麝鼠的活体取香技术

麝鼠香是成年雄性麝鼠香腺囊中的分泌物。麝鼠香的抗炎、减慢心率、降低血压及负性肌力等药理作用与天然麝香相似,海具有降低心肌耗氧量及促进动物生长等活性。在医药及日化工业上既有重要经济价值,其应用前景非常广阔。人工活体取香的麝鼠成队饲养在水封洞、全封闭楼式的圈舍内,繁殖期每只日喂精料50g。粗饲料为各种鲜嫩的水草、柳树及杨树枝等,约每日350g～400g。活体取香的方法是:取香前先自制活体取香的保定器,用电焊网制成笼形结构,纵长为25cm,前端直径为6.5cm,后端直径为8cm,中间直径为7.5cm。使麝鼠头朝前,自行爬入保定器内保定。取…     

麝鼠香腺Elovl1基因生物信息学分析及表达研究

【目的】 测定麝鼠超长链脂肪酸延伸酶1(elongase of verylong chain fatty acid 1,Elovl1)基因序列并进行生物信息学分析,探讨其在麝鼠香腺发育和泌香过程中的作用。【方法】 使用TRIzol法提取成年雄性麝鼠香腺总RNA,采用转录组测序技术获得麝鼠香腺Elovl1基因序列并测序;在GenBank数据库中下载啮齿目不同物种的Elovl1基因及其多转录本CDS序列并构建系统进化树;通过在线工具对Elovl1基因编码蛋白的理化性质及结构进行预测与分析;利用实时荧光定量PCR技术分析成年雄性麝鼠香腺发育周期内香腺组织中Elovl1基因的表达水平。【结果】 Elovl1基因在麝鼠香腺中表达2个转录本,能编码2个不同的蛋白,分别由313和279个氨基酸组成。Elovl1基因2个转录本在2~9月末的麝鼠香腺中均有表达,且表达量整体呈先上升后下降的趋势。Elovl1基因编码的2个蛋白均为稳定的亲脂性、非分泌蛋白,具有7个跨膜螺旋区,亚细胞定位均主要位于内质网。在啮齿目动物中,Elovl1基因进化与物种进化基本一致,仓鼠科与鼠科亲缘关系较近,麝鼠与水鼠平亲缘关系最近;同一物种Elovl1基因的不同转录本间相对保守,均按物种聚在一起且置信值普遍较高,旱獭例外。【结论】 Elovl1基因表达规律与麝鼠香腺的发育、萎缩及泌香周期相吻合,提示Elovl1与麝鼠香分泌相关,并参与了香腺细胞发育。     

麝鼠的活体取香技术

麝鼠香是成年雄性麝鼠香腺囊中的分泌物。麝鼠香的抗炎、减慢心率、降低血压及负性肌力等药理作用与天然麝香相似，还具有降低心肌耗氧量及促进动物生长等活性。在医药及日化工业上具有重要经济价值，其应用前景非常广阔。     

麝鼠繁殖期与非繁殖期PIK3IP1基因表达分析

麝鼠(Ondatra zibethicus)是一种重要的经济动物,繁殖期时香腺快速发育并分泌麝鼠香,但其香腺发育和泌香调控机制至今尚未阐明。磷脂酰肌醇3激酶相互作用蛋白1(PI3Kinteracting protein1,PIK3IP1)是PI3K/AKT通路重要的调控蛋白。本研究通过总RNA提取、反转录和qPCR等技术,研究PIK3IP1基因在麝鼠繁殖期与非繁殖期香腺、睾丸、心、肺、肝、肾、肌肉等组织中mRNA的表达情况,并分析表达水平的差异。结果显示,PIK3IP1基因在繁殖期和非繁殖期7个组织中均有表达。在香腺、睾丸、肺、肝中,繁殖期表达量高于非繁殖期,其中香腺组织表达差异极显著(P0.01)。其他组织无明显差异(P≥0.05)。因此推测PIK3IP1基因可能通过PI3K/AKT信号通路在香腺发育和泌香过程中起到了重要调控作用。     

麝鼠TNFRSF13 C和TNFRSF4基因表达分析

麝鼠(Ondatra zibethicus)是一种珍贵的毛皮动物和香料动物,在繁殖季节能分泌麝鼠香,而其香腺泌香机制尚不清楚。TNFRSF13 C(BAFF受体)和TNFRSF4(OX40受体)基因是TNF受体超家族的成员,参与免疫调节、炎症、凋亡,还与自身免疫病和多种器官的形成有关。本研究通过RT-qPCR技术检测繁殖期与非繁殖期麝鼠的心、肝、肺、肾、睾丸、肌肉及香腺中TNFRSF13 C和TNFRSF4基因的转录水平,结果显示两者在繁殖期和非繁殖期7个组织中均有表达,在繁殖期麝鼠的心、肝、肺、肾、睾丸、香腺中表达水平普遍高于非繁殖期,并且差异显著(P≤0.05),而在肌肉中无明显表达差异(P>0.5)。由此推测TNFRSF13 C和TNFRSF4基因参与了麝鼠心、肝、肺、肾、睾丸和香腺发育。     

贵州从江香猪PDK4、FGF10基因的克隆及组织表达分析

试验旨在克隆获得PDK4、FGF10基因,并研究大白猪与从江香猪不同组织中PDK4、FGF10基因mRNA的表达差异。采用RT-PCR分别克隆从江香猪PDK4、FGF10基因并进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR技术检测PDK4、FGF10基因在大白猪和从江香猪不同组织中mRNA的相对表达量。结果显示,从江香猪PDK4基因的编码区全长1 224 bp,编码407个氨基酸;FGF10基因的编码区全长636 bp,编码211个氨基酸。经BLAST软件进行同源性比对,发现从江香猪PDK4基因与羊、马、人的核苷酸序列同源性分别为93%、92%和91%;FGF10基因与羊、牛、人、鼠的核苷酸序列同源性分别为94%、93%、93%和90%。由PDK4基因系统进化树可知,从江香猪与牛、绵羊亲缘关系较近;由FGF10基因系统进化树可知,从江香猪与绵羊、牛、人、猕猴亲缘关系较近,与小鼠和鸡亲缘关系较远。实时荧光定量PCR结果显示,在从江香猪不同组织中,PDK4基因在肾脏中的表达量最高,在胃和脂肪中表达量较高,FGF10基因在胃中表达量最高,在肾脏和脂肪中表达量较高,两个基因在背最长肌中的表达量均最低;在大白猪的不同组织中,PDK4、FGF10基因在脂肪中的表达量均最高,PDK4基因在背最长肌中的表达量最低,而FGF10基因在心脏中表达量最低。本试验成功克隆了从江香猪PDK4、FGF10基因,并检测了其在大白猪与从江香猪不同组织中的表达,为进一步研究PDK4、FGF10基因在脂质代谢及脂肪沉积等方面的调控作用提供科学依据。     

褪黑素对早期断奶羔羊空肠抗氧化蛋白及相关基因表达的影响

为探究褪黑素(MT)影响早期断奶羔羊抗氧化能力的分子机制,试验选取7日龄以内体重(3.53±0.48) kg的健康湖羊羔羊90只,分为5组(公母各半)：ER(0 mg/kg BW MT,不断奶)、EW(0 mg/kg BW MT,断奶)、MT1(1 mg/kg BW MT断奶)、MT5(5 mg/kg BW MT,断奶)、MT10(10 mg/kg BW MT,断奶)。每个处理3个重复,每个重复6只羔羊。自羔羊21日龄开始,每天18:00以胶囊形式将褪黑素放置口送服。除ER组随母哺乳外,其余组羔羊均在28日龄通过前期饲喂基础日粮(开食料)实施早期断奶。在羔羊35日龄和42日龄每组随机选取3只进行屠宰,取羔羊空肠中段组织,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测空肠组织中谷胱甘肽过氧化物酶-1(GPX-1)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽巯基转移酶(GSTP、GSTA)、超氧化物歧化酶(CuZnSOD)的mRNA相对表达量,利用WesternBlot方法对CAT、SOD、GPX的蛋白质表达量进行测定。结果表明：添加1 mg/kg BW MT显著提高了断奶羔羊21～42 d的开食料...     

FGF10基因调节山羊成肌细胞分化相关基因表达的研究

为了阐明FGF10基因对山羊成肌细胞分化的影响,试验以简州大耳山羊羔羊的成肌细胞为研究对象,体外培养并诱导分化为肌管,采用实时荧光定量PCR技术检测FGF10基因在诱导分化过程中的表达水平;同时采用腺病毒过表达和SiRNA干扰技术、形态学观察和实时荧光定量PCR技术检测FGF10基因功能获得和缺失对成肌细胞中肌管形成的...     

FGF10基因调节山羊成肌细胞分化相关基因表达的研究

为了阐明FGF10基因对山羊成肌细胞分化的影响,试验以简州大耳山羊羔羊的成肌细胞为研究对象,体外培养并诱导分化为肌管,采用实时荧光定量PCR技术检测FGF10基因在诱导分化过程中的表达水平;同时采用腺病毒过表达和SiRNA干扰技术、形态学观察和实时荧光定量PCR技术检测FGF10基因功能获得和缺失对成肌细胞中肌管形成的影响,以及分化相关基因MyoD1、Myf5、Myf6、MyoG的表达情况。结果表明:成肌细胞在分化第2～4天时,出现大量肌管,诱导分化成功。FGF10基因随着成肌细胞分化时间的延长呈现先升高后下降的趋势,且在诱导分化第2天时极显著高于分化前(P<0.01)。过表达FGF10基因时成肌细胞中的肌管形成减少,极显著下调MyoD1(P<0.01)和显著下调Myf5(P<0.05)基因的相对表达水平;而干扰FGF10基因时成肌细胞中的肌管形成增加,极显著上调MyoG(P<0.01)和显著上调Myf5(P<0.05)基因的相对表达水平。说明FGF10基因可能是山羊成肌细胞分化的负调控因子。     

冬季补加光照对麝鼠性腺的影响

本论验采用人工补加光照的方法,观测麝鼠非繁殖期(冬季)的性腺变化,为在一年中增加繁殖胎次奠定了理论基础.试验结果表明;冬季以递增方式每日补加光照3小时20分至5小时39分,可明显地促使公鼠睾丸体积增大,重量增加,曲精细管的管腔中精子数目增多;同时也明显地促使育成母鼠卵巢体积增大,重量增加,卵泡发育,试验后期母鼠有明显的发情表现,而对照组母鼠则无此现象.     

延边黄牛FGF14基因多态性及其对生长性状的影响

本研究旨在探索延边黄牛成纤维细胞生长因子14（fibroblast growth factor 14,FGF14）第3外显子多态性及其对生长性状的影响。应用DNA直接测序法对延边黄牛FGF14基因第3外显子进行测序分析,利用高分辨率熔解曲线HRM分型技术对FGF14基因进行分型检测,探究FGF14基因不同基因型与16和24月龄延边黄牛生长性状的关联性,并进行遗传统计学分析。结果显示,在FGF14基因的631 947 bp处检测到1处A>G突变,有2个等位基因：A和G,存在3种基因型：AA、AG和GG。χ²检验结果表明,FGF14基因的基因型频率和等位基因频率在16和24月龄延边黄牛群体中的分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律（P>0.05）。多态信息含量（PIC）分析表明,FGF14基因在这2个群体中均处于中度多态（0.25 < PIC < 0.5）。与生长性状关联分析结果显示,FGF14基因不同基因型对16月龄延边黄牛背高和尻长均具有显著影响（P<0.05）,对24月龄延边黄牛体高、体重、十字部高均具有显著影响（P<0.05）。综上所述,推测FGF14基因对延边黄牛生长发育有一定影响,为后续延边黄牛肉质性状的现代分子育种选育工作提供参考。     

日粮的不同饲养水平对麝鼠繁殖力的影响

本试验选用自繁种鼠14对,分甲、乙两组进行精料对比试验.试验结果表明:繁殖种鼠的精料喂量由50克减少至30克后,其繁殖力并未受到影响(t检验差异不显著);幼鼠断奶时(喂精料30克组)体重稍小,但3～4日龄以后无差别.     

窝室与激素对麝鼠繁殖率的影响

<正> 麝鼠养殖业近几年来发展较快,但在由野生变为人工养殖方面,其生态环境和营养条件均发生了变化,一些饲养户由于饲养不科学,造成了繁殖率很低.为了探讨提高笼养麝鼠繁殖率途径.我们采用生态学的观点和方法,模拟自然环境,同时运用繁殖技术来扩大鼠群,在窝舍设计与激素应用方面做了试验,现初报如下:     

重组人生长激素对幼麝鼠性腺发育影响的研究

本文探索了重组人生长激素（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｇｒｏｗｔｈｈｏｒｍｏｎｅ,ｒｅｈＧＨ）对幼麝鼠生殖系统发育的影响。结果表明,ｒｅｈＧＨ使试验组麝鼠睾丸间质细胞和精原细胞数量明显增加,曲细精管内的初级精母细胞数量（５６７５,５８５０和１０５０个／标准口径曲细精管,Ｐ＜００１）显著增加;试验组卵巢中生长卵泡数量较多,而且有发育后期的卵泡,对照组卵巢中则没有这种卵泡。     

FGF20及其受体FGFR2和FGFR3在小鼠毛囊形成期的定位及表达

旨在研究成纤维细胞生长因子(FGF20)及受体FGFR2和FGFR3在小鼠胚胎期毛囊形成期的表达情况,了解FGF20及受体FGFR2和FG-FR3在小鼠毛囊形成期的作用。采用实时荧光定量PCR、Western blot和免疫组织化学技术检测胚胎期13 d (E13)至18 d (E18)小鼠背部皮肤中FGF20、FGFR2和FGFR3 mRNA及蛋白的差异表达。免疫组化结果显示,FGF20蛋白和FGFR3蛋白E13在表层细胞微弱表达,E14主要表达在表层细胞,且在基底层细胞也有微弱表达,E15主要表达在基板和表层细胞,E16强表达在毛钉与表层细胞,E17和E18主要表达在表层细胞和未成熟的毛囊;FGFR2蛋白在表层细胞、基底层细胞、基板、毛钉、未成熟的毛囊等处均有表达,且E18强表达在表层细胞和未成熟毛囊;RT-PCR及Western blot数据分析结果显示:FGF20 mRNA及蛋白在E16相对表达量最高;FGFR2 mRNA及蛋白在E13相对表达量最低,E18相对表达量最高;FGFR3 mRNA及蛋白表达趋势和FGF20相似。研究结果提示,在毛囊形成期,FGF20可能通过与FGFR3结合从而参与毛囊的诱导和激活,促进毛囊形成并决定其生长方向。FGFR2可能在毛囊形成过程调控表层细胞增殖,促进毛囊形成,诱导毛囊进入第一生长周期。     

外源褪黑素对鹿茸软骨细胞生长发育的影响

试验旨在探讨褪黑素对体外培养的鹿茸软骨细胞增殖、周期及凋亡的影响。利用甲苯胺蓝、茜素红S、阿利新蓝染色鉴定软骨细胞,采用外源添加褪黑素的方法,用不同浓度（0、400、800、1 200、1 600和2 000 pg/mL）、不同时间（24、48和72 h）处理鹿茸软骨细胞,CCK-8法检测细胞增殖。选取800 pg/mL褪黑素处理软骨细胞24 h,利用流式细胞仪检测细胞周期的分布及细胞凋亡情况,采用ELISA试剂盒检测细胞培养液中睾酮含量。结果显示,经不同浓度的褪黑素处理鹿茸软骨细胞不同时间后,800 pg/mL褪黑素处理鹿茸软骨细胞24 h细胞活力极显著增加（P<0.01）。软骨细胞经褪黑素处理后,与对照组相比,褪黑素处理组细胞G1期比例显著降低（P<0.05）;G2期比例极显著增加（P<0.01）,细胞被阻滞在G2期;褪黑素处理组细胞早期凋亡率无显著变化（P>0.05）,晚期凋亡率显著下降（P<0.05）;ELISA检测睾酮分泌水平均显著上升（P<0.05）。综上,外源添加800 pg/mL褪黑素可以促进鹿茸软骨细胞的增殖,抑制软骨细胞的晚期凋亡,促进睾酮的分泌;以上结果可为阐明褪黑素参与鹿茸生长发育机制提供参考。