccines are designed which have important significances to the prevention of the disease.     

猪繁殖与呼吸综合征诊断技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是最近 2 0年来才发展起来的一种新的猪病 ,然而它给许多国家的养猪业带来了灾难性的经济损失。 2 0世纪 90年代晚期 ,我国也有暴发该病的报道。为了加强进口检疫以及防止该病的传播 ,目前最主要的是提高对该病的诊断和防制水平 ,文章就有关该病的病理变化 ,诊断方法的研究进展进行了综述     

猪繁殖与呼吸综合征病毒的诊断及检测技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是猪群中的一种免疫抑制性传染病,是严重危害养猪业的主要疫病之一,运用各种检测技术对该病做出准确的诊断是预防和控制该病的前提。猪繁殖与呼吸综合征的检测包括检测病毒、检测血清抗体及分型诊断,涉及的技术和方法有病毒分离技术、免疫组化技术、RT-PCR技术、间接免疫荧光试验、免疫过氧化物酶单层细胞试验、酶联免疫吸附试验、基因芯片技术等。每种诊断技术都有其各自的优势和局限性,应根据研究目的及工作条件等予以选择,作者对各种诊断技术的原理、方法及特点进行了概述和比较,并对今后的应用前景和发展趋势进行了展望。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断方法的研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重危害养猪业的传染病之一,自2006年夏秋季节,中国自南向北相继暴发高致病性猪繁殖与呼吸综合征,采取快速准确的诊断方法与技术确定病原在PRRS的整个防控过程中具有举足轻重的作用。作者详细介绍了PRRSV诊断方法和技术的最新进展,以期为猪繁殖与呼吸综合征的诊断与防控提供技术支持和参考。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞受体研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)主要是通过与宿主细胞表面的特异性受体结合,利用细胞的内吞作用而感染易感细胞。作者对猪繁殖与呼吸综合征病毒相关受体的研究进行了综述,迄今已报道了5种独立的但功能相关的受体:硫酸乙酰肝素、唾液酸黏附素、波形蛋白、CD163和非肌肉肌动蛋白ⅡA。对受体的功能特性进行研究,将为PRRSV的感染机理和病毒性疾病的预防和治疗具有重要的意义。     

猪繁殖与呼吸综合征RT-LAMP检测方法研究

应用反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),利用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白(N蛋白)ORF7基因保守序列的6个区域设计2对特异引物,经反应体系、反应条件优化及敏感性和特异性试验,建立了PRRSV RT-LAMP检测方法。研究结果表明,该检测方法不需要复杂仪器,仅用一台普通恒温水浴锅,在等温条件(63 ℃)保温1 h,即可完成核酸扩增反应,加入核酸染料SYBR GreenⅠ后,用肉眼即可对试验结果进行准确判定,为田间和基层部门检测猪繁殖与呼吸综合征病毒提供了一种廉价、简便、快速、敏感、特异的新方法。     

猪繁殖—呼吸综合征病毒的形态学

利用电子显微技术，对从上海某发病猪场分离到3株猪繁殖－呼吸综合征病毒（PRRSV）和标准美洲株（ATCC－VR2332）进行了形态特征的比较。结果表明，这4株病毒形态特征无显著差异。负染显示该病毒以球形为主，具有囊膜，囊膜上有纤突，大小为60－85nm。超薄切片可见病毒粒子大量存在于细胞浆内，有囊膜的直径为60－80nm，没有囊膜的直径为40－50nm，在细胞的线粒体，高尔基体和双基核膜内可见病毒粒子。在病毒增殖的同时，Marc-145细胞的显微结构逐渐发生破损，显示病毒的释放是通过破坏细胞膜结构的完整性来实现的。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白基因的克隆及原核表达

通过RT-PCR技术从细胞毒液中扩增N蛋白cDNA,克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,所获得的重组质粒pET-28a-N经酶切鉴定正确后,将其转化入表达菌E.coliBL21plysS诱导表达,用SDS-PAGE与Western blotting对表达产物进行鉴定。结果表明,通过RT-PCR扩增获得长度为372 bp的N蛋白基因,诱导表达重组质粒pET-28a-N,经SDS-PAGE检测,IPTG终浓度为1 mmol/L时,诱导4 h蛋白表达量最高,出现分子质量约为18 ku的目的蛋白带,与N蛋白的理论值相符。经Western blotting检测,该表达产物可与PRRSV阳性血清发生特异性反应。获得的PRRSV N蛋白为建立针对该病毒抗体的间接ELISA检测方法,以及为进一步研发PRRS抗体检测试剂盒奠定了基础。     

猪繁殖与呼吸综合征疫苗研制的研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是一种引起母猪繁殖障碍和新生仔猪呼吸道症状及高死亡率的传染病,在全世界蔓延流行,2006年在中国又变异为高致病性猪繁殖与呼吸综合征并造成严重经济损失。自20世纪80年代末首次在美国发现该病至今已有20余年,该病尚未有特效的治疗药物,疫苗免疫是防控该病的重要措施之一,国内外学者高度重视其疫苗的研究,并取得了较大的进展。笔者着重阐述近些年来猪繁殖与呼吸综合征活疫苗、灭活疫苗及基因工程疫苗的研究进展。     

2株猪繁殖与呼吸综合征病毒的致病性分析

为追踪猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）分离株的变异特点,本研究于2016年从河北和福建疑似猪繁殖与呼吸障碍综合征（PRRS）发病猪场采集病料,接种Marc-145细胞,产生合胞体样细胞病变,RT-PCR和间接免疫荧光试验鉴定为HP-PRRSV,将其分别命名为PRRSV CZ16A和NP16A。为研究PRRSV分离株CZ16A和NP16A对猪的致病性,将分离毒株经噬斑纯化后分别接种PRRSV抗原、抗体双阴性的60日龄健康仔猪,通过临床观察、解剖病理变化及病毒血症检测等指标初步探讨两株PRRSV的致病性。结果表明,分离株CZ16A和NP16A感染猪后均能够在动物体内复制,并引起体温升高,但两株PRRSV分离株均未引起试验动物的发病和死亡,剖检结果显示NP16A分离株能引起动物肺部实变、淋巴结肿大,其毒力比CZ16A分离株稍强。