黑果腺肋花楸花色苷的提取分离纯化工艺

以黑果腺肋花楸为试材,采用Box-Behnken响应面法优化及柱层析法分离纯化花色苷,以确定花色苷的最佳提取工艺。结果表明:花色苷最佳提取工艺为浸提温度46℃、料液比1∶23.8g·mL~(-1)、浸提时间4.2h,其提取率为6.12mg·g~(-1);最佳分离纯化工艺为以XAD-7型树脂为填料,30%乙醇洗脱,最佳吸附流速1.0 mL·min~(-1),解析流速1.0mL·min~(-1)。在此基础上,可对黑果腺肋花楸花色苷进行微胶囊化,以便应用到食品加工中。     

利用高速逆流色谱技术制备灵芝酮三醇

以沪农灵芝(Ganoderma lucidum)1号子实体为原料,经过87%乙醇提取、D101大孔树脂富集、乙醇梯度洗脱获得弱极性三萜组分。采用高速逆流色谱技术,以正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水(V∶V∶V∶V=5∶6∶5∶5)为溶剂体系,对该三萜组分中灵芝酮三醇的制备工艺进行研究,在转速900 r·min~(-1)、流速3 mL·min~(-1)条件下,一次上样400 mg灵芝弱极性三萜组分,可得到纯度为91.6%的灵芝酮三醇26.8 mg。     

苹果多酚提取物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用

对苹果多酚提取物中的酚类物质进行HPLC分析,并分别以可溶性淀粉和4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷（PNPG）为底物测定了苹果多酚提取物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用。结果表明,苹果多酚提取物中含有没食子酸、原儿茶酸、儿茶素、绿原酸、表儿茶素、芦丁、根皮苷等酚类物质;苹果多酚提取物对α-淀粉酶具有较强的抑制...     

蛹虫草类胡萝卜素酶法提取和TLC法纯化研究

为了开发一种条件温和、安全环保的方法来分离纯化水溶性蛹虫草类胡萝卜素,通过试验筛选得到辅助提取蛹虫草类胡萝卜素的最佳酶为脂肪酶,并优化形成最佳工艺。蛹虫草子实体粉与水1∶4 (m∶v)混匀,加入0.1%脂肪酶,于pH 8～8.5,50°C条件下酶解30 min;将酶解液的乙醇浓度调至60%,室温下静置提取90 min;离心收集上清液。用该工艺提取1次蛹虫草类胡萝卜素的含量为(1 747.8±17.6)μg·g~(-1),显著高于直接浸提法的[(652.3±24.9)μg·g~(-1)]和超声辅助提取法[(661.5±41.9)μg·g~(-1)],P0.01。通过试验筛选得到蛹虫草类胡萝卜素TLC纯化法的最佳展开剂配比为:0.5%乙酸水溶液∶乙醇∶正丁醇∶乙酸乙酯=12∶8∶24∶36。用该展开剂能分离形成4个清晰的条带。经HPLC对比分析,4个条带的溶出液在出峰时间和顺序上与文献报道的4种蛹虫草类胡萝卜素Cordyxanthin-Ⅰ、Cordyxanthin-Ⅱ、Cordyxanthin-Ⅲ、Cordyxanthin-Ⅳ分别一一对应,峰面积百分比分别为76.10%、95.90%、97.96%、81.53%。     

文冠果壳苷提取、纯化工艺及其馏分抑菌活性的研究

以文冠果壳为试材,采用超声振荡的方法,研究了超声温度、超声功率、超声时间、料液比对文冠果壳粗提物提取率的影响,通过正交实验确定最佳提取工艺条件。依次通过硅胶H柱、ODS-A反相柱对总皂苷进行分离纯化,流动相分别为甲醇乙酸乙酯、甲醇水溶液,并选用3种细菌和2种真菌考察抑菌活性。结果表明:最佳提取工艺条件是超声温度70℃,超声功率180W,超声时间30min,经HPLC分析,料液比1∶25g·mL~(-1),提取率为17.26%,对提取率的影响顺序为料液比超声时间超声功率超声温度。80%甲醇馏分的文冠果壳苷含量和纯度最高,该馏分对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌有抑制作用。该研究为文冠果壳苷的提取纯化工艺优化,抑菌活性的开发提供了理论基础。     

竹柳皮总黄酮纯化工艺及抗氧化活性

以竹柳皮为试材,采用紫外分光光度法,以总黄酮吸附率和解吸率为考察指标,考察9种不同型号大孔树脂对竹柳皮总黄酮吸附-解吸性能,筛选出最佳大孔树脂型号,通过对工艺各参数优化,确定最佳纯化工艺,并测定竹柳皮纯化前后抗氧化活性。结果表明:D101型大孔树脂对竹柳皮中总黄酮有较好的吸附和解吸效果,最佳纯化工艺为60%乙醇提取2次,上柱液浓度为1.0 mg·m L-1,径高比为1∶15,上样速度为1.0 BV·h-1,上样体积为5 BV,洗脱溶剂为60%乙醇,洗脱速度为1.0 BV·h-1,收集0.8~2.2 BV洗脱范围内洗脱液,纯化后总黄酮含量可达64.94%,总黄酮收率高达98.34%。纯化后总黄酮的DPPH自由基清除活性、还原力分别约是纯化前粗提物的3倍和2倍。D101型大孔树脂适合纯化竹柳皮中的总黄酮,且纯化后的竹柳皮总黄酮具有更好的抗氧化活性。该试验可为竹柳皮的深入开发、产业附加值的提高提供参考依据。     

海棠果实中脱落酸的高效液相色谱测定

以‘草莓果冻’海棠为试材,采用高效液相色谱结合固相萃取法建立了一种用于海棠果实中脱落酸(ABA)含量检测的方法。通过优化前处理及色谱条件,最终确定取样量为3g,用80%预冷甲醇浸提12h,经不溶性PVPP吸附酚类等杂质,石油醚脱色,乙酸乙酯萃取,C18固相萃取小柱进一步纯化,再经甲醇∶1.0%乙酸溶液(45∶55,v/v),流速为1.0mL·min~(-1)进行洗脱,C18色谱柱分离,进样体积20μL,检测波长为254nm,柱温45℃。结果表明:该方法在0.01~0.50μg·mL~(-1)范围内线性关系良好,R~2=0.999 8,3个浓度水平下平均回收率均大于70%。采用该方法对‘草莓果冻’海棠半同胞子代中14个单株落果初期果实进行了测定,发现果实中脱落酸含量最低为0.026 9μg·g~(-1),最高含量为0.357 9μg·g~(-1),差别较大,该浓度与已有报道中的测定结果处于同一数量级水平。该方法的建立对于海棠的选育和生长发育进一步研究具有重要意义。     

UPLC法测定猕猴桃果汁中的酚类物质含量

【目的】快速分析猕猴桃果汁中的酚类物质组成建立一种可以同时测定22种酚类化合物的超高效液相色谱(UPLC)方法,并对4个品种的猕猴桃果汁中的酚类物质含量进行测定。【方法】色谱条件为:ACQUITY UPLC BEH C18分析柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为2%乙酸水溶液(A)和乙腈(B),流速为0.20 m L·min-1,柱温35℃,进样量0.6μL,检测波长为280 nm,采用梯度洗脱。【结果】猕猴桃果汁中含有没食子酸等13种酚类物质,而表没食子儿茶素没食子酸酯、阿魏酸、根皮苷、肉桂酸和根皮素等在猕猴桃果汁中均未被检出。【结论】优化后的UPLC法在33 min内可实现22种酚类物质的分离,分离度大于1.5,精密度、重复性和稳定性良好,可应用于猕猴桃果汁中酚类物质的快速分析。     

不同溶剂柠檬果皮提取物抗氧化、抑菌活性比较及其与多酚组成的关系

以柠檬果皮为材料,探讨不同溶剂提取对粗提物抗氧化及抑菌活性的影响,并分析了各提取物多酚组成与抗氧化能力及抑菌活性的关系。结果表明,不同溶剂柠檬果皮提取物抗氧化能力及抑菌活性存在显著差异(P0.05),抗氧化能力依次为:甲醇提取物丙酮提取物蒸馏水提取物乙醇提取物乙酸乙酯提取物,抑菌活性依次为:甲醇提取物丙酮提取物乙醇提取物蒸馏水提取物乙酸乙酯提取物。从柠檬果皮中共鉴定出16种多酚类物质,包括4种酚酸、12种类黄酮。相关性分析表明,不同提取物的多酚物质组成及其含量与抗氧化、抑菌活性密切相关,芸香柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、没食子酸、绿原酸和咖啡酸对抗氧化活性的贡献较大,芸香柚皮苷、新橙皮苷、咖啡酸对抗菌活性的贡献最大。甲醇为最佳提取溶剂。     

葡萄皮渣原花青素微波辅助提取工艺的优化及其抗氧化活性研究

以葡萄皮渣为试材,采用微波辅助提取方法和体外抗氧化试验,研究了葡萄皮渣中原花青素提取工艺和体外抗氧化活性。结果表明:最佳工艺为乙醇体积分数60%(v/v)、料液比1∶20g·mL~(-1)、微波时间90s、微波功率800W。在此条件下,原花青素提取率为9.12mg·g~(-1)。体外抗氧化试验中,葡萄皮渣原花青素提取物表现明显的抗氧化能力,对DPPH自由基(DPPH·)和羟基自由基(·OH)具有较好的清除能力,但抗氧化能力比维生素C弱。     

UPLC-MS/MS法同时测定生菜叶片中五种植物内源激素

以有机生菜为试材,采用甲醇∶甲酸∶水=15∶1∶4作为提取剂,经过超声、离心、氮吹,DiKMA ProElut PXA固相萃取柱分离纯化后得到植物激素提取液,在38℃恒温水浴中氮吹浓缩干燥,甲醇作为复溶液进行复溶,得到植物激素待测液.采用ACQU-ITY UPLC BEN反相色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)对5种植物激素进行分离,流动相A为0.1％甲酸水溶液,流动相B为甲醇溶液,梯度洗脱,流速为0.30 mL·min-1,柱温为40℃;在液相色谱质谱联用多反应监测(MRM)模式下进行定性定量分析,外标法测定植物激素回收率.建立了应用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS),同时测定叶菜类蔬菜中赤霉素、生长素、脱落酸、水杨酸、茉莉酸5种植物内源激素含量的方法,并优化了生菜基质中激素的前处理方法、质谱色谱条件等.结果 表明:生菜在低、中、高浓度加标时,5种激素的加标回收率为60.15％～107.73％,且相对标准偏差均小于7.6％,检出限为0.30～0.52 μg·kg-1,定量限为0.68～1.56μg·kg-1.该方法快速灵敏,可适用于其它叶菜类植物中赤霉素、生长素、水杨酸、茉莉酸、脱落酸含量的检测,以期为叶菜类植物叶片中多种内源激素的同时检测提供了一个快速有效的方法.     

虫草核苷类成分的提取方法

该研究筛选出1种提取虫草核苷类成分的方法。采用高效液相色谱法,流动相为10%甲醇溶液,流速为1 mL·min~(-1),检测波长260 nm,进样量10μL,测定不同提取溶剂和提取条件制备供试液中尿嘧啶、尿苷、2’-脱氧尿苷、肌苷、鸟苷、腺嘌呤、胸苷、腺苷、2’-脱氧腺苷和虫草素含量。结果表明,当提取溶剂为20%甲醇溶液,提取方法为超声处理,提取时间为90 min,提取次数为3次,虫草样品中核苷类成分可被充分提取。该方法适用于虫草水溶性核苷类成分供试液的制备,为准确测定虫草类真菌样品水溶性核苷类成分提供了依据。     

苹果根细胞质膜的提取和纯化

试验利用差速离心法获取苹果根细胞微粒体,两相分配法分离质膜和其它细胞内膜,从而获得纯化的正向型质膜囊泡。结果表明,研磨缓冲液成分是影响微粒体分离及其在两相体系中分配的关键。两相分配后的标志酶活性检测表明,上相中富含质膜,内膜污染较少,质膜纯度较高;下相中富含其它内膜。证明PEG—Dextron两相分配法也适用于苹果根细胞质膜的提取和纯化。     

苹果渣中苹果多酚柱层析分离工艺研究

本文研究了大孔吸附树脂对苹果渣中苹果多酚纯化和Sephadex凝胶对苹果多酚的精制工艺参数,选定AB-8为纯化用大孔吸附树脂,采用70%乙醇作为解吸剂;Sephadex凝胶精制后的苹果多酚,经冷冻干燥,得到苹果多酚粉末。苹果多酚得率为0.12%,苹果多酚的纯度由初步纯化的15.5%提高到75.6%。     

银杏叶片中萜内酯的提取工艺

以银杏叶片为试材,采用乙醇-水浸提法,设计单因素试验,研究了乙醇浓度、提取时间、料液比、提取温度4个提取参数对萜内酯得率的影响,优化了提取工艺。结果表明:提取萜内酯的最佳工艺为料液比1∶150g·mL~(-1),提取温度60℃,60%乙醇,提取2.0h;最佳洗脱条件是石油醚∶乙酸乙酯=1∶2(v/v),一次性洗脱。经过HPLC-ELSD分析,该工艺提取率高,操作简便,具有可信度。     

固相萃取-亲水作用色谱法测定香菇中硫杂脯氨酸

通过对色谱条件和样品前处理方法进行优化,建立固相萃取—亲水作用色谱法测定香菇(Lentinula edodes)中硫杂脯氨酸的检测方法。优化后的色谱条件为：Inertsil HILIC 亲水作用色谱柱(4.6×250 mm,5μm)对样品进行分离测定,流动相采用乙腈-0.1%磷酸水(85∶15,v/v)等度洗脱,流速0.8 mL/min,检测波长193 nm,柱温30℃。前处理方法为：香菇样品采用甲醇-水(70∶30,v/v)提取,MAX阴离子固相萃取小柱进行净化处理,甲醇-1.0%甲酸(90∶10,v/v)作为洗脱剂对目标物进行洗脱。检测结果表明,硫杂脯氨酸在2~100μg/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9998,加标回收率为96.3%~101.7%,相对标准偏差在1.3%~4.8%之间,检出限为0.76μg/g,定量限为2.31μg/g。该方法回收率高、简单、快速、无需衍生化,适用于香菇子实体硫杂脯氨酸的定量检测分析。     

蓝莓皮渣花色苷提取及抗氧化活性的研究

【目的】探讨蓝莓皮渣综合利用的基础因子。【方法】以花色苷含量为试验指标,考察了乙醇体积分数、料液比、p H值、提取温度及提取时间等因素对提取效果的影响。在单因素试验的基础上,利用响应面分析法优化提取工艺条件,得到适宜的工艺条件。通过测定蓝莓皮渣花色苷的总抗氧化能力、清除DPPH·和OH·能力,评价其抗氧化活性。【结果】研究结果表明,提取时液料比、提取时间、提取温度、p H、乙醇体积分数对提取量影响较大,通过响应面分析法优化了提取工艺,其适宜的提取工艺条件为:乙醇体积分数60%、V(液,m L)、m(料,g)比20∶1、提取时间1.5 h、p H 2.0、提取温度35℃,在该工艺条件下,蓝莓渣花色苷的提取量为16.197 mg·g-1;蓝莓皮渣花色苷具有一定抗氧化能力,在实验范围内,DPPH·和OH·的抑制率均随质量浓度的升高而增加,清除DPPH·和OH·的IC50分别为241.88和1 238.15μg·m L-1。【结论】优化了蓝莓皮渣花色苷提取的工艺条件,且蓝莓皮渣花色苷具有一定的抗氧化活性。蓝莓皮渣花色苷的提取及抗氧化活性分析为其综合利用奠定了基础。     

灰树花水提物抑糖基化物质的分离纯化

从大孔树脂类型、洗脱剂与上样量等方面确定灰树花中抑糖基化反应化合物的初分离条件,并选取抑糖基活性最高的组分进行薄层层析分析和硅胶柱分离纯化,最后利用高效液相色谱法和傅里叶红外光谱分析化合物。结果表明:采用D101大孔树脂,25 g树脂最佳上样量为2 g,20%乙醇洗脱组分C_3的抑糖基化活性最高。用氯仿∶甲醇(v/v 1∶9)为洗脱液对C_3进行硅胶柱层析纯化,共分离出5个组分C_35～C_39,其中C_38和C_39具有比较强的抑糖基化活性,合并C_38和C_39,再次用氯仿∶甲醇=(v/v 2∶8)为洗脱液进行硅胶柱层析纯化,共分离出5个组分G_1～G_5,薄层层析和HPLC分析分别显示G_3为单一斑点和单一峰型,说明G_3是一种单体化合物,根据红外光谱结果初步推断该化合物为酚类物质。     

土壤中根皮苷和根皮素对桃幼苗的影响

以一年生桃嫁接苗为试材,在盆栽条件下研究了苹果园土壤中特征酚酸类物质——根皮苷和根皮素对桃苗生物量、根系活力、根系保护性酶活性和MDA含量的影响。结果表明,根皮苷对桃幼苗的伤害显著,与对照相比,鲜质量、干质量分别降低了16.66%和21.58%,根系活力降低了33.04%,SOD、POD活性分别降低了40.80%和31.10%,MDA含量提高了116.34%。根皮素对桃苗的影响不大。高锰酸钾处理明显缓解了根皮苷对桃苗的伤害,苹果园土壤中的根皮苷含量降低了57.80%,提高了桃苗的生物量、根系活力和保护性酶活性,降低了MDA含量。综上,老龄苹果园土壤实测含量的根皮苷(0.343mg·kg~(-1))可降低桃苗的生物量,适量的高锰酸钾能缓解根皮苷的伤害作用。     

鱼腥草不同溶剂提取物对豌豆根腐病菌的抑制作用

用蒸馏水、95%乙醇和石油醚为溶剂对采自鄂西北山区的鱼腥草进行全草浸提,探讨不同溶剂提取物对豌豆根腐病菌的抑制作用。试验结果,以浸膏的质量得率为指标,水浸法提取率最高,石油醚超声波法提取率次之,95%乙醇浸泡法提取物最少,分别为14.34%,9.85%,7.99%;当处理浓度不低于0.000 5 g/ml时,对豌豆根腐病菌菌丝生长的抑制率以95%乙醇提取物和石油醚提取物较高,均超过40%,且在最高处理浓度0.002 g/ml时分别达到60.32%和63.26%。而对豌豆根腐病菌孢子萌发的抑制率,在最高处理浓度为0.002 g/ml时,石油醚提取物最高,为90.00%,95%乙醇提取物和水提取物分别为85.71%和59.26%。