同步辐射CNOk软X射线对米根霉诱变效果比较分析

同步辐射软X射线具有能谱宽且连续、精确可调、单色性好、可精确计算辐照剂量等特点，可提供生物分子所具有的C，N，O和k层电子吸收边波长的射线，在生物学领域有着广泛的用途。采用同步辐射2.3，3．2和4．4nm波长软X射线对米根霉3．819孢子进行辐射诱变，研究抽真空时间、不同吸收边射线、辐照剂量与诱变效果的关系。结果表明，抽真空时间对米根霉孢子的存活率有很大影响，时间越短存活率越高。YPD平板筛选结果显示：Ck软X射线诱变致死率最高，筛选得到的突变株最少，主要产生在高剂量区；Nk软X射线的效果较好，突变株产生在低剂量区；Ok诱变致死率最低，筛选得到的突变株最多，在不同剂量范围内均有产生。大平皿点样得到Nk软X射线诱变后的11号突变株H/C比值最大，其发酵液经高效液相色谱测定产物几乎为乳酸。     

高产纤维素酶菌株筛选及诱变选育

为了得到高产纤维素酶的菌株,达到缓解纤维素酶活不高、纤维素酶供不应求现状的目的。从自然界中筛选出较优良的产纤维素酶菌株并对其进行紫外、60Co-γ射线诱变选育获得高产纤维素酶活的突变株。从自然界筛选出来的菌株通过菌落、菌丝体以及孢子丝的形态初步鉴定为放线菌并命名为XZ-33。对XZ-33进行复合诱变选育并根据致死率和诱变剂量以及正突变率的相互关系,得出合适的诱变剂量即：紫外照射7 min,辐照剂量为0.6 KGy的γ射线对产纤维素酶的出发菌进行诱变,得到高产纤维素酶的突变株UV-Co16,其CMCase酶活达到66.15 IU/mL,以及PFAase酶活2.91 IU/mL,分别是出发菌的3.17倍和2.42倍。该突变株的获得为微生物发酵生产乙醇奠定了基础。     

60Coγ射线与EMS对小麦近等基因系TcLr10的复合诱变

为获得60Coγ射线与EMS对小麦近等基因系TcLr10的复合诱变体系,研究以小麦抗叶锈近等基因系为材料,应用60Coγ射线进行辐照并用EMS溶液进行处理,对小麦的发芽率、三叶期、致死率及抗病性进行分析。结果表明,本试验所用的诱变剂量对小麦近等基因的发芽率影响不显著。所用处理中到达三叶期的时间基本相同,但三叶期到四叶期的时间却随着浓度的增加而减少。当辐照剂量达到或大于0.15 kGy时,致死率显著增加。在EMS浓度为0.4%,60Coγ射线辐照剂量为0.15 kGy时,得到了3株小麦抗叶锈病近等基因系的突变体所得最佳诱变组合为EMS浓度为0.4%,60Coγ射线辐照剂量0.15 kGy。     

紫外诱变香菇条件的初步筛选

本研究的目的是通过利用紫外线照射香菇菌株808的孢子悬浮液,分析诱变处理的致死率、菌株的菌丝生长速率、诱变菌株与原菌株的拮抗反应初步筛选出突变香菇菌株,并筛选出适合香菇孢子的紫外诱变条件。结果表明,诱变时间在20 s的致死率为14.28%,40 s的致死率为28.57%,60 s致死率为64.29%,80 s的致死率为85.71%。在紫外诱变处理60 s和80 s的菌株与对照组有明显的拮抗现象,总共得到了5个有拮抗现象的突变菌株。诱变时间为60 s时菌株生长速度(2.37 cm/d)及拮抗强度均高于诱变时间为80 s (2.23 cm/d)的处理组。试验初步证明使用紫外诱变香菇孢子时的最佳时长为60 s。这为香菇诱变育种提供一定的技术依据。     

He-Ne激光辐照对黑曲霉A72的生物学效应

以黑曲霉为A72出发菌株,利用氦氖(He-Ne)激光对其单孢子悬液进行诱变育种,探讨激光辐照不同时间对黑曲霉孢子的存活率、菌重、酶活性等生理生化指标的影响.结果表明,不同辐照时间对生理生化指标产生不同的影响,确定激光的最佳辐照时间为6 min.     

~(60)Co-γ射线辐射薏苡干种子诱变效应的研究

[目的]研究60 Co-γ射线对薏苡的诱变效应,筛选出最适的辐射剂量。[方法]用2个不同品系的薏苡干种子为材料,对其进行不同剂量的辐射,观察其M1代发芽率、成苗率,M2代叶绿素、株高、抽穗期突变等指标。[结果]γ射线对薏苡有较强的诱发突变的能力,随着辐射剂量的增加M1代的发芽率与成苗率都呈现下降的趋势,在M2代产生突变最多的辐射剂量是450Gy。[结论]用60 Co-γ射线对薏苡干种子进行辐射诱变选育新材料的方法是可行的,其最适辐射剂量为450Gy。     

60Co-γ辐照和EMS对薏苡种子萌发及幼苗生长的影响

以薏苡CDT和Y 159种子为材料,采用不同剂量的60 Co-γ及不同浓度的甲基磺酸乙酯(ethyl methylsulfone,EMS)分别对种子进行诱变处理,分析60 Co-γ辐照和EM S对薏苡种子萌发和幼苗突变率、株高的影响,旨在筛选60 Co-γ辐照和EM S诱变薏苡种子的最适剂量(浓度).结果表明,60 C...     

哈茨木霉厚垣孢子产生突变体的筛选及T-DNA标签序列的克隆

利用PD液体培养基从哈茨木霉T-DNA插入突变体库中筛选出在产孢性状上与野生型菌株明显不同突变子7株,其突变表型主要表现在分生孢子产生数量显著减少和菌丝上有大量厚垣孢子分化.利用TAIL-PCR方法对7株突变体的侧翼序列进行克隆,从5个突变体中获取了5条T-DNA侧翼序列.为木霉菌厚垣孢子产生相关全长基因的克隆和产孢机制的研究奠定了基础.     

紫外辐照对产α-ALDC枯草芽孢杆菌的诱变效应

采用紫外诱变(波长260nm，功率15w)对一株产α-乙酰乳酸脱羧酶的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）BS059菌株进行诱变处理。结果表明，在紫外辐照时间为50s时，诱变效果较好。从正突变菌株中反复筛选，得到两株产酶量较高的菌株BS059-15和BS059-22，比原出发菌株的酶活分别提高了107.62%和162.25%。经过连续传代试验，证明其遗传性状稳定，为可遗传变异。     

一株对番茄枯萎病有拮抗作用的枯草芽孢杆菌的ARTP诱变与筛选

旨在利用常压室温等离子体(ARTP)诱变技术获得番茄枯萎病高效拮抗突变株。以一株对番茄枯萎病有拮抗作用的枯草芽孢杆菌N为初始菌株进行诱变处理,通过检测抑菌圈进行突变株筛选,并通过盆栽实验初步研究防效。通过拮抗带筛选以及抑菌圈复筛选出5株正突变菌株,其中正突变幅度最高的菌株为62,较初始菌株的抑菌圈直径提高了31.43%。经过6次传代,证实该突变株具有良好的遗传稳定性。盆栽实验表明,突变株62对于番茄枯萎病的防效达到75.76%。通过ARTP诱变获得的突变株稳定性好、拮抗效果提高明显,在防治番茄枯萎病方面有很好的应用前景。     

60Co-γ射线辐照处理对杉木种子萌发及幼苗生长的影响

为了探讨60Co-γ辐射剂量对杉木种子萌发及幼苗生长的影响,本研究以杉木第3 代种子园收集的种子为供试材料,研究了不同剂量的γ射线辐照处理对杉木种子发芽率、发芽时间、出苗率以及诱变苗早期生长的影响。结果表明：20 Gy辐照明显促进发芽,随着剂量的增加发芽率逐渐降低,80 Gy是致死剂量;辐照剂量20~60 Gy之间时,随着剂量的增加发芽时间会逐渐延长,出苗率会逐渐降低;γ射线辐照处理获得的诱变苗株高、地径和分枝数同样受剂量效应的影响,随着辐照剂量的增加,表现在植株矮化,地径变细,分枝数先升高后降低,尤其是40 Gy的辐照剂量能够显著促进分枝。根据辐照剂量与发芽率、出苗率可以初步确定,γ射线辐射杉木种子的半致死剂量在40~60 Gy之间。     

产胞外淀粉酶枯草芽孢杆菌的分离筛选及其紫外诱变育种

为提高枯草芽孢杆菌产生淀粉酶能力,从养虾池、混养池及污染河流的底质活性污泥中分离到12株枯草芽孢杆菌,通过淀粉降解试验筛选到产酶能力较高的菌株H4和H5,菌株淀粉酶活性分别为38.66,37.10 U/mL.以筛选到H4和H5为原始菌株,采用紫外诱变的方法对H4和H5进行连续诱变筛选产淀粉酶高的突变株.结果发现,第一次诱变后突变株的酶活分别为原始菌株的107%和111%;经过第二次诱变后,H4的突变株H4 Ⅱa,H5的突变株H5Ⅱa和H5Ⅱb的产酶能力有很大程度的提高,分别为原始菌株的147%,136%和135%,酶活达56.95,50.47和50.02 U/mL,说明紫外连续诱变有利于突变株产酶能力的提高.     

~(60)Co-γ射线辐射谷子干种子诱变效应的研究

为了研究γ射线在谷子诱变育种中的应用,本研究利用4个不同剂量的~(60)Co-γ射线辐照4份不同熟期的谷子材料。取少量辐射后的种子做发芽率分析,并对M_1代的出苗期、出苗率、成株率、畸变苗率等进行统计,在M_2代筛选突变株。结果表明,辐射剂量在0.20~0.35KGY范围内,对发芽率没有显著影响;0.20KGY的剂量能促进谷子出苗,随着辐射剂量加大转为抑制出苗;随着辐射剂量的增加,出苗日期延迟,成株率呈下降趋势,畸变苗率呈上升趋势;4个供试材料对辐射的敏感性有明显的差异,各品种(系)适宜的辐射剂量有所不同。辐射敏感性由强到弱依次是:朝谷3-1龙选1龙谷32龙谷25;各品种(系)适宜的辐射剂量是:朝谷3-1为0.25KGY,龙谷32为0.25KGY,龙谷25为0.30KGY,龙选1为0.30KGY。并对突变规律进行初步探索。     

^60Co-γ射线辐照剂量对大豆早期世代致变效应的研究

利用不同辐照剂量的60Co-γ射线对3个品种的大豆种子进行辐照处理.剂量分别为O(CK),50,100,150,200,250和300 Gy 7个水平,剂量率为1.2 Gy/min.根据大豆Ml的成株率和M2农艺性状的变异率确定辐照的最佳剂量以及对Mz的致变效应.1结果表明:辐照处理对M1的农艺性状有抑制作用,其性状平均数与辐照剂量呈显著负相关.关系式为Y=0.000 1x2-0.381x 102.9(R2=0.962 7**);品种间最佳剂量有差异,平均为144.3 Gy;不同辐照剂量对M2植株的株高、主茎节数、荚长、单株荚数、单株粒数和百粒重等都有不同程度的影响,剂量越大,影响越大;由于基因的突变,在M2植株中可发现一些超亲类型.     

60Co-γ辐照对洋紫荆种子萌发及幼苗生长的影响

为了探讨辐照对洋紫荆种子萌发及幼苗生长的影响,本研究分别采用不同辐照率和辐照时间的^60Co-γ射线辐射洋紫荆(Bauhinia variegata)种子。结果表明:总辐照剂量相同时,不同辐照率对洋紫荆种子的出苗率和成苗率没有显著影响;在0~375Gy辐射剂量内,对照组(0Gy)的出苗率和成苗率最高,分别为82.67%和74.00%,随着辐照剂量的增加,出苗率和成苗率呈非线性逐渐降低的变化趋势,致死剂(量)为375Gy。γ射线辐照处理获得的诱变苗株高、地径和相对叶绿素含量同样受剂量效应的影响,尤其是225Gy的辐照剂量能够显著增加洋紫荆地径和相对叶绿素含量。     

基于ISSR揭示草莓种子不同剂量γ辐射效果及遗传多样性

为研究丰香草莓种子辐射诱变后培育的植株性状遗传变异程度,本研究用3种剂量梯度的γ射线(~(60)Co)对丰香草莓的种子进行辐射诱变处理,并筛选合适的ISSR引物进行辐射效果及辐射后群体的遗传多样性分析。结果表明:(1)筛选出的4个ISSR引物可用于草莓辐照选育后的遗传变异分析;4条引物共扩增出31条条带,其中24条为多态性条带,多态性比例达79.14%。(2)3个辐照群体的遗传相似均在96%以上,高于与未辐射处理对照的平均遗传相似系数,辐照群体间的基因多样度、分化指数以及分子方差变异分析结果均表明遗传变异主要是由辐照引起的。(3)对遗传相似系数进行聚类分析表明辐照群体产生了较大的遗传变异;Shannon's信息指数及Nei's遗传多样性指数分析结果显示高剂量辐照的遗传多样性也相对高。     

12C6+离子束辐照糜子诱变突变群体的构建与SSR分析

为构建物理诱变糜子突变体库,采用50、100、150、200和250 Gy剂量碳离子束(12C6+)辐照陇糜7号和晋黍9号种子,结合混合系谱法和系统聚类分别构建2个含52和79个株系的M5寡表型突变群体。田间试验结果显示,诱变M1出苗率随剂量增大明显降低,陇糜7号M1半致死剂量为150 Gy,晋黍9号M1半致死剂量为100 Gy,且100、150 Gy诱变下M4变异最多。不同诱变剂量下M5、M6表型稳定且株高、产量性状、成株色及粒色均表现出明显遗传差异。从2个M6群体中分别选择9和11个代表性株系,利用多态性SSR引物进行分子验证,与亲本相比,6对SSR引物在陇糜7号的9个株系中位点变异基因型数为1~2,在晋黍9号的11个株系中位点变异基因型数为1~4,突变群体存在丰富的遗传多样性。     

发酵木糖高产乙醇酵母菌株的选育

筛选获得的季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)为出发菌株,采用紫外线和亚硝基胍(NTG)复合诱变,筛选高产乙醇突变株。结果表明,紫外诱变菌最佳稀释度为1×10-5,最佳照射时间为25 s;NTG诱变菌最佳稀释度为1×10-6,最佳诱变时间为40 min,经3轮紫外和亚硝基胍(NTG)交替诱变,获得高产乙醇突变株C3-10,其乙醇产量最高为13.2%,比原菌乙醇产量增加了8.05%,5次传代表现出较好的遗传稳定性。     

γ-射线辐照粳稻愈伤组织后代突变体的筛选

创建粳稻新的种质资源,对加速粳稻遗传育种研究具有重要意义。以粳稻品种秀水11、日本晴为材料,利用30Gy60Coγ-射线辐照其成熟胚愈伤组织筛选突变体。在MR2代群体中观察到叶片、茎秆、籽粒和穗等形态性状发生变异的突变体以及育性和生育期等生理性状方面的变异株;这些突变体为水稻新品种选育和功能基因组学研究提供了良好的基础材料。γ-射线辐照粳稻愈伤组织,利用核诱变与体细胞无性系变异相结合方法,增加再生植株中有利突变类型,其中一些突变体在水稻生产上有较高的应用价值。     

60Co-γ射线对芹菜种子的辐射效应

以3个芹菜品种的干种子为材料,用不同剂量的60Co-γ射线进行辐照处理,研究辐照对种子活力和M1代苗期生长及生理指标的影响。结果表明,辐射对3个品种的效应一致。当辐照剂量达到或高于200 Gy时,芹菜种子的萌发能力和种子活力显著下降,当辐照剂量为300 Gy时,种子没有发芽能力。60Co-γ射线辐照影响了芹菜M1代幼苗的生长和生理代谢,当辐照剂量达到或大于200 Gy时,幼苗的株高下降了50%~60%;50、100、150 Gy的辐照剂量刺激了幼苗的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）和谷光甘肽还原酶（GR）活性的增加,50、100、150 Gy的辐照剂量下超氧阴离子（O2ˉ?）产生速率和丙二醛（MDA）的含量和对照差异不显著,当辐照剂量达到或超过200 Gy时,幼苗SOD、POD和APX活性显著下降,且O2ˉ?产生速率和MDA含量显著上升,说明低于或等于150 Gy的辐照不会对芹菜幼苗的生长造成影响。综合分析所测定的指标,芹菜干种子的适宜诱变剂量为100~150 Gy。