贵州省某规模化猪场SIV和PCV-2感染的诊断

为快速诊断出贵州某规模化猪场猪发病原因,对送检样品进行了流行病学及临床症状调查、解剖病理观察,初步判断该猪场发病猪疑似为猪流感病毒（SIV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）或（和）猪圆环病毒2型（PCV-2）感染。为确诊病因,对送检样品进行了血清学检查和PCR/RTPCR检测,结果 PRRSV未出现目的条带,SIV与PCV-2出现目的条带,且测序结果与预期一致,表明该猪场感染有SIV和PCV-2,因此该猪场应及时进行猪流感（SI）与猪圆环病毒病（PCVD）的免疫预防,同时应加强日常管理与治疗。     

母猪免疫PCV-2疫苗对仔猪感染PCV-3的影响

为了解猪圆环病毒3型病毒(porcine circovirus 3 virus, PCV-3)ORF2基因的分子生物学信息,探寻防控PCV-3损害仔猪的可行方案。本研究通过对山西省某未免疫过PCV-2商品疫苗的规模化母猪场的妊娠母猪在产前45 d持续6批次免疫PCV-2疫苗,以所生仔猪生产成绩和PCV-3 ORF2基因阳性检出率为指标,评价母猪免疫PCV-2疫苗对仔猪PCV-3的感染和发病情况的缓解作用。临床数据显示母猪免疫PCV-2疫苗后生产的6批仔猪PCV-3 ORF2基因阳性率由45.0%逐渐降至20.0%,伤亡率由25.5%降至8.0%。试验结果显示,从死亡仔猪淋巴结分离出的6株PCV-3 ORF2基因序列同源性为98.4%～99.2%,均有17个磷酸化位点,预测Cap蛋白氨基酸N端不存在典型的信号肽结构,说明该蛋白位于胞外区的可能性更大,且未预测到跨膜结构存在;PCV-3 ORF2与PCV-2a同源性为32.5%～32.9%,与PCV-2b同源性为30.8%～31.7%,与PCV-2d同源性为32.6%～33.5%,与PCV-4同源性为33.9%～34.3%,说明同源性低,进...     

PRV、PCV-2、PRRSV与HPs混合感染的核酸检测

为确定青海省某规模化发病猪场的发病原因,在临床诊断的基础上对采集的临床组织病料进行了13种常见病原体的核酸检测,并对检测结果进行了序列鉴定.结果表明,该发病猪场存在猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒与副猪嗜血杆菌的混合感染.研究结果提示,利用分子生物学技术对发病猪场的病原进行快速鉴定,是病源快速诊断和防控的有效途径.     

华中部分地区发病猪群血清样品PCV-2病原学检测

为探究华中地区临床发病猪群猪圆环病毒2型（porcine circovirus type 2,PCV-2）感染状况及特点,2018—2019年,从湖北省的武汉、随州、咸宁、荆州,湖南省的常德、衡阳、汨罗、株洲等8个地市的40个规模化猪场,采集临床发病猪群血样1 550份,利用本实验室建立的巢式PCR诊断技术进行PCV-2病原学检测,并采用SPSS 24.0卡方检验,对结果进行不同地区、不同养殖阶段、不同季节统计分析,同时追踪与其他繁殖障碍性疾病病原的混合感染情况。结果显示：湖南、湖北两省8个地区发病猪群的PCV-2平均检出率为31.68%（491/1550）,所有检测地区均有不同程度的PCV-2感染,病原检出率在8.79%~49.01%之间波动,差异显著（P＜0.05）;不同养殖阶段发病猪群均有PCV-2阳性检出,检出率在12.17%~60.84%之间波动,差异显著（P＜0.05）,其中育肥猪和保育猪检出率较高,而哺乳仔猪、经产母猪和后备猪偏低;PCV-2一年四季均有检出,检出率在5.98%~49.81%之间,但有一定的季节性,夏冬季节检出率偏高,而春秋季节偏低（5.98%）,差异显著（P＜0.05）;PCV-2和其他繁殖障碍性疾病病原的多重感染较为常见,其中以PCV-2+PRRSV双重感染和PCV-2+PRRSV+PRV三重感染为主,而四重以上感染较为少见。结果表明,湖南、湖北两省的PCV-2病原分布较为广泛,是导致该区域猪群发病的重要病因,但其流行有一定的地区、猪群和季节差异。建议加强高流行地区、高发季节、重点猪群的免疫、检测和生物安全管理,逐步控制和净化PCV-2。本研究初步了解了华中地区PCV-2的流行特点,为其流行控制和净化制定提供了参考。     

ELISA对猪场PCV-2血清抗体的检测

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对三个猪场的89份血清样本进行猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)血清抗体的检测，本次检测PCV-2的总阳性率为2．24％。在甲猪场的48份血清中检出猪PCV-2阳性2份，4份可疑，阳性率为4.17％；而乙、丙两猪场的血清样本均呈阴性。结果表明：甲猪场可能有猪PCV-2的存在，而乙、丙两猪场尚处于未被猪圆环病毒污染的状态。     

药物对PCV-2感染仔猪群影响效果的观察

把两个感染了圆环病毒Ⅱ型的规模养猪场的2批仔猪,随机分为4组,按常规免疫,并在不同日龄分别注射圆环菌毒杀注射液、长效土霉素注射液和黄芪多糖注射液,采集第65天血样,分离血清,检测了圆环病毒Ⅱ型的感染率,测定了猪瘟抗体效价,称量了第65天仔猪平均体重,统计了第65天仔猪的合格率。结果显示,第一组第65天时的平均体重显著高于其他各组(P<0.05),且第一组仔猪第65天时的合格率显著高于第三、四组,第二组显著高于第四组;各组PCV-2感染率差异不显著,而第三组HC免疫抗体效价显著高于其他各组。     

仔猪感染PCV-2的病理组织学变化

2003年1月至12月间,对广东省14个猪场的48例猪圆环病毒2型(PorcineCircovirus2,PCV-2)呈阳性病例进行了病理组织学观察。结果,在淋巴组织中,10例见到病毒包涵体,5例见到多核巨细胞;48例中绝大多数是以巨噬细胞和组织细胞浸润为主。结合临床表现,统计表明急性病例中病理变化以淋巴结和扁桃体生发中心内存在嗜两性病毒包涵体为主;慢性病例中,以淋巴结和扁桃体中巨噬细胞和组织细胞浸润、实质器官肉芽肿形成为主,有时在淋巴组织和肺脏中见到多核巨细胞。     

PCV-2感染引起猪免疫抑制的作用机理及其防制

PCV-2感染是近年来畜牧兽医工作者非常关注的一种可引起猪免疫抑制的病毒性疾病.本文综述了PCV-2感染的概念特征、引起猪免疫抑制的作用机理及表现,并提出综合防制措施.     

甘肃省部分规模场猪PCV-2抗体检测与分析

[方法]采用间接ELISA方法,对采自21个规模养猪场的629份血清,进行PCV-2抗体检测。[结果]8个PCV-2免疫场抗体阳性率母猪为82.93%,生长猪为82.22%,育肥猪为86.21%;13个未免疫场中抗体阳性率为69.23%。猪群抗体阳性率依次为母猪69.79%,保育猪34.91%,肥育猪97.30%,仔猪16.67%。[结论]母猪、生长猪和育肥猪免疫抗体阳性率之间没有明显差异。未免疫场不同生长阶段的猪均存在较为普遍的感染,阳性率呈先下降后上升的趋势,其中以肥育猪群感染最为严重,仔猪感染率最低。不同生长阶段PCV-2感染抗体阳性率存在明显差异。     

规模猪场PCV-2和PRRSV混合感染的诊断

近年来,规模化猪场发展迅速,由变异病原引起的各种疾病呈多发态势。猪群的发病率逐年增长且疾病情况变得越来越复杂,以往能通过病理剖检和经验作出的诊断在越来越多非典型性病理变化的情况下变得难以进行。对于存在混合感染的猪群,不经实验室诊断无法准确查出病因。在治疗上依据主观经验用药,盲目加大抗生素的使用量以期达到疾病治疗的效果,不但不能治愈疾病,而且形成耐药猪群,导致猪群错过最佳治愈时期,增大疾病控制难度,增加猪群死亡率,造成了严重的经济损失。笔者对福建省某猪场大规模仔猪腹泻病例进行了实验室检测与分析,并确诊该猪场存在PCV-2和PRRSV混合感染的情况。     

猪PCV-2感染不止是断奶后多系统消耗性综合征

猪圆环病毒2型(PCV2)目前被确认为猪断奶后多系统消耗性综合征(PMWS)的病原(Allan和：Ellis,2000;Kennedy等,2000;Bolin等,2001)。近年来,作为一种流行病出现的PMWS严重危害着世界上的养猪业。然而,越来越明显的是PCV2对猪不仅能引起PMWS,而且还与猪的多种其它临床病症密切关联(Allan和Ellis,2000)。就这方面来说,Kim和C．Chae在本期杂志上发表的章很及时,提出了PCV2在韩国猪呼吸道疾病复症(PRDC)中可能的作用(Kim和Chae,2003)。     

一起PRRSV、PCV-2和App混合感染的诊断

宜兴某猪场仔猪出现以体温升高，两耳的耳根部和四肢末端及腹部呈紫色，剖检以肺部肉变，胸腔积液等为特征的疫病。经流行病学调查、临床症状观察、病理变化分析并结合实验室检测，诊断该病为猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型和胸膜肺炎放线杆菌混合感染。经过紧急免疫接种和综合治疗，疫情得到基本控制。     

一起PRRSV、PCV-2和App混合感染的诊断

宜兴某猪场仔猪出现以体温升高,两耳的耳根部和四肢末端及腹部呈紫色,剖检以肺部肉变,胸腔积液等为特征的疫病.经流行病学调查、临床症状观察、病理变化分析并结合实验室检测,诊断该病为猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型和胸膜肺炎放线杆菌混合感染.经过紧急免疫接种和综合治疗,疫情得到基本控制.     

PCV-2和PCV-3 Cap蛋白在昆虫细胞-杆状病毒系统中的表达和鉴定

为了实现猪圆环病毒2型(PCV-2)和3型(PCV-3)Cap蛋白在昆虫细胞-杆状病毒系统中表达,本试验利用刚性连接肽连接PCV-2和PCV-3 Cap基因,构建杆状病毒转移载体pFastBac-PCV-2-3-Cap,双酶切验证正确后,将其转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选和PCR鉴定,获得重组杆粒。将重组杆粒转染SF9细胞(昆虫卵巢细胞),盲传3代,获得重组病毒。将重组病毒接种SF9细胞96 h后,通过细胞免疫荧光检测、Western blot和电镜观察对其进行验证,并利用噬斑法检测其效价。结果显示：成功构建重组质粒pFastBac-PCV-2-3-Cap,获得了重组杆粒rAcBacmid-PCV-2-3-Cap,并制备出重组杆状病毒rvAc-PCV-2-3-Cap。重组病毒感染SF9细胞后,目的蛋白成功表达,并可以形成病毒样颗粒,病毒效价为3.41×10⁶ PFU/mL。本试验成功在昆虫细胞-杆状病毒系统中共表达了PCV-2-3-Cap,为防治PCV-2和PCV-3混合感染的二联疫苗研究提供了数据支持。     

猪圆环病毒（PCV-2型）病与喘气病混合感染的诊治

猪圆环病毒（PCV-2型）病又称为“猪断奶后多系统衰竭综合征”或“断奶仔猪衰竭综合征”，是由圆环病毒2型感染所致的病毒性疫病。此病是一种新型的传染病，最早发现并且被确诊于1996年加拿大的西部猪场。十年来在世界各地被陆续发现和报道。由于PCV-2的致病性独特，现阶段对于圆环病毒还没有完全研究清楚，也不可能在短时间内研制出有效的疫苗和治疗药物，但是目前猪群带毒感染情况非常普遍。     

仔猪圆环病毒2型与高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的诊断与病毒变异分析

2010年,山东某规模化猪场2月龄仔猪群暴发未知疫病,发病率在80%以上、死亡率在50%以上。结合临床症状、剖检病变,以及PCR或RT-PCR检测,证实该猪场发生PCV-2与高致病性PRRSV混合感染。并且细菌病排查证实还混合感染了猪肺疫。通过对感染的PCV-2ORF2基因、PRRSV Nsp2基因部分序列进行分析显示,PCV-2毒株进化来源差异较大,毒株间核苷酸序列同源性仅为94.2%,但均属于2b基因型,在我国均广泛流行;高致病性PRRSV毒株序列同源性在99.7%以上,说明毒株进化来源同一,并且与近期报道毒株序列的同源性在99%以上,而与2006年分离毒株的序列同源性在95.8%～97.2%之间。以上结果表明,该猪场感染了不同进化来源的PCV-2,所感染的高致病性PRRSV高度同源,但相比2006年报道毒株已经发生一定程度的变异。     

一起猪场混合感染验证诊断治疗体会

在一起猪场混合感染诊治中,笔者根据发病史及防疫现状,采用验证诊断的方法,利用大剂量紧急免疫的措施,及时规范合理治疗,降低了猪场损失,延续了猪场的发展。本文总结了诊断治疗及紧急免疫方法,以供基层防疫工作者借鉴。     

应用PCR技术诊断猪圆环病毒2型与猪伪狂犬病病毒混合感染

猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2，PCV-2）是从猪断奶后多系统衰竭综合征（Post-weaning multisystemic wasting syndrome，PMWS）病猪中分离的猪圆环病毒口，又称PMWS相关PCV。一般由PCV-2单独引起的疾病比较轻微，但常常由于并发或继发细菌或病毒感染而使死亡率大大增加，病死率可达25％以上。     

规模猪场圆环病毒2型感染的血清学调查

利用猪圆环病毒2型抗体酶联免疫检测试剂盒,对宁波市8个县(市)区的19个规模猪场的524份血清样品进行分析,发现有16个猪场发生了PCV-2感染,猪场感染率为84.21%,全市猪的PCV-2平均感染率为49.81%(261/524),其中种猪的感染率为48.72%(123/269),断奶猪的感染率为54.18%(138/255)。