新型油佐剂A5与进口206油佐剂配制双相疫苗比较试验

佐剂能增强抗原的免疫原性, 提高抗原的特异性免疫效果. 早在1925年, 在免疫制剂中已开始使用佐剂. 随着生物技术的发展, 疫苗的更新换代, 佐剂已成为提高疫苗质量的重要部分,受到科技工作者的重视,并得到不断发展和提高.我们经数年与中牧股份公司兰州生物制药厂合作,共同开发研制出了双相佐剂-A5,经兰州生物制药厂质量检测实验室检测,各项检测指标合格,免疫效果良好.为了降低生产成本,提高疫苗质量,笔者等对新型油佐剂A5与进口206油佐剂配制的双相疫苗进行了比较试验,现介绍如下.     

新型疫苗佐剂研究进展

佐剂是增强和调节疫苗抗原免疫反应的免疫刺激物,与抗原一起使用能产生更强的免疫反应。佐剂能激活机体的天然免疫系统,当佐剂和抗原同时或预先注射到机体内,可改变抗原的形态并延长抗原在体内的滞留时间,促进单核吞噬细胞对抗原的递呈能力及刺激淋巴细胞增殖分化,从而增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫应答类型。佐剂的发展史长达一百多年,目前使用最广泛的疫苗佐剂是铝佐剂,传统的灭活疫苗在很大程度上依靠以铝盐为主的复合物作为主要佐剂。但近年来,随着基因工程技术和生物技术的飞速发展,重组疫苗、基因工程载体疫苗、核酸疫苗等新型疫苗逐步被开发出来,这些新型疫苗与传统疫苗相比往往存在免疫应答能力差等问题,早期的抗原不纯导致传统的铝盐佐剂已无法满足需要。为解决新型疫苗免疫原性差的问题,科研人员致力于开发广谱且高效的新型疫苗佐剂用来增强新型疫苗的作用。新型疫苗佐剂种类繁多,功能各不相同且机制较为复杂,可分为新型油乳佐剂、脂质体佐剂、CpG寡核苷酸佐剂、细胞因子佐剂、纳米佐剂、多糖佐剂及复合系统类佐剂等。笔者对疫苗佐剂的发展史、作用机制及新型疫苗佐剂的分类进行分析和评述,以期为新型疫苗佐剂的研制及开发提供参考。     

提高注射用白油佐剂免疫效果的研究

为了提高注射用白油佐剂的免疫效果,在前期研究的基础上,参照国外注射用白油MK的馏分烃类组成及含量,制备3批注射用白油(JH),以免疫效果较好的国内注射用白油(JLT8、ZJ)和进口注射用白油(MK、SNB)作参照,进行注射用白油质量检测、馏分烃类组成及含量、碳数分布等分析,制备新城疫灭活疫苗进行免疫效果研究。结果表明:制备的3批注射用白油样品均达到各项标准,综合免疫效果顺序是JH2MKJH1JLT8ZJSNBJH3;运动黏度约5.53、链烷烃含量约54.0%、总环烷烃含量约45.9%、碳数C16~C20为5.51%的白油制备疫苗的免疫效果较好。     

禽流感（H9）灭活疫苗白油佐剂的优选试验

采用同一批病毒原液,不同白油佐剂乳化的疫苗,对7日龄肉鸡分组免疫接种,观察并对比各组鸡群的精神状态、采食量、增重、料肉比、疫苗的吸收情况和抗体变化规律,根据以上数据,综合评价佐剂的性能。结果显示,a疫苗中白油佐剂对鸡群影响较小,增重高于其他各组,疫苗吸收速度快,注射省力,抗体水平优秀,确定为最佳白油佐剂。     

新型动物疫苗佐剂的研究进展

疫苗佐剂是使疫苗免疫原性充分发挥的工具,目前动物疫苗佐剂主要以铝盐佐剂和油乳佐剂为主。近年来基因重组疫苗和亚单位疫苗发展迅猛,而这些新型疫苗与传统疫苗相比免疫原性较弱,这就对佐剂提出了更高的要求。当前针对佐剂的研究层出不穷,部分佐剂如MF59、AS01、AS03等已经在人用疫苗中成功应用,但应用于动物疫苗还有技术难题需要攻破。蜂胶佐剂目前在动物疫苗中应用较广,且已经占有了一定的市场份额。为充分比较现有新型疫苗佐剂的优缺点,为后续疫苗佐剂的研究提供参考,就目前广泛研究的新型动物疫苗佐剂进行综述。     

新型兽用疫苗佐剂的研究进展

综述了细胞因子、脂质体、CpG及单磷酰基脂质A四种新型佐剂的特点及其国内外的研究进展。传统佐剂存在的一些缺点致使其不适合在新型疫苗中使用,因此寻找理想的新型佐剂已经成为兽用疫苗研发的关键问题之一;新型疫苗具有传统疫苗不具备的优点,但其抗原高度纯化、免疫原性较弱的不足也需要有理想的疫苗佐剂与之配合使用以增强其作用。     

新型疫苗佐剂中药多糖的的研究概况

多糖是来自于高等植物、动物细胞膜、微生物细胞壁中的天然大分子物质，是所有生命有机体的重要组成成分，并与维持生命所必需的多种功能有关。文章介绍了新型疫苗佐剂的特点及中药多糖的免疫药理机制，综述了多糖疫细胞的影响和临床运用现状及其存在的问题，并对未来作出展望。     

新型疫苗佐剂中药多糖的研究概况

多糖是来自于高等植物、动物细胞膜、微生物细胞壁中的天然大分子物质,是所有生命有机体的重要组成成分,并与维持生命所必需的多种功能有关.文章介绍了新型疫苗佐剂的特点及中药多糖的免疫药理机制,综述了多糖疫细胞的影响和临床运用现状及其存在的问题,并对未来作出展望.     

普通佐剂与进口佐剂制备新城疫油乳剂灭活疫苗质量差异比较

将同种抗原分别与普通佐剂和进口佐剂制备成新城疫油乳剂灭活疫苗,对其进行质量检测比较,发现进口佐剂疫苗比普通佐剂疫苗免疫效力强,并且更稳定。     

国内、外鸡传染性鼻炎不同佐剂灭活疫苗免疫效力比较试验

为了评价我们应用当地分离株研制的鸡传染性鼻炎(IC)氢氧化铝胶灭活苗的免疫效力,我们从意大利引进了鸡传染性鼻炎氢氧化铝胶灭活苗,从荷兰引进了鸡传染性鼻炎油乳剂灭活苗并进行了免疫保护对比试验。经对注苗鸡的局部反应、抗体检测、攻毒后的临床症状、眶下窦中Hpg分离结果表明,我们研制的IC氢氧化铝胶灭活苗与引进的氢氧化铝胶灭活疫苗的免疫效果基本相同,均优于从荷兰引进的IC油乳剂灭活苗。     

不同来源白油佐剂质量分析及其制备的禽流感疫苗安全性与免疫效力研究

通过抽取3种来源注射用白油LH、MC、HZ,按照<中华人民共和国兽药典>附录"注射用白油质量标准"及企业内控质量标准要求进行成分分析,3种白油在黏度、稠环芳烃含量等指标方面存在差异;将上述来源白油佐剂制备的共计6批禽流感灭活疫苗分别以0.3mL/只及0.6mL/只剂量,经胸部肌肉和颈部皮下注射途径接种SPF鸡,接种后8、13、20、31、41、48 d分别进行疫苗的安全性检查和免疫效力检测.疫苗安全性检验结果表明:疫苗免疫后均导致注射部位出现局部病变和不吸收现象,恢复较快的是黏度为5.7mm2/s的LHl、LH2组及黏度为11.2mm2/s的HZ组.黏度为7.26mm2/s、稠环芳烃含量偏高的MC组吸收稍差;疫苗效力检验结果表明:黏度较低的LH1～LH4组疫苗免疫后抗体产生时间、维持水平均优于MC组、HZ组.     

不同佐剂的奶牛乳房炎多联苗对小鼠免疫机能的影响研究

为了探讨不同佐剂的奶牛乳房炎多联苗对小鼠免疫机能的影响,笔者将小白鼠分为3个组,每组30只,分别为蜂胶苗组、铝胶苗组和空白对照组。用制备的氢氧化铝胶和蜂胶2种乳房炎佐剂多联苗分别免疫小鼠,分别于免疫后的7、14、21、30和45 d采血,进行2种多联苗免疫后E-玫瑰花环率和淋巴细胞转化率测定。结果表明,蜂胶和铝胶2种佐剂苗与空白对照组相比均能显著提高小鼠的细胞免疫水平,2种苗的细胞免疫水平均在免疫后30 d左右达到最高峰(P<0.01),但在免疫后第30和45天时E-玫瑰花环率和淋巴细胞转化率,蜂胶苗组均极显著高于铝胶苗组(P<0.01),说明蜂胶佐剂比铝胶佐剂能更强地增强多联苗抗原对小鼠T细胞的致敏程度。该研究为进一步明确乳房炎多联苗免疫机制及筛选更好的免疫佐剂提供了科学数据。     

3种不同类型佐剂的猪圆环病毒2型亚单位灭活疫苗免疫效果的比较研究

为制备猪圆环病毒2型商品化亚单位疫苗选择良好的佐剂,对由水性佐剂GEL 01、白油佐剂以及氢氧化铝胶佐剂分别制备的3种猪圆环病毒2型亚单位疫苗的免疫效果进行比较研究。本实验选取3～4周龄猪圆环病毒2型抗体阴性猪30头,根据试验疫苗接种情况分为6组,分别为:3种不同佐剂制备的亚单位疫苗(A组、B组和C组)、商品化疫苗(D组)以及空白对照组和攻毒对照组,然后进行临床观察、抗体水平监测和免疫效力评价,观察各组仔猪的不良反应情况、抗体水平以及攻毒保护情况。结果显示:3种不同类型佐剂制备的猪圆环病毒2型亚单位疫苗接种猪后均无任何不良反应、能刺激机体产生良好的ELISA抗体水平和免疫效果,但水性佐剂GEL 01制备的疫苗与另外2种佐剂制备的疫苗相比,综合抗体水平、免疫效果等因素,水性佐剂GEL 01制备的疫苗在临床使用上更具优势,为商品化亚单位疫苗佐剂的选择提供了重要的数据支持。     

用不同鸡新城疫病毒株制备油乳剂苗的研究

应用４种鸡新城疫病毒Ｌａ－Ｓｏｔａ,Ｕｌｓｔｅｒ,Ｂ１和ＰＭＶ－Ⅰ分别作为抗原,制备ＮＤ油苗。每组苗颈部皮下接种非免疫来航鸡,每隔１～２周采血检测ＨＩ抗体一次,直至免疫后第８周。用同源抗原检测ＮＤ苗免疫的ＨＩ抗体滴度普遍高于非同源抗原检测的ＨＩ抗体滴度（Ｌａ－Ｓｏｔａ油苗除外）,不同ＮＤ毒株油苗中,Ｕｌｓｔｅｒ油苗和Ｂ１油苗的ＨＩ抗体水平最高,其次是Ｌａ－Ｓｏｔａ油苗,ＰＭＶ－Ⅰ油苗ＨＩ抗体水平最     

Antibody Responses in Sheep Vaccinated against Staphylococcus aureus Mastitis: A Comparison of Two Experimental Vaccines Containing Different Adjuvants

A double-blind, placebo-controlled study was conducted to compare two vaccines using different adjuvants with regard to their ability to stimulate antibody production against the - and -toxins and the exopolysaccharide of Staphylococcus aureus. The vaccines contained identical antigens, consisting of inactivated whole bacteria of two strains of S. aureus in addition to - and -toxoid. One vaccine contained mineral oil, while the other used a water-soluble acrylic acid polymer resin (Carbopol) as adjuvant. Saline served as the placebo. One hundred and forty ewes were vaccinated twice before lambing, by subcutaneous injection with vaccine or placebo in the region of the supramammary lymph node, and were observed and sampled over a period of 6 months. The vaccine containing mineral oil as adjuvant induced significantly greater immune responses to the - and -toxins than did the vaccine containing Carbopol. The latter vaccine induced higher levels of antibodies to exopolysaccharide. The degree of local adverse reactions did not differ between the two groups. The results indicate differences between the oil-adjuvanted and Carbopol-adjuvanted vaccines with regard to their ability to stimulate antibody production against S. aureus protein antigens in sheep.     

Saponin Adjuvants. IV. Evaluation of The Adjuvant Quil a in the Vaccination of Cattle Against Foot-And-Mouth Disease

The saponin adjuvant Quil A has been investigated in the vaccination of cattle against foot-and-mouth disease. Using a Frenkel type vaccine a dose-response relationship has been established between Quil A and neutralizing antibody titres. Ten ml of vaccine was combined with 0, 50, 200, 800, and 3200 µg of Quil A. The combinations were each injected into 4 animals. The local reaction on the site of injection produced by injection of the vaccine alone and in combination with different doses of Quil A has been estimated. On this basis a therapeutical dose at 1 mg of Quil A has been estimated to combine maximum adjuvant effect with a minimum of adverse reactions. This dose has been tested in the vaccination of cattle with FMD vaccines derived from BHK suspension cell virus of type O and A respectively. The vaccines were tested in 10 ml and 5 ml doses with or without Quil A, and each in 4 animals. It is concluded that Quil A is a valuable adjuvant for use in the induction of neutralizing antibodies against foot-and-mouth disease in cattle.     

中药有效成分对动物疫苗的免疫佐剂效果及相关机理研究进展

佐剂作为疫苗的重要组成部分,其自身的安全性及对疫苗的免疫增强效果受到广泛重视。动物疫苗佐剂种类较多,包括铝佐剂、油乳佐剂和脂质体佐剂等。但由于可应用的佐剂有限,疫苗的需求量增大,因此寻求更加安全有效的疫苗佐剂成为新的研究热潮。中药具有易获取、毒性低和免疫活性强等特点,有潜力成为新型疫苗佐剂。笔者对中药有效成分的佐剂活性、联合疫苗后的免疫调节效果及作用机制进行综述,阐明中药有效成分作为动物疫苗佐剂的可能性及研究进展,为新型佐剂的研制提供理论依据。     

Saponin Adjuvants. Vi. The Adjuvant Activity of Quil a in Trivalent Vaccination of Cattle and Guinea Pigs Against Foot-And-Mouth Disease

The saponin adjuvant Quil A was investigated in trivalent vaccination against foot-and-mouth disease with a concentrated vaccine based on BHK suspension cell virus of the serotypes O, A and G. The activity in cattle was estimated on the basis of seroneutra-lizing antibodies. Five and 10 ml doses with or without 1 mg of Quil A were each injected into 6 animals. Seroneutralizing antibodies were estimated at regular intervals during a period of 29 weeks. The activity in guinea pigs was estimated by experimental challenge. One ml doses of serial 4-fold dilutions of the vaccine with or without 50 µg of Quil A were injected into 24 groups of 20 guinea pigs. Challenge was given 3 weeks after vaccination.It was concluded that Quil A showed adjuvant activity in cattle and guinea pigs with all the serotypes used in the trivalent vaccination.     

鸡传染性支气管炎H120、W93株活疫苗生产工艺的改进

分别以鸡传染性支气管炎病毒(In-fectiousbronchitisvirus,IBV)H120株、W93株不同病毒量接种10、12日龄SPF鸡胚,并改变后孵化温度生产抗原液,接种后不同时间收获胚液,根据鸡胚的早死率以及胚液的收获量、病毒滴度,选择最佳的生产工艺。结果表明,IBVH120株、W93株以102.7EID50/0.1mL的病毒量接种12日龄鸡胚尿囊腔,在34.5℃孵育35h,可较为显著地降低早死胚率,提高产毒量,且抗原液病毒滴度符合疫苗制备规程的要求。