番茄"美粉1号"子叶再生体系的建立

以番茄品种美粉1号为试验材料,研究20%次氯酸钠和0.1%氯化汞处理不同时间对番茄种子表面消毒和萌发的影响,同时研究不同的激素组合对该品种再生芽形成和生根的影响.结果表明,用20%次氯酸钠对番茄种子消毒20min,可获得较多的无菌苗;同时发现,IAA浓度为0.2 mg/L和6-BA浓度为2 mg/L组合时,外植体再生芽频率较高,为85.2%,促进不定芽生根的最佳激素浓度为MS培养基中添加0.5 mg/LIAA.再生苗移栽到灭菌处理后的土壤中后成活率较高,可达92%.     

江蔬1号番茄子叶离体再生体系的建立

以番茄品种江蔬1号和金陵之星101F1为试材,MS为基本培养基,研究70%酒精和20%次氯酸钠溶液不同时间处理对种子表面的消毒效果和对种子萌发的影响,并研究不同基因型、不同植物生长调节物质及浓度对番茄子叶再生的影响。结果表明,70%酒精处理50 s后,再用20%次氯酸钠溶液浸泡30 min,江蔬1号和金陵之星101F1种子萌芽率分别为98%、63.2%,而污染率分别为0、2.2%;不同的番茄品种在相同的培养基上愈伤组织诱导率和不定芽的分化率存在着显著差异,江蔬1号优于金陵之星101F1。适于江蔬1号子叶再生的培养基为MS ZT0.5 mg/L IAA0.3 mg/L,再生频率可达49.14%;适宜的生根培养基为MS NAA 0.5 mg/L,生根率为100%。     

番茄子叶、下胚轴植株再生体系的建立

本研究以番茄(Lycopersicon esculentumM ill.)栽培品种“中杂9号”、“毛粉802”和“合作908”为试材,通过对番茄子叶、下胚轴的离体培养,研究不同基因型以及不同激素配比对植株再生的影响。结果表明:以下胚轴为外植体时3种材料均可诱导再生植株,其中中杂9号和毛粉802最适宜诱导愈伤组织和芽分化的培养基为MS 6-BA2.0mg/L IAA0.5mg/L,合作908最适宜诱导愈伤组织和芽分化的培养基为MS 6-BA2.0mg/L IAA0.4 mg/L。以子叶为外植体时毛粉802和合作908均可诱导出再生植株,其中毛粉802诱导愈伤组织及芽分化的最适宜培养基为MS 6-BA1.0mg/L IAA0.2mg/L和MS 6-BA1.0mg/L IAA0.5mg/L,合作908诱导愈伤组织及芽分化的培养基为MS 6-BA0.5mg/L IBA0.5mg/L。两种外植体适宜的生根培养基均为MS IAA0.5 mg/L。     

番茄品种“红吉星“子叶离体再生体系建立研究

本文以番茄品种"红吉星"子叶为对象,进行了离体培养再生体系建立研究.结果表明,番茄子叶离体培养过程中,影响不定芽发生的因素主要有培养基中细胞分裂素种类与浓度、培养基维生素组分、实生苗苗龄、暗培养时间等.试验结果表明番茄品种"红吉星"子叶不定芽发生率达95%以上的条件是实生苗苗龄10-25天,BA浓度1.0mg/L附加IAA0.2mg/L,子叶暗培养10-13天.卡那霉素抗性水平为75mg/L,300mg/L以下的头孢霉素加入量对子叶分化无不良影响.     

番茄子叶的离体再生与移栽

为了尽快地使番茄子叶获得较多的再生植株以及提高再生植株的移栽成活率，使番茄的遗传转化研究与应用得以顺利进行，以番茄子叶为外植体，系统研究了番茄子叶切段大小对诱导出芽的影响，生长素IAA和NAA对生根的影响，以及移栽土的灭菌处理、空气湿度、再生苗的生根状况等对移栽成活的影响。结果表明，刚展开的子叶横切成3段时可得到较多的再生芽；在MS培养基中添加低浓度的IAA能形成根系发达、生长健壮的再生苗；移栽土灭菌处理或再生苗生根差，都无法移栽成活；空气湿度过高或过低教师容易使移载苗萎蔫。     

加工番茄遗传转化再生体系的建立

加工番茄种子出芽后7~8 d,子叶剪成约0.2~0.4 cm,0.3~0.5 cm的小块,以MS B5为基本培养基,附加IAA0.2 mg/L分别与0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 mg/L的6-BA/ZT/TDZ组合;6-BA2.0 mg/L分别与0.0,0.05,0.1,0.2,0.5,1.0 mg/L的IAA/IBA/NAA组合。经诱芽比较,在不同浓度6-BA/ZT/TDZ与0.2mg/LIAA组合中,出芽率最高的培养基为MS ZT1.0 mg/L IAA0.2 mg/L和MS TDZ2.0 mg/L IAA0.2 mg/L。在不同浓度的IAA/IBA/NAA与6-BA2.0 mg/L组合中,IAA明显优于NAA和IBA,筛选出MS 2.0 mg/L6-BA 1.0 mg/LIAA为最佳生芽培养基。以1/2MS添加NAA//BA0.0,0.1,0.2,0.5,1.0 mg/L进行生根比较,再生芽在MS 0.5 mg/L IBA生根培养基上生根最好,并发育成完整的小植株。     

加工番茄离体再生体系的建立

以加工番茄B04子叶盘和下胚轴切段为外植体,研究了不同种类和浓度的细胞分裂素(ZT、6-BA和KT)和生长素(IAAI、BA和NAA)组合及附加物AgNO3对外植体不定芽诱导的影响。结果表明,细胞分裂素ZT的不定芽诱导效果明显优于6-BA和KT,KT诱导效果最差;生长素IAA的不定芽诱导效果优于IBA和NAA;在不同的激素组合中,不定芽诱导率最高的培养基为MS 2.0 mg/L ZT 0.2 mg/L IAA。再生芽在MS 0.1mg/L IAA生根培养基上能正常生根,并发育成完整的小植株。     

荞麦子叶节再生体系的建立

实验以荞麦子叶节为研究对象,摸索其再生所需的最适条件,建立荞麦的再生体系,为荞麦的转基因研究奠定基础.实验结果表明：种子萌发条件为去掉外种皮的种子用0.1％升汞灭菌1min,30g/L蔗糖＋7.5g/L琼脂粉的固体培养基培养.子叶节诱导生芽最适培养基为MS＋2.5mg/L6-BA＋0.05mg/LNAA＋30g/L蔗糖＋7.5g/L琼脂粉,芽诱导生根的培养基为1/4MS ＋6-BA （2.0mg/L） ＋NAA （0.05mg/L） ＋30g/L蔗糖＋7.5g/L琼脂粉.     

青菜子叶离体再生体系的建立

以子叶为外植体,研究了苗龄、培养基中Agar浓度、BA与NAA的组配和添加AgNO₃、GA3对子叶产生不定芽的影响.结果表明,5～9d苗龄的外植体最易诱导出不定芽;培养基中BA浓度是影响不定芽形成的关键,BA浓度低于2mg/L,不定芽难以发生,BA6mg/L与NAA0.05mg/L的搭配有利于不定芽形成;在一定范围内不定芽发生频率随着Agar浓度的提高而提高;培养基中添加5mg/L AgNO₃,2～3mg/LGA3可以提高不定芽的发生频率;在此基础上建立了青菜离体再生体系,利用该体系能够获得较高的芽苗再生频率,但存在着青菜基因型间的差异.     

番茄子叶再生系统的初步研究

以番茄品种中蔬6号为试材,对种子表面消毒条件、子叶分化培养基及该品种对卡那霉素和头孢菌素的天然耐性进行了初步研究。结果表明:适宜的表面消毒条件为0.2％升汞2min。以子叶为外植体,适宜的分化培养基为MS+6-BA 1 mg/L+IAA 0.2 mg/L。在中蔬6号的遗传转化中,卡那霉素和头抱菌素的抑菌浓度分别以10,400 mg/L为宜。     

罗汉果子叶高效再生体系的建立

以无菌萌发罗汉果子叶为外植体,进行罗汉果高效离体再生体系的研究。探讨了不同MS、琼脂含量、不同激素浓度配比、种子萌发时间和活性炭在罗汉果种子萌发、子叶诱导不定芽及试管苗生根方面的影响。结果表明：1／4 MS、0．5％-0．6％的琼脂含量比较适合罗汉果种子萌发,萌发率达89．2％;降低无机盐和蔗糖浓度有利于罗汉果试管苗的生根;最适生根培养基为1／2 MS＋IBA0．5mg／L＋1．5％蔗糖;罗汉果子叶直接诱导不定芽最适合培养基为1／2MS＋6-BA1．0mg／L＋IBA0．1mg／L,分化率达94．8％,平均每块子叶出芽10个;培养基中添加低浓度（0．2％）活性炭有利于生根,但不利于子叶不定芽的诱导;子叶不定芽的分化率还受种子萌发时间的影响,萌发时间以2—4d为宜;试管苗经过炼苗2～4d能极大提高移栽成活率,达91．7％。     

茄子高频再生体系的建立与优化

为建立并优化茄子高频再生体系,研究以茄子品种哈农杂茄2号和哈农杂茄3号为材料,利用不同的外植体和植物生长调节剂组合,探讨影响茄子再生频率的主要因素。结果表明:茄子最佳再生子叶最适分化培养基为MS 0+6-BA 1mg·L-1+KT 2mg·L-1;下胚轴最适分化培养基为MS 0+KT 2mg·L-1,再生苗最佳生根培养基为1/2MS+IAA 0.1mg·L-1,且下胚轴的分化效率高于子叶。     

紫花苜蓿子叶的高频离体再生体系的建立与优化

以东北地区农艺性状优良的不同品种紫花苜蓿的子叶为材料,研究了不同培养基和不同配比对紫花苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,最佳胚型愈伤组织诱导培养基为MS+2 mg/L 2,4-D+0.5mg/L KT;最佳分化培养基为UM+1.2 mg/L KT;不同基因型在愈伤诱导率上差异显著,其中公农5号表现最佳。紫花苜蓿的高频再生体系的建立,为下一步紫花苜蓿的遗传转化工作打下了坚实的基础。     

油茶优良无性系幼胚和子叶高效再生体系的建立

以油茶(Camellia oleifera Abel.)优良无性系的幼胚和子叶为外植体,采用正交试验设计方法,研究了基本培养基、IBA、6-BA和NAA等植物激素共4个因素的不同组合对其幼胚再生体系及子叶胚性愈伤组织诱导的影响,并进一步研究了不同植物激素对体细胞胚再生体系的影响。结果表明,植物激素的选择对幼胚再生体系的建立起着关键作用,NAA促进了幼胚再生苗的形成,IBA的添加反而阻碍了该体系的建立;由数据分析综合评定法,得出幼胚再生植株诱导最适培养基的理论值为WPM+2.0mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA;子叶胚性愈伤组织诱导的最适培养基为WPM+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA;子叶胚性愈伤组织的最适分化培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA。     

辣椒子叶离体培养及植株再生体系建立

以10个辣椒品种的子叶为试材,探讨了影响辣椒子叶离体培养及再生的各种因素(子叶外植体的生理年龄、外植体的部位、基本培养基、激素、硝酸银及光照强度等),筛选出辣椒子叶高效芽分化培养基为MS 6-BA 5.0 mg/L IAA 1.0 mg/L AgNO3 4.0 mg/L,平均芽分化率达到90.5%;高效芽伸长培养基为MS 6-BA3.0 mg/L IAA 1.0 mg/L GA32.0 mg/L AgNO34.0 mg/L;生根培养基为1/2 MS IAA 0.2mg/L NAA 0.1 mg/L,建立了辣椒高效再生体系.     

甜瓜子叶节培养高效再生体系建立

对8个甜瓜品种的子叶节进行离体培养,采用3种方法进行诱导,建立了高效的再生体系。其中,启动培养基为MS+BA2.0mg·L-1+IAA1.0mg·L-1,诱导培养基为MS+BA0.5mg·L-1+IAA0.2mg·L-1,通过器官发生途径诱导形成丛生芽,伸长和生根培养基分别为MS+BA0.05mg·L-1+IAA0.02mg·L-1和1/2MS+NAA0.2mg·L-1。以上培养基均含蔗糖35g·L-1,pH5.8。此再生体系每个外植体可获得7.2～12.5个不定芽(>1cm),生根率为91%,驯化成活率大于90%。     

辣椒子叶再生体系及其卡那霉素筛选体系的建立

以中椒2号辣椒为材料,建立了高效的辣椒子叶再生体系和卡那霉素筛选体系。结果表明,最佳的不定芽诱导培养基为MS+BA5.0 mg/L+IAA0.5 mg/L+AgNO36.0 mg/L,最佳的不定芽伸长培养基为MS+BA5.0 mg/L+IAA0.5 mg/L+GA32.0 mg/L+AgNO36.0mg/L,最佳的生根培养基为MS+IAA1.0 mg/L,卡那霉素最终筛选浓度为50 mg/L。     

保加利亚尖辣椒子叶离体组织培养与植株再生的研究

以保加利亚尖椒为试验材料,探索子叶离体组织培养与植株再生体系的建立。结果表明：诱芽率达到100％,不定芽伸长率达83％,生根率达到100％,从不定芽诱导到完整植株获得仅需约60d。     

转基因辣椒离体子叶再生研究

探讨了不同浓度植物高活性制剂LCI、AA、GA3和NAA等对遵椒1号不定芽的诱导、伸长和生根各个阶段的影响。结果表明,最佳不定芽诱导分化培养基为:MS+LC 1.0 mg/L+IAA 0.1 mg/L+ABA 0.3 mg/L+Spm 100μmol/L+AgNO35 mg/L+PD 6 mL/L(pH 5.8~6.0);最佳不定芽伸长培养基为:MS+LC 0.1 mg/L+IAA 0.2 mg/L+GA31.0 mg/L+Spm 100μmol/L+AgNO35 mg/L+PD 6 mL/L(pH 5.8~6.0);最佳生根培养基为:1/2MS+IAA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L(pH 5.8~6.0)。