鸡Mx蛋白抗病毒作用研究进展

Mx蛋白是在脊椎动物机体细胞受病毒感染或诱生剂处理时由Ⅰ型干扰素诱导表达的一种抗病毒蛋白。Mx 蛋白具有良好的抗病毒能力,靶向许多 RNA 病毒,诸如流感病毒、水疱性口炎病毒、狂犬病毒等,对某些 DNA 病毒,例如乙型肝炎病毒也有一定的作用。近年来,基于鸡的 Mx 蛋白抗病毒作用及机制的相关研究逐渐增多,取得了一些进展。论文就近年来鸡 Mx 蛋白的抗病毒机制与分子生物学特点进行综述,针对鸡 Mx 蛋白在抗病毒与品种鸡抗病育种筛选等应用前景进行分析与探讨。     

Mx蛋白研究进展

Mx蛋白是干扰素诱导表达的抗病毒蛋白家族中的成员之一。人、哺乳动物、鱼类、家禽体内都有Mx蛋白。Mx蛋白具有GTP酶活性 ,在其肽链氨基端均包含一个氨基酸序列高度保守的的三联GTP结合区域 ,羧基端存在有亮氨酸拉链区域。人和鼠的Mx蛋白有抗病毒活性。家禽中鸭的Mx蛋白无抗病毒活性 ;鸡的Mx蛋白的抗病毒活性受 6 31位氨基酸的影响 ,当 6 31位氨基酸为天冬酰胺时有抗病毒活性 ,为丝氨酸时则无抗病毒活性。文章最后对禽类Mx蛋白的应用和展望进行了探讨     

禽类Mx蛋白的研究进展

Mx蛋白在许多生物体内发现,具有广泛的抗病毒作用和GTP酶水解活性,是Ⅰ型干扰素诱导的蛋白,属于大分子GTP酶动态蛋白家族,其特征在N端有一个三联体GTP结构域和发动蛋白家族的结构特征序列,以及C端高度保守的亮氨酸拉链结构域。本文对Mx蛋白的发现、结构、表达调控、抗病毒活性等作一简要综述,着重介绍了禽类Mx蛋白的研究进展,并对禽类Mx蛋白研究的应用进行了展望。     

Mx基因的抗病毒研究进展

Mx(myxovirus resistance)蛋白是由干扰素诱导产生的具有GTP酶活性的肌动蛋白,具有广谱的抗病毒功能,可抑制RNA病毒及DNA病毒的复制。作者综述了Mx基因及其编码蛋白的结构和功能,阐述了其抗病毒的作用机制,并展望了Mx基因在抗病毒转基因育种领域的应用前景。     

鸡Mx基因的原核表达及表达蛋白抗病毒活性初步研究

将鸡Mx基因克隆入pET一32a载体,筛选鉴定后将重组阳性质粒转化到大肠埃希菌株BL21进行诱导表达,表达产物用west,ern blot鉴定,并经镍亲和层析法纯化及透析复性,得到的蛋白用微量细胞病变抑制法检测其抗病毒活性.结果显示,构建的载体经PCR扩增得到长度为2 118 bp的特异片段,测序结果证实与鸡Mx基因同...     

Mx抗病毒蛋白在水禽业抗病育种中的研究展望

随着我国水禽业的飞速发展，其集约化程度的提高、饲养条件的恶化或改变、抗生素的药物残留问题、病毒抗原漂移、超强毒株或新型传染病的出现及母源抗体的干扰等系列问题，在生产上引起大量的死亡或造成亚健康状态，进而造成巨大经济损失。这迫使我们要探索新的防疫途径和重新重视抗病育种的研究。Mx蛋白是干扰素（IFN）在体内主要诱导合成的一种特异的抗病毒蛋白，如小鼠Mx1蛋白证明能抑制流感病毒、多里病毒、索戈托病毒的复制；小鼠Mx2蛋白能抑制棒状疱疹性口炎病毒的复制；人MxA蛋白能抑制麻疹副粘病毒、棒状疱疹性口炎病毒、布尼亚病毒、白蛉病毒、汉坦病毒、3型腺病毒的复制”。本文介绍了国内外Mx蛋白的发现历程、结构、抗病毒活性并探讨了Mx蛋白在水禽抗病育种和抗病毒诊断治疗方面研究的必要性，旨在为培育整体免疫力高的水禽品系奠定理论基础。     

Mx抗病毒蛋白在水禽业抗病育种中的研究展望

Mx蛋白是I型干扰素（IFN）诱导下产生的具有抗病毒功能的蛋白质,属于大分子GTP酶动态蛋白（dynamin）超家族,大多数的脊椎动物有1～3个不同细胞内定位的Mx蛋白异构体,一般定位于核内或胞质中。Mx蛋白对RNA和DNA病毒具有广谱的抗病毒能力;其特征在N端有一个三联体GTP结构域和发动蛋白家族的结构特征序列,以及C端高度保守的亮氨酸拉链结构域,该区域是进行亚细胞定位及与病毒直接作用的区域。本文介绍了Mx蛋白发现、结构、抗病毒活性机制,并对水禽类MX蛋白在水禽抗病育种中的应用进行了展望。     

鸡抗病毒Mx基因的克隆与序列分析

用干扰素诱导剂poly（I）／（C）诱导鸡胚成纤维细胞,提取细胞总RNA,采用RT—PCR方法扩增了北京白鸡Mx基因全长编码区序列。序列分析表明：该基因编码区长2118bp,编码705个氨基酸残基,其第631位为天冬酰胺,理论上推测具有抗病毒活性。通过与GenBank中已登录的7个品系鸡Mx基因进行核苷酸系统进化树分析,结果显示,北京白鸡Mx基因与WL—N品系鸡Mx基因的亲缘关系最近。北京白鸡Mx基因序列与其他动物Mx基因序列的比较结果显示,核苷酸同源性为49．5％～76．8％,氨基酸同源性为44．1％～61．6％。据此可以推断：克隆的Mx基因具有抗病毒活性的分子特征和特征性功能结构,不同种属动物Mx基因的同源性与其亲缘关系呈正相关。     

鸡抗病毒Mx蛋白修饰及其真核表达载体的构建

利用高保真RT-PCR的方法从Poly（I）·Poly（C）诱导的鸡成纤维细胞总RNA中扩增出鸡全长Mx cDNA,扩增产物克隆到pMD19-T Simple载体上,利用PCR突变技术将其第2 032位的碱基由G突变为A,经克隆测序证实突变成功后,将已突变的Mx基因插入真核表达载体,通过PCR、酶切鉴定插入片段正确,提取质粒转染COS-Ⅰ细胞进行RT-PCR鉴定。结果表明：正确克隆了鸡Mx基因,并成功对该基因进行PCR诱变修饰,构建了能够表达鸡Mx基因的重组真核表达载体,为Mx基因体内外表达及生物学活性的进一步研究奠定了基础。     

鸡Mx蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

Mx蛋白为GTP酶动态蛋白家族成员,已被证明具有抗禽流感病毒、Thogoto病毒和水泡性口膜炎病毒等的作用.为制备鸡Mx蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的鸡Mx蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,分离脾细胞与SP2/0细胞融合,采用间接ELISA方法筛选阳性克隆,经3次细胞克隆纯化后获得4株稳定分泌抗鸡Mx蛋白抗体的杂交瘤细胞株.间接ELISA测定4株MAb纯化后腹水的效价介于1∶3.2×104～1∶2.5×105之间.Westem blot结果证实4株MAb均具有良好的反应性;间接免疫荧光试验表明其中一株MAb与真核表达的鸡Mx蛋白发生反应.本研究为鸡Mx蛋白功能及表达鸡Mx蛋白的转基因动物等研究奠定了基础.     

猪Mx1基因的克隆表达及抗病毒活性研究

本文应用(RT-PCR)技术,从猪瘟弱毒疫苗和Poly:IC共刺激7 h的PK15细胞的cDNA中扩增出编码Mx1蛋白的全长基因,并通过引物设计填补了PK(15)细胞系Mx1 cDNA序列中3’端11bp的缺失,成功获得Mx1完整基因的克隆。构建了重组表达质粒pRetroQ-sMx1,转染HEK293T细胞并表达Mx1蛋白,利用微量细胞病变抑制法测定其抗病毒活性。双酶切鉴定和核酸序列测定证实pRetroQ-sMx1真核表达质粒构建成功,转染HEK 293T细胞后,能够检测到绿色荧光,Western blot证实为目的蛋白。微量细胞病变抑制法测定重组蛋白具有一定的抗水疱性口炎病毒及猪繁殖与呼吸综合征病毒的活性。重组Mx1具有一定抗病毒生物功能,为进一步研究重组Mx1蛋白的活性以及Mx1抗病毒药物奠定了基础。     

中药抗病毒作用机制研究进展

病毒是一类严重危害人畜健康的病原体,当前防控病毒性疾病仍以疫苗免疫为主,但由于病毒种类多样,变异频发,单纯的免疫已经无法起到有效的防控作用。因此,开发理想的抗病毒药物已成为近年来国内外学者关注的重点问题。目前临床应用的抗病毒药物品种较少,效果不理想,且副作用大,由此中药因其独特的疾病防治优势,走进了众多学者的视线。研究显示,多种中药饮片、复方及其有效成分均对病毒有较强的抑制作用。论文结合病毒性疾病的发病机理,对中药抗病毒作用机制的研究成果进行综述,以期为兽医临床研发高效低毒的抗病毒药物提供参考。     

中草药提取物抗病毒作用的研究进展

我国是自然资源十分丰富的国家之一,拥有悠久的中药使用历史和全球最大的天然药材生产基地。目前国内外对天然提取物研究的热点集中在抑菌活性、抗病毒活性、抗氧化性、抗肿瘤和癌细胞等;天然提取物的主要应用体现在香料香精、中草药、食品保鲜、保健食品、化妆品、植物农药、饲料添加剂等诸多方面。目前市场上使用的化学药物具有毒副作用大,易产生抗药性等诸多不利因素,而中药天然药物在这方面具有无可比拟的优势;纯化合物新药开发难度大、周期长、费用高,使植物提取物和复方药物的开发成为新的选择。本文对目前主要研究的天然提取物及病毒进行综合性阐述,并分析天然提取物中的有效成分及天然提取物对病毒的作用机制。     

MxA抗病毒蛋白的研究概况

MxA抗病毒蛋白是新发现的由I型干扰素(IFN α/β)诱导产生的分布于细胞质中的78 kD的蛋白质,具有广谱的抗病毒作用。随着对MxA研究的深入,现已清楚,MxA蛋白对多种RNA病毒和部分DNA病毒均有抑制作用（Arloric等,1990;Ordien等,2001）,而且其水平高低可以作为机体IFN诱导状态的适宜标志。因此开展MxA蛋白研究具有很高的医学价值。     

猪Mx1基因及分段基因真核表达载体的构建和鉴定

试验旨在通过对猪Mx1基因及其分段基因的真核表达载体的构建和鉴定,为进一步研究Mx1基因的功能奠定基础。试验以猪Mx1的基因序列为基础,以真核表达质粒pXJ41为载体,依据Mx1的蛋白结构进行分段,添加了Flag标签,构建了Mx1及Mx1分段基因的真核表达质粒,分别命名为pXJ41-Flag-Mx1、pXJ41-Flag-G、pXJ41-Flag-GMD、pXJ41-Flag-MDL4、pXJ41-Flag-GED。然后通过免疫印迹试验检测上述质粒在HEK-293T细胞中的表达情况,通过间接免疫荧光试验鉴定目的蛋白在细胞内的定位情况。免疫印迹试验成功检测到了Mx1及Mx1分段基因的蛋白条带,间接免疫荧光试验检测到各目的蛋白定位于细胞质。上述真核表达质粒可在HEK-293T细胞中成功表达,Mx1及其分段真核表达质粒的构建和成功表达及定位对进一步探索Mx1的功能及机制奠定了基础。     

中药抗病毒性疫病作用机制研究进展

病毒性疫病作为一类具有高度传染性的疾病,目前尚缺乏理想的抗病毒药物,而中药因其独特的病毒病防治视角,成为近年来我国学者们研究的热点。研究显示,多种中药及其有效成分对病毒有一定的抑制作用。本文结合病毒性疫病发病机理与近年来抗病毒中药研究成果,对中药的抗病毒机制进行阐述,以期为多方位、多靶点、天然低毒兽医临床抗病毒药物的研发提供帮助。     

绿原酸抗病毒研究进展

绿原酸,又名咖啡鞣酸,是由咖啡酸与奎尼酸缩合脱水而成,是植物在有氧呼吸过程中经磷酸戊糖(HMS)的中间产物合成的一种苯丙素类物质。CGA广泛存在于植物中,以金银花和杜仲中的含量较高,有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗心血管疾病、抗菌、抗病毒等多种药理作用。但是绿原酸的抗病毒     

鸡Mx基因的克隆与原核表达

本研究旨在通过克隆鸡Mx全基因序列进而进行该基因的原核表达,获得具有生物学活性的蛋白.利用poly Ⅰ:C诱导鸡胚成纤维细胞Mx基因表达,克隆了Mx基因全长cDNA序列,将开放阅读框(ORF)连接构建于表达质粒pGEX-4t-2中获得重组表达载体pGEX-Mx,转化Rosetta(DE3)菌株,经IPTG诱导后检测.表达产物检测显示该蛋白的相对分子量为75 ku.说明获得了Mx基因的高效表达,为进一步进行Mx基因的活性检测以及利用Mx蛋白进行抗病毒转基因的研究奠定了基础.     

金花茶抗病毒作用研究进展

金花茶是山茶科山茶属的常绿灌木或小乔木植物,属于无毒性植物,其花和叶富含多种对人体健康具有重要意义的天然成分,且某些成分能够影响到传染性病毒的生命活动,现已逐渐成为制作花茶、叶茶保健饮品的首选植物资源.论文基于近年来有关金花茶药理作用方面的研究资料,对其抗病毒作用进行了系统性分析,重点阐述了金花茶拮抗几种常见DNA和R...