贵州省部分地区H7亚型禽流感监测与分析

为了解贵州省H7亚型禽流感感染情况,采用HI试验对全省9个地区家禽血清样本进行血清抗体检测,PT-PCR方法对家禽咽-肛拭子、养禽场环境样本和野鸟粪便进行病原核酸检测。结果显示:在1570份家禽血清样本中,H7亚型禽流感血清抗体阳性率为0.45%(7/1570);在350份家禽咽-肛拭子和310份养殖场环境样本中,均未检测出H7亚型禽流感病毒核酸;在160份野鸟粪便中,有1份为H7亚型禽流感病毒核酸阳性,阳性率为0.63%(1/160)。试验提示,在贵州省养禽场中不存在H7亚型禽流感感染,但迁徙野禽中可能存在H7亚型禽流感隐性感染,应当引起重视。     

山东部分地区肉鸭群鸭圆环病毒血清学调查

为了解鸭圆环病毒(DuCV)在山东地区的流行情况,本研究采用已建立的间接ELISA(iELISA)方法对山东省潍坊和泰安两个地区的17个肉鸭场1 130份血清进行DuCV抗体检测。结果显示,肉鸭场的DuCV抗体个体阳性率为2%～78%,平均为29.91%(338/1130),群体阳性率为100%(17/17)。潍坊地区的抗体阳性率(42.81%)明显高于泰安地区(17.73%),显示DuCV在老养殖区鸭群中污染更加严重。     

贵州省H7亚型禽流感病毒感染的血清学和病原学分析

为了解贵州省近几年H7亚型禽流感病毒感染情况,分别采集鸡血清3 031份、卵黄962份、咽-肛拭子1 607份、环境土壤拭子394份及野鸟粪便122份样本共计6 116份,采用血凝抑制试验(HI)和实时荧光定量RT-PCR方法进行H7亚型禽流感病毒特异性抗体和核酸检测。结果显示,在鸡血清和卵黄样本中,H7亚型禽流感表达特异性抗体的阳性率分别为1.2%(37/3 031)和2.3%(22/962);在2 123份鸡咽-肛拭子、环境样本和野鸟粪便中,均未检测出H7亚型禽流感病毒核酸。这些结果表明贵州省家禽、野鸟和环境土壤中尚未发现H7亚型禽流感病毒感染。     

新疆乌鲁木齐市某活禽交易市场禽流感流行病学调查

为了解冬季新疆乌鲁木齐市活禽市场交易禽类及市场外环境中禽流感病毒污染情况及其流行规律,对某交易市场内的鸡、鸭、鹅、鸽等活禽,采集85份活禽全血样本和143份棉拭子样本(103份活禽泄殖腔/咽喉棉拭子、40份环境棉拭子),分别采用血清学和实时荧光定量(rRT-PCR)方法,检测禽流感免疫抗体和禽流感病毒核酸,并对核酸阳性样品进行病毒亚型确定。结果显示:85份全血样本中,H5(Re-11)株免疫抗体合格32份,合格率为37.6%;H5(Re-12)株免疫抗体合格34份,合格率为40%;H7(Re-2)株免疫抗体合格46份,合格率为54.2%。143份棉拭子样本中,禽流感病毒核酸阳性36份,阳性率为25.17%。其中:活禽棉拭子阳性29份,阳性率为28.15%;交易区外环境棉拭子阳性7份,阳性率为17.5%。36份禽流感病毒核酸阳性样本中,H5亚型3份,阳性率为8.33%;H9亚型22份,阳性率为61.11%;未定型11份,阳性率为30.56%。结果表明:该市场交易活禽流感病毒感染率较高,且强制免疫的H5、H7亚型禽流感免疫抗体合格率较低,存在疫情发生和散播风险。结果提示,应加强活禽交易市场的消毒与管理,降低禽流感病毒通过活禽交易市场传播的风险。     

2014—2015年深圳野生鸟类禽流感流行病学监测

为调查深圳野生鸟类的禽流感感染情况,于2014年1月~2015年4月采集了678只野鸟的569份粪便,62份肛门拭子,26份咽肛拭子和21份血样.采用病原分离鉴定法、AIV-Ag(通用型)抗原速测卡胶体金法、荧光RT-PCR试验对样品拭子进行病原学检测.采用血凝抑制实验(HI)对血清样品进行H5N1(Re-4)、H5N1(Re-6)、H5N1(Re-7)、H7、H9等5种血清型AIV抗体检测.结果显示:26份咽肛拭子分离出1株H9N2亚型禽流感病毒,阳性率为3.85%;粪便和拭子样品的抗原检测全部阴性;血清样品中H5(Re-4)阳性数1份,阳性率为9.09%;H9阳性数7份,阳性率为63.64%;未检出H5(Re-6)、H5(Re-7)及H7阳性抗体.     

鸭圆环病毒的PCR鉴定及分子特点分析

本研究采用2对针对鸭圆环病毒(DuCV)的特异性引物,对57份病死鸭病料进行PCR检测,探究了DuCV在病死鸭的感染情况;同时,随机选择2个DuCV阳性的样品进行克隆、序列测定。结果显示,病死鸭中DuCV阳性率为7.0%;同源性分析显示,2株DuCV的核苷酸序列与广西参考株(KC460535)的同源性最高,分别为97.7%、96%。基因进化树分析显示,2株DuCV与德国参考株(AY228555)和广西参考株(KC460532、KC460535)属于同一群,为基因1型。本研究对病死鸭DuCV感染情况的初步调查,补充了其流行病学资料,对肉鸭疫病防控具有一定的参考意义。     

鸭源新城疫病毒、鸭瘟病毒和鸭圆环病毒三重PCR检测方法的建立

为了建立能同时检测鸭源新城疫病毒(DuNDV)、鸭瘟病毒(DPV)和鸭圆环病毒(DuCV)的方法,根据DuNDV、DPV和DuCV基因的保守序列设计了3对特异性引物,预特异扩增DuNDV片段大小为823 bp,DPV为576 bp和DuCV为338 bp.经过反应条件的优化,建立了DuNDV、DPV和DuCV的三重PCR检测方法.该方法特异性好,对鸭的其他病原检测结果为阴性;敏感性高,DuNDV、DPV和DuCV的核酸最低检出限分别为2.59×103、1.12×103、4.67×102拷贝/μL.对180份病料进行检测,结果DuCV阳性10份,阳性率为5.6％;DuNDV阳性1份,阳性率为0.56％.结果表明,建立的多重PCR方法可以应用于DuNDV、DPV和DuCV的临床检测和流行病学调查.     

和田地区规模化鸭场鸭圆环病毒感染情况调查

为明确和田地区鸭圆环病毒(DuCV)在鸭群中的感染情况,通过双重PCR技术对2021年和田地区5个规模化养殖场共100例病、死鸭样品进行鸭圆环病毒检测。对检测出的阳性样品随机挑选4份进行基因测序,并进行序列比较及遗传进化分析。检测结果显示,20%(20/100)样品感染了鸭圆环病毒,且优势流行毒株为DuCV-1;和田流行优势毒株与源自山东的毒株关系最近;DuCV阳性样品中鸭出血病毒、呼长孤病毒感染率略高于DuCV阴性样品。     

宁夏中南部地区牛支原体病原学检测及分离鉴定

为了解宁夏中南部地区牛支原体感染及遗传变异情况,采用PCR方法,对来自宁夏中南部9个县区规模场、屠宰场和交易市场的495份牛鼻拭子样本进行PCR检测及菌株分离鉴定.结果显示:495份样本中,经PCR检出阳性59份,总体阳性率为11.92％,9个县区的阳性率为1.82％～21.82％,规模场、屠宰场、交易市场阳性率分别为...     

我国自然发病鸭群中鸭圆环病毒的流行病学调查

为了解鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)在我国鸭群中的感染状态,从我国养鸭业比较集中的山东、江苏、四川、福建、广东5个省份36个鸭群采集临床有发病表现的343只病、死鸭的病理组织样品,以提取的组织DNA为模板通过特异性斑点杂交和PCR方法检测DuCV的感染情况.结果显示上述5个省份的鸭均检出了DuCV,病、死鸭中DuCV的个体阳性率为81.63%(280/343),群体阳性率为94.44%(34/36).结果表明我国鸭群中已普遍存在DuCV的感染.     

玉林市鸭圆环病毒感染的流行病学调查

为了解广西玉林市鸭圆环病毒( duck circovir-us,DuCV)的流行情况,项目组通过ELISA血清抗体检测的方法对玉林市周边140个规模化鸭场采集的血清样品4200份进行检测,结果显示ELISA抗体检测阳性率为16. 33％( 686/4200 ) ,表明玉林市鸭群存在DUCV隐形感染的可能. 1 样品采集...     

鸭圆环病毒ORF-C1基因的扩增及遗传进化分析

鸭圆环病毒(DuCV)感染能够引起鸭的免疫抑制，引起多种病原的继发性感染，在我国鸭群中广泛流行。为了解DuCV的遗传变异情况，对采自山东、江苏和贵州3个省份的19个鸭场的样品进行了PCR测定，并对DuCV的ORF-C1基因进行测序和遗传进化分析。PCR测定结果显示，19个鸭场中有9个鸭场的样品为DuCV阳性，总体阳性率为47.4%;ORF-C1基因序列测定结果显示，9株DuCV之间的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别为93.4%～100%和82.2%～100%,与NCBI中已公布的DuCV毒株的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别为77.8%～99.5%和71.5%～-99.6%;遗传进化分析显示，9株DuCV全部属于DuCV-1b亚型，其中有7株在同一分支上，与D11-JW-001等韩国毒株遗传距离较近，另外2株则与山东、广西的毒株遗传距离较近；此外，与已公布的毒株相比，9株DuCV都在158位发生了氨基酸突变，由E/D变为L/P。上述结果表明，DuCV-1仍然为我国鸭群中的优势流行基因型，但病毒的基因也在不断地发生变异，应该对其进行持续监测。     

2013年广州市活禽农贸市场禽流感流行病学调查

[目的]了解广州市活禽农贸市场禽流感病毒的分布和流行情况,科学制定禽流感的防控措施,于2013年3-11月对广州市91个次的活禽农贸市场进行了禽流感监测,[方法]调查共采集了1064份活禽口咽/泄殖腔棉拭子和环境拭子,并用荧光RT-PCR方法进行了检测,[结果]发现通用型、H7N9和H9亚型禽流感阳性率分别为46.05%、0.09%和19.83%。其中,鸭棉拭子样品中通用型禽流感阳性率最高,达到了58.14%,其次为鸡棉拭子、鹅棉拭子和环境棉拭子样品,分别为46.28%、42.85%和35.19%;H9亚型禽流感阳性率最高的是鸡源样品,达到了28.88%,其次为鸭棉拭子和环境棉拭子样品,分别为12.56%和5.58%;仅从1份鸡棉拭子样品中检测到H7N9亚型禽流感病毒阳性。[结论]本次调查显示,广州地区活禽农贸市场存在较为严重的禽流感污染情况,需立即采取有效的防控措施以降低本地区发生禽流感以及人感染禽流感的风险。     

山东省部分地区鸭Ⅰ群禽腺病毒的检测与分析

为了解Ⅰ群禽腺病毒在山东省种鸭场中的流行及变异情况,从而为今后调整综合防治措施提供依据,对定期从山东省部分大型种鸭场采集的鸭胚、雏鸭及种鸭样品,进行病毒分离和PCR鉴定。本研究共采集鸭胚461枚,检出阳性137枚,阳性率为37.5%,最早可从8日龄鸭胚中检测到阳性;采集1日龄雏鸭样品120份,检出阳性41份,阳性率为34.2%;从德州市某种鸭场采集120份健康鸭泄殖腔棉拭子,检出阳性34份,阳性率为28.3%。对分离到的4株Ⅰ群禽腺病毒进行基因序列分析发现:1株为血清1型,3株为血清4型;分离株与近年来我国大陆地区的其他分离株具有极高的同源性,但在Hexon基因区域有19个核苷酸位点出现突变。检测结果表明:Ⅰ群禽腺病毒在山东省部分地区鸭群中有较高的流行率,其中以血清4型为主;虽然分离株与其他毒株同源性较高,但存在变异风险;我国种鸭场存在Ⅰ群禽腺病毒隐形感染情况,有垂直传播风险,应引起高度重视。     

鸭圆环病毒PCR检测方法的建立与应用

鸭圆环病毒病是由鸭圆环病毒(duck circovirus,DuCV)引起的一种重要免疫抑制病,影响着我国养鸭业的发展。为建立针对DuCV的PCR快速检测方法,对GenBank中登录的DuCV全基因组序列进行遗传进化分析,通过对两种基因型的DuCV全基因组序列进行比对,在共同保守区筛选出1对引物,建立了可以同时检测DuCV两种基因型的PCR快速检测方法,并对该方法的敏感性和特异性进行评价。结果显示,该方法具有良好的敏感性,检测下限达1.0 fg;特异性良好,对其他常见鸭病毒核酸检测均为阴性;利用该方法对20份临床发病鸭样品进行检测,发现有6份呈DuCV阳性,序列分析表明均属于DuCV-1。该PCR检测方法的建立为鸭圆环病毒病的快速诊断和防控提供了重要手段。     

生猪屠宰过程沙门菌污染状况及其耐药性传播风险

本试验旨在通过监测沙门菌在生猪屠宰各环节和猪肉产品中的污染分布和耐药状况，揭示沙门菌在猪肉生产过程中的传播及耐药情况。选取山东省5个代表性生猪屠宰场为风险观测点，采集肛拭子、屠宰环境拭子、水样品和胴体拭子共552份，参照食品安全国家标准和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对其中沙门菌进行分离培养和鉴定；参照微量肉汤稀释法检测其药物敏感性；利用多位点序列分型(MLST)鉴定沙门菌的基因型。结果显示，共分离获得58株沙门菌，总阳性检出率为10.5%(58/552);中小型屠宰场(15.6%,33/212)较大型屠宰场(7.4%,25/340)沙门菌污染严重；屠宰环节预冷前样品检出率最高，为26.7%(8/30);不同类型样品中肛拭子样品的检出率最高，为15.1%(16/106)。耐药性检测结果显示，58株沙门菌对氨苄西林的耐药率最高(96.6%,56/58),多重耐药率为96.6%(56/58);中小型屠宰场分离株较大型屠宰场的整体耐药严重，胴体拭子(46.4%,26/56)和肛拭子(28.6%,16/56)分离株的多重耐药率高于环境拭子(25.0%,14/56)...     

山东省青岛市猫病毒性鼻气管炎流行情况调查

为了解山东省青岛市猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)的流行情况,2019年6月至2021年6月共采集猫眼鼻拭子样本218份,提取样本DNA后利用PCR方法进行FHV-1核酸检测,共检出阳性样本22份,阳性率为10.1%(22/218)。宠物救助站猫的FHV-1阳性率(16.7%)略高于其他来源猫,2~6月龄幼猫的FHV-1阳性率(13.6%)略高于成年猫(7.0%),成年公猫阳性率(7.3%)稍高于成年母猫(6.7%),但各组间均无显著性差异(P>0.05)。对2021年3月采集的60份猫血清进行了FHV-1中和抗体检测,共检出阳性样本40份,抗体阳性率为66.7%。结果表明,青岛市猫群中存在一定的FHV-1流行,抗体保护水平不高,应加快国产FHV-1相关疫苗的研制,及时对猫进行免疫预防。     

2020—2021年山东省部分地区鸭圆环病毒全基因组遗传进化及特征分析

为了解山东地区鸭圆环病毒(DuCV)流行状况及基因组特征,对山东济宁、潍坊等地区的病鸭病料进行DuCV检测及鉴定,DuCV阳性样品进行全基因组扩增,并进行遗传进化和基因组特征分析。结果显示:成功获得了14株DuCV的全基因组序列,全长为1 993～1 995 bp,遗传进化显示这些毒株与德国株AY22855处同一进化分支,均属于DuCV基因Ⅰ型,但不同年份之间已形成独立小分支且彼此之间同源性不高;Cap和ORF3蛋白氨基酸序列分析发现,2020年与2021年监测毒株Cap蛋白氨基酸同源性为96.7%,提示病毒变异速度和程度较高,增加了防控的难度。研究为山东地区鸭圆环病毒病的防控提供了重要数据支撑。     

2016—2019年广西玉林市送检病死鸭的鸭圆环病毒检测

为了解广西玉林市鸭圆环病毒（duck circovirus,DuCV）感染情况,通过PCR方法,对2016—2019年玉林市629个养鸭场送检的856份病死鸭样品进行DuCV病原检测,并对检测结果进行不同月份、不同日龄以及混合感染情况统计分析。结果显示：2016—2019年玉林市送检病死鸭的DuCV检出率为10.63%（91/856）,其中20日龄以内、21~65日龄、65日龄以上的检出率分别为7.76%、15.38%、11.32%;2019年（14.52%）和2018年（16.33%）的检出率高于2017年（5.82%）和2016年（2.38%）;3—5月（13.15%）和上年12月—2月（11.88%）的检出率高于6—8月（4.35%）和9—11月（8.56%）;95.60%（87/91）的DuCV阳性样品中检出副黏病毒、禽多杀性巴氏杆菌、鸭疫里默氏杆菌。结果表明：玉林市养鸭场中存在一定水平的DuCV流行,春冬季DuCV感染率较高,各日龄段鸭均易感,DuCV易与其他病毒和细菌发生混合感染。结果提示,要加强春冬季节DuCV感染的预防,采取综合防控措施,控制混合感染。     

深圳地区救护野鸟中禽流感的流行病学监测

为调查深圳地区救护野鸟中禽流感感染状况,于2015年4月至2015年5月从深圳市野生动物救护中心放养区采集了野鸟肛拭子77份、野鸟血清11份,利用RT-PCR方法对拭子样品进行了AIV抗原检测;利用血凝抑制实验(HI)对血清样品进行H5N1(Re-4)、H5N1(Re-6)、H5N1(Re-7)、H7、H9等5种血清型AIV抗体检测。结果显示:拭子样品的AIV-Ag抗原检测全部阴性;而血清样品中H5(Re-4)阳性数1份,阳性率为1/11;H9阳性数1份,阳性率为1/11;未检出H5(Re-6)、H5(Re-7)及H7阳性抗体。