绵羊肺腺瘤病毒致瘤机制研究进展

绵羊肺腺瘤(OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(OPAV)引起的一种慢性、传染性绵羊肺脏肿瘤性疾病,该病对养羊业,特别是种羊的发展有重大影响,世界动物卫生组织将其列为必须通报的动物疫病。论文就近年来国内外关于OPAV致瘤机制的相关研究进行了综述,包括OPAV的转录特异性和囊膜蛋白的致瘤作用和OPAV受体等。这对深入研究OPAV的致瘤机制及确定相应的防控靶点,具有重要的理论意义和潜在的应用价值。     

一例绵羊肺腺瘤病毒感染的诊断

正绵羊肺腺瘤病(Ovine pulmonary adenomatosis,OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)引起羊的一种慢性、接触传染性、肺脏肿瘤性疾病~[1]。本病的潜伏期较长,以肺部发生肿瘤为特征,病羊表现消瘦,咳嗽,呼吸困难,肺部发生肿瘤,最终衰竭而死亡~[2]。绵羊感染     

绵羊肺腺瘤病毒自然感染病例的病理学观察

通过对2只自然感染绵羊肺腺瘤病毒的病羊进行剖检及病理组织学观察,了解此病毒对绵羊机体的主要侵害器官及其他各器官所发生的一系列变化。试验结果表明:剖检可见肺脏膨隆,体积增大、充满胸腔;肺的表面和切面上见到大小不一、质度较实的黄白色小结节;有些病例肺胸膜的脏层与壁层发生黏连;在支气管、细支气管内可见白色泡沫状的黏液。组织学检查可见肺泡壁上皮细胞和细支气管上皮细胞增生,呈乳头状向肺泡腔内或细支气管腔内生长;邻近部位的肺泡腔内有大量的巨噬细胞增生。从观察结果中可以看出,绵羊肺腺瘤病毒主要侵害肺脏和机体的免疫器官,可为绵羊肺腺瘤病的进一步研究提供参考。     

绵羊肺腺瘤病毒内蒙古株的分离与观察

以内蒙古某羊场自然感染绵羊肺腺瘤病的病肺组织4例和3月龄绵羊胎肺2例作为材料，对胎肺细胞进行了原代培养并接种绵羊肺腺瘤病毒悬液，进行了绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)的分离，同时采用电镜负染色技术和超薄切片透射电镜技术对上述样品进行了观察。结果表明，自然感染绵羊肺腺瘤病的4例病肺组织中都有散在的病毒粒子，其直径为100～125nm，接种病毒悬液的胎肺细胞从第2代到第9代均出现细胞病变，但对绵羊胎肺培养的病毒悬液电镜负染色观察未发现典型的病毒粒子，而超薄切片透射电镜观察发现了病毒样粒子。     

德克赛尔杂交绵羊肺腺瘤的诊断

绵羊肺腺瘤(OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的一种可感染绵羊和山羊肺脏的肿瘤性疾病,近几年国内陆续有绵羊感染的报道,给国内的齐羊业造成巨大的经济损失.对山东某肉羊养殖场的发病羊进行临床症状观察,病理剖检及实验室诊断,通过外源性绵羊肺腺瘤病毒(exJSRV)套式RT-PCR检测方法,确诊发病绵羊为绵羊肺腺瘤病毒...     

北京地区绵羊肺腺瘤病的病理学及PCR诊断

对北京某种羊场的疑似绵羊肺腺瘤病的羊进行临床诊断、病理组织学观察和PCR检测。结果显示,(1)"小推车试验"时从鼻腔里流出黏稠鼻液;(2)剖检可见肺脏肿大和实变,肺脏和气管内有大量泡沫性液体;(3)病理组织观察到肺脏上皮细胞肿瘤性增生,突入肺泡腔;(4)PCR和半巢式PCR能扩增到176bp和129bp的特异性片段;(5)序列比对分析显示,U3区与外源性绵羊肺腺瘤病毒的核苷酸同源性为90.9%-97.7%。综合上述诊断结果确诊该种羊场的疑似病例为绵羊肺腺瘤病。     

绵羊肺腺瘤病毒人工感染羔羊淋巴细胞动态变化的研究

绵羊肺腺瘤病(sheep pulmonary adenomatosis,SPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(sheeppulmonaryadenoma-tosis virus,SPAV)所致绵羊的一种慢性、进行性、接触传染性肺脏肿瘤性疾病,实际是一种低度肺癌,又称绵羊肺癌(ovine pulmonary carcinoma,OPC)[1-2]。该病分布广泛,潜伏期长,病程久,     

绵羊肺腺瘤病的病理检查及临床诊断

绵羊肺腺瘤病是一种由病毒引起的,局限于肺脏的肿瘤性疾病。本病具有明显的隐伏性和迁延性,以渐进性消痩、衰竭、呼吸困难、湿性咳嗽和水样鼻漏,以及肺泡和呼吸性细支气管上皮的腺瘤样增生为特征。绵羊肺腺瘤病是一种独立的慢病毒感染。本病最初发现于非洲,在当地常以“驱赶病”作为病名,以后传人欧洲、美洲和亚洲。目前在世界上许多养羊国家都有本病发生。我国在甘肃、青海、新疆和内蒙古等地,也有本病流行。     

绵羊肺腺瘤病

绵羊肺腺瘤病是由绵羊驱赶病反转录病毒引起绵羊的局限性肺脏肿瘤性传染病。以渐近性消瘦、咳嗽、呼吸困难和流鼻液,并在肺脏发生多数原发性腺瘤状结节为特征。本病发现于19世纪末,以后在欧洲、亚洲及南美洲发生。到1934年在冰岛大量发生。我国于1951年在兰州首先发现。1955年以后新疆、内蒙古、青海等省区也发生了本病。由于本病分布广泛和高度病死率,给养羊业带来严重危害。1病原本病的病原体是绵羊驱赶病反转录病毒(Jaagsiektesheep retrovirus,JSRV),是一种不同于非致瘤性绵羊慢病毒的反转录病毒,称为β反转录病毒。以前所说的绵羊疱…     

1株山羊内源性肺腺瘤反转录病毒的序列测定与分析

参照内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-20(EF680302.1)全基因组序列设计合成3对引物,以山羊基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增山羊内源性病毒基因片段,分别连接PMD-18T载体并测序,完成了1株山羊内源性肺腺瘤反转录病毒全基因序列的测定。结果分析显示测定序列全长7 480bp,获得的序列与内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-18(EF680301.1)的核苷酸相似性为93.4%,与外源性绵羊肺腺瘤病毒株JS-7(AF357971.1)的核苷酸相似性为88.1%。根据pro基因序列构建系统进化树,结果显示扩增序列与内源性绵羊反转录病毒株en-JSRV-5(EF680305.1)的亲缘关系最近。本研究有助于内源性肺腺瘤反转录病毒感染性克隆的构建和内源性肺腺瘤反转录病毒功能的研究。     

绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白在大鼠体内的表达

为探讨绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白(OPAV-Env)引起肺泡Ⅱ型上皮恶变的机理,将真核表达质粒pcDNA3.1-env用体内转染试剂经尾静脉转染到幼龄大鼠体内,用RT-PCR及免疫组化法检测绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白在大鼠体内的表达,并采用SSCP法及基因克隆法结合序列分析检测H-ras基因是否发生突变.结果显示,绵羊肺腺瘤病...     

绵羊肺腺瘤病及其防治

正绵羊肺腺瘤病是绵羊的一种慢性、接触传染性的肺脏肿瘤性疾病。该病临床表现为患病羊潜伏期长,虚弱、消瘦和咳嗽,呼吸困难,伴发呼吸湿啰音,流出大量浆液性鼻漏,病理特征主要为Ⅱ型肺泡上皮细胞和无纤毛细支气管上皮细胞肿瘤性增生~([1])。1病原绵羊肺腺瘤病病毒是反转录病毒科β-反转录病毒属的成员之一,是有囊膜的线性单股负链RNA,基因组为RNA全长7400kb。绵羊肺腺瘤病病毒感染后,     

内源性绵羊肺腺瘤病毒全基因组序列测定与序列分析

参照内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-20全基因组序列设计合成3对引物,应用PCR技术扩增内源性绵羊肺腺瘤病毒基因片段分别连接pMD-18T载体并测序,完成了内源性绵羊反转录病毒基因组序列测定。分析结果显示,测定序列全长7519bp,与内源性绵羊肺腺瘤病毒代表株enJSRV-20核苷酸同源性为99．4％,与外源性绵羊肺腺瘤病毒代表株AF357971．1的核苷酸同源性为90．4％。基于全基因组序列核苷酸的系统进化发生树分析结果显示,扩增序列与enJSRV-20的亲缘关系最近。     

绵羊肺腺瘤病的病理学及RT—PCR诊断

对呼和浩特市四子王旗某种羊场的疑似绵羊肺腺瘤病的4只病羊,通过临床诊断、病理组织学观察,PCR、RT-PCR和半巢式PCR技术对疑似病羊进行检测诊断.结果显示:(1)"小推车试验"时有鼻液流出;(2)剖检时可见肺肿大实变,切开肺脏时可见大量泡沫状液体从切面渗出;(3)病理组织学观察肺脏有大小不一的腺瘤灶,而且肺泡上皮细胞呈乳头状增生;(4)根据GenBank中登录的绵羊肺腺瘤病毒全序列(AF105220),设计合成3对特异性引物和3条巢式引物,经RT-PCR、PCR及半巢式PCR法扩增并测序,利用RT-PCR和PCR分别扩增出与预期大小一致的条带U3(175 bp)、env(225 bp)、gag(300 bp),序列分析表明与引起该病的绵羊肺腺瘤病毒序列同源性较高,分别达97.2%、96.5%、94.4%.应用半巢式引物扩增片段分别为U3(133 bp)、env(178 bp)、gag(275 bp).经过以上方法确诊该羊场的疑似病例为绵阳肺腺瘤病.     

新疆绵羊肺腺瘤病临床诊断与组织病理学观察

为了进一步了解近几年新疆绵羊肺腺瘤病的临床表现以及病理变化情况,在对新疆部分地区绵羊肺腺瘤病的流行病学调查的基础上,对两只有典型临床症状的绵羊进行临床病理学诊断。通过对患病羊的流行病史调查、临床症状观察、解剖检查及组织病理学观察的方法,对其进行诊断。结果表明,驱赶病羊时步态僵硬出现咳嗽、气喘、呼吸困难等症状,"小推车试验"时有大量稀薄液体从鼻孔流出,剖检可见肺脏体积增大,质量增加,质地坚硬,病羊肺实变,有大量形态不规则灰白色或浅黄褐色结节。显微镜下观察,可见肺泡上皮细胞和支气管上皮细胞大量增生,形成肺肿瘤,腺上皮细胞分泌大量黏液使细胞粘连形成细胞团块。本研究丰富了国内对该病的临床病理调查,为更深入的研究OPA的发病机理及其生物学特性奠定基础。     

绵羊肺腺瘤PCR诊断方法的建立及应用

利用特异性PCR方法实现对绵羊肺腺瘤病毒(OPAV)快速精确诊断和病毒类型的分析.参照GenBank中公布的外源性绵羊肺腺瘤病毒基因序列,针对病毒env基因YXXM基序设计了特异性PCR引物,建立了特异性PCR检测方法.成功扩增出病毒囊膜基因(env)多变区序列片段(ST)通过序列比对确定病毒类型.此方法操作简便,可用...     

内源性绵羊肺腺瘤反转录病毒的研究进展

从内源性绵羊肺腺瘤反转录病毒（enJSRV）与外源性绵羊肺腺瘤反转录病毒（exJSRV）基因组结构的比较、enJSRV与绵羊肺腺瘤病（OPA）的关系、enJSRV在羊体内的表达及其系统发育分析等方面综述了enJSRV的研究进展，旨在为早期诊断及预防OPA提出新方法，为揭示该病的分子发病机理及探索其基因治疗提供新思路。     

绵羊基因组中内源性绵羊肺腺瘤病毒相关序列的确定

绵羊都含有与绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)密切相关的15~20拷贝内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)相关序列。宿主可利用内源性病毒来预防致病性反转录病毒的感染,一些内源性病毒可以有效地干扰相关外源性病毒的复制。本试验通过分子生物学手段确定了蒙古绵羊基因组中含有enJSRV6和enJSRV10两个内源性病毒基因而内蒙古白绒山羊中未发现。通过比较内、外源病毒LTR序列的酶切图谱,获得专一作用外源性病毒的核酸内切酶M spⅠ、TfiⅠ、BsaWⅠ,如果将酶切与聚合酶链式反应(PCR)相结合,不需要经过测序就可分辨enJS-RV和外源性绵羊肺腺瘤病毒(exJSRV),形成"酶切-PCR"检测技术,将为绵羊肺腺瘤病的快速诊断提供了新的手段。     

山东东营一例疑似绵羊肺腺瘤病的病理学诊断

绵羊肺腺瘤病是由逆转录病毒引起的成年绵羊的一种慢性传染性肿瘤病,其病变特征是细支气管粘膜上皮和肺泡上皮呈腺瘤化增生,实际是一种低度肺癌,因此又称为绵羊肺癌。其临床特征为潜伏期长,肺泡和支气管上皮进行性肿瘤增生,消瘦,咳嗽,呼吸困难,终归死亡。我国的绵羊肺腺瘤病首次报道于新疆,甘肃、青海、内蒙均有本病的报道。2005年10月至2006年5月山东东营一种羊场发生疑似绵羊肺腺瘤病。情况如下:1发病情况羊场规模800只,品种为杜泊和特克赛尔,2005年10月羊群开始发病,春节前后开始出现羊只死亡,至2006年5月8日,死亡9只。成年羊为多,2岁以…     

绵羊肺腺瘤kras和其他相关基因突变的检测

为了解绵羊肺腺瘤与基因突变的关系,从绵羊肺腺瘤病毒感染的病羊肺脏组织扩增kras、nras、pik3ca、egfr、p53基因突变频率高的位点所在外显子核苷酸序列,应用PCR-SSCP技术和测序分析检测基因突变。结果显示,nras、pik3ca、egfr基因未检测到突变。2个阳性样品kras基因第1外显子检测出突变,核苷酸突变为点为35G→T,编码的氨基酸位于第12密码子为12G→V。1个阳性样品p53基因第7外显子检测出突变,核苷酸突变位点为825T→C,编码的氨基酸未发生突变,依然是C。为绵羊肺腺瘤病毒(OPAV)分子致病机制的研究提供了参考资料。