东方蜜蜂DNA随机扩增多态及其遗传分化研究

本研究对云南及马来西亚的37个东方蜜蜂样本进行随机增多态DNA分析，从20个引物中筛选出11个引物，其中9个引物扩增出多态带。共检测到66条扩增片段，其中56条为多态带。用UPGMA聚类方法构建的分子系统树显示，云南的样本、马来西亚的样本各自分别聚在一起，说明两个样本间遗传差异较大，群体之间存在着遗传分化。但就云南的32个个体而言，虽然聚类图中大多数采用自同一地区的样本聚在一起，但也存在一定交叉，提示云南地理群体间近期可能存在一定的基因流。     

随机扩增多态性DNA技术的原理及应用

1985年,美国人Kary Mullis等发明了PCR技术,两年后PCR自动化装置仪器的完成使基进入实际应用的阶段,该装置用于扩增特定的模板DNA,使DNA的量成倍增加,可用于各种用途的DNA分析。1990年,由杜帮公司的Williams等人基于PCR技术之上首次推出了一种简便、灵敏可行的新的遗传标记技术——随机扩增多态性DNA（Random amplified poly-morphic　DNA,RAPD）[1]。尽管RAPD技术诞生的时间很短,但由于其独特的检测DNA多态性的方式以及简便快速的特点,且具有可用引物数量大,检测区域几乎覆盖整个基因组,多态信息含量大等,使得该技术已渗透到分子生物学领域基因研究的各个方面。可以预料,该技术的发展会使分子遗传学得到更广泛的应用。     

家蚕品种遗传分化的随机扩增多态性DNA分析

对广东现行家蚕生产品种9·芙×7·湘杂交亲本的基因组进行随机扩增多态性DNA(RAPD)分析。统计了932、7532、芙蓉、湘晖、9·芙、7·湘品种的蚕卵70个随机引物的RAPD扩增标记数,经计算其遗传相似系数,作遗传距离分析,同一系统内的品种间遗传差异小,系统间的品种遗传差异大,与传统的家蚕系统分类的结果完全相符。因此RAPD作为有效的跗标记。可适用于研究家蚕品种的遗传多样性、起源以及系统的演变分化。     

鸭沙门菌的随机扩增多态性DNA分析

以5株同一血清型的鸭沙门茵为研究对象，分别提取基因组DNA后，用20条随机引物对其进行RAPD分析。结果，20条随机引物中不能扩出任何条带的引物有2条，能扩出条带但扩增图谱中没有特异性条带出现的引物有10条，能扩出条带且扩增图谱具有多态性的引物有8条。对筛选到的具有多态性的8条引物进行分析，共扩增出46个DNA片段，片段大小为0．2～3．2kb，其中5个菌株共有的片段有13条，显示多态性的片段有33条。     

随机扩增多态性DNA（RAPD）技术及其应用

随机引物扩增多态性DNA（RandomAmplifiedPolymorphticDNA，RAPD）是由Williams等人于1990年发展起来的一种新型分子遗传标记，他首次用7个不同的寡核耷酸引物（十聚体），扩增了人、大豆、谷类、会苔和细菌的DNA，获得了丰富的多态性，证明了RAPD的可行性。作为PCR技术的延伸，RAPD继承了PCR样品用量少、灵敏度高、检测容易等优点，又具有合成一套弓！物，可以用干不同生物基因组分析和可以大大减少多态性分析的预备性工作等特点。因而，尽管RAPD技术诞生的时间很短，但由于其独到的检测DNA多态性的方式以及快速、简便和适…     

利用RAPD标记分析近交系小鼠的遗传多态性

采用随机扩增多态性DNA（RAPD）标记，分析了BALB／c、57BL／6、DBA／2、C3H／He近交系小鼠的遗传多态性。结果表明，上述小鼠表现出了各自不同的多态性RAPD标记；RAPD可作为近交系小鼠的分子标记， 在DNA水平区别4种近交系小鼠。     

随机扩增微卫星DNA多态标记(RAMPs)及其应用

随机扩增微卫星DNA多态标记是在微卫星DNA基础上衍生出的一种新型分子标记。它综合了微卫星DNA和随机扩增多态DNA（RAPD）两种标记的优点，可用来快速检测动植物群体的遗传变异及分离新的微卫星DNA。本文介绍了随机扩增微卫星DNA多态标记的种类及其应用。     

藏系绵羊随机扩增多态性DNA最佳反应体系的研究

以高原型藏羊的基因组DNA为模板，通过对RAPD反应体系中的各种参数进行优化试验，建立了适宜于藏系绵羊RAPD分析的最佳反应体系：在PE2400型DNA扩增仪的25μL反应体系中，模板DNA的量为60－120ng，引物量为4－8pmol，Mg^2 浓度为2.0mM，Taq DNA聚合酶为1－2.5U,dNTP浓度为150－200μM;94℃预变性3分钟后35次循环的参数设定为：94℃1分钟，36℃1分钟，72℃2.5分钟，最后72℃延伸10分钟，利用这些条件对藏系绵羊的基因组DNA进行RAPD分析，其结果的重复性和可靠性大为提高。     

一种新型的分子标记-SCARs验证王浆高产蜜蜂的 RAPD分子标记-W316bp的研究

为了验证王浆高产蜜蜂的RAPD分子标记-W316bp正确性，采用了新型分子标记-SCARs，研究结果获得的SCARs分子标记与原来RAPD分子标记有一致的显性行为，从而完成了RAPD分子标记转变成SCARs分子标记技术。     

鸭不同品种的随机扩增多态性DNA分析

随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲａｎｄｏｍＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡＳ,ＲＡＰＤ）是利用含有１０个（或９个）碱基的随机引物（单引物）通过聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对模板ＤＮＡ进行随机扩增,根据扩增的某一ＤＮＡ片段的有无来比较不同基因组ＤＮ...     

意大利蜜蜂（Apis mellifera ligustica）蜂王浆分泌相关研究进展

蜂王浆是蜜蜂重要的蜂产品之一。咽下腺和上颚腺是蜜蜂分泌蜂王浆的重要外分泌腺体,同时工蜂分泌蜂王浆的能力与脑部调节行为过程中高量表达的基因、蛋白质、神经肽等有关。近年来转录组和蛋白质组方面的快速发展,极大地促进了蜂王浆分泌的分子基础研究。系统综述了与蜂王浆分泌密切相关的咽下腺、上颚腺和脑的国内外研究进展,旨在为后续深入研究意大利蜜蜂咽下腺、上颚腺分泌蜂王浆的分子机制以及脑调控哺育行为的分子网络机制提供新的视角和理论借鉴。     

中蜂与意蜂营养杂交对意蜂微卫星遗传多态性的影响

通过人工添加中华蜜蜂王浆技术来培育江山2号与法国意蜂的杂交蜂王,并测定江山2号、法国意蜂、中华蜜蜂、营养杂交子1代和子4代工蜂的微卫星遗传多态性。结果表明,经过营养杂交,亲本蜜蜂与营养杂交子代的遗传距离发生明显的变化,中华蜜蜂和意大利蜜蜂的特有DNA条带发生了转移。说明通过蜂种之间的营养杂交可以改变其微卫星多态性。     

九华山EH-R意蜂生产性能试验报告

2001-2003年在安徽合肥与池州进行的对比试验表明,"九华山EH-R意蜂"比本地意蜂Ea产育能力强,春繁速度快,群势强;春夏季蜜源花期,蜂蜜群均产量EH-R比Ea高6.24～10.01kg,蜂王浆群均产量EH-R比Ea高37.63～58.07g,蜂王浆中10-HDA质量分数EH-R高于Ea,EH-R(池州)10-HDA的质量分数高达2.14%;越夏期Ea蜂王停卵15 d,EH-R蜂王未停卵.     

RAPD和微卫星分子标记在西方蜜蜂研究中的应用

利用RAPD分子遗传标记 ,构建了西方蜜蜂(Apismellifera)第 1张完整的遗传连锁图 ;确定性基因位点(x)、黑色体色基因位点 (blk)、苹果酸脱氢酶Ⅰ (Mdh - 1)基因位点分别位于第 3、 6、 18个连锁群上 ;确定了影响蜜蜂采粉、报警信息素水平、螫刺行为和体长等数量性状的基因座位 ;可有效地鉴别欧洲蜜蜂和非洲蜜蜂。微卫星技术已成为蜜蜂行为、起源、进化和蜂群内亚家系结构研究的有力工具     

西农萨能奶山羊随机微卫星扩增多态DNA(RMAPD)与经济性状的相关性

利用随机微卫星扩增多态DNA（RMAPD）技术分析69只西农萨能奶山羊基因组DNA的多态性与产奶性状（第1～5胎产奶量和平均产奶量）、产羔数（第1～5胎产羔数和平均产羔数）和体尺指标（初生重、成年体重、胸围、管围、体高、体斜长）的相关性.RMAPD与3个经济性状的相关性结果表明：66个标记条带分别对产奶量、产羔数及初生重、体重、体高等体尺指标有显著或极显著的标记效应（P〈0.05, P〈0.01）.其中,23个标记条带（14个正向效应标记和9个负向效应标记）与产奶量有关, HEL1r＋F09的C、D、J、K和L带对第3～5胎及平均产奶量有显著的标记效应,尤其是J带对第5胎产奶量有极显著的正向标记效应; 23个标记条带（11个正向效应标记和12个负向效应标记）与产羔数有关,HEL1r＋F09的J带、MFW20f＋P4的H带、HEL1f＋F09的E带和MFW20f＋F09的A、D带对产羔数有极显著的标记效应;20个标记条带（9个正向效应标记和11个负向效应标记）与体尺指标有关,HEL1f＋F09的G带、HEL1r＋F09的E带对初生重有极显著的标记效应,HEL1r＋OPW19的M带对胸围有极显著的标记效应 （P〈0.01）.     

采用任意引物PCR技术进行基因组差异显示

任意引物ＰＣＲ技术是通过使用短的单一引物进行聚合酶链反应，能给基因组提供几百个多态性标记，它是分析基因组间差异的有力工具。它已被广泛用于物种的分类、鉴定、估计亲缘关系、混合基因组样本的分析及创造特异探针等。其主要优点是适用于任何生物、使用的量极少及其高效性和低成本。本文对这种技术的产生、原理、特点、应用及进展作一综述。     

用RAPD标记分析草地早熟禾遗传多样性

采用RAPD分子标记技术对从美国引进的12份草地早熟禾(Poapra tensis L.)品种的遗传多样性进行分析。结果表明,从60个随机引物中筛选的17个有效引物共扩增出104条带,其中多态性带65条,占总带数的62.5%,平均每个引物扩增出多态性带3.82条;利用NTSY S-PC软件计算品种间Jaccard遗传相似系数(GS),变化范围为0.362~0.971;用非加权组法(UPGMA)聚类分析,建立供试品种的分子系统树状图,以相似系数0.7为标准分为5类,其中新哥来德(NuGlade)、解放者(Liberator)、浪潮(Impact)、午夜(Midnight)、自由Ⅱ(Freedom Ⅱ)、超级伊克利(Total eclipse)和纳苏(Nassau)共7个品种聚为一类,兰神(Nublue)和美洲王(America)聚为一类,其余品种各自为一类;该结果对引进草地早熟禾品种资源评价与利用具有一定的参考价值。     

在四个西方蜜蜂品种的线粒体基因组中存在相同的CytB基因

为了探明在西方蜜蜂不同品种中是否存在相同的CytB基因,本研究以4个西方蜜蜂品种中的线粒体基因组为研究对象,通过体外聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术特异性扩增了CytB,结果发现4个西方蜜蜂品种的线粒体基因组具有相同的分子量为600-700(bp)的CytB基因片段,这提示在西方蜜蜂不同品种的线粒体基因组中存在相同的CytB基因。     

利用RAPD标记鉴定草地早熟禾种质资源的遗传多样性

草地早熟禾是一种重要的冷季型草坪草,广泛种植于温带地区,且拥有众多的商品品种和丰富的野生资源。本研究收集了国内外72份草地早熟禾材料,对它们苗期的株高、叶宽、叶色及分蘖情况进行了考察,结果显示材料间的表型差异显著。此外,又在材料间进行了RAPD扩增产物的多态性鉴定,20条引物共扩增出115条多态性条带,多态性比率达91%。UPGMA聚类显示,材料被聚成两大类:一类为4个国内品种/系(“沪夜”、“沪青”、“沪禾2号”和“杂禾”),另一大类为剩余的所有材料。当遗传相似系数增大后,后一大类分成3组,组Ⅰ以国外引进品种为主,组Ⅱ和组Ⅲ则集中了更多的野生材料。RAPD聚类分析结果与材料背景来源之间存在一定程度的相关,但与苗期表型性状没有相关性。