家蚕微孢子虫诊断方法研究进展

自家蚕微粒子病被发现近200a来,它给世界各养蚕国家造成巨大的经济损失,已被列为蚕种生产的唯一检疫对象。为了更好地了解并总结家蚕微孢子虫现有的诊断方法及其研究进展,该研究主要对近些年来在光学显微镜检测、电镜观察检测、免疫学检测和分子生物学检测方面的研究进行了综述,并且展望未来发展趋势,以期对家蚕微粒子病进行更快速、准确的诊断与防治。     

家蚕3种微孢子虫孢子表面抗原特性的研究

用０．５％Ｋ２ＣＯ３溶液提取Ｎ．ｂ、ＳＣＭ６、ＳＣＭ７３种家蚕微孢子虫孢子表面抗原，并用聚丙烯酰胺凝胶电泳了三者表面抗原蛋白的差异，查明三者无共同成份存在。用Ｎ．ｂ抗体蛋白致敏炭素制成检液，对Ｎ．ｂ孢子为阳性反应，对ＳＣＭ６、ＳＣＭ７均不出现阳性凝集反应。可用以有效判别三者中的Ｎ．ｂ孢子。     

黑条灰灯蛾分离的一种微孢子虫生物学特性研究

从广东省曲江县蚕区捕捉的黑条灰灯蛾(Creatonotus gungis L.)成虫分离到一种微孢子虫.孢子大小为(3.03±0.17)μm×(1.90±0.07)μm;孢子的血清学类型、超微结构与传统的家蚕微粒子孢子(Nosema bombycis,简称N. b.)有差异;黑条灰灯蛾微孢子虫的发育周期符合Nosema属的特征;对家蚕有中等程度的感染能力,经卵传染频率较低.     

蓝叶甲微孢子虫的特征及其对家蚕的病原性研究

从四川省阆中市蚕区捕捉的蓝叶甲(P(?)Baly)中分离到一种大型微孢子虫,孢子大小为4.75±0.40μm×2.85±0.25μm,孢子的超微结构及在家蚕体内的发育周期符合Nosema属的特征,对家蚕有强的食下传染,感染家蚕后的经卵传染频率很低。     

家蚕微孢子虫和MG1孢子超微结构的观察

家蚕微孢子石和ＭＣ１两种孢子超微结构差异显著。家蚕微孢子虫孢子的外壁，质膜均只见一层结构，极膜呈封闭锥体，膜的层次清晰，极丝平均１３圈，极丝与孢子中轴倾角４１°左右；ＭＧ１微孢子的外壁有３层结构，质膜分２层，极膜层次不清，极丝平均１１圈，极丝也孢子中轴倾角４５°左右，极泡有许多大的颗粒状物。     

家蚕新病原性微孢子虫（Nosema SP）的研究

1990年秋从四川省阆中蚕种场种茧育家蚕(Bombyx mori)幼虫分离出一种不同于家蚕微粒子孢子(Nosema bombycis)的新病原性微孢子虫(Nosema SP)。该微孢子虫对蚕的寄生性强,侵染蚕幼虫的绢丝腺、马氏管、肌肉、脂肪体及中肠等组织。孢子为卵圆形,大小3.8～4.1×2.4～2.6μm,极丝长126±8.35μm(113～140μm),在抱予形成期产孢体(7～9×3～4μm),以二裂形成两个孢子母细胞。极丝一般为单层绕成14～15圈(偶有16圈),倾斜角40°以上。     

不同品种及性别家蚕感染菜粉蝶微孢子虫差异性分析

为了解不同品种及不同性别家蚕感染菜粉蝶微孢子虫的差异性,利用菜粉蝶微孢子虫对9个不同的家蚕品种(8个原种、1个杂交种)进行感染性添食试验,添食菜粉蝶微孢子的浓度和数量均相同。结果表明,家蚕各品种之间感染菜粉蝶微孢子虫的情况存在明显的差异,秋华最容易被微孢子虫感染,皓月感染力最低。同时,对不同家蚕品种雌雄蛾感染率进行调查,发现家蚕雌雄蛾之间感染菜粉蝶微孢子虫的差异并不显著。     

家蚕微孢子虫（Nosemabombycis）孢子人工发芽的研究

研究表明，目前常用的适合于向昆虫培养细胞接种的Ｎｏｓｅｍａｂｏｍｂｙｃｉｓ孢子的几种人工发芽方法的发芽率存在较大差异．同一种方法在不同的发芽培养基中的发芽率也有所不同．并发现在Ｎ．ｂｏｍｂｙｃｉｓ孢子的人工发芽过程中Ｋ＋促进作用比Ｎａ＋明显，而且还证实Ｎ．ｂｏｍｂｙｃｉｓ孢子在人工发芽过程中的完全发芽时间为６０ｍｉ     

广西菜粉蝶微孢子虫对家蚕的病原性研究

对广西某菜地和桑同周围的菜粉蝶成虫的调查结果表明,菜粉蝶微粒子病自然感染率在30%以上,且上半年高于下半年;菜粉蝶微孢子虫与典型家蚕微孢子虫(Nosema bombyeis,N.b)比较研究结果表明,菜粉蝶微孢子虫呈长椭圆形,大小约4.70μm×2.30μm,与N.b存在差异,采用PCR技术鉴别也证明菜粉蝶微孢子虫与N.b不同;通过添食感染家蚕,发现菜粉蝶微孢子虫对家蚕有较强的食下感染能力,也有轻微的胚种传染能力,证明菜粉蝶微孢子虫对蚕种生产具有潜在的危害性,应重视防治.     

商丘菜田蜗牛发生规律及综合防治研究

对商丘地区菜田蜗牛的种类、危害情况、生活史等进行总结,并初步提出生物防治、人工防治,化学防治等综合防治的方法.     

柞蚕微孢子虫在柞蚕体内增殖的组织病理学研究

本试验用偶氮红和苯胶兰对柞蚕微孢子病蚕组织切片进行复染后光镜观察；依常规方法制成柞蚕微孢子虫和柞蚕微孢子虫病蚕组织的超薄切片和扫描电镜试材后者电镜观察和拍照。结果表明：柞蚕的中肠、丝腺、脂肪体为易感组织，后期感染肌肉、马氏管、气管管壁细胞，最后真皮细胞亦被感染，同时也查明了上述组织细胞的病理变化。     

柞蚕微孢子虫孢子人工发芽的研究

采用6种人工发芽方法研究了柞蚕孢子虫孢子发芽条件。试验发现，柞蚕微孢子虫孢子的发芽率存在较大差异，其中KHCO3 K2CO3法发芽率最高，达78.86%。在柞蚕微孢子虫孢子的人工发芽过程中，K^ 和Na^ 对其有促进作用，并且K^ 对柞蚕微孢子虫孢子发芽的促进作用明显强于Na^ 。Ca^2 和Mg^2 则对孢子发芽有显阻碍作用，CO3^2-有协同促进作用。而且，还证实柞蚕微孢子虫孢子在人工发芽过程中的完全发芽时间为10min。经固定染色后发现孢子发芽前后的形态发生变化，并能观察到弹出的极丝。     

灰巴蜗牛在三叶草田的空间格局及理论抽样数

应用聚集度指标检验、线性回归方程检验方法研究探讨了灰巴蜗牛在三叶草田垂直方向和水平方向的空间格局。结果表明,灰巴蜗牛在垂直方向和水平方向的空间格局均为聚集分布,这种聚集是由灰巴蜗牛本身行为和不同生境决定的。并应用Iwao的m＊-m回归式计算在允许误差范围内的理论抽样数。     

柞蚕微孢子虫(Nosema pernyi)对柞蚕卵巢初代培养细胞的侵染与增殖

将精制的柞蚕微孢子虫孢子用0.2mol.L-1KOH处理后,接种感染生长状态良好的柞蚕蛹卵巢初代培养细胞,调查其感染增殖规律。接种1h后,孢子的发芽率为53.8%,培养细胞的初期感染率为30%。接种24h后,可观察到裂殖体的数量急速增加,72h达最高峰。接种96h后可观察到短极丝孢子发芽后形成的空孢壳和二次感染体。接种5d后形成成熟孢子,每个细胞平均产100个孢子。在其生活史中,柞蚕微孢子虫呈双核或四偶核,并表现出孢子二型性,具有典型的Nosema属特征。     

蛹虫草对幼虫期家蚕感染的探究

[目的]探索对家蚕具有较好感染效果的优势蛹虫草菌株和有效的感染方法。[方法]通过蛹虫草的家蚕感染试验,研究不同感染方法对蛹虫草菌株感染能力和子实体产量的影响。[结果]悬液注射法和表面消毒浸染法的感染率较高。不同蛹虫草菌株对家蚕的感染能力存在极显著差异。菌株04718的感染效果最好,菌株7172次之,菌株04最差。利用表面消毒浸染法对家蚕进行感染,蛹虫草菌子实体得率最高。用不同蛹虫草菌株感染家蚕后,产子实体能力存在极显著差异。菌株04718感染后产子实体能力最强,菌株7172次之,菌株04较差。[结论]表面消毒浸染法和悬液注射法为利用蛹虫草菌株感染桑蚕幼虫的较好方法。     

微小RNA介导东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂工蜂的分子机制

【目的】通过对东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)纯化孢子与侵染意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)工蜂的东方蜜蜂微孢子虫的差异表达miRNA(DEmiRNA)及其靶mRNA进行系统分析,筛选、分析和探讨病原毒力因子和侵染因子相关的DEmiRNA及调控网络,在miRNA组学层面揭示东方蜜蜂微孢子虫对意蜂的侵染机制。【方法】利用small RNA-seq(sRNA-seq)技术对东方蜜蜂微孢子虫感染7 d和10 d的意蜂工蜂中肠和东方蜜蜂微孢子虫纯化孢子(NcCK)进行深度测序,通过连续比对rRNA数据库、西方蜜蜂(Apis mellifera)基因组和东方蜜蜂微孢子虫基因组筛滤出处于侵染过程的东方蜜蜂微孢子虫(NcT1和NcT2)数据和东方蜜蜂微孢子虫孢子的测序数据。根据P≤0.05,|log2 fold change|≥1的标准,通过比较分析筛选出各比较组中的差异表达miRNA(differentially expressed miRNA,DEmiRNA)。通过相关生物信息学软件对DEmiRNA进行表达谱分析,靶mRNA预测及功能和代谢...     

超声波辅助提取蚕沙中类黄酮的研究

采用超声波辅助法提取蚕沙中的类黄酮,通过单因素试验考察乙醇浓度、提取温度、处理时间对类黄酮提取率的影响。结果表明,超声波辅助提取蚕沙中类黄酮的最佳工艺条件为：乙醇浓度30％,超声波提取时间35min,提取温度70℃,此条件下蚕沙中类黄酮的提取率为2．358％。