温度对枇杷花粉管生长和胚囊寿命的影响

【目的】阐明温度对枇杷花粉原位萌发、花粉管生长和胚囊寿命的影响,明确枇杷花粉萌发、花粉管生长的最适温度,为枇杷花期管理及生态区划提供新的科学依据。【方法】以‘大五星’为试材,将其离体花枝置于不同温度的恒温箱中进行培养,用‘龙泉5号’进行异花授粉,授粉后不同时间段分别采集花朵,采用荧光显微观察方法观察统计花粉萌发和花粉管生长和胚囊活力情况。【结果】在10.0、15.0和20.0℃的温度条件下花粉萌发率、被花粉管生长穿过的花柱比率和有花粉管的胚珠比率显著高于其他温度,当温度为5.0℃时花粉的萌发率仅为10%,温度升高至25.0、30.0℃时,萌发率又分别显著下降至65%和45%。当温度为5.0、30.0℃时,在授粉后120 h均未发现有花粉管穿过花柱生长至胚珠。【结论】温度对枇杷花粉萌发、花粉管生长和胚囊寿命有显著影响,枇杷花粉萌发的最适温度为19.9℃,花粉管最适宜的生长温度为18.0℃。     

单核枇杷形成的影响因素研究

【目的】明确单核枇杷形成的主要影响因素。【方法】以3个单核枇杷单株‘2-27’、‘10-6’、‘10-47’为试材,‘大五星’为对照,研究了单核枇杷花粉活力、离体萌发率和授粉受精亲和性,并进行了小孢子母细胞减数分裂行为和雌配子体发育进程的解剖学观察,并鉴定其倍性。【结果】3个单核枇杷都是三倍体;花粉畸形率高、离体萌发率极低,花粉母细胞减数分裂异常;二倍体花粉在单核枇杷柱头上有生长缓慢或停滞的现象,田间杂交所获子代全部为单核;单核枇杷中多见胚囊过早解体退化,导致大部分未受精胚珠过早败育。偶见1个子房中仅存1个正常胚珠,有望发育为单核果实。【结论】三倍体减数分裂过程中,染色体分离重组或不减数等形成低几率育性,最终获得的极少数有育性的配子才是形成单核的关键。     

天然四倍体枇杷‘B431’减数分裂观察及育性分析

通过流式细胞术和染色体制片确定枇杷天然实生筛选株系‘B431’为四倍体。采用改良涂片法观察了其花粉母细胞减数分裂过程,离体萌发法和人工杂交分析其育性,染色体计数法检测了其后代的染色体数。结果表明:天然四倍体枇杷‘B431’减数分裂过程中染色体存在异常行为;染色体配对以二价体为主,也可见少量单价体和部分多价体;减数分裂进程中出现板外染色体、早熟染色体、落后染色体、染色体桥、微核和极少的三极体等异常现象;四分体时期有二分体、三分体、多分体和微核等异常现象。四倍体枇杷‘B431’育性低于二倍体,但其花粉活力达到66.29%±2.22%,杂交结实率与二倍体差异不显著,仍有较高的育性,其与二倍体的杂交后代三倍体率达到66.67%,可以作为三倍体创制的核心亲本。     

菊属植物远缘杂交亲和性研究

 开展了不同倍性菊属物种间远缘杂交试验,比较不同杂交组合的杂交亲和指数,并对授粉后生殖生物学过程（柱头花粉附着、花粉萌发、花粉管生长、受精及子房发育）进行荧光显微观察。结果表明,具相同倍性的种间及四倍体与六倍体物种间杂交较易结籽,而二倍体与四倍体或六倍体间难以结籽,表现杂交不亲和性。菊属远缘杂交不亲和表现为柱头上花粉粒粘附少,花粉萌发率低,花粉管生长异常难以进入花柱,诱导柱头胼胝质生成,受精胚败育。     

天然三倍体枇杷与其二倍体植株的形态学比较

对大五星、龙泉1号、金丰、早红3号4个品种45个8a生三倍体株系及其对应品种的二倍体形态学特性进行了比较分析。与二倍体植株相比较，三倍体植株树体高大，生长旺盛，分枝少，叶色浓绿，茸毛长而密，叶缘缺刻明显，花器官增大明显。三倍体在树体干周、1a生枝梢粗度、叶片长、叶片宽及叶长×叶宽上分别平均为二倍体的1．7、1．4、1．...     

猕猴桃花粉萌发的影响因子

试验以美味猕猴桃4个株系帮增1号、201、35-19N1、35-18N1为材料,测定不同株系花粉的活力和花粉萌发动态,并以蔗糖、硼酸、钙、锰、钼、氯化钠等作为环境因子,看其对花粉萌发和花粉管生长的影响。结果表明:35-19N1萌发和活力最高,萌发率为51.73%;帮增1号萌发最差,萌发率为36.23%。在培养基中硼酸和蔗糖最适宜浓度分别为:150mg/L、10%;培养基中添加Ca(NO3)25mg/L,或Na6Mo7O2480mg/L、MnSO4100mg/L,能明显提高萌发率。不同株系花粉的发芽势高峰有差异。NaCl对花粉萌发和花粉管生长有抑制作用。     

苹果转CpTI基因株系花粉特性研究

转基因植物的花粉特性研究是进行遗传改良和转基因生态风险评价的一项基础工作。对7~8年生转Cp TI基因‘嘎拉’苹果花粉特性进行了研究,结果表明:转基因苹果花粉在大小、形态和表面纹饰等方面与对照花粉没有明显差别;转基因苹果花粉中畸形花粉多;供试的13个株系中12个株系的花药中花粉量显著低于对照,6个株系的花粉离体萌发率显著降低;测定了3个转基因株系的花粉生活力,其中2个株系显著低于对照。转基因‘嘎拉’苹果花粉人工授粉至普通‘富士’苹果柱头上能正常萌发,但中后期花粉管伸长较慢,花粉管到达胚珠的时间比对照延后约8 h。花器不同发育阶段内源激素测定表明,转基因株系各时期GA3含量均低于对照,而ABA含量在花蕾期低于对照,在气球期和平展期高于对照。对花药和花粉发育过程显微观察发现,转基因株系花药的结构及其发育正常,而花粉囊壁绒毡层的延迟分解影响了花粉发育可能是其花粉数量少、育性低的原因。     

连翘花粉离体萌发及活力测定

以连翘花粉为试材,采用液体培养法,研究了培养基中蔗糖、氯化钙、硼酸、PEG及不同培养时间对连翘花粉萌发和花粉管生长的影响,通过醋酸洋红和TTC染色法,找出可快速测定连翘花粉活力的方法,以期为连翘杂交育种提供参考依据.结果 表明:蔗糖、硼酸、氯化钙和PEG显著影响连翘花粉的萌发和生长,离体萌发最佳培养基组合为15％蔗糖+0.015％硼酸+0.020％氯化钙+10％PEG,最适培养时间为3h,萌发率可达87.20％,花粉管长度达181.20 μm;花粉活力测定中,醋酸洋红染色法适用于花粉活力快速测定,和离体萌发结果基本一致.     

桃三倍体种质的花粉形态及萌发特性

以同起源的二倍体为对照,采用显微测量和离体培养方法,对3份桃三倍体种质的花粉形态及萌发特性进行了观察分析。结果表明:桃三倍体种质的花粉在大小、形态等方面存在巨大差异,花粉粒径大小分布无明显的规律,横径的众数占比约为20.0%~40.0%,远低于二倍体种质的66.0%~76.0%;三倍体种质的花粉萌发率低,仅4.1%~17.5%,而二倍体的萌发率高达60.2%~75.8%;二倍体花粉萌发花粉以体积为(67.1±7.1)×103μm3的正常花粉为主,而三倍体种质‘10-15-23’,‘10-15-16’萌发最多的为体积分布在(95.3±7.1)×103μm3的大花粉。     

蜜蜂采集梨花粉萌发活性及应用分析

以鸭梨树为试材,于花期收集人工采集和蜜蜂采集的梨花粉,分别进行了花粉活力测定、离体萌发、花粉管生长以及大田人工授粉试验,分析比较了二者之间的差异。结果表明:人工采集的花粉与蜜蜂采集的花粉活力无显著差异,而蜜蜂采集的花粉的花粉管萌发速率显著高于人工采集的花粉,二者形成的人工授粉坐果率极显著高于对照。     

甘菊与栽培菊‘金陵黄玉’种间杂交失败的原因

 二倍体野菊与栽培菊种间杂交常不能结实, 从而严重影响了野菊优异基因的利用, 为了揭示其原因, 以栽培菊(Dendranthema grandiflorum) ‘金陵黄玉’为母本, 二倍体野生菊甘菊(D. lavandulifolium ) 为父本, 开展了种间杂交, 测定了父本花粉活力, 研究了授粉后花粉在柱头萌发行为及胚胎发育情况等。结果发现, 父本甘菊的花粉活力在授粉时为11.2% , 人工授粉4 h内未观察到柱头上有花粉萌发;授粉后8 h时平均每个柱头上只有7.5粒花粉萌发; 到授粉后12 h时数量达到最多, 为16.1粒; 随后数量急剧下降, 到24和48 h时柱头萌发花粉数量分别只有3.2粒和2.4粒, 且大部分花粉管生长异常并停留在柱头表面。此外, 在授粉8 d后观察到12.0%子房中含有正常的球形胚, 但之后就未观察到正常胚胎, 最终未获得杂交种子, 而母本自然开放结实率高达42.3%。以上结果表明, 受精前、后的生殖障碍, 即母本柱头上花粉萌发数量少且萌发异常和受精后胚胎大量败育, 是引起种间杂交不结实的主要原因。     

沙田柚自交和异交亲和性观察

用荧光显微镜和扫描电镜对沙田柚（Ｃｉｔｒｕｓｇｒａｎｄｉｓｖａｒ．ｓｈａｔｉｎｙｕＨｏｒｔ．）自交和异交亲和性进行了观察。沙田柚自、异交授粉后，花粉管通过柱头乳突细胞间隙进入柱头，先是在柱头区沿细胞间隙生长，长到花柱区后，一直沿花柱道内缘通道细胞长入子房。当花粉管伸长到花柱１／４～１／２时，自异交的花粉管生长速度和管壁胼胝质积累出现差异，自交花粉管在花柱１／２左右处停止生长，异交花粉管正常进入胚囊受精。花柱切面自交授粉管能萌发，但不能进入花柱道。花柱切面异交授粉和胎座授粉，花粉管均能进入胚囊，进行受精。柱头分泌液和柱头匀浆提取液进行花粉离体萌发，花粉能正常萌发和生长。实验结果表明，沙田柚自交不亲和识别和阻抑部位在花柱，属配子体不亲和型。     

多胺及其合成抑制剂对梨花粉萌发及花粉管生长的影响

以丰水梨为材料,采集开花前1d或当天花蕾的花粉,进行离体培养。结果表明,精胺、亚精胺和腐胺在低浓度时均能促进离体花粉萌发和花粉管生长,但超过一定浓度时则对其起抑制作用。精胺、亚精胺和腐胺促进花粉萌发及花粉管生长的适宜浓度分别为0.005～0.025mmol/L、0.05～0.25mmol/L和0.05～0.25mmol/L。多胺的合成抑制剂甲基乙二醛-双-鸟苷基腙(MGBG)能抑制离体花粉萌发和花粉管生长。     

野杏花粉离体培养条件筛选及花粉生活力研究

以野杏优良家系和无性系为研究对象,采用花粉离体培养的方法,对野杏花粉离体培养条件及其生活力进行研究,以期为野杏杂交育种中父本植株的选择提供参考依据。结果表明:培养基组分中蔗糖浓度、培养时间是影响花粉生活力的主要因素。最适宜野杏花粉离体培养的培养基组分浓度为10%蔗糖,0.005%硼酸,培养6.0h。根据野杏花粉管生长速率,可将其划分为4个生长阶段,其中0.3~1.0h为花粉萌发阶段,1.0~2.5h为快速生长阶段,2.5~6.0h为缓慢生长阶段,6.0h为生长停滞阶段。野杏各家系及无性系均为正常可育,其中家系209号花粉生活力最强,其花粉萌发率及花粉管长度分别为81.33%和1 136.14μm;无性系J118号萌发率最高,花粉管长度最长,分别为63.35%和1 043.78μm。野杏家系花粉萌发率和花粉管长度间无相关性,而无性系呈显著正相关。野杏家系花粉萌发率极显著优于无性系,且有3个家系的花粉生活力均极显著优于西伯利亚杏家系。     

杜鹃红山茶花粉活力测定方法的比较研究

以4年生嫁接的杜鹃红山茶花粉为试材,采用MTT法、TTC法和离体萌发法,研究了不同测定方法对杜鹃红山茶花粉活力的影响。结果表明:不同测定方法对杜鹃红山茶花粉活力测定结果影响较大,其中,离体萌发法是杜鹃红山茶花粉活力的最佳检测方法,30℃条件下花粉萌花最适培养基为2.5%琼脂+100g/L蔗糖+10mg/L硼酸,适宜统计的培养时间为4h,花粉萌发率达58.10%,Ca2+对花粉萌发起抑制作用;MTT染色得出92.5%的杜鹃红山茶花粉具有活力,明显高于离体萌发法,而TTC法由于染色不清晰,不适合用于杜鹃红山茶花粉活力检测。     

马铃薯花粉离体萌发及花粉管生长的研究

研究花粉的离体萌发对雄配子体的生物学研究、人工杂交育种以及提高亲本的利用率都具有重要意义。作者对马铃薯花粉离体萌发以及影响花粉管生长因素进行了研究。晴天10～11时采集马铃薯优良四倍体栽培种‘唐113’、‘杂5单选-10’、‘陇薯3号’和‘甘农薯1号’的新鲜花蕾,消毒后在无菌条件下剥离收集花粉粒,以0.01?(NO3)2 0.01%H3BO3作为基本萌发培养基,26～28℃黑暗条件下萌发。研究了不同浓度蔗糖和PEG组合、硼酸、无机盐以及6-BA和NAA等对花粉萌发和花粉管生长的影响。在OlympusAH-2型显微镜下观察萌发情况,用目镜测微尺测定花…     

同源四倍体青花菜花粉活力及结籽性研究

以二、四倍体青花菜为材料，采用TTC法、离体和原位萌发法研究其花粉活力，并用正交设计法研究其结籽性。结果表明：1）TTC染色试验中四倍体与二倍体花粉可染率分别为48．6％和60．8％，差异显著。2）离体萌发试验中4x花粉在4h时萌发率最大，达66．45％，     

梨43个品种花粉生活力及4种测定方法的比较

用花粉离体培养法测定比较了43个梨品种花粉离体萌发率和花粉管生长长度;从中选择花粉相对生活力低、中、高3组6个品种(今村秋和雪花梨、金二十世纪和丰水、青松和满天红)的花粉,采用I-KI染色法、蓝墨水染色法、MTT染色法、过氧化物酶染色法4种花粉生活力测定方法,以花粉离体萌发法为对照。结果表明,花粉培养24h后,43个梨品种的花粉萌发率平均为66.15%,其中花粉萌发率≥60%的品种约占84%,满天红萌发率最高为82.79%;花粉管长度平均为1.77mm,花粉管长度≥1mm的品种约占89%,其中奥萨二十世纪最长为3.25mm,说明多数梨品种花粉生活力较强。与对照相比,4种花粉生活力测定方法中I-KI染色法的测定值极显著偏低,MTT(噻唑蓝)染色法的测定值显著偏高,二者不适于梨花粉生活力的测定;过氧化物酶染色法测定值与对照差异显著,也不适宜用来测定梨花粉生活力;蓝墨水染色法测定值与对照没有显著性差异,可用于梨花粉生活力的快速测定。     

山杏花粉离体培养条件及花粉管生长动态研究

以山杏优良无性系为试材,采用花粉离体培养的方法,研究了山杏花粉离体培养条件对花粉萌发率的影响、不同采样方式对花粉萌发率的影响和花粉管的发育过程,旨在为了解和控制山杏授粉受精过程提供参考依据。结果表明:当蔗糖、琼脂浓度为10.0%和0.5%时,0.010%的硼酸浓度最适合山杏花粉离体培养。室内水培花枝取样的花粉活力显著低于野外自然开花取样的花粉活力,在相关科研和生产实践中,应尽量缩短室内水培时间或从野外自然开花中获得花粉。不同山杏无性系的花粉活力差异明显。山杏花粉管在培养基中生长可以划分为4个时期:花粉萌发期(0.3~0.6h),快速生长期(0.6~2.0h),生长速度缓慢期(2.0~4.0h)和生长停滞期(4.0h以后)。     

紫花含笑与含笑、深山含笑和阔瓣含笑杂交亲和性分析

以紫花含笑（Michelia crassipes）为母本,含笑（M. figo）、深山含笑（M. maudiae）和阔瓣含笑（M. platypetala）为父本,研究其杂交亲和性。采用离体培养法对父本花粉生活力进行检测,利用荧光显微镜观察不同杂交组合花粉萌发和花粉管伸长情况,并调查种间杂交坐果率和杂种萌发特性。结果表明：紫花含笑、含笑和深山含笑的花粉萌发率达65%以上,而阔瓣含笑的花粉萌发率较低,为29.07%。荧光显微观察发现,紫花含笑 × 含笑、紫花含笑 × 深山含笑的花粉萌发率和花粉管生长速度比紫花含笑自交快,且花粉管能正常伸长完成授精;而紫花含笑 × 阔瓣含笑的花粉虽能在柱头表面萌发,但花粉萌发和花粉管生长速度均慢于紫花含笑自交,且出现花粉管膨大、花粉管停止生长、柱头和花柱内胼胝质堆积等现象。紫花含笑 × 含笑、紫花含笑 × 深山含笑的坐果率和种子萌发率均达80%以上,表明杂交亲和性较好;而紫花含笑 × 阔瓣含笑的坐果率仅有11.1%,且杂种胚败育,受精前障碍可能是影响其杂交的主要原因之一。