奶牛活体采卵及体外生产胚胎技术研究

采用盲吸法对17头空怀奶牛和25头青年奶牛进行活体采卵,采集卵母细胞199枚,平均每头采得卵母细胞4.74枚,其中,可用卵母细胞139枚,平均每头获可用卵母细胞3.3枚,经体外系统培养,获受精卵101枚,发育至桑葚胚和囊胚期阶段35枚,受精率和胚胎发育率分别为72.66%和25.17%.选择11枚胚胎移植黄牛受体11头,妊娠4头,妊娠率为36.36%,正常产犊4头.     

奶牛活体采卵与屠宰场卵巢卵子体外生产胚胎的效果比较

先利用屠宰场卵巢获得的卵母细胞进行体外培养试验.在建立了培养体系获得较稳定的囊胚率的基础上,再利用具有优良乳用遗传性状的老龄奶牛进行活体采卵(OPU),获得的卵子进行体外胚胎生产,对奶牛活体采卵与屠宰场卵巢卵子体外生产胚胎的效果进行了比较.同时对奶牛重复OPU的效果及OPU卵子的培养天数对妊娠率的影响因素等进行探讨,试图为研究和生产建立一个高效的活体采卵体外胚胎生产方法.结果表明:(1)活体采卵获得的卵母细胞从形态以及后期的发育情况均明显差于屠宰场卵巢获得的卵子;OPU法的卵裂率、囊胚率(70.5%、18.3%)明显低于从屠宰场卵巢获得的卵子的卵裂率、囊胚率(75.1%、34.8%)(P＜0.01).(2)不同个体采集卵子数量差异明显(5.92枚/头与1.4枚/头)(P＜0.05).(3)同一头奶牛每次采卵数之间无显著差异,但有波动性变化.(4)奶牛OPU卵子经培养在第6 d或第7 d发育至囊胚的胚胎移植妊娠率高于第8 d发育至囊胚的胚胎.     

如何把好奶牛体内胚胎生产中的质量关

胚胎生产中的质量问题是直接关系到胚胎移植成功率及胚胎正常发育的关键因素。要把好胚胎生产中的质量关,就必须严格做好以下几方面:1室外1.1供体奶牛供体奶牛的选择:选择血统、体形、产奶性能优良,没有遗传缺陷,无传染病、难产和繁殖障碍等病史,性情温顺、体质健壮,最好3～8岁的经产奶牛。供体奶牛的饲养管理:饲料的营养均衡,要搭配青绿多汁饲料,不得任意更换饲料、饲草,在饲料中可添加硒和维生素E,以提高母牛受胎率。供体牛的超数排卵:①超排药品:FSH(促卵泡素)和PG(氯前列烯醇)。②牛体状态与超排效果有关:超排前具有A级黄体的2、3、4…     

荷斯坦奶牛与和牛活体采卵-体外受精（OPU/IVF）体系的建立及应用

[目的]研究牛活体采卵-体外受精（ovum pick-up and in vitro fertilization,OPU/IVF）体系,建立高效的牛体外胚胎生产系统。[方法]以从屠宰场采集的健康牛新鲜卵巢为试验材料,进行卵母细胞体外成熟、体外受精、体外胚胎培养相关条件的摸索,重点考查体外胚胎培养液中添加瘦素（leptin）对囊胚率的影响。选取13～15月龄健康荷斯坦奶牛及和牛各10头作为供体,进行活体采卵、卵母细胞体外成熟、体外胚胎生产,记录可用卵数及可用囊胚数,统计卵裂率、囊胚率;2个品种牛的体外冷冻胚胎解冻后,以荷斯坦奶牛为受体进行胚胎移植,移植后45 d统计妊娠率。[结果]添加30 U/mL的leptin可以显著（P<0.05）提高屠宰场来源牛体外胚胎的囊胚率。随机选择供体牛活体采卵,平均每头荷斯坦奶牛获得可用卵7.5枚,平均每头和牛获得可用卵8.1枚;荷斯坦奶牛及和牛的卵裂率分别为84.00%、82.71%,二者差异不显著（P>0.05）。体外培养条件下,平均每头荷斯坦奶牛获得可用囊胚4.3枚,平均每头和牛获得可用囊胚3.7枚;荷斯坦奶牛的囊胚率（57.33%）显著...     

牛胚胎工厂化生产的质量控制措施

牛的胚胎工厂化生产是通过对牛施行活体采卵,获取卵母细胞,在实验室内对卵母细胞进行体外成熟、体外受精,使受精卵在体外发育培养至囊胚阶段。对胚胎的质量检查,目前只能凭其形态进行评估分级,而对胚胎的内在质量却不易判断,在胚胎出厂前无法严把质量关,因此,在胚胎生产过程中实行严格的全程质量控制显得尤为重要。1建立严格的技术管理体系1.1制定严格的规章制度和操作规程严格的技术管理是质量控制分析的基础,必须制定切实可行的供体牛饲养管理制度、卫生防疫制度、实验室规章制度、各类人员岗位责任制度、技术档案资料管理制度及胚胎工厂…     

奶牛胚胎体外保存时间和温度对移植受胎率的影响

试验对胚胎在体外保存时间的长短及温度与移植妊娠率的关系进行统计分析，胚胎收集后分别在0-3h,3-6h和6h后冷冻，解冻后移植受胎率分别为46.07%,43.33%,30.56%,0-3h和3-6h冷冻的胚胎，移植受胎率没有明显差异（P〉0。05），6h后的冻胚与6h以前的冻胚移植受胎率差异显著（P〈0．05）。胚胎分别在室温和37℃保存5h后冷冻，解冻后移植受胎率分别为39．74％、42．24％（P〉0．05）。     

牛活体采卵技术及其在胚胎体外生产中的应用

自第1头体外生产胚胎(IVP)牛诞生和非手术活体采卵(OPU)技术在牛上应用以来,为了改进IVP和OPU技术,许多研究者致力于提高牛IVP和OPU技术的效率.时至今日,OPU和IVP技术均已成为成熟的技术.阐述了过去十几年中OPU和IVP技术的主要研究成果和研究进展,并总结了该技术的应用历史、应用现状和应用前景.     

奶牛胚胎性别鉴定技术进展

性别控制问题是很早就被人们重视和研究的一个重大理论和实践课题.这一方面是由于性别是个非常复杂的重要发育性状.这种复杂性不仅表现在性别分化的多个层次和深度上,而且在性别的形态表现、机能变异方面也非常广泛.因此对性别的决定机理、系统发生以及机能研究都具有重要的理论意义.它也是现代生物科学的重要研究领域;另一方面,对生物性别的控制是多年来人们梦寐以求的愿望.因为通过性别控制可以使某些受性别限制的性状(如母牛泌乳、公鹿生茸)和受性别影响的生产性状(如产肉、产毛)在更多的理想性别中获得更大的经济效益,增加育种中的选择强度而获得最大限度的遗传进展和排除畜禽群体中的有害基因等.     

奶牛胚胎性别鉴别技术在生产中应用的几个要点

奶牛的胚胎性别鉴别技术在其繁殖生产中占有重要地位。通过移植已知性别的胚胎，控制后代的性别比例，将给奶牛业带来巨大的经济效益。随着现代分子生物学的发展和聚合酶链式反应(PCR)技术的出现，应用PCR法鉴别奶牛胚胎性别已成为现有性别鉴别方法中最为有效，并且可进一步实现商品化生产性别鉴别胚胎的一项技术。近几年，胚胎移植技术已经得到了广泛的普及和推广，但实践中真正将胚胎性别鉴别技术应用于奶牛繁殖生产还有某些问题值得注意，主要有以下几点：     

进口奶牛冷冻胚胎移植试验效果的研究

利用澳大利亚引进的优质高产荷斯坦奶牛胚胎,在淮北市华润牛业有限公司分别以农户散养的西门塔尔牛和当地牛黄牛的杂交牛(简称西杂牛,以下同)和牛场饲养的西杂牛为受体进行了冷冻胚胎的移植试验。分别对农户散养的106头、公司牛场饲养的137头西杂受体牛进行了同期发情处理,同期发情率分别为80.2%和92%(P<0.05),平均同期发情率达86.8%。通过直肠检查黄体合格率(受体利用率)分别为75.4%和91.2%(P<0.01),平均受体利用率为84.4%。对205头合格受体牛进行了进口冷冻胚胎移植,经过良好的饲养管理,共产下108头犊牛,平均产犊率达52.7%,其中农户散养和牛场饲养的移植产犊率分别为42.5%和59.2%(P<0.05)。     

影响奶牛早期胚胎丢失的因素

早期胚胎丢失,即胚胎着床之前的胚胎死亡,是影响奶牛妊娠率的主要因素。奶牛妊娠早期的胚胎死亡率较高,给牧场造成了严重的经济损失。目前,对于早期胚胎丢失的研究主要集中在染色体异常、生殖激素紊乱、热应激、免疫因素、双胎妊娠、疾病、B族维生素缺乏等方面。本文综述了早期胚胎丢失发生的原因,为预防早期胚胎丢失提供依据。     

微生态制剂对奶牛增奶的实验研究

为了研究微生态制剂对奶牛的增奶效果。选择胎次、泌乳量相似的黑白花奶牛，在饲料配方、饲养管理、坏境条件相同的情况下，试验组添加50g微生态制剂，对照组不添加，统计各自产奶量和比重。结果试验组试验后比本组预试期产奶量增加10．31％，奶比重增加0.029％；试验后试验组比同期对照组产奶量增加7.26％，奶比重增加0．048％。说明微生态制剂能提高奶牛)的产奶量和比重。     

奶牛酮病对奶牛生产性能的影响

为了研究奶牛酮病对奶牛生产性能的影响,选取规模奶牛场和散养户共450头奶牛进行跟踪调查,结果表明,规模奶牛场发病率为14.69%,而散养户发病率高达36.92%,其中规模奶牛场的瘫痪型、神经型及消化型酮病分别比散养户低7.16%(P0.05)、6.1%(P0.05)和8.96%(P0.05);秋季发病率比冬季、夏季和春季分别高3.34%(P0.05)、10.89%(P0.05)、13.78%(P0.05);受胎率健康组比酮病组高出50%,差异极显著(P0.01);4胎以上发病率高达47.22%,分别比1胎~4胎高出42.16%(P0.01)、32.13%(P0.01)、29.86%(P0.01)、10.75%(P0.05);泌乳量在31kg以上的奶牛其发病率高达47.76%,分别比泌乳量在21kg~30kg、11kg~20kg、10kg以下的发病率高12.31%(P0.05)、19.86%(P0.01)、25.36%(P0.01),患病前,奶牛的平均日产奶量为17.32kg,而发病后泌乳量降低至7.89kg,差异极显著(P0.01);患病后,其乳成分也发生较大变化,其乳蛋白率、乳脂率、乳糖率及乳干物质分别比患病前降低了1.07%、0.56%、0.73%及3.47%,差异显著(P0.05)。奶牛酮病发病具有一定规律性,可导致奶牛情期延迟、受胎率下降、淘汰率增大、泌乳性能下降及乳质变差。     

云南亚热带地区奶牛胚胎移植初探

德宏傣族景颇族自治州地处我国西南边陲,云南西部,位于东经97°31′～90°43′,北纬23°50′～25°20′之间,其南、西、西北与缅甸联邦接壤。气候为南亚热带季风气候,其特点是:干湿分明,雨量充沛,年降雨量1400～1700mm,其中5～10月份降雨量占全年降雨量的86%～92%;冬无严寒,年均气温18.4～20℃,最高气温38.8℃,最低气温-2.1℃;日照充足,年日照2281～2453h;无霜期长(约280d),霜日少;干旱指数在0.4～1.2之间。2004年,全州水牛和黄牛存栏16.57万头(能繁母牛5.53万头),其中,水牛存栏9.34万头(能繁母牛3.28万头),黄牛存栏7.23万头(能繁母牛2.25万…     

奶牛三大评分体系在实际生产中的应用

奶牛的体况、粪便和行走评分三大指标是判断奶牛健康与否及衡量奶牛饲养管理水平高低不可或缺的指标,在实际生产中受到广泛重视。鉴于此,在前人研究的基础上,作者对三大评分体系在奶牛饲养管理中的应用进行了综述。     

微生态制剂在奶牛生产中的应用

微生态制剂作为一种新兴的饲料添加剂，近10年来发展很快，已经表现出巨大的作用。它是利用有效微生物群之间的互惠互利或互利共生现象，在畜禽体内（肠道）形成有益的微生物群落，抑制病菌生长，提高畜禽对疾病的抵抗力，促进生长，达到提高畜禽产品质量的目的。下面就其在奶牛上的应用情况作一简要介绍。     

PCR扩增妊娠奶牛牙釉蛋白基因进行胚胎性别鉴定的研究

牙釉蛋白（amelogenin,简写为AML）基因是牙齿发育过程中丰富表达的多拷贝基因,AML基因的同源基因分别定位在XY染色体上。本试验利用x—Y同源的牙釉蛋白基因序列设计一对特异性引物（牛AML基因序列的扩增片段长度：雌性为只有467bp的特异性扩增片段：雄性为同时具有341bp和467bp的两条特异性扩增片段）,应用PCR技术同时扩增X和Y染色体上的特异性片段,扩增产物用PAGE电泳分离技术,经硝酸银溶液染色及扫描分析进行妊娠奶牛早期胚胎的性别鉴定。结果显示,从X染色体上扩增出467bp的片段．从Y染色体上扩增出341bp的特异性片段。由此可知,PCR扩增妊娠奶牛牙釉蛋白基因可以进行胚胎的性别鉴定。     

油脂对奶牛生产性能的影响

选择24头一胎中国荷斯坦奶牛，采用随机区组法分为A、B、C三组：A组为豆油组，用3％豆油（或每日用270g）代替等量玉米，B组为对照组，C组为氢化豆油组，用3％的氢化豆油（同第一组）代替等量玉米，研究油脂对奶牛生产性能的影响。经过64d试验期，结果表明：豆油组可提高FCM0．16％，氢化豆油组提高4．68％，但差异都不显著fP〉0．051，添加油脂可极显著地提高乳脂率和乳干物质率（P〈0．01），乳蛋白率和乳糖率差异均不显著（P〉0．05）。添加油脂对DMI无影响（P〉0．051，氢化豆油组具有缓解体重下降的趋势，而豆油组加剧了体重的下降。添加油脂可极显著提高试验中期胰岛素浓度（P〈0．01），试验末期胰岛素浓度低于对照组，但差异不显著（P〉0．05）；试验中期的GH和PRL浓度都低于对照组，试验末期的高于对照组，但差异均不显著（P〉0．05）。     

奶牛热应激

本文综述了热应激对奶牛采食量、生理生化指标、生产性能、繁殖性能及机体免疫机能的影响,并提出了加强环境控制、饲养管理、营养调控等抗热应激措施。