洋葱高频离体再生体系的建立

 以洋葱（Allium cepa L.）品种‘W465’的幼嫩花序和不同发育时期的幼蕾为外植体材料,研究激素配比对其愈伤组织诱导、再生和生根驯化的影响,以建立洋葱高频离体再生体系。研究结果表明,洋葱幼嫩花序为最佳外植体材料,在含有1.0 mg · L^-1 2,4-D + 1.0 mg · L^-1 6-BA 的B5 培养基上愈伤诱导率为100%,在添加1.0 mg · L^-1 TDZ 的B5 培养基上再生芽分化率为78.13%,在1/2 MS + 0.01 mg · L^-1 NAA 培养基上可诱导生根,驯化移栽成活率达到95%。     

多裂叶荆芥离体再生体系的建立

以多裂叶荆芥无菌幼苗根、茎段、叶片等为外植体,进行不定芽离体再生,建立了多裂叶荆芥离体快速繁殖体系,研究了不同外植体和附加不同外源激素配比对不定芽离体再生的影响。结果表明:多裂叶荆芥离体再生的最佳外植体为带有叶腋的茎段,诱导不定芽再生的适宜培养基为MS+0.2mg/L NAA+1.0mg/L TDZ,每个外植体产生不定芽数平均为18个;不定芽增殖培养每4周为1个周期,理论年繁殖系数可达1×1812;当不定芽生长至3~4cm时移入生根培养基诱导生根;适宜的生根培养基为MS+0.2mg/L NAA,移栽成活率为53.85%。     

大白菜高频再生体系的建立及策略

 就北方大白菜14个基因型进行组织培养再生比较, 以筛选出的较高再生率的基因型为试材,在含不同配比的6-BA、TDZ、NAA及AgNO₃、GA₃、ABA的培养基中进行再生比较, 分别建立了含有6-BA和TDZ的大白菜组织培养再生最佳培养基: MS + 6-BA 5 mg/L +NAA 0.5 mg/L +AgNO₃ 2 mg/L和MS + TDZ0.1 mg/L + 6-BA 5 mg/L +NAA 0.5 mg/L +AgNO₃ 2 mg/L +ABA 0.25 mg/L, 大白菜再生频率最高可以达到90.6% , 建立了大白菜高频再生体系, 讨论分析了影响大白菜再生的主导因素并提出建立大白菜高频再生体系的可行策略。     

色素万寿菊叶片再生体系的建立及优化

以色素万寿菊叶片为外植体,探讨了不同的植物生长调节剂组合、AgNO3、凝胶剂及不同的继代培养基对叶片器官发生的影响。结果表明：6-BA 3.0 mg · L-1 + IAA 3.0 mg · L-1 + 蔗糖30.0 g · L-1 + 植物凝胶6.0 g · L-1的MS培养基适宜不定芽的分化,不定芽分化率达97.5%,将分化13 d的叶片外植体转接到组织培养瓶中,30 d后56.7%的不定芽可发育成高约5 cm的植株,再生植株在MS培养基上生根率为100%,移栽成活率达100%。     

新疆甜瓜“伽师”再生体系的建立

以厚皮甜瓜"伽师"为试材,研究了6-苄氨基嘌呤(6-BA)、硝酸银(AgNO3)对诱导不定芽的影响,建立以子叶为外植体的快速高效再生体系。选取5d的"伽师"无菌苗子叶,在添加了不同浓度6-BA的MSB培养基中诱导不定芽;并且探讨了在最适6-BA浓度的培养基中添加不同浓度AgNO3对诱导不定芽的影响。结果表明:甜瓜子叶外植体接种在MSB+1.5mg·L~(-1) 6-BA诱导分化培养基上,诱导率可达75%;添加不同浓度AgNO3诱导不定芽,以MSB+1.5mg·L~(-1)6-BA+2.0mg·L~(-1) AgNO3最适,诱导率可达65%,产生单芽较多,缩短了再生周期。丛生芽或单生不定芽转至MSB+0.1mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) GA3的培养基中伸长,不定芽均可伸长且生长状况良好;再将单芽转至MSB+0.01mg·L~(-1) NAA培养基进行生根。     

甜瓜再生体系的建立

以‘鑫福999’甜瓜5 d龄无菌苗的子叶、下胚轴、真叶为外植体,研究了添加6-BA、IAA和2,4-D的培养基对愈伤组织诱导、丛生芽的发生和丛生芽生根的影响。结果表明:诱导愈伤组织的最适外植体为子叶,由子叶诱导的愈伤组织生长速度最快、品质最好、数量最多,最适愈伤组织的诱导培养基为MS+IAA 0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L。最适宜诱导丛生芽的外植体为子叶,最适丛生芽诱导培养基MS+6-BA 1.0 mg/L,最适生根培养基为MS培养基。     

连香树再生体系的建立

对连香树进行无菌苗萌发和植株再生进行了研究.结果表明:以5～6月为最适取材季节;最佳外植体为当年生枝条顶芽下第3～4腋芽;腋芽诱导的适宜培养基为MS+BA1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L;适宜无菌播种的培养基为1/2MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L;适宜增殖培养基为MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;适宜诱导愈伤的培养基为MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L;诱导分化的适宜培养基为MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L.     

紫罗兰再生体系的建立

本研究以紫罗兰(Matthiola incana R.Br)无菌苗的叶片、茎段为外植体,通过组织培养的方法诱导愈伤组织,并进一步诱导分化出芽及再生植株.结果表明,建立紫罗兰再生体系的最佳外植体为生长8～10d的无菌幼苗的子叶;愈伤组织诱导最佳培养基为MS 6-BA(0.5mg/L) NAA(0.5 mg/L)培养基;最佳分化培养基为MS 6-BA(2.0mg/L) NAA(0.1 mg/L)培养基;最佳生根培养基为1/2MS NAA(0.5 mg/L) C(0.05mg/L).     

甜瓜再生体系的建立

以葫芦科的甜瓜为试验对象,探讨不同基因型、不同激素浓度配比及抗生素胁迫对其不定芽萌发的影响,以期建立甜瓜再生培养体系,为甜瓜遗传转化奠定基础.结果表明,甜瓜在初代培养时,不定芽发生的培养基为MS+1.0 mg·L-16-BA,甜瓜再生率最高,达到92.5％;甜瓜在继代培养中,0.3 mg·L-16-BA的处理最适宜不定...     

白菜型油菜高效离体再生体系的建立

以白菜型油菜(Brassicarapa)的亚种菜心(Brassica parachinensis)的子叶和下胚轴为外植体,研究不同浓度的NAA和6-BA配比对菜心组织培养的影响。结果表明:菜心子叶和下胚轴组织培养的再生最佳培养基分别是MS+6-BA1.5 mg/L+NAA0.2 mg/L+AgNO35 mg/L和MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+AgNO35 mg/L;不定芽生根最佳培养基是MS+NAA0.2 mg/L。同时还研究了AgNO3浓度对菜心组织培养的影响,在培养基中附加AgNO3能提高菜心芽的诱导频率。     

白菜和芜菁Ogura型雄性不育系与保持系的获得及其细胞学观察

 通过甘蓝型油菜Ogura细胞质雄性不育材料与白菜、芜菁的种问杂交和连续回交，获得了不育性稳定的白菜、芜菁Ogura细胞质雄性不育系‘新选Ogu284’、‘矮脚黄Ogu33．14’和‘耐病 “18_4’及其相应的保持系。细胞形态学研究表明：虽然这3个不育系核背景不同，但花药败育时朗基本相同．均具有单核败育型的特征；小孢子到单核期后不再向前继续发育，而是迅速退化以至解体，丁F花前彻底败育；不育系的花药在减数分裂早期绒毡层细胞中已出现液泡．有肥大趋势，而正常花药绒毡 的发育在减数分裂过程中达到高峰，四分体时出现退化迹象，开花前完全解体。不同的Ogura细胞质雄性 育系，虽然核背景不同，但花药败育的时期基本相同，说明Og．ra CMS胞质互作关系稳定，受核背景影响小     

大白菜雄性不育系小孢子发生的细胞形态学研究

  采用塑料半薄切片技术, 在光学显微镜下系统地观察了大白菜同质异核、异质同核细胞质雄性不育系、细胞核雄性不育系及其相应保持系花药发育过程的细胞形态学特征。研究结果表明: 细胞核雄性不育系花药败育主要发生在减数分裂期, 花粉母细胞不能发生正常的减数分裂; 细胞质雄性不育系花药败育主要发生在四分体时期或小孢子单核期, 表现为绒毡层细胞异常, 四分体或小孢子败育。     

花椰菜和小白菜种间杂种子房培养研究

以小白菜雄性不育系h08015为母本,以花椰菜自交系082005、082009、082010、082063为父本进行种间杂种离体子房培养。结果表明：离体培养时杂种子房发育天数、接种方式、激素水平及父本基因型对杂交种子发芽率均有明显影响。授粉后6 d的子房培养能获得较好的效果;4 d后剥取种子继续培养,获得的种子发芽率高于其他接种方式;不加激素的MS培养基好于添加6-BA及NAA的MS培养基;不同父本基因型最适取材时间不同,多数基因型最佳培养时间为授粉后6 d的子房,个别基因型则是授粉后10 d的子房。     

菜心主要农艺性状遗传相关与通径分析

选用１４ 个 菜心品 种研究了１１ 个农 艺性状的 表型相 关、遗传相 关和产 量的通径 分析。结果表 明,农艺 性状间的 遗传相 关一 般 大于 表 型相 关。单 株 菜薹 质量 与 菜薹 粗、叶数、叶 片质 量、叶柄质 量和株 高 等 具 有 显 著 正 相 关, 遗 传 相 关 系 数 分 别 为 ：ｒ ＝ ０ ．９９４ 、０ ．９８２ 、０ ．９６５ 、０ ．９１３ 和０ ．６３２ ,单 株菜薹 质量与其 它农艺性 状相 关不 显著。 遗传 通径 分析 表明 ,菜薹 粗、叶片质量对 单株菜薹 质量的 直接作 用最 大, 其次 为叶 数。 菜薹 粗、叶片 质量 和 叶数 可作 为 选育 菜 心丰产品种 的选择 性状。     

白菜病程相关蛋白1基因cDNA全长的克隆与分析

 以水杨酸处理后的‘苏州青’白菜为材料, 通过RT2PCR和RACE技术, 获得了白菜病程相关蛋白PR-1基因的cDNA全长序列。该基因与甘蓝型油菜PR-1基因氨基酸序列的同源性为91% , 与拟南芥的同源性为78% , 与其它植物的同源性为57%～60%。Southern杂交表明该基因在白菜基因组中的拷贝数至少为2个。半定量RT2PCR分析表明, 2 mmol/L的水杨酸处理后12 h, 该基因的表达量达到高峰。     

白菜类蔬菜作物离体再生研究进展

对影响白菜类蔬菜作物离体再生的主要因素:植物材料的基因型、外植体类型、外植体的生理状态、外植体接种方式、培养基及其添加物等研究进展进行了综述。     

白菜种子萌发的热抑制现象及其与细胞壁降解酶的关系

为了探讨白菜种子萌发热抑制的机制,以新收获的白菜种子为材料,研究了种子萌发对不同温度的响应,后熟、冷层积和植物激素处理对种子萌发的作用,以及种子萌发和不同处理与细胞壁降解酶之间的关系。结果表明,当萌发温度 ≥ 20 ℃时,种子的萌发率显著降低,热抑制的种子不表现次生休眠。后熟、层积和GA₃处理能有效地降低种子萌发的热抑制;相反,ABA处理则增强种子萌发的热抑制。种子萌发过程中内切–β–甘露聚糖酶、β–甘露糖苷酶和α–半乳糖苷酶的活性增加。与新收获的种子相比,后熟、层积和GA₃处理增加上述3种酶的活性;ABA处理增加内切–β–甘露聚糖酶的活性,但不影响β–甘露糖苷酶和α–半乳糖苷酶的活性。在不同温度下吸胀48 h的种子的内切–β–甘露聚糖酶和α–半乳糖苷酶的活性变化与随后种子的萌发没有直接关系。说明新收获的白菜种子具有明显的萌发热抑制,这种特性能被后熟、层积和GA₃处理以增强细胞壁降解酶活性的方式有效地解除。     

芜菁Br14-3-3的克隆及其在非生物胁迫下的表达分析

克隆了‘津田芜菁’(Brassica rapa subsp. rapifera‘Tsuda’)通用调节因子14-3-3基因cDNA序列,命名为Br14-3-3(GenBank登录号为MK896872)。该基因全长1 113 bp,开放阅读框全长774 bp,编码含有257个氨基酸的多肽。荧光定量PCR分析Br14-3-3在‘津田芜菁’不同组织中及其在温度、脱水、渗透、ABA和无机盐等非生物胁迫下幼苗中的表达,结果表明该基因在‘津田芜菁’的花中表达量最高,幼苗中次之;低温抑制了Br14-3-3的表达,其他非生物胁迫可诱导该基因表达,暗示Br14-3-3在非生物胁迫应答中发挥功能。     

大白菜AB-81高频再生系统的建立及gus A基因瞬时表达的研究

 以大白菜自交系AB-81 的子叶和真叶切块为外植体, 建立了高频不定芽离体再生系统。在MS 附加TDZ 0. 2 mg/L , NAA 2. 0 mg/L , AgNO₃ 10 mg/L 和ABA 0. 25 mg/L 的再生培养基上, 子叶和真叶的不定芽再生频率分别达到93. 3%和90. 0%, 每块外植体的不定芽数达3～6 个, 最多达21 个。以EHA105/ pMOG410 为载体转化侵染大白菜AB-81 的子叶, 获得较高gus A 基因瞬时表达频率的条件为: 子叶预培养2～3 d ; 侵染的工程菌液的浓度OD 0. 3～0. 5 ; 侵染时间2～10 min ; 共培养时间2～3 d。