猪细小病毒分子生物学及防制研究进展

猪细小病毒(porcine parvovirus，PPV)是目前危害养猪业的一种严重的繁殖障碍性疾病．综述了PPV生物学特性、基因组结构和诊断技术及疫苗研制等方面的研究进展。     

猪细小病毒及其鉴别诊断研究

猪细小病毒是全世界猪群繁殖障碍最常见的病原之一。本病于1967年在英国报道以来，目前已广泛流行于世界各地(见表1)。我国于80年代初开始研究此病，中国兽药监察所1982年在国内率先分离到该病毒。相关统计资料显示猪细小病毒病已在我国普遍存在和流行(见表2)。     

猪细小病毒SY-99株VP2基因的序列分析

克隆并测定猪细小病毒SY－99株VP2基因，与NADL－2（4973）株、NADL－2（5075）株、Kresse株和US－1株VP2基因核苷酸序列及其编码的氨基酸序列进行比较与分析，发现PPV SY－99株与Kresse株VP2基因核苷酸和氨基酸同一性最高，推测SY－99株可能为一强毒株。     

猪细小病毒病的研究进展

猪细小病毒病是由猪细小病毒（PorcineParvovirus．PPV）感染引起以母猪繁殖障碍为主要特征的病毒性传染病,其特征是母猪怀孕前期感染该病毒后,经胎盘使胚胎或胎儿受到侵袭,引起母猪流产、死胎死亡、胎儿畸形、胎儿木乃伊化及不孕等,同时还可引起仔猪的皮炎和腹泻。     

湖北省猪细小病毒病流行的调查

笔者自 １９９１ 年以来对湖北省不同地理环境的 １２ 个市（县）和国营农场共２１ 个集约化养猪场的２４７８ 胎妊娠母猪, 进行了猪细小病毒流行的调查研究。其发生繁殖障碍综合征的 １０７１ 胎,占 ４３９％ 。在 ２４７８ 胎中,共产仔 ２７７９９ 头;共死仔 ６６８０ 头,占产仔总数的 ２４％ 。在 １０７１ 胎中,共抽样 ４０７ 头份血清进行猪细小病毒（ Ｐ Ｐ Ｖ）、衣原体（ Ｃｐ）、布氏杆菌（ Ｂｒ）及乙型脑炎病毒（ Ｊ Ｅ Ｖ）的血清学检查。其中,猪细小病毒（ Ｐ Ｐ Ｖ）抗体阳性反应高达８４８％ 。研究结果表明我省繁殖障碍综合征的主要原因是猪细小病毒感染。至今,我们没发现布氏杆菌病。对此,笔者建议湖北省应根据实际情况,将防制繁殖障碍综合征的主要对象从布氏杆菌病转移到猪细小 病毒病。制定和执行严格的兽医卫生管理制度是当务之急 ,并建立猪群中定期血清抗体监测制度。要努力改善生态环境,建立防疫系统工程（即科学的、立体的及全方位的防疫体系）。     

猪细小病毒病的研究进展

<正>猪细小病毒病是由猪细小病毒(PorcineParvovirus.PPV)感染引起以母猪繁殖障碍为主要特征的病毒性传染病,其特征是母猪怀孕前期感染该病毒后,经胎盘使胚胎或胎儿受到侵袭,引起母猪流产、死胎死亡、胎儿畸形、胎儿木乃伊化及不孕等,同时还可引起仔猪的皮炎和腹泻。1967年Cartwright等首次分离出PPV后,该病在世界范围内广泛传播和流行。1982年,中国兽药监察所在国内率先分离到PPV,潘雪珠等学者分别在黑龙江、上海、四川、广东、河北、天津等省(市)分     

不同毒株猪细小病毒VP2基因的克隆与序列分析

应用PCR扩增了猪细小病毒NJ-1株、NJ-2株、7909株和Vaccine株的VP2基因,分别克隆于pGEM-TEasy载体中,测定其核苷酸序列,并推导出相应的氨基酸序列,对其核苷酸和氨基酸序列进行分析和同源性比较。所测4个序列中,NJ-1株、NJ-2株和7909株序列均为1437bp,共编码479个氨基酸;而Vaccine序列为657bp,比其他毒株缺失780bp,共编码219个氨基酸。将所得4个序列与GenBank中NADL-2株、Kresse株、China株及VR-1株相应的核苷酸及氨基酸进行同源性比较,发现其核苷酸和氨基酸的同源性分别在97.7%~99.9%和97.2%~99.2%之间,具有高度同源性;通过绘制系统进化树可知,分离自国内的China株、NJ-1株、NJ-2株、7909株及Vaccine株亲缘性最为相近,与其他毒株的亲缘关系较远。     

SYBR Green Ⅰ实时PCR对猪细小病毒体外复制动态分析

根据已经发表的猪细小病毒（PPV）的VP2基因序列,设计2对特异性引物,建立了检测PPV的SYBR GreenⅠ实时PCR方法。该方法最小检出量为12个PPV拷贝。模板稀释度在108范围内呈良好的线性关系,与猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、乙型脑炎病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病病毒无交叉反应。应用本方法对PPV在体外感染细胞后的复制动态进行了观察,并绘制了病毒的体外增殖曲线。数据换算为每瓶中细胞内、外病毒拷贝数,结果显示细胞外病毒含量在接毒初始的36h逐渐下降,随后开始逐步增加;接毒后84h培养液中的病毒含量（1.739×1010拷贝）逐渐超过细胞内的病毒含量（1.321×1010拷贝）;在接毒后108h培养液中病毒含量达到峰值（7.626×1010拷贝）,随即病毒含量开始快速下降。细胞内病毒粒子在接毒后24h内为对数增长期,然后为缓慢增长期,至接种后72h达到复制峰值（1.425×1010拷贝）,并维持至108h。与病毒复制动态变化相对应的细胞病变是从细胞聚集、开始形成空斑到约80%的细胞病变产生,108h之后随着细胞的大量死亡,细胞内、外病毒数量都开始急剧减少。     

猪细小病毒VP2基因的克隆、测序与原核表达

利用PCR技术从猪细小病毒的RF DNA模板中扩增了含有VP2全基因的2.0kb的基因片段，将PCR产物克隆至pMD18-T载体，利用双脱氧末端终止法测定了VP2全基因的核苷酸序列。将所得的核心苷酸序列和推导的氨基酸序列分别与GenBank中的相应序列进行同源性比较，同源性均在99%以上，从而说明该蛋白的碱基序列和氨基酸序列均具有高度的保守性。将VP2全基因分别克隆入原核表达载体pET15(b)、pET17(b)和pET28(b)构建成表达质粒pET15bVP2、pET17bVP2和pET28bVP2；将含有VP2基因起始位点至EcoRⅠ切点间的0.8kb片段克隆入pET17(b)中构建成表达质粒pET17bVP2f。利用上述四种质粒转化大肠杆菌BL21，IPTG诱导后SDS-PAGE检测表达情况，结果发现pET17bVP2f质粒在45kD处有一特异性表达带，而其它几种质粒均未看到特异性表达带，推测VP2基因3‘端的某些结构可能对VP2全基因的表达有一定影响。这一结果对研究VP2基因的结构与功能具有重要意义。     

我国10株猪细小病毒7型全基因组遗传与重组分析

猪细小病毒7型(porcine parvovirus 7,PPV-7)是2016年首次从美国猪群发现和鉴定的新的猪细小病毒。为进一步了解PPV-7的分子流行病学特征,采用分段扩增的方法对来自我国不同省份的10份PPV-7阳性样品进行全基因组扩增和测序,并利用DNAStar、MEGA等软件对这10株PPV-7流行毒株进行分子遗传和重组分析。结果表明,10株PPV-7流行毒株与PPV-7参考毒株的核苷酸序列同源性为92.2%～95.9%,与其他同属的田鼠细小病毒2(KX272741)等参考毒株的同源性为46.1%～50.8%,与细小病毒亚科其他属参考毒株的同源性为29.4%～33.1%;因此作者建议重新将PPV-7归于一个新的病毒属。用RADP软件进一步分析PPV-7流行毒株重组时发现,不同流行毒株的重组位点和父系病毒的来源均不相同,表明这些流行毒株仍在不断发生变异和重组,且这种变异具有不确定性。这无疑增加了PPV-7致病性增强的风险,提示我们应持续重视和关注PPV-7的分子流行病学监测。     

猪细小病毒研究进展

猪细小病毒（PPV）是Mayr和Mahnel于1966年在用猪肾原代细胞进行猪瘟病毒组织培养时发现的〔1〕,是引起母猪繁殖障碍的主要病原体之一,其特征是母猪孕前期受到感染,经胎盘使胚胎或胎儿受到侵袭,引起初产母猪流产、胚胎死亡、胎儿畸形、胎儿木乃伊化及不孕等,同时还可引起仔猪的皮炎和腹泻。     

猪细小病毒的研究进展

猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是一种自主型细小病毒,是引起母猪产畸形胎的主要因素之一.通常头胎怀孕母猪感染PPV之后可引起繁殖障碍,主要表现为流产、不孕、产死胎和木乃伊胎等,给养猪业带来重大的经济损失.PPV、猪圆环病毒(PCV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)一直是猪病研究的热点,最近研究发现PPV在猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)中扮演着重要角色.     

猪细小病毒病流行的调查与防疫研究

笔者对安徽省宣城市不同地理环境的6个市(县)共21个集约化养猪场的1 520头妊娠母猪,进行了猪细小病毒病流行的调查研究.其中,发生繁殖障碍综合征的猪671头,占44.1%.1 520头妊娠母猪中,共产仔7 799头,其中,死仔猪1 530头,占产仔总数的19.6%.在671头繁殖障碍综合征的妊娠母猪中,共抽样207头份血清进行猪细小病毒(PPV)、衣原体(Cp)、布鲁氏杆菌(Br)及乙型脑炎病毒(JEV)的血清学检查.其中,猪细小病毒抗体阳性反应高达79.8%.研究结果表明,该市繁殖障碍综合征的主要原因是猪细小病毒感染.因此,应将防制繁殖障碍综合征的主要对象从布鲁氏杆菌病转移到猪细小病毒病,并建立猪群中定期血清抗体监测制度,加强猪细小病毒病的流行防疫工作.     

猪细小病毒弱毒冻干疫苗的检测报告

猪细小病毒病是引起母猪繁殖障碍的主要病因之一 ,给养猪业造成严重的经济损失。我所研制成功的猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗已被全国各地的养猪场广泛应用 ,取得了良好的社会效益和经济效益。但是随着当今养猪业规模化和集约化的发展 ,仍十分需要猪细小病毒弱毒冻干疫苗 ,而且冻干疫苗拥有保存时间长、运输方便、生产工艺简单、免疫剂量小、成本相对比较低等优点 ,因此课题组又研制了猪细小病毒弱毒冻干疫苗 ,经过实验室的检测 ,取得了令人满意的结果。本文就检测试验结果报道如下 :1　材料和方法1 .1 　猪睾丸 (ＳＴ)传代细胞。ＳＴ细胞的…     

表达猪细小病毒VP2基因的重组伪狂犬病病毒构建及其免疫原性

猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)和伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)均可引起母猪的繁殖障碍疾病。本试验以PRV基因工程弱毒株rPRVSMX为载体,构建了表达PPV流行毒株VP2基因的重组PRV(rPRVSMX-VP2)。Western blot和IFA试验均证明了重组病毒在细胞中成功表达了VP2蛋白。动物试验结果证明重组病毒可以诱导猪体产生特异性的PPV抗体,首免后40 d血凝抑制抗体(HI)为1∶192±73.9,虽然低于PPV商品化灭活疫苗免疫后所产生的HI抗体,但此时免疫系统被认为是激活的水平;重组病毒诱导产生的PRV抗体与载体毒株rPRVSMX诱导产生的抗体相当。由此可见该重组毒株经过优化后,可以作为二联疫苗的候选毒株防控猪伪狂犬病和细小病毒病。     

猪细小病毒感染的诊断及防制策略

猪细小病毒是引起猪繁殖障碍的重要病原之一,主要表现为初产母猪不孕、流产、产木乃伊胎和死产、新生胎儿死亡以及病毒血症。该病毒在世界范围猪群内广泛存在,并多呈地方性流行,严重影响着养猪业的发展。从病原、诊断和防制等方面对猪细小病毒进行了阐述,以期为防制该病提供理论依据。     

猪细小病毒结构蛋白VP2研究进展

猪细小病毒(PPV)是引起猪繁殖障碍性疾病的重要病原之一,目前该病在世界很多国家均有流行和报道,给养猪业带来巨大损失。传统的灭活苗和弱毒苗又都存在各自的缺陷,新型诊断试剂及疫苗的研究迫在眉睫。VP2蛋白是病毒粒子的主要衣壳蛋白,具有在体外能自我装配成类病毒粒子,并能刺激机体产生抗PPV中和抗体,可作为抗原转运载体等特性,故VP2蛋白在猪细小病毒诊断试剂及新型疫苗研究领域具有很大的潜力。论文就VP2的分子生物学及其在该病诊断与预防等方面的研究进展进行了综述。     

一起地方种猪场猪细小病毒感染的诊断

猪细小病毒是引起母猪发生繁殖障碍的重要病原之一,其危害主要是导致母猪特别是初产母猪发生流产或产死胎、畸形胎、木乃伊胎及弱仔等.     

猪细小病毒基因组结构及检测技术研究进展

猪细小病毒是引起母猪繁殖障碍性疾病的主要病原体之一,对猪细小病毒的基因组、转录、编码的结构蛋白和非结构蛋白、转录的调控及血清学诊断、分子生物学检测技术方面的研究进展予以综述,以期对其进一步研究有参考价值。