日粮同时添加酵母培养物与延胡索酸二钠与对慢性酸中毒奶山羊瘤胃发酵和细菌数量的影响

本试验利用酵母培养物(yeast culturc,YC)和延胡索酸二钠(disodium fumarate)的优化组合,研究该组合添加剂在慢性瘤胃酸中毒(subacute rumen acidosis,SARA)状态下对瘤胃发酵功能及瘤胃微生物数量的影响.选取6只泌乳期并安装永久性瘤胃瘘管的奶山羊,随机分为试验组和对照组,每组各3只,通过逐渐添加精料的方式诱导动物发生SARA.试验动物处于SARA后,试验组添加组合添加剂,测定瘤胃发酵指标.采用16S rRNA寡核苷酸探针杂交定量分析法和传统滚管法测定瘤胃内细菌的含量.结果表明,投喂组合添加剂后,瘤胃pH、乙酸、丁酸和总挥发性脂肪酸(total volatile fatty acids,TVFA)浓度显著升高(P<0.05),丙酸和乙酸/丙酸没有显著变化(P>0.05),NH..N浓度显著降低(P<0.05).淀粉分解菌、反刍兽新月单胞菌、埃氏巨型球菌及3种主要纤维分解菌的数量显著增高(P<0.05),乳酸杆菌、牛链球菌的数量显著降低(P<0.05).以上结果说明YC和延胡索酸二钠的组合使用能够改善SARA状态下瘤胃内环境,对减少SARA的发生具有较好的效果.     

体外法研究延胡索酸二钠对瘤胃微生物发酵活力及甲烷产量的影响

为探讨延胡索酸二钠对瘤胃甲烷产量及瘤胃微生物发酵活力的影响,本研究共设计了3个试验来阐明该问题。试验1采用体外批次培养,研究了不同日粮条件下(高牧草日粮、中等水平牧草的日粮和低牧草日粮)添加延胡索酸二钠(0,4和7mmol/L)对山羊瘤胃微生物发酵及甲烷产量的影响。结果表明,较对照相比,添加延胡索酸二钠显著提高了累积产气量、pH值和TVFA产量(P<0.05),降低了甲烷产量(P<0.05),其中高牧草日粮组下降幅度最大。试验2探讨了延胡索酸二钠对黄化瘤胃球菌发酵粗饲料活力的影响。结果表明,与对照组相比;添加延胡索酸二钠显著提高了黄化瘤胃球菌数量及其对黑麦草的降解率(P<0.05);试验3探讨了延胡索酸二钠对瘤胃真菌发酵粗饲料活力的影响,结果显示,延胡索酸二钠显著降低了厌氧真菌发酵的总产气量、干物质消失率及羧甲基纤维素酶酶活(P<0.05)。结果说明,延胡索酸二钠在降低甲烷产量方面与发酵底物的天然特性有关,其中对高牧草日粮的作用效应最为显著;延胡索酸二钠可提高瘤胃混合微生物与瘤胃纤维降解菌发酵粗饲料的能力,但对瘤胃真菌的发酵活力具有抑制效应。     

高精料日粮条件下酵母培养物对瘤胃细菌体外发酵的影响

本试验研究添加不同活性和不同浓度的酵母培养物在高精料日粮的发酵体系中对混合瘤胃细菌发酵的影响.采用二因子设计,进行体外厌氧发酵,发酵结束采集样品,测定乳酸、挥发性脂肪酸及酶活浓度.结果表明,发酵24 h后各处理pH均随着酵母培养物添加量的增加而升高.活性组各处理乳酸浓度均显著低于灭活组(P<0.05),灭活组与活性组中各处理之间淀粉酶酶活均差异显著(P<0.05),且各处理均随着酵母培养物添加量的增加而逐渐降低.活性组中各处理乙丙比均显著低于灭活组,而TVFA浓度均显著高于灭活组(P<0.05),发酵系统中NH3-N浓度均随着酵母培养物添加量的增加而逐渐降低.结果提示,在高精料日粮条件下添加酵母培养物可改善瘤胃环境,改变瘤胃发酵类型.     

海带粉对饲喂高精料饲粮奶牛瘤胃发酵参数和菌群结构的影响

本试验旨在探究海带粉作为饲料原料对饲喂高精料饲粮奶牛瘤胃发酵参数及菌群结构的影响。试验选用体重为(605±36)kg的健康泌乳中后期荷斯坦奶牛15头,随机分为3组,每组5头。采用随机试验设计,3组奶牛分别饲喂45%低精料饲粮、55%高精料饲粮和55%高精料+5%海带粉饲粮。试验期为35d,于试验末对晨饲前奶牛经口腔采集瘤胃液,测定其pH,氨态氮、微生物蛋白、挥发性脂肪酸浓度和菌群结构。结果显示:1)相比55%高精料饲粮,在55%高精料饲粮中添加5%海带粉后,瘤胃中pH显著升高(P<0.05),氨态氮和微生物蛋白的浓度显著降低(P<0.05),总挥发性脂肪酸的浓度以及挥发性脂肪酸中丁酸、异丁酸和异戊酸的比例显著增加(P<0.05)。2)在55%高精料饲粮中添加5%海带粉降低了样本独有的操作分类单元(OUT)数量,但对瘤胃细菌α多样性的影响不显著(P>0.05)。在门水平上,与44%低精料饲粮相比,55%高精料饲粮显著增加了瘤胃中放线菌门的相对丰度(P<0.05),显著降低了瘤胃中SR1_Absconditabacteria的相对丰度(P<0.05);而在55%高精料饲粮中添加5%海带粉后,瘤胃中拟杆菌门的相对丰度显著降低(P<0.05),瘤胃中厚壁菌门的相对丰度显著增加(P<0.05),同时进一步显著增加了瘤胃中放线菌门的相对丰度(P<0.05)。在属水平上,相对于45%低精料饲粮,55%高精料饲粮显著增加了瘤胃中瘤胃球菌属2(Ruminococcus_2)和毛螺菌科NK3A20类群(Lachnospiraceae_NK3A20_group)的相对丰度(P<0.05),显著降低了瘤胃中普雷沃氏菌属1(Prevotella_1)和普雷沃氏菌科UCG-003(Prevotellaceae_UCG-003)的相对丰度(P<0.05);在55%高精料饲粮中添加5%海带粉后,进一步显著降低了瘤胃中Prevotella_1的相对丰度(P<0.05),并显著增加了瘤胃中Ruminococcus_2的相对丰度(P<0.05)。综上可见,在55%高精料饲粮中添加5%的海带粉可以改善饲喂高精料饲粮奶牛的瘤胃发酵环境,调整瘤胃菌群结构,对瘤胃细菌多样性的影响较小。     

添加延胡索酸二钠对水牛瘤胃体外发酵、脂肪酸组成及关键微生物数量的影响

试验旨在研究不同浓度延胡索酸二钠对水牛瘤胃体外发酵参数、脂肪酸组成及关键微生物数量的影响。选取3头体重约为(650±50)kg、安装永久性瘤胃瘘管的水牛作为瘤胃液的供体动物,通过体外批次培养,试验设4个组(每组5个重复),每组各添加0.25 mg/mL的α-亚麻酸,延胡索酸二钠分别添加0(对照)、1、2、3 mg/mL。分别在培养3、6、9、12、24 h时,测定产气量和甲烷产量,在培养24 h后测定瘤胃体外发酵参数、脂肪酸含量及瘤胃微生物数量。结果表明:1)添加延胡索酸二钠显著提高丙酸浓度(P0.05),降低乙酸/丙酸(P0.05),添加2 mg/mL和3 mg/mL延胡索酸二钠,能显著升高瘤胃培养液的pH值和总挥发性脂肪酸(TVFA)含量(P0.05)。2)添加1 mg/mL延胡索酸二钠C18:2n6c、c9, t11-CLA和C20:1含量显著高于对照组(P0.05);添加1 mg/mL和2 mg/mL延胡索酸二钠,C22:2n6含量显著高于其他组(P0.05);添加延胡索酸二钠组,C18:3n6含量显著高于对照组(P0.05)。3)添加2 mg/mL延胡索酸二钠,瘤胃液的真菌、溶纤维丁酸弧菌、非典型丁酸弧菌和蛋白分解丁酸弧菌数量显著升高(P0.05);添加3 mg/mL延胡索酸二钠,瘤胃液的亨氏丁酸弧菌数量显著升高(P0.05);添加2mg/mL和3 mg/mL延胡索酸二钠,瘤胃液的原虫和产甲烷菌数量显著升高(P0.05)。由以上结果可见,体外条件下添加2 mg/mL和3 mg/mL延胡索酸二钠,能提高大多数瘤胃微生物数量,优化脂肪酸组成,提高瘤胃发酵性能,但对甲烷产量没有显著影响。     

高精料条件下酵母培养物与延胡索酸二钠组合对瘤胃微生物体外发酵的影响

试验将不同剂量(0.05、0.07和0.09 g)酵母培养物(YC)和不同剂量(0.006、0.010和0.014 g)延胡索酸二钠(disodium fumarate)按3×3试验设计分为9种组合,研究高精料(精粗比为8∶2)下,二者组合对奶山羊瘤胃微生物体外发酵的影响.通过对9种组合体外发酵指标的综合效应评定,确定优化组合剂量,并采用体外培养装置进行体外批次试验.结果表明,与对照组相比,9种组合的pH值和累计产气量均显著升高(P＜0.05),NH3-N浓度均显著低于对照组(P＜0.05).9种组合显著提高了体外培养体系总挥发性脂肪酸(TVFA)和丙酸浓度(P＜0.05),但乙酸/丙酸及乙酸浓度显著降低(P＜0.05).结果显示,当YC和延胡索酸二钠的添加量分别为0.090g和0.006g时,体外发酵效果最佳.     

延胡索酸二钠对瘤胃微生物体外发酵不同饲料成分的影响

以黑麦草、高羊茅、稻草、花生壳等粗料成分以及玉米、小麦、可溶性淀粉等精料成分为发酵底物研究了延胡索酸二钠对瘤胃微生物体外发酵的影响。结果表明,延胡索酸二钠显著提高了各种底物的发酵产气量(P<0.01),黑麦草粉、高羊茅草粉、稻草粉和花生壳粉的底物消失率分别比对照组提高了26.22%(P<0.05),14.16%(P<0.05),28.54%(P<0.01)和45.09%(P<0.05);延胡索酸二钠显著提高了小麦、玉米和可溶性淀粉的pH值(P<0.05),但对粗料无明显影响(P>0.05);小麦、玉米和可溶性淀粉处理组的乳酸浓度均低于对照组;各种底物的处理组的NH3-N浓度与对照组无明显差异(P>0.05);各种底物中,小麦的总挥发性脂肪酸(total volatile fatty acid)浓度最高,小麦处理组的乙酸浓度、丙酸浓度、丙酸比例均高于对照组(P<0.05);而乙酸丙酸比降低了0.18(P<0.01),延胡索酸二钠提高了所有底物的丙酸浓度及其比例。综合各指标的发酵情况,延胡索酸二钠对各种底物均有一定的效果,是一种潜在的反刍动物饲料添加剂。     

高精料日粮对奶牛瘤胃发酵和生物胺生成的影响

为研究饲喂高精料日粮条件下奶牛瘤胃发酵情况,选取4头初产的健康荷斯坦牛进行试验。试验结果显示,饲喂高精料日粮显著提高了奶牛瘤胃液中乳酸、总VFA、丁酸、戊酸和总支链VFA的含量,同时乙丙比显著降低,但未能显著降低乙酸和NH_3-N水平;同时,与饲喂低精料日粮相比,饲喂高精料的奶牛瘤胃液中的生物胺含量显著增加(P0.05)。相关性分析结果表明,瘤胃液p H与瘤胃液中生物胺含量呈显著负相关(P0.05)。高精料日粮显著提高了瘤胃液中的乳酸杆菌数量(P0.05),但对牛链球菌数量无显著影响(P0.05)。结果表明,饲喂高精料改变了奶牛瘤胃的微生物菌群,进而影响了瘤胃的发酵参数,并促进消化道内异常代谢产物——生物胺的生成与转移,进而影响奶牛的健康。     

硝酸钠和延胡索酸二钠混合物对水牛瘤胃甲烷含量、体外发酵参数、脂肪酸组成和瘤胃微生物数量的影响

本试验旨在研究体外条件下不同比例硝酸钠和延胡索酸二钠混合物对水牛瘤胃甲烷产量、体外发酵参数、脂肪酸组成及瘤胃微生物数量的影响。选取3头体重约为（650±50） kg安装永久性瘤胃瘘管的母水牛作为瘤胃液的供体动物。试验共设4个组，每组5个重复，硝酸钠和延胡索酸二钠的添加比例分别为2：1、1：1、1：2，对照组不添加任何两者混合物。每组均添加0.25 mg·mL^-1的α-亚麻酸，试验组硝酸钠和延胡索酸二钠混合物浓度为1 mg·mL^-1。结果表明：1）添加不同比例硝酸钠和延胡索酸二钠混合物均可显著降低甲烷含量（P<0.05），平均降幅为90.63%；2）高剂量硝酸钠与低剂量延胡索酸二钠（2：1）混合添加时会导致总挥发性脂肪酸（TVFA）含量和大部分瘤胃微生物的数量显著降低（P<0.05），乙酸含量、乙酸/丙酸、花生戊烯酸（EPA）含量、共轭亚油酸（CLA）含量和不饱和脂肪酸/饱和脂肪酸（UFA/SFA）显著升高（P<0.05）；3）低剂量硝酸钠与高剂量延胡索酸二钠（1：2）混合时对TVFA含量、脂肪酸含量和瘤胃微生物数量无显著影响（P>0.05）；4）添加硝酸钠延胡索酸二钠同剂量（1：1）能显著升高EPA、CLA含量和UFA/SFA（P<0.05），但显著降低了水牛瘤胃溶纤维丁酸弧菌和非典型丁酸弧菌数量。由此可见，添加不同比例硝酸钠和延胡索酸二钠混合物均可降低甲烷产量，随着延胡索酸二钠添加比例的增加可以缓解硝酸钠对瘤胃发酵的不利影响。     

核桃青皮提取物对亚急性瘤胃酸中毒绵羊瘤胃发酵的影响

本试验旨在研究在以高精料饲粮诱导亚急性瘤胃酸中毒（SARA）条件下,核桃青皮提取物对绵羊瘤胃发酵及乳酸代谢相关酶活性的影响。选用4只健康、平均体重为（43.3±1.5） kg且安装有永久性瘤胃瘘管的小尾寒羊公羊作为试验动物。采用4×4拉丁方试验设计,以精粗比为65∶35的基础饲粮诱导SARA模型后,在基础饲粮中分别添加0（对照）、0.125%、0.250%和0.500%的核桃青皮提取物进行饲养试验。4期试验均包含预试期9 d,采样期8 d。结果显示：与对照组相比,饲粮中添加0.125%、0.250%或0.500%核桃青皮提取物对各营养物质表观消化率无显著影响（P>0.05）,但显著提高了瘤胃液pH(P<0.05),显著降低了瘤胃液总挥发性脂肪酸、乙酸、丁酸、乳酸浓度与己糖激酶、乳酸脱氢酶活性（P<0.05）;饲粮中添加0.125%或0.250%核桃青皮提取物显著降低了瘤胃液中氨态氮浓度（P <0.05）;饲粮中添加0.250%或0.500%核桃青皮提取物显著降低了瘤胃液中原虫数量和异丁酸浓度（P<0.05）;饲粮中添加0.125%或0.500%核桃青皮提取...     

茶皂素对奶牛瘤胃发酵及瘤胃微生物区系的影响

本试验旨在研究茶皂素对奶牛瘤胃发酵及瘤胃微生物区系的影响。试验选用12头健康状况良好,体重相近的荷斯坦奶牛,随机分为4组,均饲喂基础饲粮,各组分别灌服0(对照)、20、30、40 g/d茶皂素,茶皂素与水混匀灌服,进行预试期14 d,正试期35 d的饲养试验。正试期期间每隔7 d,在晨饲前1 h用口腔采样器采集瘤胃液测定瘤胃发酵指标,用实时定量PCR(qRT-PCR)法测定瘤胃微生物含量。结果表明:1)与对照组相比,茶皂素显著降低了瘤胃液p H(30、40 g/d组)、氨态氮的浓度(20、30、40 g/d组)(P0.05),但均未超过正常范围值;茶皂素显著提高了微生物蛋白(30、40 g/d组)、丙酸(20、30、40 g/d组)和丁酸浓度(20、30、40 g/d组)(P0.05),30 g/d组的微生物蛋白浓度提高了20.20%;但茶皂素对总挥发性脂肪酸和乙酸浓度的影响不显著(P0.05)。2)与对照组相比,茶皂素各组的瘤胃液原虫、溶纤维丁酸弧菌含量均显著降低(P0.05),甲烷菌、白色瘤胃球菌、产琥珀酸丝状杆菌、黄色瘤胃球菌、真菌含量没有显著变化(P0.05)。综上所述,补饲茶皂素改善了奶牛瘤胃发酵模式,并显著影响了奶牛瘤胃微生物区系,30 g/d的剂量对奶牛较为适宜。     

过瘤胃脂肪对体外瘤胃发酵的影响

本试验采用3×4两因素设计,在饲粮中分别设置低、中、高三个蛋白质水平和0、3%、6%和9%的过瘤胃脂肪含量,共形成12组饲粮。蛋白质水平/过瘤胃脂肪分别为:低/0(1组)、低/3%(2组)、低/6%(3组)、低/9%(4组)、中/0(5组)、中/3%(6组)、中/6%(7组)、中/9%(8组)、高/0(9组)、高/3%(10组)、高/6%(11组)、高/9%(12组)。通过双外流连续培养系统,模拟人工瘤胃,对12组饲粮进行消化降解,测定过瘤胃脂肪对体外瘤胃发酵的影响。试验结果如下:不同蛋白质和过瘤胃脂肪水平对瘤胃pH无影响;第12组的瘤胃氨态氮浓度极显著高于1、2、3、4和9组(P<0.01),显著高于5、6、7和10组(P<0.05),8和11组显著高于1、2、3、4和9组(P<0.05);11组的乙酸浓度极显著高于1、6、7、8和9组(P<0.01),显著高于2和5组(P<0.05),3、4、10和12组显著高于1、6、7、8和9组(P<0.05);12组的丙酸浓度极显著高于6组(P<0.01),显著高于5和7组(P<0.05);2、3、10、11和12组总酸浓度极显著高于6和7组(P<0.01),显著高于5和9组(P<0.05),1、4、8组总酸浓度显著高于6和7组(P<0.05);11组乙酸/丙酸值极显著高于1、2、8和12组(P<0.01),显著高于4、6、7和9组(P<0.05),3、5和10组乙酸/丙酸值显著高于1、2、8和12组(P<0.05)。由上述结果得出,过瘤胃脂肪最佳添加量为中蛋白质水平下的6%。     

瘤胃微生态系统

瘤胃不同的微生物群体和宿主之间的共生关系形成了复杂的生态系统，有助于纤维性饲料转化为挥发性脂肪酸（VFA）,为反刍动物提供能量来源。作者主要强调了利用分子生物学技术鉴定和描述瘤胃微生物的必要性。     

瘤胃持续模拟装置测定低质粗饲料发酵规律的研究

用瘤胃模拟技术研究不同喂料方式及不同粗饲料对发酵罐内ｐＨ值，氨氮（ＮＨ３－Ｎ）浓度，总氮（ＴＮ）浓度及挥发性脂肪酸（ＶＦＡ）的影响。选用２５ｇ喂料量，分别以稻草，羊草和麦秸为被测日粮，比较５２μｍ尼龙袋法，散放法和２５０μｍ尼龙袋法３种喂料方式对发酵罐内粗饲料发酵规律的影响。结果ｐＨ值散放法最高，２４小时为７．２８～７．５０，２５０μｍ尼龙袋法最低，为７．０５～７．１５。２４小时ＶＦＡ浓度是散放法最低，分别为稻草组２８．０９ｍｍｏｌ／Ｌ，羊草组３０．０４ｍｍｏｌ／Ｌ，麦秸组２７．０１ｍｍｏｌ／Ｌ，２５０μｍ尼龙袋法最高，分别为稻草组３１．０６ｍｍｏｌ／Ｌ，羊草组３２．２７ｍｍｏｌ／Ｌ，麦秸组３０．００ｍｍｏｌ／Ｌ。结果表明３种喂料方式中２５０μｍ尼龙袋法效果最佳，３种低质粗饲料中羊草营养价值最高。