丝核菌分离方法的研究

本文利用0,10~(-3),10~(-4),10~(-5),10~(-6)和10~(-7)不同浓度的敌克松水溶液浸泡干燥的甜荞茎杆后,再用茎定殖法从8个自然感染丝核菌的土壤中和一个人工混有丝核菌的土壤中,以及1个人工混有丝核菌和其它真菌的土壤中,分离丝核菌。结果表明,采用修订茎定殖法,即用10~(-5)浓度的敌克松水溶液浸泡后的甜荞茎分离丝核菌,在提高丝核菌的分离率和降低杂菌的污染率方面都明显的优于其它处理。此方法可用于丝核菌的分离和土壤中丝核菌数量动态的定量研究。     

红花三叶草中产苦马豆素豆类丝核菌的分离与鉴定

为了确认中国红花三叶草中是否存在产苦马豆素（SW）的豆类丝核菌,用改良的真菌分离方法从植物样品中分离豆类丝核菌。根据豆类丝核菌的形态特征对分离的真菌进行初步筛选,然后对初步筛选所得真菌的5.8S rDNA ITS序列进行扩增、测序并构建系统发育树以确定初步筛选真菌的种属,经薄层色谱和气相色谱对豆类丝核菌菌丝体提取物进行SW检测。最终,筛选出一株符合豆类丝核菌形态特征的丝核菌属真菌RL2012,薄层色谱和气相色谱检测到其菌丝体提取物中含有SW。综上分析最终确认红花三叶草中存在产苦马豆素的豆类丝核菌。     

云南双核丝核菌不同融合群菌株的遗传分化研究

利用12个随机引物对23个双核丝核菌菌株进行DNA指纹分析,结果表明,12个引物共获得210条多态性DNA谱带,多态性检测率为100%。利用UPGMA法构建的分子系统树分析发现,以遗传距离0.86为阈值,可以将供试的23个菌株分为13个RAPD组,三个测试菌株:Bch-61、SM-18、RY-86的融合群归属问题有待于进一步确定。上述结果说明供试的双核丝核菌菌株间存在丰富的遗传多样性。     

河南省几种主要禾谷类作物丝核菌的鉴定及交互侵染研究

通过细胞核快速染色鉴定及与日本生越明博士的标准丝核菌株配合测定，分离自河南省小麦，玉米，水稻，谷子和高染等作物纹枯病斑上的丝核菌株分属于双核丝核菌和多核丝核菌２大类，以多核丝核菌为主。其中小麦丝核菌株为双核丝核菌的ＡＧ－Ｂ（０）融合群，玉米和水稻丝核菌株均为多核丝核菌的ＡＧ－１－ＩＡ融合群，谷子和高梁丝核菌株分别为多核丝核菌的ＡＧ－１－ＩＣ融合群和ＡＧ－５融合群。大田人工接种试验结果表明，供试的５     

豆类丝核菌培养液中苦马豆素分离提取

[目的]探索豆类丝核菌培养液中苦马豆素的提取工艺,[方法]从豆类丝核菌培养液中分离苦马豆素,采用薄层层析、气相色谱对分离产物进行鉴定分析。[结果]产物经薄层层析、气相色谱法及熔点测定鉴定分析,确定分离到的粉末为苦马豆素,检测结果较好。[结论]该研究对于苦马豆素的批量化生产有着重大意义。     

丝核菌研究进展

对丝核菌的研究进展进行了较为全面的综述 ,内容包括丝核菌的分类概况、菌丝融合群在丝核菌分类中的应用、丝核菌的遗传多样性以及丝核菌分类研究展望 .     

广州地区13种作物丝核菌的鉴定

从广州地区13种作物上分离得到57个丝核菌(Rhizoctonia spp.)菌株。依菌丝直径、细胞核数目和培养性状等鉴定出52个立枯丝核菌(R.solani)、2个水稻丝核菌(R.oryzae)和3个双核丝核菌(binudeate Rhizoctoria)；并对52个立枯丝核菌(R．solani)菌株进行了融合群归类，其中有30个菌株属于AG-1-IA、1个属于AG-1-IB、4个属于AG-1-IC、12个菌株属于AG-4、3个菌株属于AG-2-2 Ⅲ B、2个菌株未知其归属。     

丝核菌研究进展

对丝核菌的研究进展进行了较为全面的综述，内容包括丝核菌的分类概况、菌丝融合群在丝核菌分类中的应用、丝核菌的遗传多样性以及丝核菌分类研究展望。     

广州地区10种作物立枯丝核菌菌丝融合群测定

采用培养性状比较和细胞核染色研究 ,确定分离自广州地区 10种作物上的 5 3个丝核菌菌株为立枯丝核菌 ,并对其进行了菌丝融合群测定 结果表明 ,5 3个菌株中有 30个菌株属菌丝融合群AG 1 ⅠA ,2个为AG 1 ⅠB ,4个为AG 1 ⅠC ,12个为AG 4 ,3个为AG 2 2 ⅢB ,尚有 2个菌株归属不明     

禾谷丝核菌拮抗真菌的鉴定及抗菌活性研究

利用从小麦茎叶组织中分离的内生真菌,进行平板对峙试验,从中筛选出2株对禾谷丝核菌有明显抑制效果的菌株(RF5和RF6)。采用改良的真菌基因组DNA提取方法,提取内生真菌RF5和RF6的基因组DNA,运用ITS序列通用引物(ITS4、ITS5)进行扩增,分别得到约600 bp的特异条带。对PCR产物进行测序,根据序列比对分析结果,将拮抗真菌RF5和RF6分别鉴定为:肉座菌(Hypoc-reales sp.)和杂色曲霉(Aspergillus versicolor)。进一步研究这2株拮抗真菌的抗菌活性大小,结果显示,2株真菌对病原菌都能产生明显的抑菌圈,抑菌圈直径分别为23 mm和19 mm;其液体发酵产物对病原菌的生长也有显著抑制作用,抑制率分别为63.3%和60.8%。     

无致病性双核丝核菌BNR-1的抑菌作用及温室防病效果

通过平板对峙培养试验和温室防病试验,测定了双核丝核菌BNR-1的抑菌作用及对植物真菌病害的防治效果。结果表明,在PDA培养基上BNR-1对供试7种植物病原真菌均有不同程度的抑制作用,其中对苹果拟茎点霉的抑制作用最强,抑制率为83.9%。温室试验表明,BNR-1对小麦幼苗无致病性,对小麦纹枯病的防治效果达73.7%,较对照药剂井冈霉素提高13.2个百分点,处理间差异极显著(P<0.01)。     

松属植物上散斑壳菌鉴定的几个问题

本文阐述了松属(Pinus Linn.)植物上散斑壳菌(Lophodermium spp.)鉴定的方法和依据,并介绍了各菌种在形态、培养、生态等方面的主要特征。     

一种快速提取丝核菌(Rhizoctonia spp.)DNA的方法

[目的]建立一套快捷、安全、有效的丝核菌菌株DNA提取方法。[方法]采用Chelex-100法提取丝核菌菌株DNA,作为5.8S r DNA-ITS序列的PCR扩增模板,评价提取的DNA质量。[结果]采用Chelex-100法提取丝核菌DNA能够在15 min之内完成,提取的DNA可以直接作为PCR扩增模板,PCR产物经电泳检测,条带整齐、清晰、明亮,产量大,符合常规测序要求,测序结果准确。[结论]该方法具有快速简便、省时省力、经济高效的特点,是一种较为理想的丝核菌基因组DNA提取方法,适用于丝核菌菌株的分类鉴定。     

新疆地区棉花根际拮抗菌的筛选与鉴定

从新疆地区棉花根际分离出4 028个细菌分离物,以棉花立枯病病原真菌立枯丝核菌(Rhizocto-nia solaniK櫣hn)为靶标菌,通过平板对峙法,获得48个具有拮抗性能的分离物,其中MK48、MK49、MK50及MK51具有较强的拮抗性能,且拮抗性能稳定,具有较好的生防潜力。经过形态观察、生理生化特性分析及16S rDNA序列分析,MK48为短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis),MK49和MK51为枯草芽孢杆菌(Bacillus sub-tilis),MK50是铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。MK48、MK49、MK50及MK51的16S rDNA序列在GenBank中注册号分别为:EU272855、EU272856、EU272857、EU272865。     

小麦全蚀病拮抗木霉ZBS6的分离、筛选及鉴定

从河南省农科院试验地小麦田土中分离获得12株木霉,通过室内对峙试验,筛选出1株对小麦全蚀病菌拮抗作用较强的木霉菌株ZBS6,室内测定其抑菌率和寄生率分别达到82.5%和80%。并对该拮抗木霉进行了抑菌谱测定,研究了不同培养条件对该木霉菌株菌丝生长及产孢量的影响,同时利用形态学及分子鉴定相结合方法对木霉菌株ZBS6进行了鉴定。结果表明:ZBS6具有广谱的抑菌活性。其最适培养条件:以葡萄糖为碳源,基质酸碱度(pH)5.0,温度为25℃,光暗交替培养;光照处理对菌丝生长影响不明显,但显著促进产孢量。结合形态学特征及rDNA ITS序列聚类分析结果,ZBS6鉴定为绿色木霉(Trichoderma viride)。     

3种作物纹枯病菌生物学特性差异的比较

较系统地比较了水稻、玉米和小麦3种作物纹枯病菌的培养性状及其在不同培养基、温度、碳源、氮源、pH值和光照条件下生物学特性的差异。结果表明:供试的3种纹枯病菌菌株在菌落生长速率、菌落和菌核颜色、菌核数量和菌核在培养皿的分布等方面均有明显差异;水稻、玉米和小麦纹枯病菌在Czapek培养基上菌丝生长最快、产生的菌核最多,在Richard培养基上菌丝生长最慢,在WA培养基上产生菌核极少或无;水稻和玉米纹枯病菌菌株生长温度范围为10～35℃,最适温度为25～30℃,而小麦纹病菌枯菌株生长温度范围为5～30℃,生长最适温度为20～25℃;3种纹枯病菌菌株对供试碳源中的可溶性淀粉、蔗糖和葡萄糖能很好地利用,但水稻和玉米纹枯病菌菌株对甘露醇的利用能力最差,而小麦纹枯病菌菌株对乳糖的利用能力最差;硝酸钾、亚硝酸钠、硫酸铵、脲和L-亮氨酸5种氮源对3种纹枯病菌菌丝的生长影响不显著,但对菌核的形成有显著影响;3种纹枯病菌菌株在pH 4～10时均可生长和形成菌核,pH 6时生长最快、形成菌核较多。试验结果还表明,光照对3种纹枯病菌菌丝的生长影响无明显差异,但对菌核数量和颜色有显著影响。     

青贮玉米秸秆乳杆菌的分离与鉴定

本文对昆明地区青贮上米秸秆乳杆菌进行调查。从１２份样品中，共分离到５５株乳杆菌，鉴定出１２个种。其中短乳杆菌及干酪乳杆菌两个种占４３．６％，确认为是青贮料中的优势种群。本文还从青贮料中分离鉴定出：食果糖乳酸杆菌、绿色乳杆菌、格氏乳杆菌、亚麻那乳杆菌等４个种，现作一并报道。     

拮抗立枯丝核菌的木霉菌株筛选

通过对峙培养、耐性测定,筛选出拮抗立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）的优良木霉菌（Trichoderma spp.）T05-049菌株.该菌株对立枯丝核菌的抑制率达到50%以上,在5、10、35℃,pH 4、9、10,多菌灵含量为0.01、0.1、1 mg/L的范围内生长良好.     

灰色关联度分析法在拮抗丝核菌木霉菌株筛选中的应用

为了筛选出能较好拮抗丝核菌的木霉菌株和了解灰色关联度分析法在木霉菌株的抑制率、产孢量及其对温度、酸碱度和多菌灵杀菌剂的耐受程度等主要生防性状综合评价中的应用效果,采用该方法对初筛得到的10株木霉菌株的8个主要性状进行了综合分析,其中木霉菌株T21-1-4的灰色关联度ri=0.8793最大,其次是T35-2-3和T16-1-4,其灰色关联度分别为0.8388和0.8337。说明T21-1-4菌株是拮抗丝核菌的较好的木霉菌株。