秦皇岛地区貉肠外大肠杆菌的致病性与耐药性分析

为了解河北省秦皇岛地区貉肠外致病性大肠杆菌(extraintestinal pathogenic Escherichia coli,ExPEC)的致病性与耐药性,采取小鼠致病试验、KB纸片法和PCR方法检测20株貉源ExPEC对小鼠的致病力,对15种抗生素的敏感性以及12种毒力基因和15种耐药基因的携带情况。结果显示,20株ExPEC均可致小鼠死亡,死亡率在40%～80%;iss、ler、vat等11种毒力基因有不同程度检出,检出率为15%～85%;20株ExPEC均具有多重耐药性,氟苯尼考、磺胺间甲氧嘧啶和磺胺二甲氧嘧啶等12种抗生素耐药率均在70%以上,多西环素耐药率高达100%(20/20);20株ExPEC分别检出2～8个耐药基因,喹诺酮类耐药基因gyrA和gyrB检出率最高,为80%(16/20)。本试验为秦皇岛地区ExPEC所致貉大肠杆菌病的防制提供数据参考。     

死胎流产的蓝狐体内检出致病性大肠杆菌

2015年4月,唐山地区不同的养殖场蓝狐出现了死胎、流产,无菌采集流产蓝狐阴道分泌物、死胎等病料组织,PCR检测阿留申病毒、伪狂犬病病毒、犬瘟热病毒均为阴性,通过形态学观察、培养特性、生化试验和16SrRNA等方法,鉴定出5株大肠杆菌。对分离的5株大肠杆菌进行动物致病性试验、血清型及毒力基因检测。结果表明,5株大肠杆菌分离菌株均对怀孕的小鼠和蓝狐有致病性;分离的5株致病性大肠杆菌属于3个不同血清型(O89、O3、O38),其中O89为流行血清型;毒力基因fuyA、irp2、papC、fimC、iucDa、vat的检出率分别为100%,80%,60%,80%,60%,60%,其中,毒力基因iutA、Ler、eaeA均未检出,致病性大肠杆菌流行血清型O89分离菌株同时携带6个毒力基因。药敏试验结果显示,5株致病性大肠杆菌均对丁胺卡那霉素、大观霉素、氟苯尼考3种药物敏感,对环丙沙星、恩诺沙星、头孢曲松、庆大霉素、诺氟沙星等药物中度敏感,对其他的药物存在不同耐药性。本研究为河北唐山地区的蓝狐死胎流产的防治提供基础。     

仔猪腹泻致病性大肠杆菌分型鉴定及耐药性分析

为了解贵州省规模化养猪场腹泻仔猪致病性大肠杆菌流行情况及耐药性变化,本研究运用凝集试验、PCR和药敏纸片琼脂扩散法等方法对分离的78株致病性大肠杆菌进行血清型、毒力基因及耐药性分析。结果显示,78株致病性大肠杆菌以O138、O87血清型为主,占定型菌株的60.8%;其中62株致病性大肠杆菌检出毒力基因,检出率为79.5%,可分为8种毒力基因类型,分属肠致病性大肠杆菌（EPEC）、肠产毒性大肠杆菌（ETEC）和肠聚集性大肠杆菌（EAEC）,毒力基因eaeA、elt和escV检出率较高,分别为38.5%、28.2%和21.8%;分离到的致病性大肠杆菌对β-内酰胺类药物高度耐药,均为多重耐药株,耐药种类可达8种以上。结果表明,当前贵州省规模化养猪场腹泻仔猪致病性大肠杆菌的毒力基因检出率较高且基因型复杂,耐药性严重。本试验结果可为规模化养猪场防控仔猪腹泻提供基础资料及理论依据。     

仔猪腹泻致病性大肠杆菌分型鉴定及耐药性分析

为了解贵州省规模化养猪场腹泻仔猪致病性大肠杆菌流行情况及耐药性变化,本研究运用凝集试验、PCR和药敏纸片琼脂扩散法等方法对分离的78株致病性大肠杆菌进行血清型、毒力基因及耐药性分析。结果显示,78株致病性大肠杆菌以O138、O87血清型为主,占定型菌株的60.8%;其中62株致病性大肠杆菌检出毒力基因,检出率为79.5%,可分为8种毒力基因类型,分属肠致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)和肠聚集性大肠杆菌(EAEC),毒力基因eaeA、elt和escV检出率较高,分别为38.5%、28.2%和21.8%;分离到的致病性大肠杆菌对β-内酰胺类药物高度耐药,均为多重耐药株,耐药种类可达8种以上。结果表明,当前贵州省规模化养猪场腹泻仔猪致病性大肠杆菌的毒力基因检出率较高且基因型复杂,耐药性严重。本试验结果可为规模化养猪场防控仔猪腹泻提供基础资料及理论依据。     

羊源大肠杆菌血清型鉴定、毒力基因检测及耐药性分析

为分析内蒙古扎兰屯地区羊源大肠杆菌血清型分布、毒力基因及耐药性流行情况,采集患羊鼻腔拭子150份,分离大肠杆菌,并采用O血清型玻板凝集试验、PCR法和K-B药敏纸片法对分离的大肠杆菌致病菌株进行血清型、毒力基因及耐药性检测。结果显示, 45株大肠杆菌致病菌株分属10种血清型,以O111、O127、 O38为流行的优势血清型,分别占致病菌株的26.7%、22.2%和17.8%;分离菌株毒力基因irp2、fyuA、hlyA、hlyE、Ler、eaeA、Ehly检出率在33.3%以上,其他毒力基因检出率在4.4%～14.3%之间;分离菌株对氨苄西林、阿莫西林、新霉素9种药物耐药率在53.3%以上,对其他药物的耐药率在13.3%～26.7%之间。研究表明,内蒙古扎兰屯地区羊源大肠杆菌血清型复杂,携带多种毒力基因,耐药性严重。     

江苏及周边地区鸭致病性大肠杆菌血清型、毒力因子及耐药研究

本研究旨在明确江苏及周边地区鸭禽致病性大肠杆菌（avian pathogenic Escherichia coli,APEC）的血清型、毒力基因分布和耐药性之间的相关性,以期为APEC的防控提供依据。从江苏省及周边养鸭场分离了191株APEC,并对其中21株（每个养殖场选取1株）的O抗原血清型、毒力基因分布和耐药性进行检测。对21株APEC的血清型检测结果表明,O65血清型12株,占全部菌株的57.14%,O5、O28、O42、O87、O93、O138、O147血清型均为1株,其他血清型2株;毒力基因检测结果表明,5个毒力基因有较高的分布率,其中fimA基因的阳性率为100%,ECs3737、ECs3703、tsh和irp2基因的阳性率分别为90.5%、85.7%、57.1%和42.9%,含有5个毒力基因的菌株共有6株（28.57%）;药敏试验结果表明,21株APEC均存在多重耐药性,100%的分离菌株对恩诺沙星、强力霉素、万古霉素和红霉素耐药,85.71%的分离株对10种以上抗生素耐药,14.29%的菌株对21种药物都耐药;对血清型、毒力基因分布和耐药性之间的关系分析表明,含有4种以上毒力基因的菌株有13株,其中9株是O65血清型。在13株含有4种以上毒力基因的菌株中,耐15种药物以上的有9株（69.23%）,耐20种以上药物的有3株（23.08%）,表明含有4种以上毒力基因的菌株多重耐药现象严重。研究表明,江苏及周边地区鸭源大肠杆菌血清型复杂,携带多种毒力基因,耐药性严重。     

猪、鸡与貂源肠外致病性大肠杆菌群型、耐药性与致病性分析

为检测不同动物源肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)的耐药及致病性差异,本研究从132份鸡、猪和水貂等动物肠道外组织中分离鉴定大肠杆菌,并对分离菌株进行了16S rRNA基因测序、毒力基因检测、药敏试验、O抗原鉴定、系统进化群分析及动物致病性试验。实验结果显示:分离出53株ExPEC,且至少携带特异性毒力基因pap、sfa/foc、afa/dra、iutA、kpsMTII中的两种基因,并携带fimH、ibeA、hlyA、malX、iss、iroN等其它相关毒力基因。53株ExPEC分离株对氯霉素、卡那霉素、头孢噻吩、四环素、多粘菌素B、氨苄青霉素等呈现不同程度的多重耐药性;O抗原主要分布于O1、O2、O8、O11、O38、O78、O120血清型;系统进化群分析结果显示:28株属于A群,19株属于B1群,1株为B2群,5株属于D群。选取20株ExPEC分离菌株按照6×10~6cfu/只对小鼠进行腹腔注射,验证其致病性;并测定ExPEC6、ExPEC42、ExPEC52、ExPEC53菌株对BALB/c小鼠的LD_(50),其结果分别为3.49×10~6cfu/mL、9.49×10~5cfu/mL、9.48×10~6cfu/mL、2.38×10~7cfu/mL。本研究为动物源性ExPEC的预防诊断提供依据,并为下一步研究其致病机理等奠定基础。     

致羔羊腹泻大肠杆菌血清型鉴定与耐药性分析

为了分析白城地区致羔羊腹泻大肠杆菌流行的血清型与耐药性,从采集的腹泻羔羊粪便样品127份中分离鉴定得到了56株为致病性大肠杆菌。采用玻板凝集法和K-B药敏纸片法分别检测56株致病性大肠杆菌分离株的血清型分布和耐药性情况。结果显示,56株致病性大肠杆菌分离株属于9个血清型,致病性大肠杆菌分离株以O119、O101、O24为流行的优势血清型;56株致病性大肠杆菌分离株且呈现多重耐药性,对头孢克肟、头孢曲松两种药物的耐药率最低,在12.4%~28.6%之间;对阿米卡星、新霉素、多西环素等7种药物的耐药率在50.0%~78.6%之间;对大观霉素、环丙沙星、氧氟沙星等5种药物的耐药率在82.1%~96.4%之间。     

云南南涧地区致仔猪腹泻性大肠杆菌血清型鉴定与耐药性分析

对2018—2020年采集的南涧县不同养殖场中患腹泻病仔猪肛拭子、粪便、肝脏等共243份病料进行大肠杆菌分离鉴定,采用人工感染小白鼠试验、玻板凝集试验、结晶紫微孔板法和K-B药敏纸片法,对分离的致泻性大肠杆菌的致病性、血清型、生物被膜形成能力及耐药性进行检测。结果显示,从243份仔猪腹泻病料组织中分离得到了113株大肠杆菌,其中有87株为致病性大肠杆菌,87株致病性大肠杆菌属于14种不同的血清型,以038 (17.2%)、0101 (18.4%)和0142 (14.9%)为主要流行优势血清型,强形成被膜能力菌株有24株(27.6%)、中形成被膜能力菌株有34株(39.1%)、弱形成被膜能力菌株有17株(19.5%)、不形成被膜菌株有12株(13.8%)。分离的87株致病性大肠杆菌对阿莫西林、氨苄西林、链霉素等10种药物的耐药率较高,耐药率在49.4%以上,对其他药物的耐药率在9.2%～26.4%之间。     

临床腹泻肉羊源大肠杆菌流行病学调查及耐药性分析

为了了解江苏省肉羊腹泻源致病性大肠杆菌毒力基因分布情况,并与相应的大肠杆菌O抗原型进行比较和分析其耐药性,试验采集江苏省部分地区24个肉羊养殖场临床腹泻样品75份,运用PCR技术、玻板凝集试验和药敏纸片琼脂扩散法对56株致病性大肠杆菌分离株进行毒力基因、血清型及耐药性分析。结果表明:56株分离株可分为11种不同毒力因子组合,O73为优势血清型。致病性大肠杆菌分离株对磷霉素、多黏菌素B比较敏感,敏感比例分别为85.71%、76.79%。耐药性最强的是强力霉素,耐药比例为94.64%;其次是四环素,耐药比例为78.57%。说明目前江苏省规模化肉羊养殖场致病性大肠杆菌的毒力基因检出率较高且基因型复杂,耐药性严重。     

桂林地区致仔猪腹泻大肠杆菌血清型鉴定与耐药性分析

为了了解桂林地区致仔猪腹泻大肠杆菌血清型分布与耐药性,从桂林地区不同养猪场中采集患腹泻仔猪肝脏、肛拭子及粪便等病料中分离到67株大肠杆菌。致病性试验结果显示,在67株大肠杆菌中52株为致病性大肠杆菌。采用玻板凝集法和K-B药敏纸片法对52株致病性大肠杆菌进行血清型鉴定和耐药性分析,结果表明,52株致病性大肠杆菌共属于12个血清型,以O149、O109和O9为流行的优势血清型;52株致病性大肠杆菌呈现多重耐药,对阿莫西林、磺胺间甲氧嘧啶、新霉素3种药物的耐药率高达100%,对环丙沙星、恩诺沙星、氨苄西林等9种药物的耐药率在51.9%～98.1%之间;对其他药物的耐药率在23.1%～48.1%之间。本试验为该地区致仔猪腹泻大肠杆菌防控提供了参考依据。     

泉州地区猪源致病性大肠杆菌的分离鉴定血清型检测与耐药性分析

为了解泉州地区猪源致病性大肠杆菌流行血清型分布及耐药性,无菌采集的患病仔猪肝脏、肛拭子和粪便等病料组织样品87份,通过细菌的分离鉴定得到了42株大肠杆菌,其中,30株为致病性大肠杆菌。利用玻板凝集法和K-B药敏纸片法分别检测30株猪源致病性大肠杆菌分离株的血清型和耐药性。结果显示,30株猪源致病性大肠杆菌分离株属于9个血清型中,定型的猪源致病性大肠杆菌分离株27株,定型率为90%(27/30),2株未鉴定出来,占分离菌菌株的64.3%(27/42),以O147和O141为该地区流行的优势血清型;30株猪源致病性大肠杆菌分离株对新霉素、环丙沙星、恩诺沙星等5种药物的耐药率在80.0%~100%之间,对克林霉素、多西环素、丁胺卡娜霉素等5种药物的耐药率在60.0%~73.3%之间;对其他的药物耐药率在33.3%~53.3%之间,且呈现多重耐药性。本研究为该地区的猪源致病性大肠杆菌病的防治提供了重要的参考价值。     

河南省濮阳市犊牛腹泻大肠杆菌分离鉴定及生物学特性分析

为了解河南省濮阳市致犊牛腹泻大肠杆菌的致病性、血清型、生物被膜形成能力及耐药性等生物学特性,对2018—2020年采集的243份腹泻犊牛肛拭子以及粪便、肝脏等病料样品进行大肠杆菌分离鉴定,采用人工感染小鼠试验、玻板凝集试验以及结晶紫微孔板法和K-B药敏纸片法,对分离的致病性大肠杆菌进行相关特性检测。结果显示：从243份病料样品中分离到87株致病性大肠杆菌,致病性大肠杆菌分离率为35.8%（87/243）;分离的致病性大肠杆菌分属于14种血清型,其中O101（18.4%）、O38（17.2%）和O142（14.9%）为优势血清型;分离的致病性大肠杆菌中,被膜形成能力强的24株（26.6%）,中等的34株（43.6%）,弱的17株（19.5%）,不形成的12株（15.4%）;分离的致病性大肠杆菌对阿莫西林、氨苄西林、链霉素10种药物的耐药率较高,均在49.4%以上。结果表明：致病性大肠杆菌在濮阳市可能呈地方性流行,O101、O38、O142为犊牛源优势血清型;该地的致病性大肠杆菌外界生存能力较强,且对多种临床常用药物产生了耐药性。因此,应采取综合防控措施,科学使用敏感抗菌药物,研制优势血清型多价疫苗,加强犊牛大肠杆菌性腹泻的防控。     

藏香猪源大肠埃希菌致病性和血清型检测及药敏试验

为了解四川省藏香猪源大肠埃希菌致病性、血清型及耐药性情况,从四川省藏香猪养殖场中无菌采集腹泻仔猪肝脏、肛拭子及粪便等组织病料253份中,分离得到155株大肠埃希菌。采用人工感染小鼠致病性试验、玻板凝集试验和KB药敏纸片法分别测定155株大肠埃希菌分离菌株的致病性、血清型及耐药性。结果显示,小鼠致病性试验表明155株分离菌中120株有致病性;玻板凝集试验表明120株致病性大肠埃希菌分离株属于14个血清型,以O111、O147、O109和O119为主要流行的优势血清型;耐药性试验表明120株致病性大肠埃希菌分离株对阿莫西林、氨苄西林、新霉素、磺胺间甲氧嘧啶4种药物耐药较严重,耐药率在94.2%~98.3%之间,对庆大霉素、氟苯尼考、多西环素等6种药物耐药率在44.2%~85.0%之间,对其他药物耐药率在15.0%~37.5%之间。说明该地区藏香猪源致病性大肠埃希菌血清型呈多样性分布,耐药性严重。     

秦皇岛地区蛋鸡致病性大肠杆菌的血清型、毒力基因及耐药性检测分析

采用玻板凝集试验、PCR方法及K-B药敏纸片法分别对2021年秦皇岛地区分离鉴定的36株蛋鸡致病性大肠杆菌进行血清型、毒力基因、耐药基因及耐药性检测。结果显示,36株致病性大肠杆菌属于10种不同的血清型,以O78、O2、O1为主要流行的血清型,分别占比25.00%(9/36),19.44%(7/36),16.67%(6/36)。分离菌株携带14种不同的毒力基因,未检测到Ler、eaeA 2种毒力基因,其中iutB、tsh等5种毒力基因的检出率为66.67%～88.89%,而Vat、colv毒力基因检出率较低,分别为11.11%和16.67%。分离菌株对磺胺间甲氧嘧啶、阿莫西林等7种抗生素的耐药率在77.78%以上,对林可霉素、卡那霉素等4种抗生素的耐药率在27.78%以下。分离菌株均携带多重耐药基因,以Sul-1、dhpS等8种耐药基因为主,检出率为72.22%～94.44%,而SHV等4种耐药基因的检出率较低,为2.78%～25.00%,KPC、qnrA、qnrB基因未检出。本试验结果为河北省秦皇岛地区蛋鸡大肠杆菌的防制提供了用药指导。     

邵阳地区宠物犬源致病性大肠杆菌的血清型鉴定及耐药性分析

为了分析邵阳地区宠物犬源致病性大肠杆菌的血清型与耐药性,采用细菌分离鉴定的方法对38家宠物医院中无菌采集的87份腹泻宠物犬肛拭子及粪便样品进行大肠杆菌分离鉴定,采用人工感染动物试验、玻板凝集试验和K-B药敏纸片法分别检测分离菌株的致病性、血清型及耐药性。结果显示:分离得到了49株大肠杆菌,其中34株为致病性;34株致病性大肠杆菌分离株属于9种血清型,以O_2、O_9、O_(13)和O_(20)为主要的优势血清型;34株致病性大肠杆菌分离株对阿莫西林、氨苄西林、美罗培南等4种药物耐药率在82.4%～94.1%之间,对丁胺卡那、头孢他啶、恩诺沙星等6种药物的耐药率在41.2%～79.4%之间,对头孢曲松、头孢噻肟耐药率在14.7%～23.5%之间。研究结果为该地区宠物犬大肠杆菌病防治提供参考。     

福建省龙岩市禽致病性大肠杆菌的血清型、毒力因子及耐药研究

本研究对2015年分离自福建省龙岩市的139株禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)的血清型、毒力因子分布及耐药性等进行检测,并对血清型与耐药性、毒力因子分布和耐药性之间的相关性进行分析,以期为APEC的防控提供参考。对139株分离菌株的血清型检测结果表明,O1血清型(11株)、O2血清型(14株)和O78血清型(14株)占全部菌株的28%;对分离菌株毒力基因检测结果表明,4%和7.1%的菌株检测到papC基因和vat基因,14.3%和19.3%的菌株检测到aat A基因和cva/cvi基因。而iuc D(82%)、tsh(59%)、iss(55%)和irp2(44.6%)基因在分离菌株中具有较高的检出率;药敏实验结果表明,分离株存在多重耐药性,99%以上分离菌株对红霉素、克林霉素和利福平耐受,86%的分离菌株对10种以上抗生素耐受,57.3%的菌株对13种药物都耐受;对血清型、耐药性与致病性之间的分析结果表明,分离的O1、O2和O78血清型的菌株,其中50%的菌株是含有5种以上毒力基因的强毒株,且在分离的含有5种以上毒力基因的强毒株中,50%的菌株对13种抗生素耐受,90%的菌株对10种以上药物耐受。     

河西走廊地区犊牛腹泻致病性大肠杆菌分离鉴定、毒力因子及耐药性检测

[目的]为了分析河西走廊地区犊牛腹泻致病性大肠杆菌携带毒力基因和耐药性情况,[方法]2020—2021年在河西走廊地区采集患腹泻病犊牛的粪便、肛拭子及肝脏等病料组织279份,采用人工感染试验动物、PCR方法和K-B药敏纸片法分别检测犊牛腹泻性大肠杆菌致病性、毒力因子和耐药性。[结果]结果表明,分离得到了126株大肠杆菌,其中79株犊牛腹泻性大肠杆菌能引起小鼠死亡;分离的79株致病性大肠杆菌的毒力基因crl、irp2、fimH、papC、K88、K99、stx1、stx2检测率在40.5%～100%之间,其他毒力基因检测率在15.2%～34.2%之间;分离的79株致病性大肠杆菌对氨苄西林、阿莫西林、新霉素等8种药物的耐药率在49.4%～96.2%之间,对其他药物的耐药率在5.1%～32.9%之间。[结论]从河西走廊地区患腹泻病犊牛病料组织中分离得到79株致病性大肠杆菌,这些菌株携带多种毒力基因,对临床中常用的抗菌药物产生了耐药性。     

肠致病性大肠杆菌的分离鉴定和耐药性分析

为了给临床合理用药提供正确的指导,对江苏南京、扬州、镇江、泰州、盐城及安徽天长等地区送检的病死猪、羊、鸡、鹅等动物进行细菌分离和鉴定,调查肠致病性大肠杆菌对常用抗菌药物的耐药情况。结果分离出78株大肠杆菌,经过血清型鉴定,其中17株为肠致病性大肠杆菌,共属于8种血清型。通过对这17株肠致病性大肠杆菌进行耐药性分析,发现分离的肠致病性大肠杆菌对15种药物存在不同程度的耐药性。对多西环素、诺氟沙星、洛美沙星高度耐药,耐药率分别为100%、94.12%、94.12%,对头孢曲松钠、阿米卡星敏感性较高,敏感率分别为52.94%、41.18%。研究结果显示肠致病性大肠杆菌在动物感染的大肠杆菌病例中占有一定的比例,同时分离菌株的耐药性较为严重,给治疗增添了难度,因此应重视对肠致病性大肠杆菌的监测,根据药敏结果选用合适的药物进行治疗。     

鸡源致病性大肠杆菌血清型鉴定及耐药性分析

为了了解山东、河北和河南等省部分地区养殖场鸡源致病性大肠杆菌的血清型及耐药性,试验采用细菌分离和生化鉴定方法对鸡大肠杆菌进行分离和鉴定,通过动物试验确定分离大肠杆菌的致病性,应用血清学方法和药敏试验对致病性大肠杆菌的血清型及耐药性进行研究。结果表明:分离鉴定的119株大肠杆菌中致病性菌株有110株,其中92株致病性菌株能够定型,分别属于15个血清型,有5株出现交叉凝集,O14、O35、O1、O2、O78、O88为优势血清型;分离鉴定的致病性大肠杆菌对环丙沙星、头孢噻肟、头孢哌酮等最敏感,对林可霉素、头孢克肟、卡那霉素、庆大霉素、红霉素的耐药率达60%以上。说明分离的致病性大肠杆菌血清型存在复杂性,对大部分临床常用药物产生了不同程度的耐药。